蔡海光，應(yīng)捷，倪卓暉，藍(lán)萍，張亦園，余榮軍，龐宏兵，葉成立，韋登明

（1.寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理研究室，浙江寧波 315211；2.寧波市刑偵科學(xué)技術(shù)研究所，浙江寧波 315010）

寧波市三江流域夏季硅藻分布

蔡海光1，應(yīng)捷2，倪卓暉1，藍(lán)萍1，張亦園1，余榮軍2，龐宏兵2，葉成立2，韋登明1

（1.寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理研究室，浙江寧波 315211；2.寧波市刑偵科學(xué)技術(shù)研究所，浙江寧波 315010）

目的研究寧波市三江流域夏季水中硅藻的種類、數(shù)量及藻屬分布情況，為寧波市相關(guān)水域溺死案件的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)提供科學(xué)依據(jù)。方法在2015年7月和8月份采集標(biāo)本水樣，沿姚江、奉化江和甬江共選取14處樣本水采集點(diǎn)，應(yīng)用顯微鏡觀察技術(shù)，通過形態(tài)特征辨析硅藻的種屬和各河段的優(yōu)勢硅藻。結(jié)果姚江、奉化江和甬江的水體中總共發(fā)現(xiàn)了16類硅藻種屬。姚江的直鏈藻屬最為豐富，數(shù)量和豐富度上均高于其他流域；甬江的小環(huán)藻屬豐富度高于其他流域；奉化江的羽紋藻屬和楔形藻屬的豐富度總體上要高于姚江和甬江。結(jié)論各個(gè)河段的硅藻種屬和比例具有一定的差異，初步建立了相應(yīng)流域硅藻種屬及相對(duì)構(gòu)成比數(shù)據(jù)庫，為寧波市三江流域的溺死案件法醫(yī)檢驗(yàn)鑒定提供數(shù)據(jù)支持。

法醫(yī)病理學(xué)；溺死；硅藻；寧波；夏季

硅藻也稱作矽藻，是一種生活在水體中的單細(xì)胞植物，其細(xì)胞壁高度硅質(zhì)化以保證其能夠在復(fù)雜的水域中都可以適應(yīng)生長[1]。不同種類的硅藻在形態(tài)上有顯著差異，且不同河段里的硅藻在種屬、數(shù)量和豐富度上也有一定的區(qū)別，故憑此特點(diǎn)可以作為檢測溺死案件的金標(biāo)準(zhǔn)[2]。通過分析溺死者體內(nèi)的溺液成分，將之與上下游各河段中的硅藻分布特點(diǎn)進(jìn)行比較，可以大致判斷出溺死者的第一落水位置，為警方在案件的性質(zhì)判定和偵測方向提供有力的幫助[3]。

寧波作為一個(gè)沿海港口城市，市區(qū)內(nèi)河道密布，溺死案件時(shí)有發(fā)生。由于受環(huán)境、水文等多種因素影響，不同季節(jié)同一水域中硅藻數(shù)量及種屬構(gòu)成的差異可能很大[4]。硅藻作為溺死尸體法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的重要觀察指標(biāo)，建立寧波市三江流域（姚江、奉化江和甬江）的硅藻數(shù)據(jù)庫，對(duì)于寧波市溺死尸體的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)具有非常重要的價(jià)值。基于此，本研究對(duì)該流域7、8月份硅藻情況進(jìn)行調(diào)查，為該流域溺死案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣本

本研究于2015年7月和8月在寧波市三江流域，以外灘為調(diào)查中心，分別采集姚江（姚江公園、灣頭、江北大橋、江北洪塘）、奉化江（外灘三江口、長豐橋、段塘、輕紡城）和甬江（大通橋、路林市場、寧波大學(xué)、明州大橋、沿江村、甬江隧道）共14個(gè)地點(diǎn)的水樣。每次采樣以相隔3km取一次為原則，均在江岸水深1m處采取550mL水樣。

