李靜++葉志中++尹志華++陳新鵬

【摘 要】 目前類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。隨著對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的深入研究，近年來多種生物制劑的臨床治療獲得了成功；但生物制劑花費(fèi)較高且易感染，而基因治療能夠克服這些缺點(diǎn)?；蛑委熤饕ò谢虻倪x擇、動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究以及臨床試驗(yàn)的研究等。靶基因的選擇中，主要闡述了調(diào)控細(xì)胞因子的相關(guān)基因、核轉(zhuǎn)錄因子-κB抑制劑以及調(diào)控細(xì)胞凋亡的相關(guān)基因。雖然類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的基因治療目前處于探索階段；但現(xiàn)有的臨床研究表明基因治療有顯著的療效，進(jìn)一步說明類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的基因治療有較好的研究前景。

【關(guān)鍵詞】 關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕；基因治療；靶基因；綜述

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以對稱性的累及外周關(guān)節(jié)的持續(xù)性滑膜炎為主要表現(xiàn)的全身性自身免疫性疾病，主要特點(diǎn)是滑膜炎癥導(dǎo)致血管翳的形成、軟骨破壞及骨質(zhì)侵蝕，而最終影響關(guān)節(jié)的完整性。RA的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，傳統(tǒng)的藥物治療能夠有效控制疾病的進(jìn)展；但是存在起效慢以及不良反應(yīng)多等缺點(diǎn)。目前，生物制劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床，然而仍有一部分患者應(yīng)用生物制劑效果并不明顯。生物制劑的主要缺點(diǎn)是限制免疫系統(tǒng)的功能，導(dǎo)致機(jī)體更容易感染。而基因治療避免了這些缺點(diǎn)，基因治療的主要思路是將具有編碼治療性蛋白的基因?qū)胩囟ǖ慕M織中，使患者能夠持續(xù)性地產(chǎn)生這種治療性蛋白，這給RA的治療開辟了新路徑。

1 基因治療的一般過程

基因治療能夠潛在地治療疾病的遺傳性，主要方法是在靶細(xì)胞內(nèi)通過抵消或者替換某些缺陷基因，從而達(dá)到治療該缺陷基因引起某種疾病的目的[1]。

基因治療的過程主要包括4個(gè)階段。（1）目的基因的獲取，常用的方法有：①通過限制性內(nèi)切酶在生物體基因上直接提取目的基因；②采用逆轉(zhuǎn)錄酶，以mRNA為模板合成單鏈DNA，再經(jīng)DNA聚合酶作用產(chǎn)生雙鏈DNA；③根據(jù)已知的氨基酸人工合成DNA；④用PCR擴(kuò)增特定片段。（2）載

體的選擇，主要有病毒載體系統(tǒng)和非病毒載體系統(tǒng)。病毒載體系統(tǒng)除了常用的腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒之外，還包括慢病毒、皰疹病毒、麻疹病毒及桿狀病毒等。（3）重組DNA的構(gòu)建，即用DNA連接酶將目的基因DNA分子與載體連接，形成一個(gè)具有自我復(fù)制能力的雜合子DNA。（4）重組DNA導(dǎo)入體細(xì)胞。

人類的疾病主要分為單基因遺傳病、多基因遺傳病以及獲得性基因遺傳病。RA的發(fā)病機(jī)制仍不清楚，目前研究表明，RA可能是復(fù)雜的多基因遺傳病，與多個(gè)尚未闡明的易感基因以及環(huán)境因素之間的相互聯(lián)系有關(guān)[2]。盡管RA的遺傳性并不符合傳統(tǒng)意義上的孟德爾定律，但是基因治療同樣可用于RA患者的治療[3]。

2 RA的基因治療

2.1 細(xì)胞因子的基因治療 目前基因治療研究較多的是與細(xì)胞因子有關(guān)的靶基因。細(xì)胞因子參與了RA的發(fā)病機(jī)制相關(guān)的免疫應(yīng)答中，促進(jìn)自身免疫反應(yīng)、慢性炎癥的形成過程及組織的破壞。腫瘤壞死因子-α（TNF-α）及白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）的抑制劑已在臨床中廣泛應(yīng)用于RA的治療，并取得了良好的效果。這一點(diǎn)同時(shí)也支持細(xì)胞因子在RA中發(fā)揮重要作用的觀點(diǎn)，基因治療的靶基因，特別是細(xì)胞因子相關(guān)的靶基因是重要的研究方向。

