祁麗芳，呂杰強(qiáng)，朱雪瓊，夏露，黃秋穗，屈王蕾，陳文兵

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院育英兒童醫(yī)院 婦產(chǎn)科，浙江 溫州 325027）

ERCC1、XPD、XPC單核苷酸多態(tài)性與局部晚期宮頸癌新輔助化療敏感性的相關(guān)性

祁麗芳，呂杰強(qiáng)，朱雪瓊，夏露，黃秋穗，屈王蕾，陳文兵

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院育英兒童醫(yī)院 婦產(chǎn)科，浙江 溫州 325027）

目的：探討DNA修復(fù)切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1（ERCC1）、人類著色性干皮病D組基因（XPD）、人類著色性干皮病C組基因（XPC）基因多態(tài)性與局部晚期宮頸癌（LACC）鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療（NACT）敏感性的關(guān)系。方法：經(jīng)病理學(xué)確診的LACC患者114例，所有病例化療前抽取靜脈血并提取DNA，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性分析（PCR-RFLP）技術(shù)檢測單核苷酸多態(tài)性（SNPs），比較不同基因型與NACT療效的關(guān)系。結(jié)果：攜帶ERCC1 Asn118Asn C/T基因型的化療敏感率高于C/C基因型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），攜帶C/T基因型化療敏感性比C/C基因型增加4.48倍（OR=4.480；95%CI=1.436～13.976）。攜帶XPD Lys751Gln A/A基因型化療敏感性高于A/C基因型，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。XPC Lys939Gln基因型與化療敏感性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：ERCC1 Asn118Asn多態(tài)性可以預(yù)測以鉑類為基礎(chǔ)的LACC患者化療療效。

局部晚期宮頸癌；新輔助化療；單核苷酸多態(tài)性

局部晚期宮頸癌（locally advanced cervical cancer，LACC）是一組具有不良預(yù)后因素的高危宮頸癌，廣義包括宮頸癌Ib～I(xiàn)Va期，狹義指局部腫瘤直徑≥4 cm的早期巨塊型宮頸癌。此類宮頸癌單純行手術(shù)或放療不易控制，術(shù)后容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，治療的失敗率更高、生存率更低[1-2]。而宮頸癌是婦女最常見的惡性腫瘤之一，病死率在女性癌癥病死率中排行第二，是威脅婦女健康與生命的嚴(yán)重疾病。新輔助化療（neoadjuvant chemotherapy，NACT）的臨床療效已被多數(shù)學(xué)者所肯定，故LACC患者在NACT后實(shí)行宮頸癌根治術(shù)+盆腔淋巴清掃術(shù)，是目前比較推薦的治療方案[3]。

宮頸癌化療是以鉑類藥物為主的聯(lián)合化療，由于腫瘤耐藥性的存在，使患者非但沒有取得預(yù)期療效，反而遭受化療不良反應(yīng)。研究[4]表明，這種耐藥性和DNA修復(fù)基因的表達(dá)和單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）存在相關(guān)性。核苷酸切除修復(fù)系統(tǒng)（nucleotide excision repair，NER）是人類DNA損傷修復(fù)系統(tǒng)的重要組成部分，在NER途徑中，與鉑類藥物抵抗有關(guān)的關(guān)鍵因子有切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1（excision repair cross-complementing group 1，ERCC1）、人類著色性干皮病D組基因（xeroderma pigmentary group D，XPD）、人類著色性干皮病C組基因（xeroderma pigmentosum group C，XPC）等。這3種基因的多態(tài)性往往影響內(nèi)在順鉑（cisplatin，DDP）的敏感性，鉑類藥物引起的DNA損傷修復(fù)主要由這個(gè)系統(tǒng)完 成[5-6]。目前ERCC1、XPD、XPC基因多態(tài)性與鉑類化療的相關(guān)研究主要集中在肺癌、食管癌、卵巢癌、頭頸部及胃腸道腫瘤方面，關(guān)于LACC DNA修復(fù)基因的SNP與鉑類化療的相關(guān)研究報(bào)道甚少，本研究將探討ERCC1、XPD和XPC基因多態(tài)性與鉑類為基礎(chǔ)的NACT敏感性的關(guān)系，希望在化療前預(yù)測化療療效，制定最佳治療方案，減少患者痛苦。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選擇2009年1月至2013年1月在我院初次治療并經(jīng)宮頸活組織檢查確診為宮頸癌的患者114例，經(jīng)盆腔磁共振及陰道B超證實(shí)存在可測量病灶，并符合以下條件者納入本研究：①國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（Federation of International Gynecology Obstetrics，F(xiàn)IGO）臨床分期為Ib～I(xiàn) I Ia期且腫瘤直徑≥4 cm的巨塊型宮頸癌；②無化療禁忌證；③患者及家屬知情同意；④無重要臟器功能損害。臨床分期采用2009年的FIGO分期標(biāo)準(zhǔn)?；颊吣挲g為25～63歲，中位年齡為44歲。其中，鱗癌102例，腺癌12例。FIGO臨床分期Ib期54例，I Ia期42例，I Ib期12例，I I Ia期6例。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，治療前患者簽署知情同意書。

