李治國+郭曉芝+吳維亞+張菲菲

摘要： 青鱂魚是國際標準組織（ISO）推薦為毒性實驗的標準用魚之一，近年來被廣泛的用于環(huán)境監(jiān)測領域。本研究對青鳉魚的人工繁殖情況進行了一定的觀察。在光照對青鳉產(chǎn)卵的研究中，發(fā)現(xiàn)在日夜比為16：8的情況下，青鳉的日平均產(chǎn)卵量最大，因此16：8是青鳉產(chǎn)卵的最適宜的光照時間；在溫度對青鳉產(chǎn)卵影響的研究中，發(fā)現(xiàn)在水溫26.0℃條件下，青鳉的日平均產(chǎn)卵量最大，26.0℃是青鳉產(chǎn)卵的最適水溫。

Abstract： The medaka is a kind of standard fish used for toxicity test， which has been recommended by International Standards Organization （ISO）， and in recent years has been widely used in the field of environmental monitoring. The study on artificial breeding of medaka is also investigated. In the study of the impact of light on oviposition of medaka， it is found that when the ratio of day and night is 16：8， the average daily fecundity of medaka is maximum， so this ratio is the most suitable illumination time for oviposition of medaka； and in the study of the effect of temperature， found in the water temperature of 26.0℃， the average daily fecundity is maximum and 26.0℃ is the most suitable water temperature.

關鍵詞： 青鳉；人工繁殖；生長發(fā)育

Key words： medaka；artificial breeding；growth and development

中圖分類號：X83 文獻標識碼：A 文章編號：1006-4311（2016）31-0129-02

0 引言

青鳉魚（Oryzisa latipes）隸屬于鳉科，個體小，全長2.5～5.0cm，淡水魚類。其性皮實，可以耐受低溶氧和較寬的溫度及鹽分范圍，食性較雜，易飼養(yǎng)管理[1]。在小型容器內(nèi)通過人工飼養(yǎng)就能正常生長、繁殖，由于取材方便，卵粒較大，被廣泛應用在生物學背景研究當中。但是由于在自然環(huán)境食蚊魚與青鳉魚占有相同的生態(tài)層次且具有相同的食性，因此在生存空間上就產(chǎn)生了劇烈的競爭，由于食蚊魚生存能力強，胎生的繁殖方式優(yōu)越于青鳉卵生的繁殖方式，這種在繁殖方式上的優(yōu)勝劣汰，使得青鳉越來越少，致使青鳉魚在大自然中已經(jīng)頻臨滅絕。

在實驗室穩(wěn)定的培育出青鳉的幼體和成體以及受精卵，是實施一系列生物實驗的基礎和關鍵。因此如何促進青鳉的產(chǎn)卵量與孵化率，已成為當前面臨的難題。本研究就是旨在研究光照和溫度對青鳉親魚產(chǎn)卵量是否產(chǎn)生影響，是否可以通過調(diào)節(jié)光照和溫度來提高產(chǎn)卵量？以使青鳉更好地作為一種模式生物進一步用于實驗室研究。同時還觀察了胚胎各個時期的發(fā)育情況，以掌握胚胎各個時期發(fā)育特點，以作為有關方面的參考。

1 青鳉的生物學特性

青鳉屬鳉形目（Cyprinodontiformes）青鳉科（Oryzia tidae）青鳉屬（Oryzias）。體長2.5～5.0cm，體重0.2～0.3g?？谛。衔?；眼大，位于上側。青鳉卵大且透明，卵具油球，卵徑約0.9mm，吸水后膜徑1.0mm。卵膜上具有長、短兩類絲狀物，其中短絲數(shù)目多，并均勻地分布在整個卵膜上；長絲20余根，集中在一個地方，形成一束。青鳉產(chǎn)卵時，長絲不會完全產(chǎn)出，一頭聯(lián)在卵巢膜上，另一頭仍附著在卵膜上。這樣，產(chǎn)出的卵不會與母體分離而沉入水中，使卵成串地掛在母體的生殖孔后面。在受精后，卵就粘在母體上進行發(fā)育，待大約2小時后就會脫離。青鳉受精卵的培育時間較長，卵內(nèi)的胚胎在發(fā)育完成時才會出膜，是極好的魚類胚胎發(fā)育實驗材料。