TNF-α在RA的發(fā)病機(jī)制中有重要作用，在RA滑膜組織中調(diào)節(jié)其他促炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。TNF-α主要由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，同樣也可以由單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肥大細(xì)胞及自然殺傷細(xì)胞等產(chǎn)生。目前的研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α有2個(gè)受體，即TNF-RⅠ受體及TNF-RⅡ受體。TNF-RⅡ受體有更多的限制，主要在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞中高度表達(dá)[4]。TNF-α的免疫功能主要是通過誘導(dǎo)促炎性細(xì)胞因子，以及刺激免疫細(xì)胞的免疫效應(yīng)來發(fā)揮作用的，而刺激免疫細(xì)胞往往是通過TNF受體來介導(dǎo)的[5]。Rossol等[6]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TNF-α和TNF-RⅠ之間的相互關(guān)系在滑膜內(nèi)T細(xì)胞的轉(zhuǎn)移中有重要作用。收集RA的滑膜組織切片在體外環(huán)境下培養(yǎng)，在熒光顯微鏡下可以觀察到轉(zhuǎn)移的CD4+T細(xì)胞，結(jié)果表明，來自RA患者的CD4+T細(xì)胞轉(zhuǎn)移到滑膜組織中，而健康對照組的CD4+T細(xì)胞并沒有轉(zhuǎn)移到滑膜組織中。在對比實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，TNF-RⅠ和ICAM-1是CD4+T細(xì)胞轉(zhuǎn)移至滑膜液中必不可少的條件[6]。

IL-1家族主要包括11種細(xì)胞因子，即7種促炎性細(xì)胞因子（IL-1α、IL-1β、IL-18、IL-33、IL-36α、IL-36β、IL-36γ）和4種抗炎性細(xì)胞因子（IL-1Ra、IL-36Ra、IL-37、IL-38），在介導(dǎo)免疫應(yīng)答中有重要的作用[7]。內(nèi)源性抑制劑IL-1Ra具有阻斷IL-1α及IL-1β的作用，IL-1的受體包括IL-1RⅠ及IL-1RⅡ。編碼IL-1α、IL-1β及IL-Ra的基因存在多態(tài)性，該位點(diǎn)的基因多態(tài)性提高了RA的易感性以及改變了IL-1的生成。IL-1β基因rs 169 44位點(diǎn)的多態(tài)性同樣影響IL-1的表達(dá)，這也與RA患者的關(guān)節(jié)損害密切相關(guān)[8]。IL-Ra主要是通過刺激單核細(xì)胞的抗炎細(xì)胞因子產(chǎn)生的。Hu等[9]將IL-Ra基因轉(zhuǎn)染至間充質(zhì)干細(xì)胞，量化重組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞產(chǎn)生的IL-Ra相關(guān)蛋白，然后觀察APA微囊劑的滲透性，并通過對CIA小鼠模型的治療來評(píng)估臨床效果，結(jié)果表明，帶有IL-Ra基因轉(zhuǎn)染的間充質(zhì)干細(xì)胞對RA有潛在治療效果[9]。

一些生長因子已經(jīng)被證實(shí)在骨科疾病模型中有一定的治療效果。骨形成蛋白（BMPs）在軟骨及骨的形成中有重要的作用[10]，特別是BMP-2及BMP-7有最大的成骨效能，并且已經(jīng)被批準(zhǔn)用于臨床的重組蛋白。但是由于其半衰期短以及能夠明顯降低細(xì)菌表達(dá)蛋白的活性，故這種蛋白療法是有限的[11]。基因治療可以通過高水平的局部轉(zhuǎn)基因表達(dá)來克服這些缺點(diǎn)。某些生長因子已被用于RA治療的研究，例如轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、胰島素樣生長因子-1（IGF-1）等。最近有研究表明，IGF-1的基因治療獲得了有限的成功。腺病毒載體介導(dǎo)的IGF-1在體外轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中不能促進(jìn)軟骨的分化，但是在軟骨的形成中表達(dá)TGF-β1有協(xié)同作用[12]。腺病毒作為載體能夠成功在體外環(huán)境下將馬的IGF-1轉(zhuǎn)導(dǎo)入馬的軟骨細(xì)胞。將這種經(jīng)過修飾的細(xì)胞再導(dǎo)入有15 mm軟骨破損的股膝關(guān)節(jié)中，能夠觀察到基質(zhì)的合成及軟骨的修復(fù)[13]。RA相關(guān)的促炎性細(xì)胞因子，例如TNF-α及IL-1β能夠產(chǎn)生IGF-1的抵抗，這些研究表明IGF-1在RA的基因治療中有較好的研究前景。

