夏萬(wàn)寶，張冬青，周慶豐，沈 嘉，侯彥強(qiáng)

(上海市松江區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 201600)

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·臨床研究·

羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)系統(tǒng)性能驗(yàn)證

夏萬(wàn)寶，張冬青，周慶豐，沈 嘉，侯彥強(qiáng)△

(上海市松江區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 201600)

目的 系統(tǒng)地對(duì)羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀(簡(jiǎn)稱COBAS C501)酶學(xué)指標(biāo)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、L-γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶(GGT)及堿性磷酸酶(ALP)的分析性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，了解和掌握羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT、AST、GGT及ALP的精密度(批內(nèi)、日間)、線性范圍、臨床可報(bào)告范圍、正確度及生物參考區(qū)間等相關(guān)性能。方法 根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(NCCLS)文件(EP5-A2、EP15-A2)及中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(簡(jiǎn)稱衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn))的相關(guān)文件進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果 ALT、AST、GGT及ALP的高、中、低值的批內(nèi)精密度均小于1/4總誤差(TEa)，日間精密度均小于1/3TEa；ALT、AST、GGT及ALP的各項(xiàng)目線性良好，線性回歸方程的斜率均在1.00±0.03范圍內(nèi)，R2均≥0.95，線性范圍分別為2～730、2～673、3～1 266、3～1 156 U/L，臨床可報(bào)告范圍分別為2～14 600、2～13 460、3～25 320、3～23 120 U/L；對(duì)上海市5份室間質(zhì)控物的ALT、AST、GGT及ALP檢測(cè)結(jié)果與靶值的偏倚分別為0%～5.88%、1.03%～3.33%、-1.64%～1.68%、-0.34%～6.25%，均小于1/2TEa；各項(xiàng)目的生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果均在本實(shí)驗(yàn)室引用的參考區(qū)間內(nèi)。結(jié)論 羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀對(duì)ALT、AST、GGT及ALP檢測(cè)的主要性能符合質(zhì)量目標(biāo)要求，能夠滿足各大、中型醫(yī)院的臨床檢測(cè)需求。

COBAS C501分析儀； 性能驗(yàn)證； 精密度； 線性范圍； 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)CNAS-CL02:2012《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》要求醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期對(duì)設(shè)備、檢測(cè)系統(tǒng)或方法的主要分析性能進(jìn)行驗(yàn)證,證實(shí)其能夠達(dá)到臨床檢測(cè)所要求的標(biāo)準(zhǔn)及CNAS-CL38：2012《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床化學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明》第5條款“技術(shù)要求”中的5.5“檢驗(yàn)過(guò)程”5.5.1.2要求羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀的性能驗(yàn)證內(nèi)容至少應(yīng)包括精密度、正確度、可報(bào)告范圍等[1-2]。本實(shí)驗(yàn)室參照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 403-2012、WS/T 404.1-2012、WS/T 408-2012)，對(duì)羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行性能評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 所用標(biāo)本均采自本院健康體檢人群或就診患者，標(biāo)本要求為新鮮血清(無(wú)溶血、無(wú)黃疸、無(wú)脂血)；標(biāo)本采集嚴(yán)格按照《臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理》(WS/T 225-2002)[3]要求進(jìn)行。

1.2 儀器與試劑 儀器為羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀。試劑和校準(zhǔn)品為羅氏公司原裝丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、L-γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶(GGT)及堿性磷酸酶(ALP)檢測(cè)試劑盒(批號(hào)分別為13354101、12398201、11948901、62159401)；校準(zhǔn)品c.f.a.s(批號(hào)17795803)。質(zhì)控品為低值質(zhì)控品(批號(hào)M407081)、中值質(zhì)控品(批號(hào)M407082)、高值質(zhì)控品(批號(hào)M407083)，均由美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司提供。羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀所使用的試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品均在有效期內(nèi)。

1.3 方法

1.3.1 質(zhì)控檢測(cè) 選擇低、中、高值3個(gè)濃度質(zhì)控品，每天進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，所檢測(cè)的指標(biāo)在控狀態(tài)下對(duì)精密度、線性范圍、臨床可報(bào)告范圍、正確度及生物參考區(qū)間進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.3.4 正確度 參考NCCLS EP15-A2文件[5]，使用5份2015年上海市臨檢中心第2次室間質(zhì)控物(批號(hào)RC2015021、RC2015022、RC2015023、RC2015024、RC2015025)分別進(jìn)行單次檢測(cè)，計(jì)算每份標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果與靶值的偏倚，判定標(biāo)準(zhǔn)為小于1/2總誤差。

