張文飛 劉蘋蘋 管武太* 陳 芳 鄧躍林
(1.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院,廣州510642;2.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院華農(nóng)聯(lián)佑飼用油脂研究中心,廣州510642)
?
飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標、腸道形態(tài)及腸道微生物菌群的影響
張文飛1,2劉蘋蘋1,2管武太1,2*陳 芳1鄧躍林1
(1.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院,廣州510642;2.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院華農(nóng)聯(lián)佑飼用油脂研究中心,廣州510642)
本試驗旨在研究飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標、腸道形態(tài)及腸道微生物菌群的影響。試驗選取160頭(25±1)日齡“杜×長×大”斷奶仔豬,分為4個組,每個組4個重復,每個重復10頭豬。各組分別飼喂以下4種飼糧:基礎飼糧(對照組)、基礎飼糧+0.4 kg/t硫酸黏桿菌素(抗生素組)、基礎飼糧+1.0 kg/t卵黃抗體(卵黃抗體組)、基礎飼糧+0.2 kg/t硫酸黏桿菌素+0.5 kg/t卵黃抗體(聯(lián)用組)。試驗期共計28 d。結(jié)果表明:1)與對照組相比,卵黃抗體組顯著提高了斷奶仔豬平均日增重(P<0.05),顯著降低了斷奶仔豬料重比和腹瀉率(P<0.05),斷奶仔豬平均日采食量無顯著差異(P>0.05)。與抗生素組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬生長性能無顯著差異(P>0.05),兩者表現(xiàn)出相近的使用效果。2)與對照組相比,卵黃抗體組顯著提高了斷奶仔豬血清中總蛋白、白蛋白的含量(P<0.05)。3)與對照組相比,卵黃抗體組顯著增加了斷奶仔豬回腸絨毛高度和絨隱比(P<0.05),斷奶仔豬十二指腸和空腸的絨毛高度、隱窩深度和絨隱比無顯著差異(P>0.05)。4)與對照組相比,卵黃抗體組顯著降低了斷奶仔豬回腸、盲腸中大腸桿菌數(shù)量(P<0.05),顯著增加了斷奶仔豬回腸、盲腸中的乳酸桿菌數(shù)量(P<0.05)。綜上所述,飼糧中添加卵黃抗體能顯著改善斷奶仔豬生長性能,增強仔豬免疫力,提高腸道健康水平,促進有益菌生長,與抗生素有相近的使用效果,是很有發(fā)展?jié)摿Φ目股靥娲分弧?/p>
卵黃抗體;斷奶仔豬;抗生素;生長性能;血清生化指標;腸道形態(tài);腸道微生物
斷奶仔豬由于具有消化機能發(fā)育不完善、胃腸道微生態(tài)平衡脆弱、免疫機能低下等消化生理特點,易誘發(fā)腹瀉[1],而集約化生產(chǎn)中,仔豬大腸桿菌性腹瀉發(fā)病率又占仔豬胃腸疾病的50%以上[2]。由于大腸桿菌血清型復雜,耐藥質(zhì)粒的相互傳遞和擴散給預防和治療工作帶來很大困難[3],給養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴重的經(jīng)濟損失。目前防治仔豬細菌性腹瀉較有效的手段是應用抗生素,短期內(nèi)有一定效果,但長期使用存在細菌產(chǎn)生耐藥性、畜產(chǎn)品藥物殘留等問題,隨著社會公眾對食品安全的重視,尋找一種新的安全、有效的手段來控制仔豬腹瀉已刻不容緩。
卵黃抗體(immunoglobulin of yolk,IgY)是一種從免疫禽蛋中提取的針對特定抗原的抗體,也稱卵黃免疫球蛋白[4-5],其作用機理與初乳中母源抗體相類似[6],不僅具有較強的耐酸、耐堿和抗酶解的作用,而且還具有制備簡單、產(chǎn)量高、特異性強、無毒副作用、成本低等優(yōu)點[7-9],已廣泛用于動物的疾病預防和治療中,不僅可為機體提供被動保護,而且還具有營養(yǎng)補充作用,具有廣闊的應用前景。卵黃抗體代替抗生素在動物生產(chǎn)中的應用已被廣泛認可[10-13],其不僅具有提高生長性能的效果,對動物腸道形態(tài)[14-15]和腸道微生物區(qū)系[16-18]也會產(chǎn)生積極的影響,是一種很有潛力的抗生素替代品[19]。但卵黃抗體作為飼料添加劑在斷奶仔豬中的應用卻鮮有報道,為此,本試驗旨在研究飼糧中添加抗大腸桿菌卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標、腸道形態(tài)及腸道微生物菌群的影響,為其在仔豬中的應用提供科學的依據(jù)和參考。
