林文耀，曾容愚，李聰，栗娟，張婷婷，劉輝，秦云，于朋

（西班牙海博萊生物大藥廠股份公司北京代表處，北京海淀100086）

2011—2015年規(guī)?；i場偽狂犬病野毒感染血清流行病學(xué)調(diào)查

林文耀，曾容愚，李聰，栗娟，張婷婷，劉輝，秦云，于朋

（西班牙海博萊生物大藥廠股份公司北京代表處，北京海淀100086）

2011年1月至2015年12月對中國21個省市1 537個規(guī)模化豬場不同豬群的偽狂犬病野毒感染血清流行病學(xué)進行了全面調(diào)查與系統(tǒng)分析。結(jié)果顯示，偽狂犬病野毒抗體陽性豬場有984個，陽性豬場比例為64.0%；總血清樣品中偽狂犬病野毒抗體平均陽性率為31.60%。不同階段的豬群檢測結(jié)果表明，種豬帶毒率高是豬偽狂犬病持續(xù)存在的重要原因；生長肥育豬野毒抗體陽性率隨豬只日齡的增長而上升，可能與豬場忽視仔豬偽狂犬病免疫有關(guān)；提示要重視肥育豬偽狂犬病的免疫預(yù)防。調(diào)查結(jié)果顯示，豬偽狂犬病在規(guī)?；i場仍普遍存在。

豬偽狂犬??；血清流行病學(xué)；野毒感染

自2011年以來，豬偽狂犬病（PR）大有卷土重來之勢，主要表現(xiàn)為豬群gE抗體陽性率顯著升高，發(fā)病妊娠母豬流產(chǎn)，產(chǎn)弱仔、死胎；新生仔豬死亡率高，同時出現(xiàn)角弓反張等神經(jīng)癥狀，病死率在10%～50%。病毒的分離鑒定表明疫病由變異偽狂犬病病毒（PRV）毒株引起，并且新流行毒株處于獨立的進化分支，這對PR的防控提出了嚴峻挑戰(zhàn)[1-3]。為掌握現(xiàn)有防疫控制體系下我國豬場偽狂犬病感染的狀況，進而有效控制和凈化豬偽狂犬病，海博萊中國北京實驗室持續(xù)多年對全國部分規(guī)?；i場進行豬偽狂犬病的流行病學(xué)調(diào)查。筆者對2011年1月至2015年12月中國23個省市1 537個規(guī)?；i場不同豬群的偽狂犬病野毒血清流行病學(xué)進行了全面調(diào)查與系統(tǒng)分析，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 采樣方法樣品采用橫斷面采樣方法，分別采集公豬、后備豬、不同胎次生產(chǎn)母豬以及不同生長階段商品豬群的血液，分離血清，送海博萊北京實驗室檢測。

1.1.2 血清樣品血清樣品采集時間為2011年1月至2015年12月，共97 050份，其中種豬群血清樣品61 838份，不同周齡仔豬和生長育成豬樣品35 212份。樣品來自我國23個省市1 537個規(guī)?；i場，包括種豬場和商品育成豬場，記錄各豬場主要疫病免疫程序，方便對結(jié)果進行分析。

1.1.3 檢測試劑豬偽狂犬病野毒抗體測定采用gE-ELISA鑒別診斷試劑盒（CIVTEST SUIS ADV gE）。

1.2 試驗方法與結(jié)果判定

阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法，操作方法以及結(jié)果判定參照試劑盒說明書進行。檢測的血清樣品全部來自使用gE基因缺失疫苗免疫的豬場，所以檢測到gE抗體陽性豬可以判斷該豬場被偽狂犬病野毒感染。在進行豬場結(jié)果判定和統(tǒng)計時，只要豬場有1個樣品為陽性，則該場判定為偽狂犬病野毒陽性場。

2 結(jié)果

2.1 2011—2015年規(guī)?；i場偽狂犬病野毒gE抗體檢測結(jié)果

2.1.1 2011—2015年不同地區(qū)規(guī)?；i場偽狂犬病野毒gE抗體檢測結(jié)果在2011—2015年所檢測的1 537個規(guī)?；i場中，984個豬場為偽狂犬病野毒陽性，豬場陽性率為64.0%；總血清樣品數(shù)97 050份，30 660份為陽性，樣品陽性率為31.6%（表1）。其中陜西、內(nèi)蒙古陽性率高達100%，可能是由于送檢豬場較少造成的。然而從檢測豬場數(shù)較多的山東（259個豬場）和浙江（150個豬場）2個省來看，陽性豬場的比例也是居高不下：山東70.3%，浙江83.3%。總體而言，不同地區(qū)的豬場陽性率均居高不下，23個送檢省市中，有18個省市豬場陽性率≥50%。但是，不同地區(qū)的陽性豬場樣品陽性率卻差異較大，23個送檢省市中，只有4個省市樣品陽性率≥50%。這種差異可能是不同地區(qū)對偽狂犬病的重視程度和生產(chǎn)管理水平不同造成的。