2.2 細(xì)胞凋亡基因的治療 許多研究表明，在人類自身免疫性疾病中，外周血存在單核細(xì)胞過度的細(xì)胞凋亡，而不一定是有缺陷的免疫細(xì)胞的凋亡，通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡以及抑制細(xì)胞周期的延長改善RA關(guān)節(jié)破壞是一種新的治療方向。目前發(fā)現(xiàn)在Fas基因的啟動(dòng)子區(qū)域，2個(gè)單核苷酸多態(tài)性是已經(jīng)被證實(shí)了，主要包括-1377G-A和-670A-G。這些單核苷酸多態(tài)性的生物學(xué)功能還不確定，而Fas-1377位點(diǎn)的多態(tài)性可能與轉(zhuǎn)錄因子SP-1序列有關(guān)。Fas/FasL啟動(dòng)子區(qū)的基因變化可能在影響RA細(xì)胞凋亡中有重要意義[14]。

FasL是Fas在體內(nèi)的天然配體，屬于TNF/LT家族。細(xì)胞凋亡機(jī)制的受損以及Fas基因的過度表達(dá)可能導(dǎo)致多種遺傳性疾病。當(dāng)Fas與FasL結(jié)合后，可以導(dǎo)致攜帶有Fas的細(xì)胞發(fā)生凋亡，而細(xì)胞膜上的Fas與Fas交聯(lián)成Fas三聚體，繼而誘導(dǎo)Fas分子胞質(zhì)區(qū)死亡結(jié)構(gòu)域（DD）與一種含有死亡結(jié)構(gòu)域的Fas相關(guān)蛋白（FADD）結(jié)合，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的發(fā)生。CTLA4-FasL是CTLA4和FasL的胞外結(jié)構(gòu)域的融合產(chǎn)物，是將T細(xì)胞的兩種抑制分子整合到同一個(gè)分子中。重組腺相關(guān)病毒（AAV）編碼鼠CTLA4-FasL融合基因（rAAV.CTLA4-FasL）注射到小鼠踝關(guān)節(jié)內(nèi)后，觀察到rAAV.CTLA4-FasL抑制了AIA模型中小鼠關(guān)節(jié)炎的進(jìn)展，這表明關(guān)節(jié)腔內(nèi)局部注射CTLA4-FasL可能對RA疾病的進(jìn)展有潛在的治療效果[15]。

2.3 核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）抑制劑 RA的滑膜成纖維細(xì)胞中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的中斷是轉(zhuǎn)基因治療的新方向，可以通過抑制或者激活轉(zhuǎn)錄因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，減少細(xì)胞因子介導(dǎo)的慢性炎癥。NF-κB在分化、代謝以及CNS的某些特定功能中有重要作用[16]。NF-κB是由5種DNA相關(guān)蛋白組成，主要包括relA（p65）、relB、c-rel、p50以及p52等。這些二聚體被細(xì)胞抑制劑抑制其功能，當(dāng)信號(hào)介導(dǎo)導(dǎo)致細(xì)胞抑制劑降解后能夠釋放其功能，能夠在滑膜成纖維樣細(xì)胞的培養(yǎng)中以及RA患者的滑膜組織中檢測到NF-κB的活化，在關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型中同樣能夠檢測到NF-κB在RA的疾病發(fā)展中有重要的作用[17]。