1.1 試驗材料
本試驗所使用高免卵黃抗體為抗大腸桿菌K88、K99、987P多價菌毛卵黃抗體粉,其效價分別為1∶12 800、1∶12 800、1∶6 00。
1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理
試驗選取160頭(25±1)日齡“杜×長×大”斷奶仔豬,根據(jù)體重、性別、健康狀況等均衡分布原則分為4組,每組4個重復,每個重復10頭豬。各組分別飼喂以下4種飼糧,基礎飼糧(對照組)、基礎飼糧+0.4 kg/t硫酸黏桿菌素(抗生素組)、基礎飼糧+1.0 kg/t卵黃抗體(卵黃抗體組)、基礎飼糧+0.2 kg/t硫酸黏桿菌素+0.5 kg/t卵黃抗體(聯(lián)用組)。
飼養(yǎng)試驗在廣東長江食品集團汶村豬場進行。各試驗組每天08:00、10:00、15:00、17:00飼喂,自由采食和飲水,日常管理及防疫按豬場常規(guī)程序進行。豬場實行規(guī)模化生產(chǎn),其防疫及管理各項工作科學規(guī)范,且配套設施齊全,滿足本試驗的要求。
1.3 試驗飼糧
試驗飼糧為玉米-豆粕型基礎飼糧,其各項營養(yǎng)指標均滿足斷奶仔豬的營養(yǎng)需求(NRC,2012),基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)
1)預混料為每千克飼料提供The premix provided the following per kg of the diet:VA 9 750 IU,VD33 000 IU,VE 22.5 mg,VK33 mg,VB13 mg,VB23.7 mg,VB62 mg,煙酸 nicotinic acid 30 mg,泛酸 pantothenic acid 15 mg,葉酸 folic acid 1.5 mg,Se 0.15 mg,Cu 5 mg,F(xiàn)e 80 mg,Zn 51 mg,Mn 20.5 mg,I 0.14 mg。
2)營養(yǎng)水平均為計算值。Nutrient levels were all calculated values.
1.4 樣品采集與制備
試驗第29天,每個重復1頭,每組選取4頭仔豬(體重接近窩平均個體重、公母各占1/5),共屠宰16頭斷奶仔豬。按常規(guī)方法進行采樣,分別采集十二指腸、空腸、回腸、盲腸腸段各2 cm及內(nèi)容物,并采集血液制備血清。
1.4.1 血清樣品
試驗第29天,每個重復選1頭接近平均體重的斷奶仔豬,10 mL一次性注射器空腹前腔靜脈采血8 mL,迅速轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中,室溫下傾斜靜置1 h后,3 000 r/min離心15 min,分離血清,-20 ℃保存,待測血清生化指標。
1.4.2 各腸段及腸道內(nèi)容物樣品
分離各腸段,取十二指腸、空腸、回腸各腸段約2 cm,用生理鹽水清洗后固定在4%多聚甲醛中,-20 ℃保存。無菌條件下,將回腸、盲腸腸段兩端分別結(jié)扎5 cm,用無菌剪刀剪開腸壁,將腸道內(nèi)容物迅速放入無菌的離心管中,液氮速凍,-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.5 指標測定及方法
1.5.1 生長性能
以重復為單位,在試驗第1、29天,稱取仔豬窩重,計算斷奶仔豬平均日增重(ADG);記錄采食量,計算斷奶仔豬平均日采食量(ADFI),計算試驗階段的料重比(F/G),記算腹瀉率。
腹瀉率(%)=[試驗期內(nèi)腹瀉頭數(shù)/
(試驗天數(shù)×試驗頭數(shù))]×100。
1.5.2 血清生化指標
血清溶菌酶活性及總蛋白、白蛋白、球蛋白含量測定試劑盒均購于南京建成生物工程研究所,操作按說明書進行。
1.5.3 腸道形態(tài)
腸道形態(tài)測定由北京吉普騰生物公司完成。將腸道樣品進行石蠟包埋切片,蘇木精-伊紅染色,測定絨毛高度(VH)、隱窩深度(CD),計算絨隱比(VH/CD)。
1.5.4 回腸、盲腸中微生物菌群數(shù)量的測定
