趙柏林，孔冬妮，楊 林

（1. 中國動物疫病預防控制中心，北京 102600；2.中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京 100081）

我國口蹄疫研究進展

趙柏林1，孔冬妮2，楊 林1

（1. 中國動物疫病預防控制中心，北京 102600；2.中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京 100081）

口蹄疫是危害豬、牛、羊等偶蹄動物的一種重要動物疫病，可造成巨大的經(jīng)濟損失。本文主要介紹了近兩年我國在口蹄疫流行病學、病原學、致病機理、診斷技術等方面的研究進展，分析了口蹄疫O型Mya98株、PanAsia株及A型Sea-97毒株傳入我國的大致時間、來源及分布，闡述了口蹄疫病毒的病原學及致病機理研究進展，介紹了目前口蹄疫的診斷技術及疫苗研發(fā)情況，并針對我國口蹄疫防控策略提出了建議。

口蹄疫；流行病學；病原學；診斷；疫苗；研究進展

口蹄疫（FMD），是由口蹄疫（FMDV）引起的偶蹄動物傳染病[1]。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為須通報動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。FMDV有O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3等7個血清型，血清型間無交叉免疫現(xiàn)象[2-3]。目前，在我國主要流行的有O型和A型FMD，Asia1型自2009年之后未見臨床病例報道。為降低FMD對畜牧業(yè)生產(chǎn)和國際貿(mào)易的不利影響，OIE和聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）將該病列為優(yōu)先防控的動物疫病，并啟動了FMD全球控制策略，鼓勵各成員制定官方控制計劃，并將FMD官方控制計劃認可作為申請免疫無FMD、非免疫無FMD國家/區(qū)域的前提條件。2012年，國務院辦公廳印發(fā)了《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》，將FMD列為優(yōu)先防治病種之一。2015年我國FMD控制策略獲得OIE認可[4]。

1 流行病學

FMD傳播途徑廣泛、方式多樣，國家和地區(qū)間的動物跨界移動或貿(mào)易流通可傳遞病原。目前，除一些發(fā)達國家消滅了FMD并保持無疫狀態(tài)外，F(xiàn)MD在很多發(fā)展中國家仍呈流行或散發(fā)態(tài)勢。我國周邊國家的FMD疫情不斷發(fā)生，對我國畜牧業(yè)發(fā)展也造成了一定威脅，尤其是近年來流行的O/ ME-SA/Pan Asia、O/SEA/Mya-98和A/ASIA/Sea-97病毒均是由周邊國家傳入的。2005年5月至2017年1月，我國共發(fā)布了125次FMD疫情，主要為O型和A型。2013—2015年經(jīng)國家FMD參考實驗室確診的疫情有40起，其中A型30起、O型10起[5]。流行毒株有A型ASIA拓撲型Sea-97毒株、O型SEA拓撲型Mya98毒株和O型ME-SA拓撲型PanAsia毒株。其中O型Mya98毒株和PanAsia毒株分別于2010年和2011年由東南亞國家傳入我國，A型Sea-97毒株為2013年新傳入毒株。

2 病原學

FMDV屬于小RNA病毒科口蹄疫病毒屬，共包括A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia1型等7個血清型以及65個以上的亞型。不同A型FMDV流行毒株的致病性研究表明，新流行的A型Sea-97 G2毒株可感染牛和豬并引起發(fā)病。國家口蹄疫參考實驗室系統(tǒng)測定了重組疫苗株Re-A/ WH/09毒株對該流行毒株的免疫保護效力，結果表明該疫苗毒株對流行毒株的PD50均在10.81以上，具有良好的免疫保護[6]；FMDV是由1A（VP4）、1B（VP2）、1C（PV3）和1D（VP1）4種結構蛋白組裝成病毒衣殼，只有1D能誘導動物產(chǎn)生中和抗體。FMDV的4種結構蛋白構成了病毒的抗原位點，其中1個表位改變可影響該區(qū)域內相鄰表位與相應單克隆抗體的反應。目前，對于O型、C型和A型FMDV抗原位點的相關研究較多，對其他各型FMDV的抗原位點研究報道較少。