表1 2011—2015年不同地區(qū)規(guī)模化豬場偽狂犬病野毒gE抗體檢測結(jié)果

按照地區(qū)統(tǒng)計，七大區(qū)域均有豬偽狂犬病野毒感染。北方的陽性率高于南方，其中華北豬場陽性率最高，達到75%（圖1）。國內(nèi)學(xué)者在北京、天津等地首先分離到偽狂犬病變異毒株，從而推測這場疫病可能首先在北方暴發(fā)，繼而在全國傳播流行[1-3]。從2011年開始，我們也發(fā)現(xiàn)北京的豬場陽性率明顯高于其他地區(qū)，豬場陽性率高達80%。

圖1 2011—2015年不同地區(qū)規(guī)?；i場偽狂犬病野毒gE抗體陽性率

2.1.2 2011—2015年規(guī)?；i場偽狂犬病野毒gE抗體陽性率由圖2可知，樣品陽性率和豬場陽性率從2011—2015年逐年上升，樣品陽性率由13.6%上升至41.3%，豬場陽性率由41.7%上升至78.1%。結(jié)果表明，豬偽狂犬病的流行有持續(xù)上升的趨勢，在未來一段時間仍是中國養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一。

圖2 2011—2015年規(guī)模化豬場偽狂犬病野毒gE抗體陽性率

2.2 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場種豬的陽性率

2.2.1 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同階段種豬gE抗體陽性率由圖3可知，生產(chǎn)母豬的陽性率高于公豬和后備母豬。其中1～2胎母豬gE抗體陽性率最高為52.2%。

圖3 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同階段種豬gE抗體陽性率

2.2.2 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場種豬gE抗體陽性率由圖4可知，種豬陽性率從2011—2015年逐年上升，由33.5%上升至58.0%，其中2013年增長幅度最大，比2012年上升8.5個百分點。種豬偽狂犬病野毒感染持續(xù)上升的趨勢對豬偽狂犬病的防控和凈化提出了嚴峻的挑戰(zhàn)。

圖4 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場種豬gE抗體陽性率

2.3 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同生長階段肥育豬gE抗體陽性率

由圖5可知，肥育豬從16周開始gE抗體陽性率上升，從16周的32.5%上升至24周的52.6%，顯然由偽狂犬病野毒感染所致，這與陽性場肥育豬后期出現(xiàn)呼吸道疾病、日增重不理想等現(xiàn)象一致。10周和13周的gE抗體可能是母源抗體[4]。

圖5 2011—2015年偽狂犬病野毒陽性豬場不同生長階段肥育豬gE抗體陽性率

3 分析與討論

3.1 豬偽狂犬病仍是我國養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病

本次調(diào)查持續(xù)時間較長，時間跨度5年。調(diào)查樣品來自我國23個省市1 537個規(guī)?；i場，共97 050份，是目前國內(nèi)調(diào)查范圍較廣的規(guī)?；i場偽狂犬病野毒感染血清流行病學(xué)調(diào)查。結(jié)果表明，2011—2015年豬偽狂犬病的流行有持續(xù)上升的趨勢，樣品陽性率由13.6%上升至41.3%，豬場陽性率由41.7%上升至78.1%。七大區(qū)域均存在偽狂犬病野毒的感染，北方地區(qū)的偽狂犬病野毒陽性率高于南方地區(qū)。其中華北豬場陽性率高達75%，西南最低為29.6%，可能是由于病毒在氣溫較低的北方更易存活。調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，南方較北方更重視對仔豬的免疫預(yù)防。

國內(nèi)相關(guān)學(xué)者也對偽狂犬病野毒血清流行病學(xué)做了相關(guān)的調(diào)查。胡睿銘等對9個省市2011—2013年的692份血清樣品進行g(shù)E抗體檢測，結(jié)果顯示，血清樣品陽性率為67.05%（464/692）[5]。鄒敏等對2012—2013年來自18個省市的393個送檢豬場共14 801份血清樣品進行檢測，結(jié)果顯示，豬場陽性率為44.02%（173/393），樣品陽性率為16.13%（2 388/14 801），并且發(fā)現(xiàn)陽性率有上升的趨勢[6]。解偉濤在2014年第一季度的檢測結(jié)果表明，血清樣品gE抗體陽性率為37.9%（1 244/3 281），比2013年上升6.6%；豬場陽性率為89.9%（124/138），比2013年上升6.3%[7]。

不同的調(diào)查研究產(chǎn)生了不盡相同的結(jié)果，可能與采樣地區(qū)、采樣階段、采樣數(shù)量不同有關(guān)，但是豬偽狂犬病有持續(xù)上升趨勢的結(jié)論是一致的，提示豬偽狂犬病在未來的一段時間仍是中國養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一，豬偽狂犬病的預(yù)防和凈化形勢不容樂觀。