采用平板計數(shù)法檢測回腸、盲腸中微生物菌群數(shù)量。在無菌操作臺內(nèi)稱取1.0 g腸段內(nèi)容物與9 mL滅菌生理鹽水配制成1∶10稀釋液,振蕩3~5 min,用微量移液器準確吸取該稀釋液1 mL至裝有9 mL滅菌稀釋液試管中,用渦旋振蕩器振蕩1~2 min,配制成10-2稀釋液,再依次進行10-3~10-7稀釋。將各腸段內(nèi)容物的稀釋液接種于相應的選擇性培養(yǎng)基中(乳酸桿菌用乳酸細菌培養(yǎng)基,大腸桿菌用麥康凱培養(yǎng)基)。大腸桿菌在37 ℃有氧培養(yǎng)20 h,乳酸桿菌在37 ℃有氧培養(yǎng)36 h。每個稀釋梯度重復3次,最后取3次計數(shù)的平均值。腸道微生物的數(shù)量用lg(CFU/g),即每克腸道內(nèi)容物中含菌落總數(shù)的對數(shù)表示[20]。
1.6 數(shù)據(jù)處理及分析
試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進行方差分析,采用Duncan氏法進行多重比較和差異顯著性檢驗,P<0.05表示差異顯著,結(jié)果均以平均值±標準誤(means±SE)表示。
2.1 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能的影響
由表2可知,與對照組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬平均日增重顯著提高(P<0.05),提高了29.46%;斷奶仔豬料重比顯著降低(P<0.05),降低了23.76%;斷奶仔豬腹瀉率顯著降低(P<0.05),降低了2.87%。與抗生素組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬平均日增重、平均日采食量、料重比、腹瀉率均無顯著差異(P>0.05),兩者表現(xiàn)出相近的使用效果。與對照組相比,聯(lián)用組斷奶仔豬平均日增重顯著提高(P<0.05),提高了34.78%;斷奶仔豬料重比顯著降低(P<0.05),降低了21.28%;斷奶仔豬腹瀉率顯著降低(P<0.05),降低了2.48%。與抗生素組相比,聯(lián)用組斷奶仔豬平均日增重、平均日采食量、料重比、腹瀉率均無顯著差異(P>0.05)。
表2 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能的影響
同行數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),肩標相同字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。
In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.
2.2 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬血清生化指標的影響
由表3可知,與對照組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬血清中總蛋白、白蛋白的含量顯著提高(P<0.05),分別提高了5.48%、14.33%;血清中溶菌酶活性提高了20.59%,但差異不顯著(P>0.05)。與抗生素組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬血清生化指標均無顯著差異(P>0.05),兩者表現(xiàn)出相近的使用效果。與對照組相比,聯(lián)用組斷奶仔豬血清中總蛋白、白蛋白含量顯著提高(P<0.05),分別提高了4.77%、9.49%。與抗生素組相比,聯(lián)用組斷奶仔豬血清中溶菌酶活性提高了11.61%,但差異不顯著(P>0.05)。
表3 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬血清生化指標的影響
2.3 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬腸道形態(tài)的影響
由表4可知,與對照組相比,卵黃抗體組顯著增加了斷奶仔豬回腸絨毛高度和絨隱比(P<0.05),回腸絨毛高度提高了30.65%,十二指腸和空腸的絨毛高度和隱窩深度無顯著差異(P>0.05)。與抗生素組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬小腸腸道形態(tài)均無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,聯(lián)用組顯著增加了斷奶仔豬回腸絨毛高度和絨隱比(P<0.05),回腸絨毛高度提高了29.32%。