3 致病機理

在FMDV的感染發(fā)病過程中，病毒首先會吸附在敏感的細胞上，產(chǎn)生非特異性的結合，進一步通過RGD與敏感細胞上的受體發(fā)生特異性吸附，使細胞發(fā)生一系列的改變。發(fā)生變化的細胞會把FMDV當作食物胞飲吞噬到細胞內部，其溶菌酶將病毒衣殼裂解，釋放出病毒核酸，完成病毒對細胞的感染。國家口蹄疫參考實驗室針對FMD致病機理進行了如下研究：（1）開展了FMDV致乳鼠心肌炎機制的研究，成功建立了FMDV致乳鼠心肌炎動物模型，從轉錄組和蛋白質組學水平上發(fā)掘與FMDV致乳鼠心肌炎的關鍵蛋白[7]。（2）開展了FMDV感染相關miRNAs的篩選與功能研究，對Asia1型FMDV感染宿主細胞前后miRNA表達豐度和功能進行了分析與研究，開展了miRNA在FMDV感染宿主過程中參與病毒復制和免疫調控機制的研究[8]。（3）研究了O型Mya98譜系缺失S片段對病毒復制、毒力、維持RNA穩(wěn)定性等方面的生物學意義，成功構建了S片段缺失和不缺失Mya98系工程病毒，對比分析拯救病毒的生物學特性差異。結果表明，S基因缺失70 nt可以加快病毒核酸S片段的復制，提高病毒滴度12倍以上[9]。（4）研究了受體識別位點變異導致病毒表型變異的規(guī)律，結合穩(wěn)定表達單受體的細胞系，闡明了含有不同受體識別位點的毒株對受體的路徑識別和利用效率[10-11]。（5）研究了FMDV誘導凋亡機制，分別研究了FMD蛋白3A、VP1和VP3誘導BTY細胞凋亡的情況。結果表明，這3種蛋白均能誘導BTY細胞發(fā)生明顯的細胞凋亡。（6）結合反向遺傳技術和宿主天然免疫信號轉導機制理論，研究了FMDV抑制天然免疫機制。

4 診斷技術

當前，F(xiàn)MDV的血清型多，持續(xù)感染無癥狀但帶毒嚴重[12]。因此，準確診斷血清型和精準監(jiān)測隱性帶毒，是防控該病的首要環(huán)節(jié)。從早期的補體結合試驗和病毒中和試驗，到隨后以酶聯(lián)免疫吸附反應（ELISA）為核心的病原和抗體檢測方法，再到現(xiàn)今的以聚合酶鏈反應（PCR）為基礎的多種分子診斷技術，F(xiàn)MDV診斷技術日臻成熟，形成了多方位、多層面的診斷監(jiān)測手段。目前，我國研制了間接夾心ELISA方法，可用于FMDV的抗原定型檢測；建立了FMDO型、Asia 1型和A型固相競爭ELISA抗體檢測方法[13]；FMDV非結構蛋白抗體單抗阻斷ELISA試劑盒，可以與FMD標記滅活疫苗配合使用[14]；在通用型熒光定量RT-PCR基礎上發(fā)展的熒光定量PCR定型檢測方法，可準確區(qū)分O、A和Asia1等3個血清型[15]。

5 疫苗研發(fā)

為預防和控制FMD，各國對疫苗的研究一直沒有間斷過。我國目前使用的FMD疫苗主要包括滅活疫苗和合成肽疫苗，近年來我國開展了一系列新疫苗和疫苗新技術研究，包括FMD反向遺傳疫苗、標記疫苗、復合表位蛋白疫苗、病毒樣顆粒疫苗等，取得了一定的進展。

目前我國研制出的豬O型FMD緬甸98（Mya98）疫苗（2013新獸藥證字23號），豬O型FMD滅活疫苗（OGX09-7株+OXJ10-11株2014新獸藥證字01號），O型FMD、Asia 1型、A型三價滅活疫苗（O/MYA98/BY/2010株+Asia 1/JSL/ZK/06株+ReA/WH/09株，2013新獸藥證字40號）等已實現(xiàn)了工業(yè)化生產(chǎn)和應用。在原有的Cathay型毒株和PanAsia毒株抗原肽的基礎上，增加了Mya98/BY/2010毒株的抗原肽，成功研制了能有效防控Cathay、PanAsia和Mya98等3個流行毒株的3個組分合成肽疫苗——豬O型FMD合成肽疫苗（多肽2600+2700+2800，2014新獸藥證字24號），提高了疫苗效力和抗原譜。這些新產(chǎn)品為我國有效防控O型FMD提供了技術支持[16]。