最近的研究表明，與NF-κB信號(hào)遺傳相關(guān)的基因包括CD40、TRAF1、TNFAIP3以及c-REL，同樣也強(qiáng)調(diào)了NF-κB的活化在RA發(fā)病機(jī)制中的重要作用[18]。目前研究表明，NF-κB的活化主要有2條路徑[19]。在經(jīng)典的路徑中，細(xì)胞質(zhì)中的IκBα抑制p50/rel A二聚體的功能。激活經(jīng)典路徑的信號(hào)主要包括抗原受體以及細(xì)胞因子受體，細(xì)胞因子受體主要為TNFR1、IL-1R以及Toll樣受體（TLR）。另外一條非經(jīng)典路徑是NF-κB的活化，包括p100和p105等4種NF-κB亞基。p100和p105分別是p52和p50的前體[20]。齊晅等[21]分別取RA和健康人群的成纖維樣滑膜細(xì)胞（FLS）進(jìn)行培養(yǎng)，然后分別用相同劑量的NF-κB抑制劑，結(jié)果表明，與對照組相比，NF-κB能夠誘導(dǎo)FLS的凋亡，并抑制促炎性細(xì)胞因子TNF-α以及IL-1β的釋放?；虻南嚓P(guān)性分析能夠幫我們預(yù)測疾病的風(fēng)險(xiǎn)以及潛在的治療方案，通過全基因組相關(guān)分析（GWAS）發(fā)現(xiàn)，NF-κB路徑可能是RA發(fā)病的潛在危險(xiǎn)因素[20]。

3 基因治療在動(dòng)物模型中的進(jìn)展

目前建立動(dòng)物RA模型的方法較多，主要有小鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（CIA）、大鼠鏈球菌細(xì)胞壁誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（SCW）、小鼠酵母聚糖誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（ZIA）、兔抗原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（AIA）。國內(nèi)許多實(shí)驗(yàn)室利用CIA模型進(jìn)行篩選藥物、轉(zhuǎn)基因、免疫治療及發(fā)病機(jī)制方面的研究。

CIA模型被用來研究已經(jīng)超過30年，即使現(xiàn)在仍能從小鼠CIA模型中學(xué)到很多，然而CIA模型只模擬了人類RA的一小部分模型片段。RA患者與小鼠CIA模型的不同主要體現(xiàn)在缺乏性別差異，以及RA患者會(huì)產(chǎn)生類似于類風(fēng)濕因子（RF）、抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體（抗CCP抗體）之類的抗體。

4 RA基因治療的臨床試驗(yàn)

美國的匹茲堡大學(xué)在1996年完成實(shí)施了第1例

應(yīng)用基因轉(zhuǎn)移技術(shù)治療RA的臨床試驗(yàn)，主要實(shí)驗(yàn)方法是將治療基因轉(zhuǎn)移至RA患者關(guān)節(jié)中，用以確定對RA患者治療的可行性及安全性。主要研究對象是需要關(guān)節(jié)置換術(shù)的嚴(yán)重RA終末期患者，將攜帶有IL-1Ra基因輸入到RA的第2～5掌指關(guān)節(jié)中，在RA患者的其他炎性關(guān)節(jié)置換術(shù)中獲得了自體滑膜細(xì)胞的培養(yǎng)。將這些培養(yǎng)的自體滑膜細(xì)胞擴(kuò)增，其中一半被逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染，另一半未修飾的滑膜細(xì)胞保持自體遺傳的同源性作為對照組。培養(yǎng)這些滑膜細(xì)胞，并將其重新注入掌指關(guān)節(jié)中。其中有

2個(gè)關(guān)節(jié)獲得IL-1Ra表達(dá)的細(xì)胞，另外2個(gè)關(guān)節(jié)獲得未修飾的滑膜細(xì)胞。通過ELISA和PCR分析，結(jié)果表明，帶有IL-1Ra基因的確轉(zhuǎn)入關(guān)節(jié)中，并得到有效表達(dá)[22]。

盡管逆轉(zhuǎn)錄病毒在臨床試驗(yàn)中得到有效應(yīng)用，逆轉(zhuǎn)錄病毒本身存在安全問題及費(fèi)用問題，因此在RA這類非致死性疾病中，研究者們開始采用相對更安全、更便宜的腺病毒載體。腺病毒載體已經(jīng)成功運(yùn)用于超過47項(xiàng)人類臨床試驗(yàn)中，總共有600多例患者[23]。Targeted Genetics公司進(jìn)行了一項(xiàng)針對RA基因治療的臨床試驗(yàn)研究，主要是測試能夠完全編碼TNFR：Fc的單鏈rAAV2病毒的臨床有效性，這種目的基因產(chǎn)物主要是結(jié)合了胞外的人類TNF-RⅡ及IgG1的Fc結(jié)構(gòu)區(qū)。在臨床試驗(yàn)進(jìn)程一半的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)單個(gè)和重復(fù)的關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射AVV2-TNFR：Fc（tgAAC94）是安全的，并且具有良好的耐受性[24]。然而在2007年6月24日