1.2 化療方案 所有患者均接受以DDP為基礎(chǔ)的聯(lián) 合化療，均經(jīng)雙側(cè)子宮動(dòng)脈介入性化療?；熐把?規(guī)、肝腎功能、血電解質(zhì)及心電圖均正常?；煼桨笧镈DP+博來霉素（bleomycin，BLM）+5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-Fu），化療劑量：DDP為70 mg/m2， BLM為30 mg/d，5-Fu為15 mg/kg?；煰煶虨?～2個(gè)，其中1個(gè)療程的為102例，2個(gè)療程的為12例，所有患者化療后進(jìn)行水化，計(jì)算24 h尿量。

1.3 化療療效評(píng)價(jià)及分組 所有患者完成1～2個(gè) 周期的化療后，根據(jù)末次療程進(jìn)行評(píng)價(jià)。對(duì)于可測量實(shí)體瘤按照1979年WHO抗瘤藥物客觀療效標(biāo)準(zhǔn)（response evaluation criteria in solid tumors，RECIST）進(jìn)行評(píng)價(jià)，完全緩解（CR）：全部可測量病灶完全消失持續(xù)4周；部分緩解（PR）：病灶的最大直徑與最大垂直橫徑乘積總和減小≥50%，持續(xù)至少4周；穩(wěn)定（SD）：各病灶最大直徑與最大垂直橫徑乘積總和減小＜50%，或增大＜25%，持續(xù)至少4周且無新病灶出現(xiàn)；進(jìn)展（PD）：病灶的最大直徑與最大垂直橫徑乘積總和增大≥25%，或出現(xiàn)新的病灶。以CR和PR歸為敏感病例計(jì)算敏感率。以SD和PD歸為化療不敏感組。

化療后2周進(jìn)行評(píng)估，所有療效判定及分期均由2名或2名以上從事婦科腫瘤專業(yè)的高年資醫(yī)師共同判定。化療前后腫瘤病灶的大小主要依靠婦科檢查以及影像學(xué)檢查來確定，若局部腫瘤未縮小或增大，追加1個(gè)療程，待第2療程化療結(jié)束后再次評(píng)估。若NACT無效，分期較晚，建議行放射治療；若NACT有效，行根治性子宮切除術(shù)+盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)，年輕者保留一側(cè)或兩側(cè)卵巢。