表4 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬腸道形態(tài)的影響
2.4 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬腸道微生物菌群的影響
由表5可知,與對照組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬回腸、盲腸中大腸桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05),分別降低了5.91%、13.64%;回腸、盲腸中的乳酸桿菌數(shù)量顯著增加(P<0.05),分別增加了8.22%、15.75%。與抗生素組相比,卵黃抗體組斷奶仔豬回腸乳酸桿菌數(shù)量顯著增加(P<0.05),增加了2.90%。與對照組相比,聯(lián)用組斷奶仔豬回腸、盲腸中大腸桿菌數(shù)量顯著降低(P<0.05),分別降低了5.36%、14.41%;回腸、盲腸中的乳酸桿菌數(shù)量顯著增加(P<0.05),分別增加了5.05%、9.41%。與抗生素組相比,聯(lián)用組斷奶仔豬回腸、盲腸中的大腸桿菌、乳酸桿菌數(shù)量無顯著差異(P>0.05)。
表5 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬腸道微生物菌群的影響
3.1 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能的影響
隨著國內(nèi)禁止抗生素步伐的加快,科研工作者正努力尋找一種能有效防治動物疾病而且綠色環(huán)保的生物制劑,卵黃抗體以其成本低、高效、安全等優(yōu)點,得到了國內(nèi)外學者的廣泛關注。許國棟等[21]制備了抗產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌(ETEC)的F18和K88融合蛋白卵黃抗體,并研究了卵黃抗體對斷奶仔豬腹瀉的預防及生長性能的影響,結(jié)果表明,在飼糧中添加卵黃抗體可提高仔豬的生長性能,顯著降低仔豬腹瀉率。高云英等[22]將K88+、K99和987P滅活后,等量混合免疫產(chǎn)蛋雞,隨后給仔豬口服卵黃抗體,預防保護試驗達到90%以上,攻毒保護試驗達到98%,該試驗顯示卵黃抗體在治療上優(yōu)于痢特靈和慶大霉素。Owusu-Asiedu等[23]研究發(fā)現(xiàn),人工感染大腸桿菌后,不添加卵黃抗體組嚴重腹瀉,并持續(xù)7 d,有33%的死亡率,而添加卵黃抗體組只發(fā)生輕微腹瀉。王吉譚等[14]研究表明,使用含有抗K88+、K99和987P的卵黃抗體粉飼喂斷奶仔豬后,飼喂2周高免全蛋粉能顯著提高仔豬平均日采食量、平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率,能有效防治斷奶仔豬腹瀉,顯著降低腸道中大腸桿菌數(shù)量。姜錦鵬等[24]使用脂肪組織細胞膜蛋白制得的卵黃抗體,在豬的生長前期飼喂添加卵黃抗體(75 mg/kg)的飼糧,平均日增重提高了13.03%,飼料報酬率提高了7.49%,瘦肉率提高了10.30%,背膘厚下降了24.14%,腎臟、腸系膜、皮下脂肪指數(shù)都下降,并可改善肉色。
余冰等[25]研究了含膽囊收縮素(CCK)抗體的卵黃粉對斷奶仔豬生長性能及養(yǎng)分消化率的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比,試驗組仔豬血清中CCK含量下降,試驗組平均日采食量提高了6.92%、平均日增重增加了12.14%,料重比降低了4.62%,同時,隨著含CCK抗體卵黃粉添加水平的增加,粗蛋白質(zhì)消化率隨其添加水平增加呈二次曲線變化。Yokoyama等[16]研究口服抗K88+、K99和987P的卵黃抗體對防制仔豬大腸桿菌性腹瀉的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),口服后不僅降低了仔豬的腹瀉率、死亡率,且有效預防了細菌和病毒引起的消化道疾病,同時提高了仔豬平均日增重。肖馳等[26]給初生仔豬口服抗豬大腸埃希氏菌卵黃抗體,7日齡仔豬腹瀉率較對照組由47.7%降至9.4%,8~12日齡仔豬腹瀉率較對照組下降了9.5%。大量資料表明,卵黃抗體作為飼料添加劑不僅可預防仔豬消化道疾病,且可提高早期斷奶仔豬的生長性能[27]。陳魯勇等[28]研究報道,選用21日齡的早期斷奶仔豬160頭,每組80頭,分別飼喂基礎飼糧和基礎飼糧+1 g/kg卵黃抗體粉,結(jié)果表明,試驗組比對照組平均日增重提高,采食量提高,料重比下降,腹瀉率下降。
