黃波++萬(wàn)小濤++張有輝++鐘方財(cái)

摘要：目的 探討乙型肝炎病毒不同基因亞型與病毒復(fù)制狀況、凝血功能、肝臟功能的關(guān)系，以及不同基因亞型的臨床意義。方法 選取慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血液標(biāo)本，檢測(cè)乙型肝炎病毒基因亞型、病毒載量、凝血功能、肝功能等指標(biāo)，應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 16.0進(jìn)行分析。結(jié)果 本次調(diào)查乙型肝炎病毒基因亞型主要為B型和C型，B型略多于C型。但在肝癌患者中，C型所占比例高于B型（P<0.05）。C型患者病毒載量高于B型（P<0.05）。不同基因亞型患者凝血功能指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），肝功能差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 本地區(qū)乙型肝炎病毒基因亞型主要為B型和C型，C型患者肝臟損害較B型重，提示不同基因亞型可能影響患者體內(nèi)病毒復(fù)制，并引起不同臨床損害程度的慢性肝病。

關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒；基因型

Clinical Correlation Research of Hepatitis B Virus Genotypes

HUANG Bo， WAN Xiao-tao， ZHANG You-hui，ZHONG Fang-cai

（Department of Clinical Laboratory，The First Peoples Hospital of Neijiang， Neijiang 641000，Sichuan，China）

Abstract：Objective To understand the distribution of genotypes in Neijiang area， analyze the relationship of different genotypes with virus replication， liver function and coagulation function， investigate the clinical significance of different genotypes. Methods Serum samples were collected from chronic hepatitis B， liver cirrhosis， hepatic cell carcinoma individuals. Hepatitis B virus genotypes， virus replication， liver function and coagulation function were detected. The data was analyzed with SPSS 16.0.Results The main genotypes in Neijiang area were B and C. The C genotype virus replication was significantly higher than that of B genotype（P﹤0.05）.The proportion of C genotype in hepatic cell carcinoma group exhibited significantly higher than that in B genotype（P﹤0.05）.No significant difference was found in liver function between B and C genotypes（P>0.05）. But significant difference was found in coagulation function between B and C genotypes（P﹤0.05）. Conclusion The main genotypes in Neijiang area were B and C. The liver damage of patients with C genotype is more serious than that of B genotype， which prompts that hepatitis B virus genotypes may influence on in vivo hepatitis B virus replication and may cause chronic liver disease of different clinical types.

Key words：Hepatitis B virus；Genotype

病毒性肝炎是嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的疾病，其中乙型病毒肝炎是危害較廣泛的慢性傳染病，目前全世界大概有近20億人感染過(guò)乙型肝炎病毒，其中有超過(guò)3億人發(fā)展為慢性感染者。我國(guó)是乙型肝炎病毒感染的高發(fā)區(qū)，人群中乙型肝炎病毒的感染率高，乙型肝炎表面抗原陽(yáng)性率高達(dá)7.15%。乙型肝炎病毒感染人體后，損傷肝細(xì)胞，嚴(yán)重者導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死，少數(shù)發(fā)展為肝硬化乃至肝癌，預(yù)后較差，遷延不愈，嚴(yán)重危害人類(lèi)生命健康。乙型肝炎病毒感染人體后的臨床狀況、治療效果、預(yù)后等與病毒的不同基因亞型都有一定的關(guān)系[1]。為探討本地區(qū)乙肝患者基因亞型和相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系及臨床意義，本調(diào)查選取了慢性乙型肝炎、肝硬化及肝癌患者血液標(biāo)本，檢測(cè)乙肝病毒基因亞型及病毒載量、凝血功能、肝功能等指標(biāo)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 標(biāo)本來(lái)源于2014年9月～2015年7月在本醫(yī)院住院患者，經(jīng)檢測(cè)乙肝表面抗原陽(yáng)性且血清HBV-DNA拷貝數(shù)≥1×103患者172例，其中男性105例，女性67例，年齡16～70歲。所有病例排除合并其它肝炎病毒感染、脂肪肝、酒精肝、原發(fā)性膽汁性肝硬化及自身免疫性肝炎等，均未使用溶栓及抗凝藥物。其中慢性乙型肝炎98例，肝硬化40例，肝癌34例，全部按照慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。標(biāo)本均為早晨空腹靜脈血，當(dāng)天及時(shí)分離血清并檢測(cè)。

