張燕霞 （上海市閔行區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心 201101）

長(zhǎng)蕊絲石竹的組織培養(yǎng)及快速繁殖初探

張燕霞 （上海市閔行區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心 201101）

長(zhǎng)蕊絲石竹的食用和藥用價(jià)值較高，為滿足其市場(chǎng)需求，對(duì)長(zhǎng)蕊絲石竹的組織培養(yǎng)及快速繁殖技術(shù)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L為最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基；MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L為最佳增殖培養(yǎng)基；MS+IBA 0.1 mg/L為最佳生根培養(yǎng)基；泥炭和珍珠巖配比3∶1是理想的馴化基質(zhì)。

長(zhǎng)蕊絲石竹；誘導(dǎo)培養(yǎng)；增殖培養(yǎng)；生根培養(yǎng)；馴化

長(zhǎng)蕊絲石竹是分布在我國(guó)東北、華北地區(qū)的一種多年生草本植物，植株高約30～100 cm，全株光滑無(wú)毛。該植物葉片內(nèi)的生物堿含量較高，具有活血化瘀、消腫止疼的功效；根的提取液，可代替柴胡作藥用；嫩葉及莖既可作家養(yǎng)動(dòng)物的飼料，又是一種食用野菜。由于長(zhǎng)蕊絲石竹的食用及藥用價(jià)值明顯，但作為一種野生資源，因被大量采摘，造成了分布銳減，因此，對(duì)其進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得大量馴化種苗，以滿足市場(chǎng)需求，已成為當(dāng)前研究的重點(diǎn)。筆者對(duì)長(zhǎng)蕊絲石竹的組織培養(yǎng)及快速繁殖技術(shù)進(jìn)行了研究?，F(xiàn)將相關(guān)研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為來(lái)自山東省煙臺(tái)市昆崳山脈的野生長(zhǎng)蕊絲石竹。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 材料的選取與滅菌

選取具有腋芽的莖段，置于塑料網(wǎng)袋中，用流水沖洗2 h。然后在超凈工作臺(tái)上，將腋芽切成1 cm左右的小段。先用70%酒精浸泡1 min，然后用無(wú)菌水沖洗3～5次；再用0.5%次氯酸浸泡30 s，然后用無(wú)菌水沖洗3～5次，最后將滅菌后的材料放置在滅菌盤(pán)中備用。

1.2.2 不定芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)

修整腋芽末端，露出新鮮的嫩莖后，將其接種于培養(yǎng)基中用于不定芽的誘導(dǎo)。不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基分別為MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.3 mg/L。MS培養(yǎng)基中加蔗糖30 g/L、瓊脂粉8 g/L，pH值調(diào)節(jié)在5.8～6.0之間。每處理誘導(dǎo)12瓶，每瓶放置2顆不定芽，培養(yǎng)條件為溫度18～26 ℃、光照12 h、光照強(qiáng)度2 500 lx。

1.2.3 不定芽的增殖培養(yǎng)

待外植體誘導(dǎo)出不定芽后，將其切成單株，接種于不同培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基濃度分別為MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.3 mg/L。MS培養(yǎng)基中加蔗糖30 g/L、瓊脂粉8 g/L，pH值調(diào)節(jié)在5.8～6.0之間。每個(gè)處理12瓶，每瓶放置3顆不定芽，培養(yǎng)條件為溫度18～26 ℃、光照12 h、光照強(qiáng)度2 500 lx。。

1.2.4 不定芽的生根培養(yǎng)

待增殖培養(yǎng)基中的不定芽長(zhǎng)成具有1個(gè)莖節(jié)的莖段，將其接種到不同培養(yǎng)基上，進(jìn)行不定根誘導(dǎo)，培養(yǎng)基濃度分別為MS、MS+IBA 0.1 mg/L、MS+IBA 0.2 mg/L，每個(gè)處理12瓶，每瓶放置3顆不定芽，培養(yǎng)條件為溫度18～26℃、光照12 h、光照強(qiáng)度2 500 lx。

1.2.5 試管苗的移栽

將生根苗培養(yǎng)瓶的瓶塞打開(kāi)，置于光照強(qiáng)度2 500 lx、20 ℃左右的條件下，煉苗1 d后取出，洗去基部培養(yǎng)基，移栽到鋪有約16 cm厚的混合基質(zhì)（泥炭∶珍珠巖為3∶1）的溫苗床上，澆足水后鋪上蛭石。然后每隔1 d用噴壺澆1次水，對(duì)組培苗進(jìn)行初級(jí)馴化。栽后15 d，組培苗生長(zhǎng)穩(wěn)定后，每3 d澆1次水。栽后40 d觀察幼苗生長(zhǎng)情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對(duì)不定芽誘導(dǎo)及增殖的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，選用相同激素濃度的培養(yǎng)基對(duì)不定芽進(jìn)行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)10 d左右不定芽基部就產(chǎn)生大量愈傷組織，30 d后長(zhǎng)出新嫩莖，60 d后嫩莖長(zhǎng)出2個(gè)節(jié)段。在不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，以MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果為最佳，不定芽誘導(dǎo)率達(dá)100%（見(jiàn)表1）。

表1 不同培養(yǎng)基對(duì)長(zhǎng)蕊絲石竹不定芽誘導(dǎo)及增殖的影響

在增殖培養(yǎng)中，接種新嫩莖到培養(yǎng)基后，不同培養(yǎng)基的表現(xiàn)也各不相同。以MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/ L培養(yǎng)基的增殖效果為最佳，增殖率達(dá)55.6%（見(jiàn)表1），不定芽呈叢生狀態(tài)，高度為2.5 cm 左右。

2.2 不同培養(yǎng)基對(duì)不定芽生根的影響

由表2可知，以MS+IBA 0.1 mg/L培養(yǎng)基的生根效果最佳，生根率達(dá)91.7%，且葉色濃綠，葉片較大，株高達(dá)2.5 cm左右。

2.3 試管苗的馴化及移栽

試驗(yàn)結(jié)果表明，采用泥炭和珍珠巖按3∶1混合的移栽基質(zhì)，組培苗的成活率高、長(zhǎng)勢(shì)好。本試驗(yàn)先后4次移栽組培苗，成活率均達(dá)95%以上，表明泥炭和珍珠巖按3∶1混合的基質(zhì)配比是理想的訓(xùn)化基質(zhì)。

試驗(yàn)期間觀察發(fā)現(xiàn)，移栽40 d后，組培苗根系已基本長(zhǎng)出，將其移栽到上海三齊野菜合作社，與野生的長(zhǎng)蕊絲石竹相比，組培苗生長(zhǎng)更旺盛，每年可采摘4～5次嫩莖，采收量比野生提高42%左右。

2016-03-15