在本試驗中,與對照組相比,飼糧中單獨添加卵黃抗體或者與抗生素聯(lián)用時都能顯著提高平均日增重,顯著降低料重比和腹瀉率,結(jié)果與前人基本一致。與抗生素組相比,飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能無顯著差異,兩者使用效果相近,表明在以后的生產(chǎn)中可以用卵黃抗體部分或全部替代抗生素。
3.2 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬血清生化指標的影響
血清中的總蛋白、白蛋白、球蛋白含量可以反映機體的免疫機能狀態(tài)。血清中的白蛋白參與機體組織蛋白的合成,是血液緩沖劑,它可以維持血管膠體滲透壓,作為金屬離子、脂肪酸、氨基酸和激素等的運輸載體;血清中的球蛋白主要與機體免疫機能有關。血清中的白蛋白和球蛋白主要由肝臟合成,其含量反映了肝臟的功能狀態(tài)和機體免疫機能。吳春燕等[29]研究報道,新生仔豬主動免疫能力缺乏,主要依靠母乳提供的免疫球蛋白進行被動免疫,直到4~5周齡時,主動免疫才發(fā)揮作用。早期斷奶仔豬由于被動免疫保護消失,主動免疫功能又不完善,所以抵抗力差,容易出現(xiàn)腹瀉等疾病。
溶菌酶廣泛分布于動植物組織、體液與分泌液中,具有溶解細菌細胞、迅速清理黏膜及抗感染的功能,其主要來自嗜中性白細胞、單核細胞及吞噬細胞溶酶體中,能增強機體活性,與免疫球蛋白在功能上有著緊密聯(lián)系,對仔豬腹瀉具有防治作用[30]。
本試驗中,與對照組相比,飼糧中添加卵黃抗體能顯著提高血清中總蛋白、白蛋白的含量,血清中溶菌酶活性提高了20.59%,但差異不顯著,與抗生素組相比,飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬血清生化指標無顯著差異。當抗生素與卵黃抗體聯(lián)用時也能顯著提高血清中總蛋白、白蛋白含量,與抗生素組無顯著差異。這說明卵黃抗體能很好的增強仔豬免疫力,效果與抗生素接近。
3.3 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬小腸腸道形態(tài)的影響
國內(nèi)外大量研究證實,斷奶對仔豬腸道形態(tài)產(chǎn)生嚴重影響。Hampson[31]研究報道,在斷奶后3~8 d,腸道絨毛長度下降了30%~63%,隱窩深度增加了76%~180%。任曼等[32]研究表明,仔豬斷奶后,腸道完整性遭到破壞,腸道絨毛萎縮,隱窩深度增加,絨隱比降低。顧憲紅等[33]研究報道,腸道病原菌與小腸的互作是影響斷奶后仔豬消化道結(jié)構(gòu)和功能變化的主要因素之一。王吉譚等[14]研究表明,使用含有抗K88+、K99和987P的卵黃抗體粉飼喂斷奶仔豬后,飼喂2周高免全蛋粉能顯著降低腸道中大腸桿菌數(shù)量,增加絨毛高度,降低隱窩深度,在獲得與飼喂添加血漿蛋白粉飼糧相同的生長性能條件下,極大地降低了生產(chǎn)成本。Mahdavi等[15]研究發(fā)現(xiàn),在將抗大腸桿菌O78∶K80卵黃抗體添加到飼料中飼喂雛雞后,能夠增加腸道絨毛的高度和隱窩深度,并能降低空腸中球狀細胞和淋巴濾泡的數(shù)目。
在本試驗中,與對照組相比,飼糧中添加卵黃抗體能顯著增加回腸絨毛高度和絨隱比,對十二指腸和空腸的絨毛高度和隱窩深度無顯著影響,與抗生素組相比,兩者無顯著差異,但效果類似;當抗生素與卵黃抗體聯(lián)用時也能顯著增加回腸絨毛高度和絨隱比。這說明,飼料中添加抗生素、卵黃抗體對斷奶仔豬的小腸黏膜形態(tài)均有明顯的改善作用,其原因可能是因為它們明顯抑制了致病性大腸桿菌的生長,減少了大腸桿菌內(nèi)毒素的分泌,降低了內(nèi)毒素對小腸絨毛的破壞。
3.4 飼糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬腸道微生物菌群的影響