1.2 主要儀器

5840 R臺(tái)式離心機(jī)（德國Eppendorf公司），CX31生物顯微鏡（日本Olympus公司），JD-801形態(tài)學(xué)圖像分析系統(tǒng)（江蘇捷達(dá)科技發(fā)展有限公司）。

1.3 硅藻的提取

本實(shí)驗(yàn)采取棉紗過濾法檢驗(yàn)硅藻。先將采取的水樣用8層紗布和1層脫脂棉進(jìn)行過濾除雜，再用吸管吸取過濾后水樣10mL注入15mL離心管內(nèi)，以離心半徑10 cm，4 000 r/min，離心10 min，棄去上清液后，再次吸取過濾后水樣注入離心管內(nèi)，重復(fù)離心步驟2次[5]。然后用吸管吸取沉淀液，滴1滴在載玻片上，待自然風(fēng)干后，在載玻片上的樣本水漬上滴1滴二甲苯，待二甲苯揮發(fā)后用吸管滴1滴樹膠進(jìn)行封片，待干燥后便可開始鏡檢。

1.4 硅藻的鑒定

利用CX31生物顯微鏡和JD-801形態(tài)學(xué)圖像分析系統(tǒng)采集圖像，對(duì)硅藻種屬進(jìn)行辨別[6]，并對(duì)硅藻種屬、數(shù)量等進(jìn)行分析和統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

寧波三江流域本次共檢出16類硅藻種屬（表1）。其中以直鏈藻屬最為常見，整體構(gòu)成比為38.86%；其次為小環(huán)藻屬，為17.16%；帕拉藻屬的11.13%和針桿藻屬的9.57%比例相近。

表1 寧波三江流域水樣中硅藻的構(gòu)成比（%）

3 討論

寧波市的主要河道由姚江和奉化江共同匯聚形成甬江，最后由甬江經(jīng)鎮(zhèn)海區(qū)的入?？诹飨驏|海。姚江的水質(zhì)肉眼觀察十分干凈、清澈，而奉化江和甬江的水質(zhì)偏渾濁，差異十分顯著。因此，提取硅藻時(shí)的方式也具差異，作為寧波市居民飲用水源的姚江樣本水只需過濾、離心后便可直接提取沉淀液進(jìn)行制片；但是甬江和奉化江的樣本水待離心后，還需要用膠頭滴管輕輕地吸取沉淀液，沿著有泥沙沉淀的管壁上方流下去，重復(fù)2次可以讓更多因離心力而附著到泥沙沉淀中的硅藻被沉淀液流洗下去，再用吸管輕輕地反復(fù)吹打沉淀液，待其混合均勻后便可進(jìn)行制片。用棉紗過濾可以先剔除大顆粒雜質(zhì)，否則視野下全都是雜質(zhì)而無法進(jìn)行觀察。棉紗也不能太厚，否則會(huì)導(dǎo)致樣本水無法順利過濾。相比其他方法，棉紗過濾法具有簡單、高效、安全并且無污染等優(yōu)點(diǎn)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，姚江流域的直鏈藻屬占了絕對(duì)性的優(yōu)勢，豐富度最低的灣頭占了35.79%，最高的姚江公園占了58.88%，明顯高于甬江和奉化江，故直鏈藻屬可作為姚江的優(yōu)勢藻屬。灣頭的針桿藻屬豐富度高達(dá)33.13%，明顯高于其他地點(diǎn)；甬江流域的小環(huán)藻屬總體上的豐富度要高于奉化江，雖然與甬江直接相連的外灘三江口屬于奉化江，但是小環(huán)藻屬的豐富度（31.11%）最高；奉化江流域的舟形藻屬和菱形藻屬豐富度明顯高于姚江流域并略高于甬江流域。楔形藻屬屬于劣勢藻屬，主要分布于奉化江局部河段，也可根據(jù)實(shí)際情況作為奉化江的鑒別藻屬。故不同流域的硅藻分布存在著一定的差異。