1.2儀器與試劑

1.2.1乙肝兩對(duì)半檢測(cè) 采用蘇州新波公司EasyCuta全自動(dòng)時(shí)間分辨熒光分析儀及配套試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 HBV-DNA定量檢測(cè) 采用美國(guó)ABI7500熒光定量PCR儀進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒由達(dá)安基因公司提供。

1.2.3 HBV基因亞型檢測(cè) 采用美國(guó)ABI7500熒光定量PCR儀進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒由上海復(fù)星公司提供。

1.2.4肝功能檢測(cè) 采用HITACHI7600-020全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒由四川邁克公司提供。

1.2.5凝血功能檢測(cè) 采用Sysmex7000儀器及配套試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。分析均數(shù)使用t檢驗(yàn)，偏態(tài)數(shù)據(jù)使用中位數(shù)和非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料使用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析。設(shè)定P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV基因亞型檢測(cè)結(jié)果 對(duì)172例HBV患者進(jìn)行基因亞型檢測(cè)，見(jiàn)表1。本次研究發(fā)現(xiàn)乙肝病毒患者基因亞型主要為B型和C型，另有少量混合型BC型和BD型。B型比C型略多，但相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）?；騺喰头植荚诼砸倚透窝准案斡不颊咧袩o(wú)顯著差異，但在肝癌患者中，C型比例高于B型（P<0.05）。

2.2 HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果 檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。C型患者HBV-DNA水平（以lg表示）為（6.722±1.085），B型患者HBV-DNA水平為（5.268±1.036），C型高于B型，病毒載量相比有差異（P<0.05）。BC型及BD型例數(shù)較少，未參與統(tǒng)計(jì)分析。

2.3肝功能測(cè)定結(jié)果 檢測(cè)172例HBV患者血清總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、總膽紅素（TBil）、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）等指標(biāo)，結(jié)果見(jiàn)表3。B型和C型患者的TP、Alb經(jīng)t檢驗(yàn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），TBil 、ALT 、AST經(jīng)非參數(shù)秩和檢驗(yàn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。BC型及BD型例數(shù)較少，未參與統(tǒng)計(jì)分析。

2.4凝血功能檢測(cè)結(jié)果 檢測(cè)172例HBV患者凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶時(shí)間（TT）、纖維蛋白原（Fbg）等指標(biāo)，B型和C型在慢性乙肝組、肝硬化組及肝癌組的比較見(jiàn)表4。BC型及BD型例數(shù)較少，未參與統(tǒng)計(jì)分析。在慢性乙肝組，與B型患者相比，C型患者PT延長(zhǎng)（P<0.05），F(xiàn)bg水平降低（P<0.05），APTT、TT無(wú)差異（P>0.05）；在肝硬化組，PT、APTT、TT、Fbg相比均無(wú)差異（P>0.05）；在肝癌組，與B型患者相比，C型患者APTT和TT都延長(zhǎng)（P<0.05），PT、Fbg無(wú)差異（P>0.05）。

