李小霞，陳 鋒，潘 慶，王 玲，馮 田，甘 煉，付京花，曹俊明

( 1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，廣東 廣州 510642； 2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 動物科學(xué)研究所，廣東 廣州 510640 )

硒源對凡納濱對蝦生長、體組成和抗氧化能力的影響

李小霞1，陳 鋒1，潘 慶1，王 玲1，馮 田1，甘 煉1，付京花1，曹俊明2

( 1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，廣東 廣州 510642； 2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 動物科學(xué)研究所，廣東 廣州 510640 )

水溫(29.0±1.3) ℃，將初始體質(zhì)量(0.41±0.01) g的凡納濱對蝦隨機分為4組，每組3個重復(fù)，飼養(yǎng)在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中，投喂基礎(chǔ)飼料(對照組)及在此飼料中分別添加硒含量相等(0.30 mg/kg)的亞硒酸鈉、酵母硒和蛋氨酸硒的4種飼料，養(yǎng)殖56 d，比較了不同硒源對凡納濱對蝦生長、體組成和抗氧化能力的影響。試驗結(jié)果表明，蛋氨酸硒組對蝦的生長性能顯著高于對照組和亞硒酸鈉組(P<0.05)。外源硒可顯著影響對蝦體蛋白和脂肪含量 (P<0.05)，蛋氨酸硒組對蝦機體營養(yǎng)成分顯著優(yōu)于其他組(P<0.05)。添加外源硒組對蝦的血清總抗氧化能力和谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于對照組(P<0.05)。蛋氨酸硒組對蝦血清丙二醛含量顯著低于其他組(P<0.05)。由此得出，飼料添加0.3 mg/kg的硒能在一定程度上提高凡納濱對蝦的生長和抗氧化能力，蛋氨酸硒優(yōu)于酵母硒和亞硒酸鈉。

凡納濱對蝦；硒；生長性能；抗氧化能力

硒是動物生長發(fā)育所必需的微量營養(yǎng)元素之一，是谷胱甘肽過氧化物酶和含硒轉(zhuǎn)移核糖核酸的組成成分，對動物體的免疫和抗氧化機能有重要作用，在動物營養(yǎng)中已有研究與應(yīng)用[1-2]。研究證實，在飼料中添加適量硒，能顯著增強機體免疫力，提高養(yǎng)殖動物的生長性能、成活率和抗氧化酶活性[3-7]。常用的飼料硒源有無機硒和有機硒兩種形式。目前，水產(chǎn)飼料中廣泛使用的是無機硒—亞硒酸鈉，但其吸收率低、毒性較強，并具有氧化作用，對動物和環(huán)境有潛存風(fēng)險，限制了其在飼料中的應(yīng)用[1,8]。近年來，不同硒源在水產(chǎn)動物養(yǎng)殖上的研究日益增多，但在凡納濱對蝦(Litopenaeusvannamei) 生產(chǎn)中的應(yīng)用研究較少。筆者以亞硒酸鈉為無機硒源，酵母硒和蛋氨酸硒為有機硒源，探討了這3種硒源對凡納濱對蝦生長、體組成和抗氧化能力的影響，為其在對蝦養(yǎng)殖中合理應(yīng)用提供參考。

1.材料與方法

1.1 試驗飼料

根據(jù)凡納濱對蝦的營養(yǎng)需求[9]，以魚粉、酪蛋白和明膠為主要蛋白源，魚油和大豆磷脂為脂肪源配制基礎(chǔ)飼料，所用飼料原料均符合國家飼料衛(wèi)生標準。飼料配方及營養(yǎng)組成見表1。對照組飼喂不加硒的基礎(chǔ)飼料，試驗組在基礎(chǔ)飼料中分別添加硒含量為0.30 mg/kg的亞硒酸鈉(飼料級，黃驊津驊添加劑有限公司，純度≥98.7%)、酵母硒(廣東海大集團股份有限公司，硒含量為1600 mg/kg)和蛋氨酸硒(Sigma-Aldrich Co. LLC., 純度≥98%)，配制成4種試驗飼料，實測硒含量分別為0.25、0.50、0.56、0.50 mg/kg。飼料原料經(jīng)粉碎過60目篩后混合均勻，用SLX-80型雙螺桿擠壓機制成直徑為1.0 mm的顆粒飼料，在50 ℃烘箱中烘干至水分含量<10%，自然冷卻后放入塑料密封袋中，冰箱中-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗用蝦及飼養(yǎng)管理