微生物與動物機體及環(huán)境之間是一個相互依賴、相互制約的微生態(tài)體系,在微生態(tài)平衡狀態(tài)下,動物腸道中的正常微生物菌群對腸道的結(jié)構(gòu)和功能、對增強機體的免疫能力及抵抗疾病起著十分重要的作用。仔豬斷奶是由母乳喂養(yǎng)為主轉(zhuǎn)變?yōu)橐燥暭Z喂養(yǎng)為主的過程,在此期間消化道內(nèi)微生物區(qū)系易發(fā)生較大改變,從而導致仔豬腹瀉。許多研究表明,斷奶對仔豬腸道菌群有很大影響,主要表現(xiàn)為大腸桿菌數(shù)量的上升和乳酸桿菌數(shù)量的下降[34]。李冬虹等[17]制備了抗ETEC的卵黃抗體,并通過同位素標記大腸埃希菌證明了卵黃抗體對ETEC黏附具有良好的保護效果。胥桂華等[35]用仔豬大腸埃希菌病純化凍干卵黃抗體處理ETEC的K88+、K99和987P菌株感染新生仔豬,研究卵黃抗體對大腸埃希菌藥理機制,結(jié)果表明卵黃抗體與ETEC菌毛相結(jié)合,改變了ETEC的細胞膜結(jié)構(gòu),阻止了ETEC在仔豬小腸內(nèi)的定殖,妨礙了ETEC的正常代謝,最終實現(xiàn)了對仔豬大腸埃希菌病防治的目的,與Yokoyama等[16]和Jin等[18]的研究結(jié)果一致。
卵黃抗體經(jīng)過胃液和腸液的消化后,大部分完整的卵黃抗體黏附于腸道病原菌的菌毛和鞭毛上,使病原菌失去黏附腸黏膜上皮細胞的能力,阻礙病原菌運動、擴散或者直接結(jié)合到病原菌的細胞壁上,從而改變病原體的完整性,達到抑制腸道大腸桿菌的目的;小部分卵黃抗體在腸道消化酶作用下,降解為可結(jié)合片段,這些片段含有抗體末端的可變小肽(Fab)部分,這些小肽很容易被腸道吸收而進入血液,進入血液后能與特定的病原菌黏附因子結(jié)合,使病原菌不能黏附易感細胞而失去致病性[36]。
本試驗中,與對照組相比,飼糧中添加卵黃抗體能顯著降低回腸、盲腸中大腸桿菌的數(shù)量,顯著增加回腸、盲腸中的乳酸桿菌數(shù)量。與抗生素組相比,添加卵黃抗體能顯著增加回腸乳酸桿菌數(shù)量,并且各組中,卵黃抗體組回腸、盲腸中乳酸桿菌數(shù)量最多,更有利于腸道有益菌群的生長和繁殖。當抗生素與卵黃抗體聯(lián)用時也表現(xiàn)出很好的使用效果。
飼糧中添加抗大腸桿菌多價卵黃抗體能顯著改善斷奶仔豬生長性能,提高平均日增重,降低料重比和腹瀉率,增強仔豬免疫力,提高腸道健康水平,促進有益菌生長,與抗生素有相近的使用效果,是一種很有應用前景的抗生素替代品。
[1] MOREIRA I,DE OLIVEIRA G C,FURLAN A C,et al.Utilization of pre-gelatinized corn meal on nursery phase piglet feeding.Digestibility and performance[J].Revista Brasileira de Zootecnia,2001,30(2):440-448.
[2] 于力.動物傳染病學[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1998:56-132.
[3] ETIENNE J,GERBAUD G,COURVALIN P,et al.Plasmid-mediated resistance to fosfomycin inStaphylococcusepidermidis[J].FEMS Microbiology Letters,1989,61(1/2):133-137.
[4] WILLIAMS J.Serum proteins and the livetins of hen’s-egg yolk[J].Biochemical Journal,1962,83(2):346-355.
[5] LOEKEN M R,ROTH T F.Analysis of maternal IgG subpopulations which are transported into the chicken oocyte[J].Immunology,1983,49(1):21-28.
[6] 宋維平,徐福洲,王金洛,等.抗豬流行性腹瀉病毒卵黃抗體治療效果研究[J].華北農(nóng)學報,2003,18(1):114-115.
[7] DEVI C M,BAI M V,LAL A V,et al.An improved method for isolation of anti-viper venom antibodies from chicken egg yolk[J].Journal of Biochemical and Biophysical Methods,2002,51(2):129-138.