生長與繁殖青鳉屬卵生魚類。魚苗經(jīng)過2～5個月的生長，待體長達到2.0cm左右時達到性成熟。天然產(chǎn)卵在4～9月之間，6、7、8月為產(chǎn)卵高峰。青鳉產(chǎn)卵多少與溫度、光照及食物有密切關系。一條正常雌青鳉在繁殖的季節(jié)最多能產(chǎn)出約3000枚卵。水溫控制在24.0℃時，受精卵經(jīng)過11天左右的培育時間就可以破膜孵出。仔魚階段一般進食原生動物或輪蟲等，之后逐步轉為吃小型的浮游甲殼動物、藻類或其它碎屑等。

2 親魚的培育、鑒別及配對繁殖

2.1 親魚培育 基于毒理學規(guī)范，不帶化學膠粘和塑料材質的水族箱、玻璃缸和玻璃水槽均可用來飼養(yǎng)標準模式青鳉。青鳉的食性復雜，攝食廣泛，但需要注意的是，每天要定時早晚各投喂1次，每次投喂量適中，一定要注意不要過量，不僅會造成水質污染還會對青鳉的生長產(chǎn)生不利影響。同時，培育箱中的水溫變幅為20.0℃～27.0℃。

當魚苗喂養(yǎng)至第11周齡時，在同一批次魚中挑選出成熟的種魚以供繁殖實驗所用。挑選的雌魚要求腹部明顯膨大、身體健壯，全長約2.0～4.0cm，平均3.4cm；雄魚要求體色鮮艷、身體健壯、游動正常，體長2.8～4.7cm，平均3.9cm。

2.2 雌雄親魚的鑒別 性成熟時，雌雄魚有明顯的外形差異：雌魚體較肥胖，腹部膨大；產(chǎn)卵季節(jié)時腹鰭與臀鰭之間常附著若干粒受精卵。雄魚體較細長，背鰭的后兩鰭條之間有明顯的凹陷且臀鰭較長，臀鰭和腹鰭上聚集著大量的小黑點，比雌魚相應部位的顏色深。因此處于繁殖期的雌雄個體是非常容易區(qū)分的。（見圖1）

2.3 親魚的配對與繁殖 人工繁殖定義為在人工控制條件下促使親體的性產(chǎn)物達到成熟、排放和產(chǎn)出，并使受精卵在適宜的條件下發(fā)育成為苗種的過程。本實驗就是控制光照時間的長短和水的溫度來研究光照及溫度對青鳉親魚繁殖的影響。

將性成熟青鳉按3雌2雄的比例放養(yǎng)在適當大小的水族箱中，控制好光照和溫度，即可進行人工繁殖。

3 不同光照時間長短對青鳉產(chǎn)卵的影響

3.1 分組 將性成熟的親魚進行隨機分組，每組6雌4雄共10尾，在相同的水質溫度（26.0℃）、食物和水質條件下，改變不同的光照條件。實驗共設4組，分別給以以下不同的光照時間：

A組（16：8）：白日控制在16小時，黑夜控制在8小時。

B組（14：10）：白日控制在14小時，黑夜控制在10小時。

C組（12：12）：白日控制在12小時，黑夜控制在12小時。

D組（10：14）：白日控制在10小時，黑夜控制在14小時。

實驗所用的容器為400mm×230mm×250mm的方形玻璃缸，初始水位高度為200mm。每個玻璃缸放養(yǎng)繁殖期6雌4雄共10尾親魚，實驗連續(xù)進行4d。每天定時采用虹吸法將桶底廢物吸出，換水50%，投餌2次，保證1h之后有少許餌料剩余。實驗在環(huán)境溫度和水質溫度均為26.0℃下進行繁殖。不同組之間所用的吸管、魚網(wǎng)等工具要分開使用，以防交叉污染。