1.4 基因型分析檢測 所有患者在化療前抽取靜脈血2 mL，放入EDTA抗凝管于-70 ℃冰箱中保存，使用時(shí)在37 ℃水浴箱解凍。采用天根生物試劑公司的DNA提取試劑盒提取基因組DNA，以基因組DNA為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)。所有引物序列由上海捷瑞生物工程有限公司合成，ERCC1 code 118：上游引物為5′-CGGGGACCCTTTAGGAAAG-3′，下游引物為5′-GGCTTCTCATAGAACAGTCC-3′；XPC code 939：上游引物為5′-GGAGGTGGACTCTCTTCTGATG-3′，下游引物為5′-TAGATCCCAGCAGATGACC-3′；XPD code 751：上游引物為5′-CCCCCTCTCCCTTTCCTCTGTTC-3′，下游引物為5′-GGACCTGAGCCCCCACTAACG-3′。PCR反應(yīng)體系共 25 μL：2×Taq MasterMix 12.5 μL，DNA模板2 μL， ddH2O 8.5 μL，上下游引物各1 μL。PCR循環(huán)參數(shù)分別為：ERCC1 Asn118Asn：94℃預(yù)變性3 min，94 ℃ 30 s，62 ℃ 36 s，72 ℃ 50 s，共40個(gè)循環(huán)，72 ℃ 延伸5 min；XPD Lys751Gln：95 ℃預(yù)變性10 min，94 ℃ 1 min，63 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，共31個(gè)循環(huán)，72 ℃延伸5 min；XPC Lys939Gln：95 ℃預(yù)變 性5 min，95 ℃ 30 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，共 35個(gè)循環(huán)，72 ℃延伸5 min。取10 μL PCR產(chǎn)物（含 ERCC1 Asn118Asn、XPD Lys751Gln、XPC Lys939Gln） 分別與限制性核酸內(nèi)切酶（PvuI I、PstI、BsrDI，F(xiàn)ermentas生物試劑公司）1 μL、ddH2O 7 μL、10× Buffer G 2 μL，37 ℃消化16 h，產(chǎn)物4 ℃冰箱保存。

吸取10μL酶切產(chǎn)物進(jìn)行3%瓊脂糖凝膠電泳鑒定，以100 bp DNA Marker為參照。分型的基本依據(jù)為：①突變純合子型：因2個(gè)堿基無突變，均有酶切位點(diǎn)，形成2條條帶。②野生純合子型：因2個(gè)堿基發(fā)生突變，沒有酶切位點(diǎn)，只有最長片段，在電泳圖上只有1條條帶。③雜合子型：1個(gè)堿基發(fā)生突變，沒有酶切位點(diǎn)，形成最長片段；另1個(gè)堿基未發(fā)生突變，有酶切位點(diǎn)，形成2個(gè)小片段，最終在電泳圖上形成3個(gè)條帶。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)算各種基因型的頻率，確定是否符合Hardy-Weinberg平衡，率的比較采用x2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法，以比值比（OR）及95%可信區(qū)間（CI）表示各種基因型與宮頸癌患者鉑類藥物化療敏感性的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度，OR值及其95%CI以非條件logistic 模型計(jì)算。所有的統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均為雙側(cè)概率檢驗(yàn)。P＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 酶切結(jié)果

2.1.1 ERCC1 Asn118Asn基因型：分為C/C、C/T和 T/T 3種類型；C/C基因型沒有酶切位點(diǎn)，只有474 bp 1個(gè)片段；C/T基因型產(chǎn)生474 bp、311 bp和163 bp 3個(gè)片段；T/T基因型有311 bp和163 bp 2個(gè)片段（本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)該基因型）。見圖1。

2.1.2 XPD Lys751Gln基因型：分為A/A、A/C、C/C 3種類型；A/A基因型沒有酶切位點(diǎn)，只有413 bp 1個(gè)片段；A/C基因型產(chǎn)生413 bp、322 bp和91 bp 3個(gè)片段；C/C基因型有322 bp和91 bp 2個(gè)片段（本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)該基因型）。見圖2。

圖1 ERCC1 Asn118Asn基因型電泳圖

圖2 XPD Lys751Gln基因型電泳圖

2.1.3 XPC Lys939Gln基因型：分為A/A、A/C和C/C 3種類型；A/A基因型沒有酶切位點(diǎn)，只有1個(gè)765 bp 片段；A/C基因型產(chǎn)生765 bp、582 bp和183 bp 3個(gè)片段；C/C基因型有582 bp和183 bp 2個(gè)片段。見圖3。

