蘆淑娟

（沈陽(yáng)市第五人民醫(yī)院病理科，遼寧 沈陽(yáng) 110023）

E-cad和EphA2在膀胱癌患者癌組織中的表達(dá)及臨床意義

蘆淑娟

（沈陽(yáng)市第五人民醫(yī)院病理科，遼寧 沈陽(yáng) 110023）

目的 研究E-cad以及EphA2在膀胱癌患者癌組織中的表達(dá)與臨床意義。方法 收集2015年5月至2016年5月納入治療的膀胱癌患者共40例作為研究對(duì)象，其中25例患者為膀胱浸潤(rùn)性尿路上皮癌，10例患者為膀胱非浸潤(rùn)性尿路上皮癌，5例患者為膀胱尿路上皮原位癌，設(shè)置為癌變組。另選擇同期經(jīng)健康體檢中檢查排除膀胱癌變的正常人20例作為正常組。取癌變組以及正常組膀胱組織免疫組化標(biāo)本進(jìn)行處理，對(duì)兩組膀胱組織免疫組化標(biāo)本的陽(yáng)性表達(dá)情況進(jìn)行對(duì)比觀察。結(jié)果 正常膀胱黏膜組織E-cad呈陽(yáng)性表達(dá)，癌性病變膀胱組織E-cad呈低表達(dá)或不表達(dá)。膀胱癌患者中E-cad陽(yáng)性表達(dá)率為22.50%（9/40），顯著低于正常組（P＜0.05）；正常膀胱組織EphA2呈陰性表達(dá)，癌性病變膀胱組織EphA2呈高表達(dá)或陽(yáng)性表達(dá)。膀胱癌患者中EphA2陽(yáng)性表達(dá)率為80.00%（32/40），顯著高于正常組（P＜0.05）。結(jié)論 臨床可以通過(guò)對(duì)E-cad以及EphA2表達(dá)水平的變化為膀胱癌變的診斷、轉(zhuǎn)移、治療提供一定依據(jù)，有臨床應(yīng)用價(jià)值。

膀胱癌患者；E-鈣黏素；酪氨酸蛋酶受體A2；癌組織；表達(dá)

既往報(bào)道中指出：E-cad（E-鈣黏素）在人體各類(lèi)上皮細(xì)胞中廣泛分布，對(duì)上皮極性以及上皮組織完整性的維持有重要意義，且能夠發(fā)揮對(duì)鈣離子起來(lái)性細(xì)胞與細(xì)胞間黏附的介導(dǎo)功能，屬于人體非常重要的跨膜糖蛋白成分[1]。EphA2（酪氨酸蛋酶受體A2）同樣在人體多種細(xì)胞系以及組織中存在，基因定位染色體為1p36.1，外顯子為17個(gè)。有關(guān)報(bào)道中認(rèn)為本區(qū)在人體的多種腫瘤病變中有明顯缺失，且EphA2對(duì)細(xì)胞增生有一定的調(diào)節(jié)作用[2-4]。上述研究結(jié)論提示E-cad以及EphA2在腫瘤病變的組織表達(dá)中具有一定特異性[5]。為進(jìn)一步研究E-cad以及EphA2在膀胱癌患者癌組織中的表達(dá)與臨床意義，本研究收集2015年5月至2016年5月納入治療的膀胱癌患者共40例作為研究對(duì)象，另選擇同期經(jīng)健康體檢中檢查排除膀胱癌變的正常人20例作為正常組，對(duì)兩組E-cad以及EphA2的陽(yáng)性檢出情況進(jìn)行對(duì)比，現(xiàn)將研究結(jié)果總結(jié)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2015年5月至2016年5月納入治療的膀胱癌患者共40例作為研究對(duì)象，其中25例患者為膀胱浸潤(rùn)性尿路上皮癌，10例患者為膀胱非浸潤(rùn)性尿路上皮癌，5例患者為膀胱尿路上皮原位癌，設(shè)置為癌變組。另選擇同期經(jīng)健康體檢中檢查排除膀胱癌變的正常人20例作為正常組。兩組基線資料分別為：正常組方面，男性共14例，女性共6例，年齡區(qū)間為38～70周歲，平均年齡為（51.2±2.9）歲；癌變組方面，男性共29例，女性共11例，年齡區(qū)間為41～75周歲，平均年齡為（53.6±1.8）歲。對(duì)比兩組基線資料，未見(jiàn)顯著差異（P＞0.05），有可比性。

1.2 方法：取癌變組以及正常組膀胱組織免疫組化標(biāo)本，在室溫條件下用濃度10.0%甲醛溶液完全浸泡（維持24.0 h以上），脫水后石蠟包埋并切片。用甲醛-H2O2封閉組織內(nèi)源性過(guò)氧化物，梯度乙醇水化反應(yīng)后用磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗。然后進(jìn)行微波修復(fù)，并加入濃度5.0%小牛血清覆蓋組織，在水浴箱中進(jìn)行加熱。加入一抗試劑，于4.0 ℃冰箱中靜置過(guò)夜保存。然后用磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗，加二抗試劑，水浴箱中加熱，磷酸鹽緩沖液再次沖洗后加入鏈霉親和素-生物素復(fù)合物試劑盒，再次于水浴箱中進(jìn)行加熱并用磷酸鹽緩沖液二次沖洗。加入二氨基聯(lián)苯胺顯色劑，靜置并等待上色，然后入水阻斷反應(yīng)，并用蘇木素復(fù)染。入水，入鹽酸酒精，入水進(jìn)行酚化反應(yīng)，去蘭。梯度乙醇脫水處理后用二甲苯處理，經(jīng)樹(shù)脂封片后即可保存觀察[6-7]。