1.3.5 線性范圍及臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證

1.3.5.1 線性范圍 參考衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T408-2012)《臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》[6]，選取新鮮高值(H)血清和低值(L)血清標(biāo)本各1份，將H和L按5L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、5H配制成6個(gè)濃度標(biāo)本，每標(biāo)本按照從低濃度到高濃度順序測(cè)定3次，再按照從高濃度到低濃度順序測(cè)定3次，計(jì)算均值，以X表示各標(biāo)本的預(yù)期值，以Y表示各標(biāo)本的實(shí)測(cè)均值，得直線回歸Y=aX+b,得到a、b及R2值。a為斜率，b為Y軸截距，R2為相關(guān)系數(shù)的平方，判斷其是否呈線性關(guān)系。

1.3.5.2 臨床可報(bào)告范圍(CRR) 選取儀器線性范圍內(nèi)高值患者標(biāo)本，分別做5倍、10倍、20倍稀釋檢測(cè)，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定3次，將3次測(cè)定結(jié)果的平均值與稀釋后的理論值比較，計(jì)算稀釋回收率；稀釋回收率=(實(shí)測(cè)值/理論值)×100%，回收率應(yīng)在90%～110%，符合該條件的最大稀釋度為該項(xiàng)目的最大稀釋倍數(shù)。線性范圍乘以最大稀釋倍數(shù)為該項(xiàng)目的臨床可報(bào)告范圍。

1.3.6 生物參考區(qū)間 參考衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 404.1-2012)《臨床常用化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間》[7]，挑選本院健康成人(20～79歲)體檢者40例，男女各半，對(duì)參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證，只允許10%的數(shù)據(jù)超過(guò)所驗(yàn)證的參考范圍，否則需建立新的參考范圍。判定標(biāo)準(zhǔn)R=(測(cè)定結(jié)果在參考范圍的例數(shù)/總測(cè)定例數(shù))×100,結(jié)果≥90%為合格。

2 結(jié) 果

2.1 批內(nèi)精密度 COBAS C501檢測(cè)高、中、低值的質(zhì)控品，ALT、AST、GGT及ALP的批內(nèi)精密度均滿足衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 403-2012)的1/4總誤差，見(jiàn)表1。

表1 各項(xiàng)目的批內(nèi)精密度結(jié)果

2.2 日間精密度 COBAS C501檢測(cè)高、中、低值的質(zhì)控品，連續(xù)檢測(cè)20 d，統(tǒng)計(jì)ALT、AST、GGT、ALP的日間精密度，均滿足衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 403-2012)的1/3總誤差，見(jiàn)表2。

表2 各項(xiàng)目的日間精密度結(jié)果

2.3 正確度 COBAS C501檢測(cè)5個(gè)批號(hào)質(zhì)控物的ALT、AST、GGT、ALP的偏倚均符合衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 403-2012)的1/2總誤差，見(jiàn)表3。

2.4 線性范圍及臨床可報(bào)告范圍

2.4.1 COBAS C501檢測(cè)ALT、AST、GGT、ALP的線性范圍，a 均≤1±0．03、R2均≥0.95，均符合衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 408-2012)的要求，見(jiàn)表4。

表3 對(duì)質(zhì)控物進(jìn)行各項(xiàng)目檢測(cè)的正確度結(jié)果

續(xù)表3 對(duì)質(zhì)控物進(jìn)行各項(xiàng)目檢測(cè)的正確度結(jié)果

表4 各項(xiàng)目的線性范圍評(píng)價(jià)結(jié)果

2.4.2 各項(xiàng)目臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證結(jié)果 見(jiàn)表5。

表5 各項(xiàng)目的臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證結(jié)果(U/L)

2.5 生物參考區(qū)間 40個(gè)參考值數(shù)據(jù)的驗(yàn)證結(jié)果均在衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 404.1-2012)給出的參考區(qū)間內(nèi)，見(jiàn)表6、7，R2均≥0.95。說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)室引用ALT、AST、GGT、ALP的成人參考區(qū)間符合臨床要求。

