馮航

（西安文理學(xué)院生物與環(huán)境工程學(xué)院，陜西西安710065）

蚊香對動物細(xì)胞微核的誘導(dǎo)

馮航

（西安文理學(xué)院生物與環(huán)境工程學(xué)院，陜西西安710065）

選用3種不同品牌的盤式蚊香為原料，對老鼠做經(jīng)口鼻吸入毒性實驗，觀察老鼠骨髓細(xì)胞微核數(shù)目，研究不同蚊香產(chǎn)生的毒性。結(jié)果表明，使用盤式蚊香會產(chǎn)生微核現(xiàn)象，且綠組高于藍(lán)組；而在實驗過程中綠組的保險膜上有明顯的黃色污圈，這是由煙塵和焦油產(chǎn)生的，而藍(lán)組沒有，究其原因可能在于煙塵和焦油，也就是說微核的產(chǎn)生與煙塵、焦油有關(guān)；小鼠體重的變化也和這兩個因素有關(guān)。

蚊香；微核；骨髓細(xì)胞

蚊蟲不僅騷擾吸血，且傳播多種疾病，故防治蚊蟲是控制或消滅蚊媒病的重要措施之一。人類對蚊蟲的防治已有悠久的歷史，目前防治蚊蟲的方法較多，有蚊帳、驅(qū)蚊燈、盤式蚊香、電熱蚊香片、電熱蚊香液和殺蟲霧劑等產(chǎn)品，還有起保護(hù)作用的驅(qū)蚊花露水、驅(qū)蚊露和驅(qū)蚊霜等。其中蚊香的使用歷史較長，多用木粉和人工合成的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥為有效成分制作而成。

由于木粉燃燒時會產(chǎn)生大量的煙，對人體健康大為不利。因此，近年來人們改用無煙的炭粉代替木粉，由此出現(xiàn)了無煙蚊香。

為了從實驗動物整體水平證明煙塵和焦油會導(dǎo)致染色體斷裂和基因毒性[1]，本實驗研究蚊香對小鼠細(xì)胞微核率及體重的影響。

1　實驗部分

1.1實驗動物及材料

實驗動物：小鼠，24只。

3種品牌的盤式蚊香：超威（綠色、微煙）、槍手（藍(lán)色、無煙）、滅害靈（紅色、無煙）。

1.2實驗試劑

檸檬酸鈉、氯化鉀、甲醇、冰醋酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉和姬姆薩染液。

1.3實驗過程

實驗共4組，空白對照6只，實驗組根據(jù)蚊香種類不同分3組，每組各6只。

1.4建立蚊香環(huán)境

實驗組：在鼠籠旁燃一盤蚊香，然后用60cm×30cm×30cm的紙箱將蚊香和鼠籠罩住，紙箱上開若干小孔，保證氣流通暢，每天8h。

對照組：無蚊香，其余同實驗組。

1.5染毒次數(shù)及取樣時間

每天染毒一次（8h），連續(xù)4d，第5天取樣觀察

1.6觀察檢驗

用拖頸椎法處死小鼠，處死后取出小鼠肱骨，除凈上面的肌肉碎渣和結(jié)締組織。

用剪刀剪開肱骨的兩端使骨髓露出，將裝有2%檸檬酸鈉溶液的5mL注射器插入肱骨的上端，緩慢沖洗骨髓腔，沖洗的溶液從股骨下端滲入到離心管中，反復(fù)沖洗至股骨變白灰色，經(jīng)1000rpm離心后棄去上清液。

離心管中加入0.075mol/LKCl5mL用吸管將骨髓細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液，37℃低滲30min。

沿離心管壁緩慢加入固定液5mL，用吸管吹打成細(xì)胞懸液，室溫靜置20min。離心棄去上清液后加入0.3mL固定液，用吸管輕輕吹打成細(xì)胞懸液。

取細(xì)胞懸液滴在載玻片上，每個載玻片兩端各滴一滴，自然晾干。先用姬姆薩染液染片30min，然后用0.1mol/L的磷酸緩沖液沖洗，吸干水分后待檢。選擇細(xì)胞分布均勻、細(xì)胞無損、著色適當(dāng)?shù)膮^(qū)域鏡檢，每個小鼠選取3個視野，統(tǒng)計微核和細(xì)胞數(shù)量，計算微核率。每天對每只小鼠的體重進(jìn)行稱量，計算各組小鼠的平均體重。

2　結(jié)果與分析

實驗組中其中一組（滅害靈）的小鼠第一次染毒后3只死亡，故取3只小鼠重新進(jìn)行第二次實驗，但4h后全部死亡，所以這一組不計入統(tǒng)計，直接視為毒性強于其他實驗組。

2.1微核結(jié)果統(tǒng)計

細(xì)胞微核率統(tǒng)計結(jié)果見表1。由表1可知，實驗組均出現(xiàn)微核現(xiàn)象，與對照組相比微核率高出很多，且綠組微核千分率高于藍(lán)組。

表1　細(xì)胞微核率統(tǒng)計

2.2體重影響

小鼠體重統(tǒng)計見表2。由表2可知，與對照組相比，實驗組5日內(nèi)的體重明顯降低，其中實驗組前2d體重降低明顯，隨后藍(lán)組體重緩慢上升，綠組緩慢降低。但仍可確定，蚊香對小鼠體重增長有明顯抑制作用，但具體的抑制程度因蚊香種類不同而不同。

表2　小鼠平均體重變化

3　結(jié)論

實驗表明，使用盤式蚊香會產(chǎn)生微核現(xiàn)象，且綠組高于藍(lán)組。而在實驗過程中，綠組的保險膜上有明顯的黃色污圈，是由煙塵和焦油產(chǎn)生的[2]，藍(lán)組沒有，因此原因可能在于煙塵和焦油。也就是說微核的產(chǎn)生與煙塵、焦油有關(guān)。小鼠體重的變化也和這兩個因素有關(guān),建議使用盤式蚊香選擇無煙較好[3]。

[1]曹佳.微核實驗在中國的應(yīng)用、發(fā)展與展望[J].遺傳,2003,25(1):73-76.

[2]胡文濤.蚊香煙塵和焦油的測定及對小鼠的影響[J].中化衛(wèi)生殺蟲藥械,2004,10(2):79-82.

[3]周曉蓉,李百祥,邱向紅,等.小鼠骨髓及肝血中嗜多染紅細(xì)胞微核率的比較[J].衛(wèi)生毒理學(xué)雜志,1999,13(1):66-67.

The Animal Cell Micronucleus Induced by Mosquito Coil

Feng Hang
(Xi’an University,College of Biological and Environmental Engineering,Shanxi Xi’an 710065)

Three different kinds of mosquito coils is used as raw material,the mouse do is inhaled through the nose and mouth toxicity test and observation of the number of mice bone marrow cell micronucleus,study the different mosquito coils incense toxicity. The results showed that using mosquito coils would produce the phenomenon of micronucleus and green group,it was higher than that of the blue group; In the experimental process of Zhonglu group insurance membrane had obvious dirty yellow circle,speculation was produced by smoke and tar,and blue group did not,guess the reason may lie in the dust and tar,that is to say,the production of micronucleus was related to the dust and tar; Changes in body weight of mice was also associated with speculation that the two factors.

Mosquito Coil; Micronucleus; Marrow cells

X834

A

2096-0387（2016）05-0047-02

馮航（1982-），女，陜西西安人，碩士，實驗師，研究方向：植物種質(zhì)資源的開發(fā)與利用。