圖3 XPC Lys939Gln基因型電泳圖

2.2 療效分析 114例LACC患者中，CR為26.3%（30/ 114），PR為42.1%（48/114），SD為30.7%（35/114），PD為0.87%（1/114），總敏感率為68.4%（78/114）?；颊呋举Y料見表1。經(jīng)檢驗(yàn)，腺癌的化療敏感性高于鱗癌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），化療敏感組和不敏感組患者的年齡以及臨床分期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 患者基本資料（例）

2.3 基因分型 114例LACC患者中，ERCCl基因Asn118Asn的C/C和C/T基因型的頻率分別為52.6%和47.4%，未檢測到該位點(diǎn)的突變純合基因型；XPD基因Lys751Gln的A/A和A/C基因型的頻率分別為89.5%和10.5%，未檢測到該位點(diǎn)的突變純合基因型；XPC基因Lys939Gln的A/A、A/C和C/C基因型的頻率分別為26.3%、26.3%和47.4%。結(jié)果顯示，ERCC1、XPD和XPC的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡（分別為x2=3.05，P＞0.05；x2=0.60，P＞0.05；x2=3.33，P＞0.05），表明該組病例具有群體代表性。2.4 基因型與化療敏感性的關(guān)系 ERCC1 Asn118Asn 基因多態(tài)性C/C和C/T的化療敏感率分別為61.0%和88.5%，C/T基因型化療敏感性高于C/C基因型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。攜帶ERCC1第118位密碼子C/T基因型的LACC患者化療敏感性高于C/C基因型患者4.48倍（OR=4.480，95%CI：1.436～13.976；校正年齡、臨床分期及病理類型后OR=8.466，95%CI： 2.084～34.392）。見表2。

表2 LACC化療敏感性與基因型的關(guān)系

XPD Lys751Gln基因多態(tài)性A/A和A/C的化療敏感率分別為70.5%和50.0%，A/A基因型化療敏感性高于A/C基因型，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。攜帶XPD A/A基因型與A/C基因型的LACC患者對(duì)鉑類藥物化療敏感性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR=2.400，95%CI：0.716～8.041）。見表2。

XPC Lys939Gln基因多態(tài)性A/A和A/C+C/C基因型化療敏感率分別為66.7%和69.1%，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。攜帶XPC Lys939Gln A/A基因型與攜帶至少1個(gè)C等位基因（A/C和C/C）的LACC患者對(duì)鉑類藥物化療敏感性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR= 0.897，95%CI：0.369～2.18）。見表2。

3 討論

近幾年發(fā)現(xiàn)宮頸癌漸趨年輕化，中青年宮頸癌患者更多地考慮治療后的生活質(zhì)量。LACC患者采用放療會(huì)導(dǎo)致卵巢功能的永久破壞及陰道上皮角化，嚴(yán)重影響正常性生活。NACT后（以鉑類藥物為主）行手術(shù)治療，能提高宮頸癌患者的手術(shù)率和治愈率，以及術(shù)后的生活質(zhì)量。本研究NACT總敏感率為68.4%，Takekida等[7]研究發(fā)現(xiàn)：宮頸鱗癌和腺癌化療有效率分別為69.7%和68.9%，與本研究NACT敏感率相近。目前較多學(xué)者認(rèn)為宮頸鱗癌靜脈化療敏感性高于腺癌[8]，而本研究發(fā)現(xiàn)腺癌NACT敏感性高于鱗癌，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與既往研究結(jié)果存在差異可能與給藥途徑有關(guān)，本研究經(jīng)雙側(cè)子宮動(dòng)脈化療，單次給藥，局部藥物濃度高亦可能提高腺癌化療敏感性。故病理類型和化療敏感性的關(guān)系尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。