1例36歲的RA患者于第2次關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射22 d后死亡[25]，F(xiàn)DA立即叫停了這項(xiàng)臨床試驗(yàn)，并對患者死亡原因進(jìn)行調(diào)查。調(diào)查結(jié)果顯示，患者死亡原因與本次試驗(yàn)的tgAAC94無明顯相關(guān)性，故于同年9月允許此臨床試驗(yàn)繼續(xù)進(jìn)行[31]。試驗(yàn)結(jié)果表明，rAAV載體是安全的，而且通過關(guān)節(jié)外的檢測證實(shí)目前并沒有證據(jù)表明關(guān)節(jié)外TNFR：Fc的過度表達(dá)。臨床結(jié)果證實(shí)，實(shí)驗(yàn)組相比對照組，靶關(guān)節(jié)的臨床癥狀得到較好的改善[32]?；蛑委熍R床試驗(yàn)的成功證實(shí)了將基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入靶關(guān)節(jié)中，并得到有效、穩(wěn)定、持續(xù)的表達(dá)是可能的，這為RA治療方法的探索提供了新的研究方向。

5 問題及展望

近來RA的基因治療發(fā)展較快，通過試驗(yàn)研究獲得了較大的突破及發(fā)展；但是目前基因治療RA存在一些問題。主要包括：①基因治療RA的實(shí)驗(yàn)研究缺乏理想的RA動(dòng)物模型，目前的動(dòng)物模型只有關(guān)節(jié)炎癥的單次發(fā)作或者一個(gè)階段的發(fā)展。②帶有目的基因的載體可能播散到靶器官外，目的基因難以穩(wěn)定表達(dá)，并且目的基因的調(diào)控也存在問題。③最大的限制性問題是缺乏理想的載體，目前使用最多的是逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒及非病毒載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒能穩(wěn)定表達(dá)，體內(nèi)轉(zhuǎn)染率低，并且是隨機(jī)整合到體細(xì)胞染色體上的，已經(jīng)證明野生的逆轉(zhuǎn)錄病毒可引起細(xì)胞惡變。腺病毒載體轉(zhuǎn)染率高，但是不能穩(wěn)定表達(dá)，并且腺病毒存在免疫原性。非病毒載體的主要優(yōu)點(diǎn)是安全、穩(wěn)定，主要缺點(diǎn)是轉(zhuǎn)基因的表達(dá)時(shí)間短，在活體細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染率較低。目前沒有一個(gè)載體能夠安全、穩(wěn)定、有效地表達(dá)。有理由相信，隨著載體、基因調(diào)控和轉(zhuǎn)染效率的不斷完善，基因治療將成為治療RA的有效手段。

6 參考文獻(xiàn)

[1] Naldini L.Gene therapy returns to centre stage[J].Nature，2015，526（7573）：351-360.

[2] Picerno V，F(xiàn)erro F，Adinolfi A，et al.One year in review：the pathogenesis of rheumatoid arthritis[J].Clin Exp Rheumatol，2015，33（4）：551-558.

[3] Evans CH，Ghivizzani SC，Robbins PD.Arthritis gene therapy and its tortuous path into the clinic[J].Transl Res，2013，161（4）：205-216.

[4] Monaco C，Nanchahal J，Taylor P，et al.Anti-TNF therapy：past，present and future[J].Int Immunol，2015，27（1）：55-62.

[5] Mula RVR，Shashidharamurthy R.Multifaceted role of TNF-α during the pathogenesis of rheumatoid arthritis[J].

Adv in Biosci & Biotechnol，2013，4（10）：937-940.

[6] Rossol M，Schubert K，Meusch U，et al.Tumor necrosis factor receptor type I expression of CD4+ T cells in rheumatoid arthritis enables them to follow tumor necrosis factor gradients into the rheumatoid synovium[J].Arthritis Rheum，2013，65（6）：1468-1476.