3.2 種豬感染率持續(xù)上升是偽狂犬病持續(xù)流行的重要原因

由圖2和圖4可知，豬場陽性率和種豬陽性率都呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢，種豬的陽性率與豬場的陽性率呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系。2012—2013年種豬陽性率由40.6%上升到49.1%，與此同時，豬場陽性率由44.3%上升到62.3%。分析各胎次生產(chǎn)母豬的陽性率，1～2胎的陽性率最高達到52.2%，明顯高于其他胎次，提示補充的后備母豬有可能為陽性豬，應(yīng)該引起豬場足夠的重視，防止后備母豬的更新被偽狂犬病野毒感染，導(dǎo)致種豬的帶毒率居高不下。

預(yù)防種豬感染偽狂犬病野毒是偽狂犬病防控和凈化的關(guān)鍵問題。首先，要保證更新的公豬和后備母豬偽狂犬病野毒陰性，引種前進行g(shù)E抗體檢測，確保引進的種豬為陰性豬。做好隔離等生物安全措施，穩(wěn)定后首先免疫偽狂犬病gE基因缺失疫苗，轉(zhuǎn)生產(chǎn)前免疫2次。為了提高中和抗體水平和抗感染能力，可免疫高效的偽狂犬病滅活疫苗，如海博萊高效滅活菌AUSKIPRA BK。偽狂犬病滅活苗可有效提高中和抗體滴度，降低抗體離散度。然后通過gE抗體篩查，淘汰陽性生產(chǎn)公豬，以保證生產(chǎn)公豬全部為陰性。因為偽狂犬病病毒可以通過精液傳播[8]。其次，加強種豬的免疫強度，年普免4次，可以有效減少種豬的帶毒和排毒時間。最后，生物安全仍是很重要的防線。從圖3得知，生產(chǎn)母豬的陽性率都高于50%，為了降低生產(chǎn)公豬的感染風(fēng)險，必須禁止查情公豬返回公豬站，防止查情公豬成為偽狂犬病野毒傳播的媒介。

3.3 需要加強生長肥育豬的偽狂犬病疫苗免疫

由圖5可知，肥育豬gE抗體陽性率從16周開始上升。一般來講，gE母源抗體維持時間在120天左右[4]。如沒有野毒的感染，隨著母源抗體的消退，16周開始gE抗體陽性率應(yīng)該出現(xiàn)下降。此次調(diào)查gE抗體陽性率在16周后不降反升，說明在13～16周這個階段有偽狂犬病野毒的感染，同現(xiàn)實生產(chǎn)相吻合?，F(xiàn)實生產(chǎn)中很多豬場只重視母豬的免疫，往往忽視仔豬的免疫。有的豬場只免疫母豬，不免疫仔豬。有的豬場母豬免疫進口疫苗，仔豬免疫國產(chǎn)疫苗，對仔豬偽狂犬病疫苗的選擇也比較隨意。有的豬場仔豬只在出生滴鼻免疫1次。隨著母源抗體的消退，肥育豬后期缺乏保護力，感染偽狂犬病野毒，在生產(chǎn)上往往出現(xiàn)呼吸道疾病，繼發(fā)細菌感染，如傳染性胸膜肺炎等，抗生素治療效果不明顯。此外，感染的肥育豬進入后備豬群，形成循環(huán)感染，這也是部分豬場偽狂犬病持續(xù)存在難以凈化的重要原因。據(jù)我們的經(jīng)驗，在偽狂犬病防控壓力較大現(xiàn)狀下，仔豬滴鼻1次和2次肌注偽狂犬病疫苗，可以有效維持陽性場的生產(chǎn)穩(wěn)定，減少仔豬的感染機會，陽性場獲得陰性仔豬也是有可能的。

3.4 豬偽狂犬病的防控

本次的調(diào)查結(jié)果表明，豬偽狂犬病的流行有持續(xù)上升的趨勢，在未來一段時間仍是中國養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一。在這種流行趨勢下，選用優(yōu)質(zhì)高效的偽狂犬病gE基因缺失活疫苗結(jié)合滅活疫苗的使用，采用科學(xué)的免疫程序是預(yù)防和控制豬偽狂犬病的主要手段。Zeng等和王繼春等用豬偽狂犬病活疫苗“喜可凈”（Bartha K61株）對仔豬免疫1次，1周后用豬偽狂犬病病毒變異株（AH02LA株）進行攻毒，結(jié)果顯示可以抵御偽狂犬病病毒變異株攻擊[9-11]。劉芳等使用gE基因缺失活疫苗緊急免疫，并對初生仔豬進行滴鼻和肌注免疫后有效地控制了PR疫情，說明現(xiàn)有疫苗對新流行毒株依然有較好效果[12]。這些研究結(jié)果表明Bathar-K61疫苗目前還是控制偽狂犬病的最好手段之一，能夠?qū)箓慰袢〔《荆≒RV）新流行株的攻擊，為豬提供完全保護。

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（編輯：富春妮）

S858.282.65+9.1

A

1002-1957(2016)02-0113-04

2016-02-02

林文耀（1985-），男，廣東吳川人，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師，碩士，主要從事規(guī)?；i場生產(chǎn)管理及豬病防控工作. E-mail:lin.wenyao@hipra.com