鉑類藥物的作用機(jī)制主要是與DNA上的鳥嘌呤、腺嘌呤和胞嘧啶結(jié)合形成Pt-DNA加合物，導(dǎo)致DNA的鏈間交聯(lián)或鏈內(nèi)交聯(lián)，抑制DNA復(fù)制，從而抑制瘤細(xì)胞分裂，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的凋亡[9]，故清除Pt-DNA加合物則引起臨床鉑類藥物抵抗。有研究[10]已經(jīng)證明腫瘤組織低水平的DNA損傷修復(fù)可以減少鉑類和DNA加合物的切除，增加化療敏感性，可能是改善鉑類化療生存的預(yù)后因素之一，而這種化療差異（耐藥）和DNA修復(fù)基因的SNPs存在相關(guān)性。

ERCC1是第一個(gè)克隆而得的人類DNA損傷修復(fù)基因[11]。ERCC1 codon118是一種保守的同義核苷酸突變（AAC-AAT），兩者皆編碼天冬酰胺（Asn），但基因多態(tài)性導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄變化。本研究發(fā)現(xiàn)ERCC1第118位密碼子C/C和C/T 2種基因型，攜帶C/T基因型的LACC患者化療敏感率較C/C基因型增加4倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明ERCC1 codon118基因型與化療敏感性有相關(guān)性，其基因型變異可提高化療敏感性。Kang等[12]發(fā)現(xiàn)：攜C/T和T/T基因型的卵巢癌患者鉑類化療敏感性高于C/C型。Yu等[13]發(fā)現(xiàn)ERCC基因型與食管癌化療療效相關(guān)，攜帶C/T基因型與C/C、T/T基因型相比，能顯著延長總生存時(shí)間。張勝利[14]指出ERCC1基因SNPs與晚期非小細(xì)胞肺癌（non-small-cell lung cancer，NSCLC）含鉑類化療療效有關(guān)，T等位基因（T/T+C/T）較C等位基因（C/ C）型患者對(duì)化療敏感。Ren等[15]研究：攜帶ERCC1 condon118 C/T或T/T基因型的NSCLC患者接受鉑類化療后的平均生存時(shí)間為18個(gè)月，而C/C為13.8個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Chen等[16]也在神經(jīng)膠質(zhì)瘤ERCC1多態(tài)性研究中發(fā)現(xiàn)118 T/T基因型比C/C基因型的中位生存時(shí)間要長（HR=0.67，95%CI：0.35～0.96）。以上均表明ERCC1 Asn118Asn C到T的多態(tài)與化療療效有相關(guān)性，可以提高化療敏感性，延長生存時(shí)間，改善預(yù)后，ERCC1基因多態(tài)性可能可以作為降低鉑類化療耐藥的預(yù)測因子。本研究結(jié)果與上述學(xué)者相似，故推測ERCC1 Asn118Asn基因多態(tài)性可能可以作為預(yù)測宮頸癌患者鉑類化療療效的指標(biāo)。本研究未發(fā)現(xiàn)ERCC1 Asn118Asn T/T基因型，考慮可能系樣本量偏少所致，有必要在擴(kuò)大樣本量的基礎(chǔ)上繼續(xù)研究。

XPD是DNA解旋酶，在DNA修復(fù)過程中可通過NER途徑中去除各種因素導(dǎo)致的DNA損傷。有研究[17]證實(shí)，XPD基因751密碼子A→C多態(tài)導(dǎo)致的Lys751→ Gln751氨基酸替代，與個(gè)體DNA修復(fù)能力差異密切相關(guān)，影響腫瘤對(duì)抗癌藥物（鉑類藥物）的敏感性。本研究發(fā)現(xiàn)XPD基因751密碼子A/A和A/C化療敏感率分別為70.5%和50.0%，A/A基因型化療敏感性高于 A/C基因型，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，未發(fā)現(xiàn)XPD基因多態(tài)性與化療敏感性的相關(guān)性。Wu等[18]在NSCLC中未發(fā)現(xiàn)XPD751基因多態(tài)性與化療療效、總生存率及無進(jìn)展生存率有相關(guān)性。一項(xiàng)系統(tǒng)回顧和薈萃分析也顯示，XPD751基因多態(tài)性在鉑類為基礎(chǔ)的NSCLC化療中，與化療療效及生存時(shí)間無相關(guān)性[19]，與本研究結(jié)果相同。但Li等[20]和Bradbury等[21]發(fā)現(xiàn)在順鉑治療的食管癌患者中，XPD 751基因的多態(tài)性變異的確能提高總生存率（和無進(jìn)展生存率）。王連云等[22]在卵巢癌化療患者中發(fā)現(xiàn)，攜帶XPD Lys751Gln基因雜合突變型基因型LG和野生基因型LL相比，LL基因型化療敏感性是LG基因型的2.88倍，XPD Lys751Gln基因與上皮性卵巢癌鉑類化療敏感性存在相關(guān)性。根據(jù)Li等[20]和王連云等[22]研究結(jié)果推測，XPD基因751密碼子的SNP可能可以提高化療反應(yīng)及生存率，與本次研究結(jié)果完全不同。綜上所述，目前關(guān)于XPD基因多態(tài)性與化療療效是否相關(guān)尚不明確，可能與研究腫瘤類別不同、人種差異有關(guān)。故XPD Lys751Gln多態(tài)性作為預(yù)測鉑類治療方案效果的遺傳學(xué)標(biāo)志尚需進(jìn)一步探討。

