許鵬 甄興厚 汪睿辰 張習(xí)苗 劉暢 劉紅英（通訊作者）

（濰坊醫(yī)學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 山東 濰坊 261053）

目前，國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者研究證實(shí)家裝污染物對(duì)人體健康具有極大影響[1]，如苯對(duì)大鼠腦組織結(jié)構(gòu)和認(rèn)知功能的影響[2]、甲醛對(duì)精子的致畸影響[3]等，但尚缺乏分子遺傳學(xué)水平的研究探討以及混合因素對(duì)微核率影響的劑量和時(shí)間效應(yīng)的研究數(shù)據(jù)。

本實(shí)驗(yàn)同時(shí)觀察了家裝污染物單一因素及混合因素對(duì)微核率的不同影響，探討了苯、甲醛、氯化鉛對(duì)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率的影響的分子機(jī)制，從而為進(jìn)一步研究家裝污染物對(duì)人類遺傳物質(zhì)的影響，以及提出更合理有效的防治措施提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1.材料和方法

昆明種清潔級(jí)小白鼠84只，雌雄各半，體重27～33g，8周齡，由濰坊醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)組共12組，包括甲醛組、苯組、氯化鉛組及混合組，其中每組各分為高、中、低濃度3組。對(duì)照組2組，即生理鹽水組、花生油組。所用染毒試劑為0.050mg/ml、0.025mg/ml、0.125mg/ml的氯化鉛溶液；1%、0.5%、0.25%的甲醛溶液；以及100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml的苯溶液。

實(shí)驗(yàn)組采用腹腔注射染毒。每4天一次，共6次，染毒劑量0.002ml/g。各組小鼠分別在第2、4、6次染毒24小時(shí)后處死[4]，常規(guī)制作微核制片[8]后觀察計(jì)數(shù)，微核率以千分率表示[5,7]，分別計(jì)算雌雄動(dòng)物微核率的均值，無(wú)明顯差異可合并計(jì)數(shù)。利用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0，以1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞中出現(xiàn)微核的細(xì)胞個(gè)數(shù)為指標(biāo)，采用單因素方差檢驗(yàn)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。各組均數(shù)比較采用One-WayANOVA、組間兩兩比較采用SNK檢驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組采用對(duì)照樣本的t檢驗(yàn)。

2.結(jié)果

2.1 苯對(duì)小鼠微核率的影響

苯對(duì)小鼠微核率的影響見表1。結(jié)果表明，無(wú)論以染毒時(shí)間為變量還是以染毒劑量為變量，實(shí)驗(yàn)組小鼠的微核率均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），且隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)和染毒劑量的增加，小鼠微核率呈持續(xù)上升趨勢(shì)（P＜0.05）。

表1 苯對(duì)小鼠微核率的影響

2.2 甲醛對(duì)小鼠微核率的影響

甲醛對(duì)小鼠微核率的影響見表2。結(jié)果顯示，使用甲醛染毒會(huì)導(dǎo)致小鼠微核率明顯增加，且有時(shí)間和劑量效應(yīng)（P＜0.05）。

表2 甲醛對(duì)小鼠微核率的影響

2.3 氯化鉛對(duì)小鼠微核率的影響

氯化鉛對(duì)小鼠微核率的影響見表3。結(jié)果表明，無(wú)論以染毒時(shí)間為變量還是以染毒劑量為變量，實(shí)驗(yàn)組小鼠的微核率均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），且隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)和染毒劑量的增加，小鼠微核率呈持續(xù)上升趨勢(shì)（P＜0.05）。

表3 氯化鉛對(duì)小鼠微核率的影響

2.4 混合染毒對(duì)小鼠微核率的影響

混合染毒對(duì)小鼠微核率的影響見表4。結(jié)果表明，混合染毒對(duì)小鼠的微核率影響效應(yīng)明顯高于單一因素染毒對(duì)小鼠的影響（P＜0.05），且隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)和染毒劑量的增加，小鼠微核率呈持續(xù)上升趨勢(shì)（P＜0.05）。

表4 混合染毒對(duì)小鼠微核率的影響

3.討論

微核（micronucleus,MC），也叫衛(wèi)星核，是真核生物細(xì)胞中的一種異常結(jié)構(gòu)，是染色體畸變?cè)陂g期細(xì)胞中的一種表現(xiàn)形式。微核的產(chǎn)生過(guò)程與染色體損傷密切相關(guān)[9-10]，且出現(xiàn)的頻率決定于組織DNA損傷的程度，故可以通過(guò)微核率的高低來(lái)推測(cè)組織畸變情況[11-13]。微核實(shí)驗(yàn)是遺傳毒理學(xué)常用的實(shí)驗(yàn)方法之一，可以檢測(cè)遺傳損傷程度，可以通過(guò)觀察細(xì)胞中微核的個(gè)數(shù)來(lái)檢測(cè)遺傳毒物對(duì)細(xì)胞的損傷程度[9]。已有多項(xiàng)研究表明，在受到了化學(xué)誘變劑、生物因素、電離輻射等影響后，細(xì)胞的微核率均明顯增加[14-17]。故微核試驗(yàn)最大的優(yōu)點(diǎn)是經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)單、快速，大量對(duì)比試驗(yàn)研究表明該方法在敏感性、特異性和準(zhǔn)確性方面，與經(jīng)典的染色體畸變分析方法基本相當(dāng)。

本實(shí)驗(yàn)以時(shí)間、劑量、種類為變量，多角度多層次研究了苯、甲醛、氯化鉛對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞微核率的影響。結(jié)果顯示，隨著家裝污染物濃度的增加和染毒時(shí)間的延長(zhǎng)，小鼠骨髓細(xì)胞的微核率均明顯升高；且混合因素染毒對(duì)小鼠遺傳物質(zhì)的損傷程度明顯高于單一因素的影響。

該結(jié)果提示我們?cè)谧⒅丶已b材料的美觀性以及家具的實(shí)用性的同時(shí)更應(yīng)當(dāng)重視家裝材料的環(huán)保性?？刂坪皖A(yù)防家裝污染物的毒害，不僅要從法律制度上著手，還要加強(qiáng)綠色環(huán)保家裝材料的教育宣傳，盡可能的減少家裝污染物對(duì)人們身體健康的危害。