徐海濤王旭宮磊

摘 要：巴氏桿菌病是由巴氏桿菌屬細菌引起人獸共患的一種急性傳染病，呈世界性分布。隨著動物源性巴氏桿菌強毒株和耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，巴氏桿菌的感染譜逐漸擴大，除各種家畜、家禽外，多種珍稀野生動物也可感染致死，給整個動物界造成極大的危害。本文主要對病死東北虎進行病理學研究，為東北虎的巴氏桿菌病提供臨床病理學資料，為指導臨床上東北虎疾病的診斷和防治提供理論依據(jù)。

關鍵詞：東北虎；巴氏桿菌??；流行；診斷

一、病原介紹

巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌病引起的細菌性傳染病。多殺巴氏桿菌氏一種兩段鈍圓，中央微突的短桿菌或球桿菌，長0.6-2.5微米，寬0.25-0.6微米，不形成芽胞，不運動，無鞭毛，革蘭氏染色陰性的需氧兼性厭氧菌。本菌在添加血清或血液的培養(yǎng)基上生長良好。在血瓊脂上生成灰白色，濕潤而粘稠的菌落，不溶血；在普通瓊脂上形成細小透明的露珠狀菌落；在普通肉湯中，初均勻混濁，以后形成黏性沉淀和菲薄的附壁菌膜；明膠穿刺培養(yǎng)，沿穿刺孔呈線裝生長，上粗下細。本菌的抵抗力不強，在直射陽光和干燥的情況下迅速死亡；60℃10min可殺死；一般消毒藥在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)可殺死。3%石炭酸和0.1%升汞水在1min內(nèi)可殺菌，10%石灰乳及常用的甲醛溶液3-4min內(nèi)可使之死亡。在無菌蒸餾水和生理鹽水中迅速死亡，但在尸體內(nèi)可存活1-3個月，在廄肥中亦可存活一個月。用特異性莢膜抗原（K抗原）吸附于紅細胞上作被動血凝試驗，分為A、B、D、E和F五型血清群；利用菌體抗原（O抗原）作凝集試驗，將本菌分為12個血清型。若將K、O兩種抗原組合在一起，迄今已有16個血清型。該病的病型，宿主特異性，致病性，免疫性等，都與血清型有關。

二、流行情況

本病的發(fā)生一般無明顯的季節(jié)性，但以冷熱交替，氣候劇變，悶熱，潮濕，多雨的時期發(fā)生較多。體溫失調(diào)，抵抗力降低，是本病主要的發(fā)病誘因之一。另外長途運輸或頻繁遷移，過度疲勞，飼料突變，營養(yǎng)缺乏，寄生蟲等也常常誘發(fā)此病。因某些疾病的存在造成機體抵抗力降低，易繼發(fā)本病。本病多呈地方流行或散發(fā)，同種動物能相互傳染，不同種動物之間也偶見相互傳染。

三、發(fā)病機理

當氣候，季節(jié)變化，長途運輸和寄生蟲感染，營養(yǎng)不良等因素導致動物機體抵抗力降低時，健康帶菌動物的呼吸道和扁桃體內(nèi)所存在的巴氏桿菌，會變成強毒菌而造成內(nèi)源性感染；另外可由于污染的飼料，水，空氣，器具等經(jīng)消化道，呼吸道，外傷而造成外源性感染。

如果機體抵抗力較弱，而侵入的時強毒菌，則會很快地通過淋巴結(jié)地阻止作用，進入血流，形成菌血癥，染病動物可于24h內(nèi)因敗血癥死亡。如果機體抵抗力強或侵入機體的菌數(shù)不太多或毒力較弱，病程可延長1-2天或更久。如果病原菌屬于弱毒力，機體又具有較強的抵抗力，則病變會局限于局部。

四、診斷

眼觀患病虎營養(yǎng)不良，消瘦，體質(zhì)量約100kg，被毛無光澤，可視黏膜發(fā)白。剖檢見腹腔和胸腔內(nèi)均有大量的黑褐色透明積液（約250mL）；肺臟膨大，表面有塌陷，呈典型的大葉性肺炎病變，切面可見有大量的膿性滲出物，肺臟實質(zhì)分布有較多的蠶豆大到核桃大的化膿灶，充滿多量綠色膿汁；肝臟腫大，土黃色，分布有塊狀壞死灶和白色小結(jié)節(jié)，膽囊腫大，充滿綠色膽汁；脾臟皺縮，質(zhì)地柔軟，表面分布大量白色斑點；胃內(nèi)無內(nèi)容物，胃黏膜表面有大量粘稠黑褐色黏液樣物質(zhì)；腸空無內(nèi)容物，腸道內(nèi)有大量的黑褐色黏液樣物質(zhì)。其他組織臟器無明顯的眼觀病變。