XPC是一個(gè)重要的核苷酸切除修復(fù)酶，是核苷酸 切除修復(fù)系統(tǒng)的重要成分。XPC蛋白與HHR23B形成復(fù)合物，在切除修復(fù)初始階段發(fā)揮識(shí)別DNA損傷的功能[23]。本研究發(fā)現(xiàn)XPC Lys939Gln A/A、A/C、C/C基 因型，A/A和A/C+C/C基因型化療敏感率分別為66.7% 和69.1%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。攜帶XPC Lys939Gln A/A基因型與攜帶至少1個(gè)C等位基因（A/ C和C/C）的LACC患者對(duì)鉑類藥物化療敏感性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR=0.897，95%CI：0.369～2.18）。Ott等[24]對(duì)DNA修復(fù)基因多態(tài)性預(yù)測鉑類化療的療效研究中，指出XPC多態(tài)性與鉑類化療敏感性無相關(guān)性，與本研究結(jié)論相同。而Zhu等[25]研究表明攜帶XPC Lys939Gln A/C基因型的NSCLC I I I期患者化療反應(yīng)比A/A基因型者差。又有研究指出，XPC基因多態(tài)性與降低卵巢癌復(fù)發(fā)及死亡風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)[26]，可以延長無進(jìn)展生存率[27]。故關(guān)于XPC基因多態(tài)性與化療療效相關(guān)性的研究存在諸多爭議，因此要明確XPC Lys939Gln基因多態(tài)性與鉑類藥物化療的敏感性究竟是否相關(guān)，尚需要加大病例數(shù)做進(jìn)一步的研究。

綜上所述，本研究未發(fā)現(xiàn)XPD、XPC基因多態(tài)性與NACT之間具有相關(guān)性，但ERCC 118基因多態(tài)性與化療敏感性有關(guān)，這一位點(diǎn)基因多態(tài)性的檢測可能可以作為預(yù)測LACC NACT療效的指標(biāo)之一，從基因水平上預(yù)測化療效果，設(shè)計(jì)個(gè)體化化療方案，減少臨床耐藥，提高藥物的療效。

[1] ROTMAN M, SEDLIS A, PIEDMONTE M R, et al. A phase III randomized trial of postoperative pelvic irradiation in Stage IB cervical carcinoma with poor prognostic features： follow-up of a gynecologic oncology group study[J]. Int J Radiat Oncol, 2006, 65(1)： 169-176.

[2] DELGADO G, BUNDY B, ZAINO R, et al. Prospective surgical-pathological study of disease-free interval in patients with stage IB squamous cell carcinoma of the cervix：a Gynecologic Oncology Group study[J]. Gynecol Oncol, 1990, 38(3)： 352-357.

[3] Al-MANSOUR Z, VERSCHRAEGEN C. Locally advanced cervical cancer： what is the standard of care[J]. Curr Opin Oncol, 2010, 22(5)： 503-512.