3 討論

乙型病毒性肝炎嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，感染病毒后機(jī)體對(duì)其清理能力及疾病的轉(zhuǎn)歸預(yù)后，很大程度上取決于病毒基因亞型的差別。學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)乙型肝炎病毒根據(jù)全基因組序列差異>8%或S基因片段差異>4%可分為A-H共8個(gè)基因亞型，在我國(guó)流行的乙型肝炎病毒主要為A、B、C、D 4個(gè)基因亞型，所占比例分別為1.2%、39.3%、50.2%、8.1%。各省市的乙型肝炎病毒基因亞型分布也不相同，在北部地區(qū)主要為C型，約占81.6%；在南部地區(qū)則主要為B型[3]。本次調(diào)查數(shù)據(jù)顯示乙型肝炎病毒患者基因亞型以B型和C型為主，B型較C型略多，但兩者差異無(wú)顯著意義。BC型和BD型較少，可能與標(biāo)本例數(shù)不足有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。隨著肝臟疾病嚴(yán)重程度的增加，由慢性乙型肝炎發(fā)展為肝硬化乃至肝癌，C型所占比例逐漸升高，B型所占比例逐漸降低，提示乙型肝炎病毒不同基因亞型與疾病的活動(dòng)性可能存在一定的關(guān)系。分析原因可能為針對(duì)不同基因亞型病毒，藥物治療效果存在差異，使治療效果明顯有效的B型乙肝病毒感染患者發(fā)展為肝硬化和肝癌的幾率比C型低。提示C型感染的危害比B型感染更為嚴(yán)重，發(fā)展為肝硬化和肝癌的可能性更高，早期應(yīng)積極采取措施治療并監(jiān)測(cè)病情進(jìn)展情況，防止病情惡化。

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)C型乙肝病毒感染者HBV-DNA水平明顯高于B型感染者，提示復(fù)制較活躍。學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，C基因型乙肝病毒感染人體后，雖要經(jīng)過(guò)機(jī)體的免疫清除，但效果不佳，最終進(jìn)入較嚴(yán)重的肝臟損傷階段，而B(niǎo)基因型則經(jīng)過(guò)機(jī)體免疫清除后很快進(jìn)入較輕的損傷階段，效果較好。干擾素對(duì)病毒載量低的患者治療效果好，對(duì)B型感染者的治療效果比C型感染者好。

肝臟是合成凝血因子的重要器管，出血是肝臟疾病的常見(jiàn)癥狀，臨床上凝血功能四項(xiàng)指標(biāo)常被用作評(píng)價(jià)肝病患者肝臟功能受損的程度。APTT是反映機(jī)體內(nèi)源性凝血功能的指標(biāo)，PT是反映機(jī)體外源性凝血功能的指標(biāo)，TT是預(yù)測(cè)肝炎患者病情進(jìn)展及預(yù)后的靈敏指標(biāo)，F(xiàn)bg在肝臟合成，在凝血過(guò)程中具有重要的生理作用，F(xiàn)bg含量降低，反映肝臟損害程度嚴(yán)重。將病毒基因亞型與凝血功能結(jié)合分析，在慢性肝炎患者組，C型較B型的Fbg降低（P<0.05），PT延長(zhǎng)（P<0.05）；在肝硬化患者組，C型和B型四項(xiàng)指標(biāo)無(wú)差異；在肝癌患者組，C型較B型的TT及APTT均延長(zhǎng)（P<0.05）。提示C基因型乙型肝炎病毒感染可能是機(jī)體凝血功能異常的重要危險(xiǎn)因素，對(duì)于臨床指導(dǎo)用藥及患者出血監(jiān)測(cè)具有一定的意義。

了解乙型肝炎病毒基因亞型分布對(duì)于判斷乙型肝炎病毒感染者的預(yù)后轉(zhuǎn)歸、如何選擇抗病毒藥物治療有重要的指導(dǎo)意義，有助于指導(dǎo)個(gè)體化治療。相信隨著基因檢測(cè)及基因治療的不斷發(fā)展，乙型肝炎病毒基因亞型作為重要指標(biāo)將更加受到臨床醫(yī)生的重視。

參考文獻(xiàn)：

[1]Tujios SR， Lee WM. New advances in chronic hepatitis B[J]. Curr Opin Gastroenterol， 2012，28（3）：193-197.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)與感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）[J]. 胃腸病學(xué)，2011，19（6）：351-366.

[3]Zeng G， Wang Z， Wen S， et al. Geographic distribution， virologic and clinical characteristics of hepatitis B virus genotypes in China[J]. Viral Hepat， 2005， 12（6）： 609-617.編輯/金昊天