張大俊，張羽男，張 宇

(佳木斯大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

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四氫小檗堿晶體的波譜特征與結(jié)構(gòu)確定

張大俊，張羽男，張 宇

(佳木斯大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

目的：制備得到四氫小檗堿晶體并對其波譜特征與結(jié)構(gòu)進行確定。方法：采用溶劑揮發(fā)法制備四氫小檗堿晶體，并利用元素分析、XRPD、IR、1H/13C-NMR手段對所得晶體進行波譜表征與結(jié)構(gòu)確定。結(jié)果：XRPD分析產(chǎn)物與四氫小檗堿粉末的衍射角基本相同但其峰型較為尖銳；IR、1H/13C-NMR分析表明產(chǎn)物譜圖峰位與四氫小檗堿樣品峰位及峰型基本一致，表明所得產(chǎn)物為高純度的四氫小檗堿晶體。結(jié)論：本文所得數(shù)據(jù)及譜圖可為四氫小檗堿及其衍生物的定性分析及純度鑒定提供參考和依據(jù)。

四氫小檗堿晶體；XRPD；IR；NMR

四氫小檗堿(Tetrahydroberberine，THB)屬原小檗堿類生物堿，主要來源于罌粟科，如蛇果黃堇、延胡索等植物，在抗氧化、抗心律失常、鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛等方面展現(xiàn)出良好的臨床藥用活性[1～5]，結(jié)構(gòu)式見圖1。研究表明，高純度的四氫小檗堿不僅對于生物活性實驗有更為顯著的作用而且對于結(jié)構(gòu)修飾的產(chǎn)率也有明顯的影響[6～10]。因此，制備四氫小檗堿晶體并對其進行表征和鑒定將極具科學(xué)意義和應(yīng)用價值?；谝陨峡紤]，本實驗利用溶劑揮發(fā)法制備得到四氫小檗堿晶體，并對其進行了結(jié)構(gòu)表征及解析，數(shù)據(jù)可為高純度四氫小檗堿的藥理學(xué)及衍生化實驗開發(fā)提供定性及純度分析的科學(xué)依據(jù)。

圖1 四氫小檗堿的分子結(jié)構(gòu)式

1 試劑、儀器

1.1 主要試劑

98%四氫小檗堿(上海樊克生物科技有限公司)，其余藥品、試劑等均為分析純或化學(xué)純且未進一步純化。

1.2 主要儀器

AUX220型電子天平(日本島津公司)；HJ-6B型六聯(lián)數(shù)顯磁力攪拌器(上海梅香儀器有限公司)；650型紅外光譜儀(廣州科曉科學(xué)儀器有限公司)；D8粉末X-射線衍射儀(Bruker公司)；EA3000型元素分析儀(蘇州三值有限公司)；AVANCE-III核磁共振儀(Bruker公司)。

2 實驗方法

2.1 四氫小檗堿晶體的制備

四氫小檗堿(72.0 mg)溶于20.0mL CH3OH和C2H5OH混液(2:1)中，室溫攪拌5h，留取濾液揮發(fā)，20d后可見淡黃色塊狀晶體析出。元素分析結(jié)果表明，C、H、N的含量(理論值)分別為70.38%(70.78%)、6.11%(6.24%)和 4.41%(4.13%)。

2.2 XRPD測試

取四氫小檗堿及合成樣品，研細測試，測試條件為：Cu Kα，2θ在5～60 °之間。

2.3 紅外測試

取適量四氫小檗堿及合成樣品，研細，KBr壓片，進行紅外測試。IR測試波數(shù)為400～4000cm-1。

2.4 核磁測試

取適量樣品溶于 DMSO-d6 溶劑中，以TMS為內(nèi)標，室溫測定。

3 結(jié)果與分析

3.1 XRPD分析

四氫小檗堿晶體的XRPD見圖2。四氫小檗堿晶體的特征峰位為(2θ)：10.47°、12.86°、14.98°、18.80°、22.11°和25.57°，與對照品的X-射線粉末衍射角度大致相同，但峰型較為尖銳，表明形成的化合物為晶體。見圖2。

圖2 四氫小檗堿晶體的XRPD譜圖

3.2 紅外分析

四氫小檗堿晶體的紅外光譜圖見圖3。由圖可知，波數(shù)2937、2837和2835cm-1歸屬為CH3吸收峰，1605、1492、1455及1425cm-1歸屬為苯環(huán)雙鍵吸收峰，1388及1275cm-1歸屬為C-N吸收峰，1083和1037cm-1歸屬為C-O吸收峰，854、806、748和706cm-1歸屬為δ(Ar-H)。四氫小檗堿晶體紅外譜圖與對照品的紅外圖譜峰型及峰位基本一致。

圖3 四氫小檗堿晶體的紅外光譜圖

圖4 四氫小檗堿晶體的1H-NMR

圖5 四氫小檗堿晶體的13C-NMR

3.3 核磁分析

四氫小檗堿晶體的1H-NMR的δH(ppm)歸屬：2.748(1H，s，H-5)，3.182(1H，s，H-13)，3.325(1H，s，H-6)，3.628(1H，d，J =15.8Hz，H-8)，3.757(3H，s，9-OCH3)，3.810(3H，s，10-OCH3)，4.619(1H，d，J =15.8Hz，H-8)，5.423(1H，s，H-14)，5.804(2H，s，-O-CH2-O-)，6.208(1H，s，H-1)，6.362(1H，d，J =8.4Hz，H-12)，6.406(1H，d，J =8.4Hz，H-11)和 6.707(1H，s，H-4)。見圖4。四氫小檗堿晶體的13C-NMR的δC(ppm)歸屬：159.0(C-9)，146.8(C-10)，

145.7(C-2，C-3)，131.3(C-12a)，128.9(C-4a，C-14a)，127.7(C-8a)，122.3(C-12)，117.7(C-11)，107.1(C-1，C-4)，93.2(O-CH2-O)，62.3(C-14)，61.6(9-OCH3)，59.2(10-OCH3)，52.7(C-8)，49.3(C-6)，36.1(C-13)和23.2(C-5)。見圖5。

4 結(jié)語

本文利用溶劑揮發(fā)法制備了四氫小檗堿晶體，合成條件為四氫小檗堿(72.0mg)溶于20.0mL CH3OH和C2H5OH混液(2:1)中，室溫攪拌5h，留取濾液揮發(fā)，20d后可見淡黃色塊狀晶體析出。通過元素分析、XRPD、IR、1H/13C-NMR等手段對所得產(chǎn)物進行了晶體鑒定和圖譜解析。結(jié)果表明四氫小檗堿晶體與四氫小檗堿對照品的XRPD、IR、1H/13C-NMR譜圖基本一致，表明所得產(chǎn)物為高純度的四氫小檗堿晶體，試驗所得數(shù)據(jù)可為將高純度四氫小檗堿的藥理學(xué)及衍生化實驗開發(fā)提供定性及純度分析的科學(xué)依據(jù)。

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1.佳木斯大學(xué)研究生科技創(chuàng)新項目，編號：YM2016_103；2.中國博士后科學(xué)基金資助項目，編號:2014M561382。

張大俊(1991～)男，安徽六安人，在讀碩士研究生。

張羽男(1979～)男，黑龍江佳木斯人，博士，副教授，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail: zhangyunan79@163.com。

R917; O629.3; O722+.4

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1008-0104(2016)06-0062-02

2016-06-18)