[4] 魏嘉, 劉寶瑞, 王亞平, 等. DNA修復(fù)基因單核苷酸多態(tài)性與鉑類藥物抵抗研究進(jìn)展[J]. 中華腫瘤雜志, 2006, 28(3): 161-163.

[5] ROSELL R, LORD R V, TARON M, et al. DNA repair and cisplatin resistance in non-small-cell lung cancer[J]. Lung Cancer, 2002, 38(3)： 217-227.

[6] FARNEBO L, JEDLINSHI A, ANSELL A, et al. Proteins and single nucleotide polymorphisms involved in apoptosis, growth control, and DNA repair predict cisplatin sensitivity in head and neck cancer cell lines[J]. Int J Mol Med, 2009, 24(4)： 549-556.

[7] TAKEKIDA S, FUJIWARA K, NAGAO S, et al. Phase II study of combination chemotherapy with docetaxel and carboplatin for locally advanced or recurrent cervical cancer[J]. Int J Gynecol Cancer, 2010, 20(9)： 1563-1568.

[8] 董霞, 王剛. 局部晚期宮頸癌新輔助化療影響因素研究進(jìn)展[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志(電子版), 2012, 6(15): 153-155.

[9] ROSE M C, KOSTYANOVSKAYA E, HUANG R S. Pharmacogenomics of cisplatin sensitivity in non-small cell lung cancer[J]. Genomics Proteomics Bioinformatics, 2014, 12(5)： 198-209.

[10] World Health Organization. WHO handbook for reporting results of cancer treatment[M]. Geneva： WHO Offset publication, 1979： 16-21.

[11] REED E. Platinum-DNA adduct, nucleotide excision repair and platinum based anti-cancer chemotherapy[J]. Cancer Treat Rev, 1998, 24(5)： 331-344.

[12] KANG S, JU W, KIM J W, et al. Association between excision repair cross-complementation group 1 polymorphism and clinical outcome of platinum-based chemotherapy in patients with epithelial ovarian cancer[J]. Exp Mol Med, 2006, 38(3)： 320-324.

[13] YU X, XIAO H, ZHAO B, et al. DNA repair gene ERCC1 C118T polymorphism predicts sensitivity of recurrent esophageal cancer to radiochemotherapy in a Chinese population [J]. Thorac Cancer, 2015, 6(6)： 741-748.

[14] 張勝利. ERCC1和XPD基因SNPs與晚期NSCLC含鉑類藥物化療敏感性的關(guān)系[D]. 蘇州: 蘇州大學(xué), 2011.

[15] REN S, ZHOU S, WU F, et al. Association between polymorphisms of DNA repair genes and survival of advanced NSCLC patents treated with platinum-based chemotherapy [J]. Lung Cancer, 2012, 75 (1)： 102-109.

[16] CHEN D Q, YAO X, ZHAO H Y, et al. DNA repair gene ERCC1 and XPD polymorphisms predict glioma susceptibility and prognosis[J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2012, 13(6)：2791-2794.

[17] TISEO M, BORDI P, BORTESI B, et al. ERCC1/BRCA1 expression and gene polymorphisms as prognostic and predictive factors in advanced NSCLC treated with or without cisplatin[J]. Br J Cancer, 2013, 108(8)： 1695-1703.

[18] WU W, LI H, WANG H, et al. Effect of Polymorphisms in XPD on clinical outcomes of platinum-based chemotherapy for Chinese non-small cell lung cancer patients[J]. Plos One, 2012, 7(3)： e33200.

[19] QIU M, YANG X, HU J, et al. Predictive value of XPD polymorphisms on platinum-based chemotherapy in nonsmall cell lung cancer： A systematic review and metaanalysis[J]. Plos One, 2013, 8(8)： e72251.

[20] LI C, JIANG Z, LIU X. XPD Lys(751) Gln and Asp(312) Asn polymorphisms and bladder cancer risk：a meta-analysis[J]. Mol Biol Rep, 2010, 37(1)： 301-309.