試驗用凡納濱對蝦購自正大集團珠海蝦苗廠，為當(dāng)年蝦苗。養(yǎng)殖試驗在華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行。正式試驗前先將蝦苗在室外水泥池馴養(yǎng)15 d，期間投喂對照組飼料。試驗開始前凡納濱對蝦禁食24 h后，選取規(guī)格一致、體格健壯的初始體質(zhì)量為(0.41±0.01) g的幼蝦480尾，隨機放入12個養(yǎng)殖桶中(約350 L)，每桶40尾蝦，每試驗組設(shè)3個重復(fù)，養(yǎng)殖試驗持續(xù)56 d，每日于08:30、14:30、20:00飽食投喂，投喂0.5～1 h后吸取殘餌，根據(jù)攝食情況及時調(diào)整投喂量。試驗水源為經(jīng)沙濾、消毒后的淡化海水，鹽度3.5～5.5。飼養(yǎng)期間24 h連續(xù)充氣，水溫(29.0±1.3) ℃，溶解氧>5.0 mg/L，氨氮<0.2 mg/L，亞硝酸氮<0.1 mg/L，pH 7.6～8.0，每3 d排污1次，每7 d換水1/4～1/3。

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平

注：1.礦物質(zhì)預(yù)混料由廣州海因特生物技術(shù)有限公司提供(g/kg)：NaCl, 59.34; KCl, 114.54; MgSO4·7H2O, 146.08; CuSO4·5H2O, 0.84; FeSO4·5H2O, 4.95; ZnSO4·7H2O, 3.67; MnSO4·H2O, 19.35; Ca(IO3)2, 0.04; CoSO4·7H2O, 0.50; 沸石粉, 397.76; 磷酸二氫鈣, 252.93; 2. 維生素預(yù)混料由廣州飛禧特水產(chǎn)科技有限公司提供(g/kg): VA, 3 200 000 IU; VD, 1 600 000 IU; VE, 16; VK, 4; VB1, 4; VB2, 8; VB6, 4.8; VB12, 16 mg; 煙酸, 28; 泛酸鈣, 16; 葉酸, 1.28; 生物素, 64 mg; 肌醇, 140; 米糠, 777.84; 3.實測值.

1.3 樣品采集及分析

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，對所有試驗對蝦禁食24 h，計數(shù)、稱每桶總質(zhì)量，計算生長指標。每桶隨機取10尾蝦，裝入密封袋中于冰箱-20 ℃保存?zhèn)溆?，用于分析全蝦體成分；另外，每桶隨機取15尾蝦，用1 mL一次性無菌注射器從圍心竇采血，將血樣在冰箱中4 ℃靜置過夜后，4 ℃，8000 r/min離心20 min，取上清液分裝于冰箱中-80 ℃保存待測。

1.4 指標測定與方法

1.4.1 生長性能指標測定

試驗開始和結(jié)束時，記錄每桶對蝦的尾數(shù)和總質(zhì)量，采樣前禁食24 h，按下式計算對蝦生長性能指標：

質(zhì)量增加率/%=(mt-m0)/m0×100%

特定生長率/%·d-1=(lnmt-lnm0)/t×100%

飼料系數(shù)=m1/(mt-m0)

蛋白質(zhì)效率= (mt-m0)/ (m1×P)

成活率/% =Nt/N0×100%

式中，mt、m0分別為對蝦終末和初始體質(zhì)量(g)；t為試驗天數(shù)(d)；m1為攝入的干飼料質(zhì)量(g)；P為飼料蛋白質(zhì)含量(%)；Nt為試驗結(jié)束時對蝦的尾數(shù)；N0為試驗開始時對蝦的尾數(shù)。

1.4.2 體成分和血清抗氧化指標測定

采用美國分析化學(xué)家協(xié)會規(guī)定的方法測定飼料和全蝦的常規(guī)營養(yǎng)成分[10]。其中，水分采用105 ℃烘箱常壓干燥恒重法測定；粗蛋白用凱氏定氮法測定(瑞典TECATOR公司1030型蛋白質(zhì)自動分析儀)；粗脂肪采用索氏抽提法測定；粗灰分用箱式馬弗爐550 ℃灼燒法(4 h)測定。采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定對蝦血清總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽過氧化物酶活性和丙二醛含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)用平均值±標準差表示，采用SPSS 20.0進行統(tǒng)計分析，先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析，若組間差異顯著，再用多重檢驗進行比較，顯著性水平為P<0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同硒源對凡納濱對蝦生長性能的影響