表6 成年男性各項(xiàng)目的生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

表7 成年女性各項(xiàng)目的生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

3 討 論

COBAS C501是由羅氏公司生產(chǎn)的全自動(dòng)生化分析儀，配套的檢測(cè)系統(tǒng)具有完善的溯源性，檢測(cè)系統(tǒng)或方法的性能可否接受，是決定檢測(cè)系統(tǒng)能否用于常規(guī)工作的前提。按照《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》(ISO15189)的要求醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期對(duì)設(shè)備、檢測(cè)系統(tǒng)或方法的主要分析性能進(jìn)行驗(yàn)證,證實(shí)其能夠達(dá)到臨床檢測(cè)所要求的標(biāo)準(zhǔn)，依照相關(guān)文件和衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，探討并制訂了羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀對(duì)ALT、AST、GGT、ALP各個(gè)項(xiàng)目的性能驗(yàn)證方案，并對(duì)該檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行了評(píng)價(jià)，驗(yàn)證主要包括精密度(批內(nèi)、日間)、正確度、線性范圍、臨床可報(bào)告范圍及生物參考區(qū)間。

其中，檢測(cè)系統(tǒng)ALT、AST、GGT、ALP各項(xiàng)目的批內(nèi)精密度均小于1/4總誤差，日間精密度均小于1/3總誤差，符合衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，可認(rèn)為該儀器測(cè)定的各個(gè)項(xiàng)目的精密度驗(yàn)證通過(guò)；再確認(rèn)檢測(cè)系統(tǒng)精密度符合要求的基礎(chǔ)上，進(jìn)行正確度驗(yàn)證，結(jié)果顯示，ALT、AST、GGT、ALP正確度分別為1.02%～2.94%、0.52%～3.33%、0.68%～2.63%、0.49%～6.25%，均小于1/2總誤差，可認(rèn)為該儀器測(cè)定ALT、AST、GGT、ALP的正確度驗(yàn)證通過(guò)，能夠滿足臨床要求；該儀器檢測(cè)各項(xiàng)目線性范圍較寬，線性范圍基本涵蓋了臨床標(biāo)本分布的濃度范圍,線性符合要求。

在檢驗(yàn)過(guò)程中，經(jīng)常會(huì)遇到一些高值標(biāo)本，超出了儀器的檢測(cè)范圍，對(duì)于此類情況通常會(huì)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋。為了保證稀釋后結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，針對(duì)臨床不同項(xiàng)目高值的需要，選用儀器線性范圍內(nèi)的高值標(biāo)本進(jìn)行不同稀釋倍數(shù)的驗(yàn)證。各項(xiàng)目稀釋后的回收率均在90%～110%，說(shuō)明稀釋后的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，能夠滿足臨床需求。

實(shí)驗(yàn)室在開(kāi)展檢測(cè)項(xiàng)目前，所引用的參考區(qū)間是否適用于本實(shí)驗(yàn)室服務(wù)的人群，若適合，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按要求進(jìn)行驗(yàn)證；經(jīng)驗(yàn)證，本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的ALT、AST、GGT、ALP的R2值均≥90%,因此，引用的生物參考區(qū)間符合本實(shí)驗(yàn)室服務(wù)的人群。

綜上所述， 羅氏公司COBAS C501全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT、AST、GGT、ALP各項(xiàng)性能均已達(dá)到國(guó)家衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，是一臺(tái)具有檢測(cè)精度高、速度快、功能強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)的全自動(dòng)生化分析儀，能夠滿足各大、中型醫(yī)院的臨床檢測(cè)需求。

[1]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì).醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則：CNAS-CL02[S]．北京：中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)，2014：1-54.

[2]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì).2012醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床化學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明：CNAS-CL38[S]．北京：中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)，2015.

[3]張麗霞，孫艷虹，孫芹敏，等．臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理：WS/T 225-2002[S]．北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2002．

[4]NCCLS.Evaluation of precision performance of quantitative measurement menthods：EP5-A2[S].PA,USA:NCCLS,2004.

[5]NCCLS.User demonstration of performance for precision and accuracy：EP5-A2[S].PA,USA:NCCLS,2004.

[6]汪靜，郭健，張傳寶，等.臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南：WS/T 408-2012[S]．北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012．

[7]尚紅，陳文祥，張傳寶，等.臨床生化常用檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間：WS/T 404-2002[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

[8]陳文祥，尚紅，申子瑜，等.臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量指標(biāo)：WS/T 403-2002[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.24.041

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1673-4130(2016)24-3482-04

2016-05-16

2016-07-27)

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