3.2 不同光照條件下青鳉的產(chǎn)卵數(shù)量 實驗期間每天觀察各組親魚的活動情況，記錄各組親魚的產(chǎn)卵數(shù)量。在第 1d、2d、3d 及時收卵，進行計數(shù)并取平均值

每天每魚產(chǎn)卵量（a）=每天產(chǎn)卵總量/6

日均產(chǎn)卵量=（1da+2da+3da）/3

1da表示第一天平均每條魚的產(chǎn)卵量，其他同理。

3.3 結果 在本實驗中，除光照時間不同外，餌料投喂量、溫度高低等在各組中保持相同，但在繁殖3天后，各自青鳉的產(chǎn)卵量有所差異。由表1可以看出，青鳉的日均產(chǎn)卵量受光照時間長短影響明顯。日均產(chǎn)卵量從大到小排列順序為A組>B組>C組>D組，同時在實驗中發(fā)現(xiàn)，光照條件達不到一定要求，青鳉不產(chǎn)卵，或者6條中僅有1、2條產(chǎn)卵且產(chǎn)卵量非常低。實驗表明A組的光照時間長度是青鳉最佳的產(chǎn)卵時間且光照達到一定時間，青鳉就可以產(chǎn)卵。

4 不同溫度產(chǎn)卵實驗

4.1 分組 將性成熟的親魚進行隨機分組，每組6雌4雄共10尾。在相同的光照（日夜比為16：8）、餌料和水質條件下，改變不同的溫度條件。實驗共設6組，分別設置溫度為：

1組：水溫控制在17.0℃。

2組：水溫控制在20.0℃。

3組：水溫控制在23.0℃。

4組：水溫控制在26.0℃。

5組：水溫控制在29.0℃。

6組：水溫控制在32.0℃。

與控制光照時間實驗一樣，也是用容器為400mm×230mm×250mm的方形玻璃缸，初始水位高度為200mm。每個玻璃缸放養(yǎng)6雌4雄共10尾親魚。實驗連續(xù)進行3d，每天定時做出相應處理，工具分開使用，以防交叉污染。

4.2 不同溫度條件下青鳉的產(chǎn)卵情況 實驗期間每天觀察各組親魚的活動情況，記錄每組的產(chǎn)卵量。取卵時間定在每天7點進行。將取出的卵放入清潔的培養(yǎng)皿中進行計數(shù)。為了保證計數(shù)準確，我們采取取用親魚3天產(chǎn)卵的平均值進行對比，用以減小誤差。公式同上。

4.3 結果 在本實驗中，除水溫不同外，餌料投喂量、光照時間長短等在各組中基本相同，但在繁殖3天后，各自青鳉的產(chǎn)卵的平均量有所差異。這就是說明在其他條件保持不變的情況下，水溫的高低，對青鳉的產(chǎn)卵量也有重要的影響。

從表2中可以得知，青鳉的日均產(chǎn)卵量受水溫影響明顯。日均產(chǎn)卵量從大到小順序為4組>5組>3組>2組>1組>6組，最終實驗表明26.0℃是青鳉最適的產(chǎn)卵溫度。

5 討論與結論

5.1 光照對青鳉親魚產(chǎn)卵量影響的實驗 光照對青鳉的繁殖行為非常重要，實驗結果表明，光照時間小于或等于10h時，青鳉幾乎不產(chǎn)卵或產(chǎn)卵極少，可見青鳉是一種喜光照的生物。

5.2 溫度對青鳉親魚產(chǎn)卵量影響的實驗 同時，溫度對青鳉的繁殖行為也十分重要，從本實驗可以看出，水溫高于29℃或低于20℃時均不適合青鳉的繁殖。

參考文獻：

[1]陳學文，陳再忠.中華青鳉胚胎低溫保存研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學，2013（5）：33-36.

[2]韓家波，木云雷，王麗梅.海水養(yǎng)殖與近海水域污染研究進展[J].水產(chǎn)科學，1999（4）：41-43.

[3]鄭樂云.貢氏紅圓尾鳉人工繁殖實驗研究[J].福建水產(chǎn)，2011：4（8）：37-40.