經(jīng)革蘭氏染色的病料涂片可見有大量的兩端鈍圓、兩極濃染的紅色球桿菌，堿性美藍染色可見大量的呈明顯兩極著色的球桿菌；血清肉湯培養(yǎng)基變渾濁，有大量細菌生長，涂片革蘭氏染色鏡檢可見大量均勻的兩端濃染的球桿菌；麥康凱培養(yǎng)基無細菌菌落生長；血清肉湯培養(yǎng)的細菌接種的10只小鼠均在16～ 48h內(nèi)死亡。解剖小鼠后，取病變臟器觸片染色鏡檢并同時進行細菌分離培養(yǎng)，其分離細菌的特征與病料中分離的一致。

心肌纖維間毛細血管擴張充血，心肌纖維腫脹，肌漿中含有大量紅染顆粒，呈顆粒變性變化；部分肌纖維崩解斷裂，在斷裂部有多量的紅細胞，呈局灶性出血；肝組織失去固有結(jié)構(gòu)，肝細胞索紊亂，肝細胞胞漿凝固，胞核皺縮深染，甚至有的肝細胞核溶解消失，呈中毒性肝營養(yǎng)不良；脾小體發(fā)生壞死，細胞核溶解碎裂，并有大量炎性細胞，脾小梁被支解成島嶼狀；肺細支氣管和小血管周圍結(jié)締組織增生，呈現(xiàn)支氣管和小動脈周圍炎變化；部分肺泡內(nèi)含大量變性、壞死的嗜中性白細胞，呈化膿性肺炎變化；另有部分肺泡中含有大量纖維蛋白和少量的白細胞，呈現(xiàn)纖維素性肺炎變化；腎小管上皮細胞發(fā)生變性壞死，鏡檢見腎小管上皮細胞脫落，大部分腎小管上皮細胞核溶解，上皮細胞崩解堵塞管腔，腎小管間含有大量的紅細胞；小腸腸絨毛黏膜壞死脫落，可見大量巨噬細胞，呈卡他性腸炎變化。

五、討論

東北虎為我國的一級保護動物，在國內(nèi)分布較為普遍，由于生存環(huán)境的破壞、偷獵行為、疾病等多種因素導致其數(shù)量不斷減少。近年來，雖然人工圈養(yǎng)虎的數(shù)量有所增加，但隨之而來的疾病導致虎死亡的報道也逐漸增多。常見的一些病原微生物如鏈球菌、大腸桿菌、犬瘟熱病毒、細小病毒、杯狀病毒、流感病毒等均可自然感染虎并導致死亡?？梢姡膊〉牧餍幸步o虎造成巨大的威脅。

巴氏桿菌是條件致病性細菌之一，在健康動物眼、鼻、喉與外界接觸部位經(jīng)常可以分離到，各種畜、禽及野生動物都可感染。當遇到氣候驟變、環(huán)境惡劣時，造成動物機體抵抗力降低，菌群失調(diào)，毒力增強，由常在菌變?yōu)橹虏【?；如果飼養(yǎng)管理不當，很容易為細菌繁殖造成可乘之機，從而導致動物發(fā)病死亡。本試驗從臨床送檢的虎病料中分離獲得1株巴氏桿菌，經(jīng)動物回歸試驗證實其有致死性。另外，本試驗選用與東北虎物種相近的傳代細胞系F81細胞（貓腎細胞系）和雞胚進行病毒檢測，結(jié)果均未分離到病毒粒子，排除東北虎感染病毒致死的可能性，所以診斷為東北虎因巴氏桿菌病死亡。

病理剖檢變化發(fā)現(xiàn)該病例最明顯的病變在肺臟，呈現(xiàn)典型的大葉性肺炎變化，這也是動物生前表現(xiàn)咳嗽、呼吸困難等呼吸道癥狀的主要原因。另外，肺臟的大量化膿灶和病理組織學觀察發(fā)現(xiàn)的大量嗜中性白細胞可以證實該東北虎死于細菌性疾病。

巴氏桿菌常通過消化道和呼吸道感染，在該病例，推測經(jīng)常飼喂活雞或生肉而使東北虎通過消化道感染病原的可能性較大。因此，在日常飼喂動物時應保持生肉新鮮、活物健康，防止有害細菌從食物鏈進入動物機體，特別是像東北虎這樣野性較強的動物，因不易接近，平時很難觀察到他的前期癥狀，更應加強飼養(yǎng)管理，防止病從口入。因此，實施綜合獸醫(yī)衛(wèi)生管理措施是防患于未然的根本保障，尤其是一些國家珍稀野生動物，應采取必要而有效的保健和防治措施，以盡可能減少疾病所造成的巨大損失。