[21] BRADBURY P A, KULKE M H, HEIST R S, et al. Cisplatin pharmacogenetics, DNA repair polymorphisms, and esophageal cancer outcomes[J]. Pharmacogenet Genomics, 2009, 19(8)： 613-625.

[22] 王連云, 呂杰強(qiáng), 朱雪瓊, 等. XRCC1和XPD多態(tài)性基因型與上皮性卵巢癌鉑類藥物敏感性的關(guān)系[J]. 溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2013, 43(4): 227-227.

[23] VAN HOFFEN A, BALAJEE A S, VAN ZEELAND A A, et al. Nucleotide excision repair and its interplay with transcription[J]. Toxicology, 2003, 193(1-2)： 79-90.

[24] OTT K, RACHAKONDA P S, PANZRAM B, et al. DNA repair gene and MTHFR gene polymorphisms as prognostic markers in locally advanced adenocarcinoma of the esophagus or stomach treated with cisplatin and 5-fluorouracil-based neoadjuvant chemotherapy[J]. Ann Surg Oncol, 2011, 18(9)： 2688-2698.

[25] ZHU X L, SUN X C, CHEN B A, et al. XPC Lys939Gln polymorphism is associated with the decreased response to platinum based chemotherapy in advanced non-small-cell lung cancer[J]. Chin Med J (Engl), 2010, 123(23)： 3427-3432.

[26] SALDIVAR J S, LU K H, LIANG D, et al. Moving toward individualized therapy based on NER polymorphisms that predict platinum sensitivity in ovarian cancer patients[J]. Gynecol Oncol, 2007, 107(1)： 223-229.

[27] FLEMING N D, AGADJANIAN H, NASSANIAN H, et al. Xeroderma pigmentosum complementation group C singlenucleotide polymorphisms in the nucleotide excision repair pathway correlate with prolonged progression-free survival in advanced ovarian cancer[J]. Cancer, 2012, 118(3)： 689-697.

（本文編輯：吳昔昔）

Association between ERCC1, XPD, XPC polymorphisms and chemosensitivity of platinum-based neoadju-vant chemotherapy in patients with locally advanced cervical cancer

QI Lifang, LYU Jieqiang, ZHU Xueq-iong, XIA Lu, HUANG Qiusui, QU Wanglei, CHEN Wenbing. Department of Gynecology, the Second Affiliated Hospital & Yvying Children’s Hospital of Wenzhou Medical University, Wenzhou, 325027

Objective: To investigate whether single-nucleotide polymorphisms of ERCC1, XPD, XPC affected response in locally advanced cervical cancer (LACC) receiving platinum-based neoadjuvant chemotherapy (NACT). Methods: A total of 114 patients who were pathologically diagnosed as cervical carcer treated with platinum-based neoadjuvant chemotherapy were examined for genotyping of ERCC1, XPD and XPC in peripheral blood lymphocytes with the method of polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RPLF), and than the correlation between different genotypes with NACT curative effect was analized. Results: Variant genotypes of ERCC1 Asn118Asn were significantly associated with /C genetype LACC chemosensitivity (P＜0.05). To compare ERCC1 Asn118Asn C/T genetype with ERCC1 Asn118Asn C/C genetype, chemosensitivity increased 4.48 times (odds ratio 4.48； 95%CI： 1.436-13.976； P＜0.05). While no significant difference was found between chemotherapy response and SNPs of XPD condon 751 and XPC condon 939 (P＞0.05). Conclusion: Our study provides evidence for the predictive role of ERCC1 Asn118Asn on chemotherapy response in LACC patients treated with.

locally advanced cervical cancer； neoadjuvant chemotherapy； polymorphism

R737.33

A

10.3969/j.issn.2095-9400.2016.10.005

2016-01-04

溫州市科技局對(duì)外合作項(xiàng)目（H20080032）；正大青春寶腫瘤科研專項(xiàng)（2012ZYC-A34）。

祁麗芳（1985-），女，浙江溫州人，住院醫(yī)師，碩士。

陳文兵，副教授，碩士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，Email：fccwbqlf@sina.com。