人在溺水過程中必然會(huì)掙扎并吸入大量河水進(jìn)入消化道和呼吸道中，尤其是進(jìn)入呼吸道內(nèi)的溺液最具研究價(jià)值。肺中的溺液通過主動(dòng)呼吸進(jìn)入并擴(kuò)張肺泡，引起肺部毛細(xì)血管壁的損傷，導(dǎo)致硅藻進(jìn)入肺靜脈循環(huán)，再到左心，后隨體循環(huán)到達(dá)全身各器官[7]。凡是肺組織硅藻檢驗(yàn)為陽性，肝、腎、牙齒和骨髓等器官也可能有硅藻，且硅藻種類與實(shí)地水樣一致，即可診斷為溺死[8]。若檢驗(yàn)結(jié)果在種屬和比例上存在明顯的差異，便可懷疑尸體為死后移尸或者尸體被河水沖刷到下游。如果能建立一個(gè)硅藻種屬和比例的數(shù)據(jù)庫，可以方便警方找到溺死者的第一案發(fā)現(xiàn)場，有助警方縮短破案時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步建立了寧波市夏季三江流域的硅藻數(shù)據(jù)庫，將對(duì)寧波溺死案件的偵破提供科學(xué)依據(jù)。由于每個(gè)季節(jié)硅藻繁殖種類與數(shù)量有所不同，寧波市三江流域其他季節(jié)硅藻分布情況還有待進(jìn)一步調(diào)查分析。

[1]Meguro H，F(xiàn)ukushima H，Matsuda T.Distribution of thetwotypesoficediatomcommunitiesinthe Antarctic[J].Journal of Marine Systems，1992，3（1-2）：163-168.

[2]Piette MH，De Letter EA.Drowning：still a difficult autopsy diagnosis[J].Forensic Sci Int，2006，163（1-2）：1-9.

[3]李立平，孫婷怡，劉鴻霞，等.北京中心城區(qū)水域硅藻的分布[J].法醫(yī)學(xué)雜志，2012，28（4）：265-268.

[4]杜宇，蔡洪洋，周哲，等.溺死尸體器官硅藻檢出率季節(jié)性差異[J].中國司法鑒定，2013，（3）：33-36.

[5]田露，臧士博，邱志軍.上海市浦東新區(qū)川楊河水域硅藻分布及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用[J].法醫(yī)學(xué)雜志，2014，30（2）：114-116.

[6]楊世民，董樹剛.中國海域常見浮游硅藻圖譜[M].青島：中國海洋大學(xué)出版社，2006：2-257.

[7]韓軍鴿，王程寶，李興彪，等.硅藻硝酸硝化法與浮游生物16S rDNA PCR法在溺死鑒定中的比較[J].法醫(yī)學(xué)雜志，2013，29（5）：356-359.

[8]祝家鎮(zhèn).法醫(yī)病理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1989：265-266.

Diatoms Distribution in Ningbo Three-river Watershed during Summer

CAI Hai-guang1,YING Jie2,NI Zhuo-hui1,LAN Ping1,ZHANG Yi-yuan1,YU Rong-jun2,PANG Hongbing2,YE Cheng-li2,WEI Deng-ming1
（1.Department of Pathology,School of Medicine,Ningbo University,Ningbo 315211,China;2.Institute of Criminal Science and Technology of Ningbo,Ningbo 315010,China）

ObjectiveTo explore the species,quantity and distribution of diatoms in Ningbo three-river watershed during summer and to provide scientific basis for forensic examination of drowning cases in the waters of Ningbo.MethodsWater samples were collected in July and August of 2015.Fourteen water sampling points were selected from the Yao River,the Fenghua River and the Yong River.The morphological features of diatom species and dominant diatoms were distinguished by microscope.ResultsA total of 16 species of diatoms were detected in the Yao River,the Fenghua River and the Yong River. Melosira was the dominant species in the Yao River,and the quantity and richness were higher than in other rivers.The richness of Cyclotella in the Yong River was higher than in other rivers.The richness of Pinnularia and Licmophora were higher in the Fenghua River than in the Yao River and the Yong River.ConclusionThe species and proportion of diatom is different in each river.Database of the species and relative composition for the diatoms in corresponding river is established,which may provide data support for forensic examination of drowning cases in Ningbo three-river watershed.

forensic pathology;drowning;diatoms;Ningbo;summer

DF795.1

A

10.3969/j.issn.1004-5619.2016.06.004

1004-5619（2016）06-0413-02

2015-12-10）

（本文編輯：鄒冬華）

寧波市科技攻關(guān)項(xiàng)目（2014C50039）

蔡海光（1991—），男，主要從事臨床醫(yī)學(xué)研究；E-mail：563435643@qq.com

韋登明，男，博士，教授，主要從事法醫(yī)病理學(xué)研究；E-mail：weidengming@nbu.edu.cn