[7] Wang M，Wang B，Ma Z，et al.Detection of the novel IL-1 family cytokines by QAH-IL1F-1 assay inrheumatoid arthritis[J].Cell Mol Biol（Noisy-le-grand），2016，62（4）：31-34.

[8] Magyari L，Varszegi D，Kovesdi E，et al.Interleukins and interleukin receptors in rheumatoid arthritis：Research，diagnostics and clinical implications[J].World J Orthod，2014，5（4）：516-536.

[9] Hu J，Li H，Chi G，et al.IL-1RA gene-transfected bone marrow-derived mesenchymal stem cells in APA microcapsules could alleviate rheumatoid arthritis[J].Int J Clin Exp Med，2015，8（1）：706-713.

[10] Wu X，Shi W，Cao X.Multiplicity of BMP signaling in skeletal development[J].Ann N Y Acad Sci，2007，1116：29-49.

[11] Einhorn TA.Clinical applications of recombinant human BMPs：early experience and future development[J].J Bone Joint Surg Am，2003，85（13）：82-88.

[12] Evans CH，Ghivizzani SC，Robbins PD.The 2003 Nicolas Andry Award.Orthopaedic gene therapy[J].Clin Orthop Rel Res，2004（429）：316-329.

[13] Goodrich LR，Hidaka C，Robbins PD，et al.Genetic modification of chondrocytes with insulin-like growth factor-1 enhances cartilage healing in an equine model[J].J Bone Joint Surg Br，2007，89（5）：672-685.

[14] Kobak S，Berdeli A.Fas/FasL promoter gene polymorphism in patients with rheumatoid arthritis[J].Reumatismo，2012，64（6）：374-379.

[15] Zhang W，Wang F，Wang B，et al.Intraarticular gene delivery of CTLA4-FasL suppresses experimental arthritis[J].

Int Immunol，2012，24（6）：379-388.

[16] Tornatore L，Thotakura AK，Bennett J，et al.The nuclear factor kappa B signaling pathway：Integrating metabolism with inflammation[J].Trends Cell Biol，2012，22（11）：557-566.

[17] Roman-Blas JA，Jimenez SA.Targeting NF-κB：a promising molecular therapy in inflammatory arthritis[J].Int Rev Immunol，2008，27（5）：351-374.

[18] Criswell LA.Gene discovery in rheumatoid arthritis highlights the CD40/NF-κB signaling pathway in disease pathogenesis[J].Immunol Rev，2010，233（1）：55-61.

[19] Sun SC.The noncanonical NF-κB pathway[J].Immunol Rev，2012，246（1）：125-140.

[20] Scheinman R.NF-κB and Rheumatoid Arthritis：Will Understanding Genetic Risk Lead to a Therapeutic Reward？[J].For Immunopathol Dis Therap，2013，4（2）：93-110.

[21] 齊晅，田玉，孫超，等.NF-κB信號(hào)通路的阻斷對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞凋亡與炎癥的影響[J].中國老年學(xué)雜志，2015，35（12）：7022-7024.

[22] Evans CH，Robbins PD，Ghivizzani SC，et al.Gene transfer to human joints：progress towards a gene therapy of arthritis[J].Proc Natl Acad Sci USA，2005，102（24）：8698-8703.

[23] Edelstein ML，Abedi MR，Wixon J.Gene therapy clinical trials worldwide to 2007-an update[J].J Gene Med，2007，9（10）：833-842.

[24] Mease P，Wei N，F(xiàn)udman E.Local treatment for inflammatory arthritis：A phase 1-2 clinical study of intra-articular administration of a recombinant adeno-associated vector containing a TNF-alpha antagonist gene[J].Arthritis Rheum，2007，56：793.

[25] Evans CH，Ghivizzani SC，Robbins PD.Arthritis gene therapys first death[J].Arthritis Res Ther，2008，10（3）：110.

[26] Mease PJ，Wei N，F(xiàn)udman EJ，et al.Safety，tolerability，and clinical outcomes after intraarticular injection of a recombinant adeno-associated vector containing a tumor necrosis factor antagonist gene：results of a phase 1/2 Study[J].J Rheumatol，2010，37（4）：692-703.

收稿日期：2016-06-29；修回日期：2016-07-25