1.3 觀察指標(biāo)：對(duì)兩組膀胱組織免疫組化標(biāo)本的陽(yáng)性表達(dá)情況進(jìn)行對(duì)比觀察。E-cad陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為：細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色，細(xì)胞膜染色呈線狀或顆粒狀，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞10%；EphA2陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為：細(xì)胞陽(yáng)性根據(jù)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)棕黃色染色進(jìn)行判定，陽(yáng)性細(xì)胞低于10%計(jì)1分，陽(yáng)性細(xì)胞10%～50%計(jì)2分，陽(yáng)性細(xì)胞高于50%計(jì)3分，染色為陰性計(jì)0分，染色為淡黃色計(jì)1分，染色為中度黃色計(jì)2分，染色為棕黃色計(jì)3分。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)分×染色強(qiáng)弱計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算總評(píng)分，以總評(píng)分＞3分為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：全部數(shù)據(jù)采用EXCEL和SPSS17.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入和統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用配對(duì)或完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)或非參統(tǒng)計(jì)；計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

正常膀胱黏膜組織E-cad呈陽(yáng)性表達(dá)，癌性病變膀胱組織E-cad呈低表達(dá)或不表達(dá)。膀胱癌患者中有9例E-cad表達(dá)為陽(yáng)性，E-cad陽(yáng)性表達(dá)率為22.50%（9/40），顯著低于正常組（P＜0.05）；正常膀胱組織EphA2呈陰性表達(dá)，癌性病變膀胱組織EphA2呈高表達(dá)或陽(yáng)性表達(dá)。膀胱癌患者中有32例EphA2表達(dá)為陽(yáng)性，EphA2陽(yáng)性表達(dá)率為80.00%（32/40），顯著高于正常組（P＜0.05）。

3 討 論

近年來(lái)的臨床報(bào)道中認(rèn)為，E-cad在膀胱組織中有一定的黏附性，對(duì)于正常人膀胱黏膜組織而言，E-cad多呈現(xiàn)出高表達(dá)狀態(tài)，陽(yáng)性表達(dá)率可達(dá)到95%～100%，而對(duì)于膀胱癌變組織而言，E-cad陽(yáng)性表達(dá)減弱，多呈現(xiàn)出低表達(dá)或不表達(dá)的狀態(tài)。也有相關(guān)報(bào)道中認(rèn)為，E-cad參與了細(xì)胞遷移的抑制反應(yīng)中，多種癌變組織中細(xì)胞表面E-cad的減少或消失會(huì)導(dǎo)致癌細(xì)胞從瘤塊脫落，成為癌變細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移的前提，可作為轉(zhuǎn)移抑制的重要標(biāo)志。有研究表明EphA2促發(fā)了某些致癌信號(hào)級(jí)聯(lián)，阻礙了EphA2的配體結(jié)合及降解，其表達(dá)與癌癥分級(jí)、分期以及轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系[9-14]。本研究中觀察結(jié)果顯示：正常膀胱黏膜組織E-cad呈陽(yáng)性表達(dá)，癌性病變膀胱組織E-cad呈低表達(dá)或不表達(dá)。膀胱癌患者中E-cad陽(yáng)性表達(dá)率為22.50%（9/40），顯著低于正常組（P＜0.05），與既往研究結(jié)論基本一致。而EphA2在正常膀胱組織以及膀胱癌變患者膀胱組織中的表達(dá)則有負(fù)相關(guān)關(guān)系，即正常膀胱組織EphA2呈陰性表達(dá)，癌性病變膀胱組織EphA2呈高表達(dá)或陽(yáng)性表達(dá)。膀胱癌患者中EphA2陽(yáng)性表達(dá)率為80.00%（32/40），顯著高于正常組（P＜0.05）。以上研究結(jié)果提示：E-cad在膀胱組織中的低表達(dá)以及EphA2在膀胱組織中的高表達(dá)可作為膀胱癌變臨床診斷的重要依據(jù)之一。而從預(yù)防、治療膀胱癌疾病的角度上來(lái)說(shuō)，可以嘗試以影響E-cad以及EphA2表達(dá)的方式進(jìn)行干預(yù)，并將其作為膀胱癌變的診斷、轉(zhuǎn)移、治療的重要依據(jù)。

綜上所述，臨床可以通過(guò)對(duì)E-cad以及EphA2表達(dá)水平的變化為膀胱癌變的診斷、轉(zhuǎn)移、治療提供一定依據(jù)，有臨床應(yīng)用價(jià)值。

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1671-8194（2017）14-0157-02