6 防控策略

2012年1月，OIE和FAO聯(lián)合發(fā)布了FMD全球控制策略，制定了全球FMD控制路線圖，提出了15年FMD控制目標[17-19]。作為OIE成員國，2012年國務院發(fā)布了《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃》，對A型、O型和Asia1型FMD的防控都提出了具體目標；2014年我國向OIE提交了FMD官方控制計劃，并在2015年5月經(jīng)OIE認可通過?！禙MD漸進性控制路徑》（PCP-FMD）是FAO和OIE推薦的指導原則，應用于有FMD的國家或地區(qū)制定控制計劃，也是FAO/OIE實施全球控制FMD策略的準則，其中將FMD疫病風險狀況劃分為6個階段/等級。我國推進FMD防控將參照OIE推薦的PCP-FMD路線圖，繼續(xù)堅持“預防為主”的方針，對FMD實行區(qū)域化管理，遵循“因地制宜、分區(qū)防治、分型控制”的原則，大力推進綜合防治策略，嚴格落實免疫預防、監(jiān)測凈化、流通監(jiān)管、應急處置、無害化處理、檢疫監(jiān)督等措施。

7 小結

經(jīng)過多年努力，全球FMD防控取得了巨大成效，歐洲和美洲已基本消滅FMD。隨著全球FMD控制策略的實施，F(xiàn)MD無疫區(qū)的范圍會進一步擴大。近年來，我國采取了大規(guī)模免疫接種、強化監(jiān)測等措施，F(xiàn)MD防控成效顯著。2016年農(nóng)業(yè)部印發(fā)了《國家口蹄疫防治計劃（2016—2020年）》，明確提出了我國FMD的防治目標。但由于不同血清型和不同遺傳譜系FMDV混雜存在、周邊國家FMD疫情嚴重復雜、流行毒株跨界傳入風險加大等原因，目前我國FMD防控形勢依然嚴峻。

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[3] OIE. World animal health information system[EB/OL]. [2017-06-12]. http://www.oie.int/wahis.

[4] 國務院. 關于印發(fā)國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）的通知：國辦發(fā)〔2012〕31號[A/OL].（2002-05-25）[2017-06-12]. http://www.gov.cn/zwgk/2012-05/25/ content_2145581.htm.

[5] 農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局. 監(jiān)測與疫情動態(tài)[EB/OL]. [2017-06-12]. http://www.syj.moa.gov.cn/dwyqdt/.

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[8] 郭慧琛，靳野，韓世充，等. 口蹄疫病毒Asia1型感染BHK-21細胞的定量蛋白組學分析及驗證[C]//中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會，中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會，中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所. 中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第十次學術研討會論文集. 深圳：中國畜牧獸醫(yī)學會，2014：171.

[9] 姜韶東，李平花，白興文，等，用于研究FMDV L~（pro）與S片段互作的基因工程病毒的拯救[C]//中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會，中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會，中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所. 中國畜牧獸醫(yī)學會畜牧獸醫(yī)生物技術學分會暨中國免疫學會獸醫(yī)免疫分會第十次學術研討會論文集. 深圳：中國畜牧獸醫(yī)學會，2014：281.

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（責任編輯：杜憲）

Research Progress of Foot-and-mouth Disease in China

Zhao Bolin1，Kong Dongni2，Yang Lin1
（1. China Animal Disease Prevention and Control Center，Beijing 102600；2. China Institute of Veterinary Drug Control，Beijing 100081）

Foot-and-mouth disease（FMD）is a highly infectious disease of artiodactyl，such as swine，cow，and sheep，and may cause enormous economic losses. The research progress of FMD in epidemiology，etiology，pathogenesis，and diagnosis in recent two years were introduced in this paper. The general time，origin and distribution of O type Mya98 strain，PanAsia strain and Sea-97 strain of Foot-and-mouth disease were introduced. The etiology and pathogenesis of Foot-and-mouth disease Virus were reviewed. And the current diagnostic techniques and vaccine development of Foot-and-mouth disease were introduced. Some suggestions for the prevention and control strategy of Foot-and-mouth disease were put forward.

Foot-and-mouth disease；epidemiology；etiology；diagnosis；vaccine；research progress

S851.33

：B

：1005-944X（2017）07-0067-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.07.020