試驗結(jié)果顯示，亞硒酸鈉組對蝦成活率最低，與對照組相比降低了4.51%，但硒源對凡納濱對蝦成活率無顯著性影響(P>0.05)(表2)。蛋氨酸硒組對蝦的終末體質(zhì)量、質(zhì)量增加率、特定生長率和蛋白質(zhì)效率均顯著高于對照組和亞硒酸鈉組(P<0.05)，其他組間均無顯著差異(P>0.05)。蛋氨酸硒組對蝦飼料系數(shù)顯著低于對照組和亞硒酸鈉組(P<0.05)，其他組間均無顯著差異(P>0.05)。

2.2 不同硒源對凡納濱對蝦體成分的影響

飼料中添加不同硒源對凡納濱對蝦全蝦水分含量無顯著性影響(P>0.05)(表3)，而對蝦體蛋白和脂肪含量有顯著性影響(P<0.05)。蛋氨酸硒組對蝦體蛋白含量顯著高于其他組(P<0.05)；對照組和酵母硒組對蝦體蛋白含量差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于亞硒酸鈉組(P<0.05)。與對照組相比，添加不同硒源可顯著降低對蝦體脂肪含量(P<0.05)，其中，有機硒組對蝦體脂肪含量顯著低于無機硒和對照組(P<0.05)，而蛋氨酸硒組對蝦體脂肪含量最低，顯著低于其他組(P<0.05)。

2.3 不同硒源對凡納濱對蝦血清抗氧化指標的影響

添加硒組對蝦血清總抗氧化能力、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性均高于對照組(表4)，其中，血清總抗氧化能力和谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于對照組(P<0.05)。蛋氨酸硒組對蝦血清丙二醛含量顯著低于其他組(P<0.05)，其他組間均無顯著差異(P>0.05)。

表2 不同硒源對凡納濱對蝦生長性能的影響

注：同一行數(shù)據(jù)中上標不同字母的平均值間差異顯著(P<0.05) (n=3)，下同.

表3 不同硒源對凡納濱對蝦體成分的影響 (% 濕質(zhì)量)

表4 不同硒源對凡納濱對蝦血清抗氧化指標的影響

3 討 論

3.1 飼料中添加不同硒源對凡納濱對蝦生長性能的影響

硒是魚類生長和繁殖所必需的微量元素。飼料硒含量不足或過高都會影響魚類的健康和生長[11-13]。有研究指出，影響營養(yǎng)素作用效果的關(guān)鍵因素是吸收，不同來源的硒在腸道內(nèi)的吸收率不同[14]；一般來說，養(yǎng)殖動物對有機硒的生物利用率比無機硒高，有機硒具有較好的腸道吸收率[15]。本試驗結(jié)果表明，飼料中添加外源硒明顯地促進了凡納濱對蝦的生長，有機硒的促生長效果優(yōu)于無機硒。Nugroho等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.2 mg/kg的有機硒，有效提高了紅螯螯蝦(Cheraxcainii)終末體質(zhì)量、特定生長率、質(zhì)量增加率和成活率。在斑點叉尾(Ictaluruspunctatus)[4]和黃尾(Seriolalalandi)[17]的養(yǎng)殖研究中發(fā)現(xiàn)，添加外源硒可提高養(yǎng)殖斑點叉尾和黃尾的終末體質(zhì)量及質(zhì)量增加率，且有機硒的生物學(xué)效果優(yōu)于無機硒。添加外源硒可促進異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)的生長，無機硒的生物學(xué)效果與有機硒相似[3,18]。這種差異可能是由于不同動物對不同形式硒的吸收、利用能力不同。本試驗還發(fā)現(xiàn)，蛋氨酸硒組對蝦生長性能優(yōu)于其他試驗組，表明凡納濱對蝦飼料中蛋氨酸硒的生物學(xué)效應(yīng)最好，可完整地被吸收、運輸?shù)浇M織中，有較高的腸道吸收能力。

3.2 飼料中添加不同硒源對凡納濱對蝦體成分的影響

目前，有關(guān)飼料硒含量對動物體成分影響的研究較少。本試驗研究得知，除亞硒酸鈉外，添加外源硒可增強蝦體對飼料蛋白的利用率，提高機體粗蛋白質(zhì)含量，降低蝦體粗脂肪含量。相似的研究結(jié)果在鱸魚(Lateolabraxjaponicus)[12-13]和草魚(Ctenopharyngodonidellus)[19]的研究中均有報道。王吉橋等[20]研究指出，飼料添加蛋氨酸硒，可顯著提高仿刺參(Apostichopusjaponicus)幼參體壁的粗蛋白含量，但對體壁粗脂肪含量無顯著影響。在飼料中添加亞硒酸鈉可顯著提高方格星蟲(Sipunculusnudus)的粗脂肪含量，但對蟲體蛋白質(zhì)含量無顯著影響[21]。在飼料中添加酵母硒，對凡納濱對蝦[22]和鳡魚(Elopichthysbambusa)幼魚[23]體蛋白脂肪含量沒有顯著影響。飼料硒源對養(yǎng)殖動物體營養(yǎng)成分的影響不同，原因可能與動物種類、發(fā)育階段、硒來源等有關(guān)，但其影響機制還需進一步研究。

3.3 飼料中添加不同硒源對凡納濱對蝦血清抗氧化指標的影響

谷胱甘肽過氧化物酶、超氧化物歧化酶和總抗氧化能力是動物機體的主要抗氧化酶，其活性影響丙二醛的含量[24]。硒是谷胱甘肽過氧化物酶的活性中心，是抗氧化體系重要的組成部分，對動物的正常生長發(fā)育有重要的生物學(xué)作用[1, 25]。本試驗結(jié)果表明，飼料中添加外源硒，提高了養(yǎng)殖對蝦總抗氧化能力和谷胱甘肽過氧化物酶的活性，降低機體自由基和脂質(zhì)過氧化物的積聚，有效抵抗氧化損傷。Wang等[4]發(fā)現(xiàn)，添加蛋氨酸硒、酵母硒和亞硒酸鈉，可顯著提高斑點叉尾血液和肝組織谷胱甘肽過氧化物酶活性，有機硒的作用效果優(yōu)于無機硒，蛋氨酸硒的效果優(yōu)于酵母硒，在異育銀鯽[18]的研究中亦有相似的研究結(jié)果。

本試驗結(jié)果表明，飼料中添加0.30 mg/kg的硒對凡納濱對蝦生長性能改善有一定的促進作用，同時提高機體的抗氧化能力。蛋氨酸硒提高凡納濱對蝦生長和抗氧化能力的效果優(yōu)于酵母硒和亞硒酸鈉。

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EffectsofDietarySeleniumSourcesonGrowth,BodyCompositionandAntioxidantPerformanceofJuvenilePacificWhiteLegShrimpLitopenaeusvannamei

LI Xiaoxia1, CHEN Feng1, PAN Qing1, WANG Ling1, FENG Tian1, GAN Lian1, FU Jinghua1, CAO Junming2

( 1. College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China; 2. Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China )

A feeding trail was conducted to evaluate the effects of dietary selenium sources on growth, body composition and antioxidant capacity of juvenile Pacific white leg shrimpLitopenaeusvannamei. The healthy shrimp with initial body weight of (0.41±0.01) g were randomly divided into 4 groups with 3 replicates per treatment and fed a basal diet (control group) and the diets supplemented with 0.30 mg/kg selenium from sodium selenite (Na2SeO3), selenium yeast (Se-Y) and selenomethionine (Se-M) with selenium levels of 0.25, 0.50, 0.56, and 0.50 mg/kg, respectively, at water temperature of (29.0±1.3) ℃ for 56 days. There was significantly higher growth performance in the shrimp fed Se-M diet than the shrimp fed the control diet and Na2SeO3diet (P<0.05). The shrimp fed the diet supplemented with selenium showed higher body protein content compared to the animals fed the control diet, while the fat content in the shrimp showed the opposite trend (P<0.05). The serum total antioxidative capacity and glutathione peroxidase capacity were found to be significantly increased in the shrimp fed the diets containing selenium supplements compared with the shrimp in the control group (P<0.05), without significant differences among test groups (P>0.05). The shrimp fed Se-M diet had the maximal serum malondialdehyde content among these treatments (P<0.05). The findings indicate that supplementation of 0.30 mg/kg selenium can improve growth and antioxidant performance of juvenile Pacific white leg shrimp, more effective in selenomethionine than in selenium yeast and sodium selenite.

Litopenaeusvannamei; selenium; growth; antioxidant capacity

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.03.001

S968.22

A

1003-1111(2016)03-0199-05

2015-09-07；

2015-10-23.

廣東省自然科學(xué)基金團隊項目(10351064001000000).

李小霞(1985-)，女，博士研究生；研究方向：水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料. E-mail：xiaoxljaney@163.com. 通訊作者：潘慶(1969-)，女，教授，博士生導(dǎo)師；研究方向：水產(chǎn)經(jīng)濟動物營養(yǎng)與飼料. E-mail：qpan@scau.edu.cn.