[8] POLSON A,VON WECHMAR M B,VAN REGENMORTEL M H V.Isolation of viral IgY antibodies from yolks of immunized hens[J].Immunological Communications,1980,9(5):475-493.
[9] 張小鶯,鄭禮,SCHADE R,等.免疫雞產(chǎn)生IgY抗體的技術[J].中國藥理學通報,2004,20(10):1102-1106.
[10] 吳義龍,費榮梅.雞卵黃抗體IgY研究進展[J].畜牧與獸醫(yī),2013,45(3):94-98.
[11] 張輝,崔煥忠,楊歡,等.卵黃抗體及其在疾病防制與飼料中的應用研究進展[J].中國畜牧獸醫(yī),2014,41(5):124-127.
[12] 朱錦蘭,李煥友,馮定遠,等.卵黃抗體添加劑與金霉素對肉鴨生長性能的影響比較研究[J].中國畜牧雜志,2005,41(6):36-37,50.
[13] 韓水仲,田澤華,趙津子,等.卵黃抗體在飼料添加劑中的應用[J].中國飼料,2010(15):3-7.
[14] 王吉潭,李德發(fā),龔利敏,等.高免全蛋粉對早期斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道組織形態(tài)的研究[J].飼料研究,2004(5):1-6.
[15] MAHDAVI A H,RAHMANI H R,NILI N,et al.Effects of dietary egg yolk antibody powder on growth performance,intestinalEscherichiacolicolonization,and immunocompetence of challenged broiler chicks[J].Poultry Science,2010,89(3):484-494.
[16] YOKOYAMA H,PERALTA R C,DIAZ R,et al.Passive protective effect of chicken egg yolk immunoglobulins against experimental enterotoxigenic Escherichia coli infection in neonatal piglets.[J].Infection and Immunity,1992,60(3):998-1007.
[17] 李冬虹,黃文靜,盧玉葵,等.同位素標記檢測卵黃抗體對大腸桿菌的黏附抑制作用[J].畜牧與獸醫(yī),2011,43(2):111-112.
[18] JIN L Z,BAIDOO S K,MARQUARDT R R,et al.Invitroinhibition of adhesion of enterotoxigenicEscherichiacoliK88 to piglet intestinal mucus by egg-yolk antibodies[J].FEMS Immunology & Medical Microbiology,1998,21(4):313-321.
[19] 崔煥忠,張輝,楊歡,等.卵黃抗體及其在動物疾病診斷與防治中應用的研究進展[J].黑龍江畜牧獸醫(yī):科技版,2014(15):60-62.
[20] 馬鑫,馬秋剛,計成,等.蛋氨酸羥基類似物和有機酸化劑對主要腸道病原菌體外抑菌效果的比較[J].動物營養(yǎng)學報,2008,20(2):238-241.
[21] 許國棟.日糧中添加卵黃抗體對斷奶仔豬生長性能、腹瀉及糞樣菌群的影響[D].碩士學位論文.武漢:華中農(nóng)業(yè)大學,2009.
[22] 高云英,趙發(fā)苗,張金良,等.雞抗豬大腸桿菌高免卵黃抗體的研制與應用[J].畜牧獸醫(yī)雜志,2003,22(1):6-8.
[23] OWUSU-ASIEDU A,NYACHOTI C M,BAIDOO S K,et al.Response of early-weaned pigs to an enterotoxigenicEscherichiacoli(K88) challenge when fed diets containing spray-dried porcine plasma or pea protein isolate plus egg yolk antibody[J].Journal of Animal Science,2003,81(7):1781-1789.
[24] 姜錦鵬.脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體對豬脂肪沉積的調(diào)控及相關機理研究[D].博士學位論文.南京:南京農(nóng)業(yè)大學,2006.
[25] 余冰,林曉欽,羅文麗,等.含膽囊收縮素抗體卵黃粉對斷奶仔豬生產(chǎn)性能及養(yǎng)分消化率的影響[J].中國飼料,2009(1):19-21,25.
[26] 肖馳,周淑蘭,涂志,等.雞抗豬大腸埃希氏菌卵黃抗體的研制與應用[J].中國獸醫(yī)科技,1998,28(4):21-23.
[27] 高嶺,劉聚祥,楊娜娜.雞卵黃抗體及其在養(yǎng)豬業(yè)中的應用研究進展[J].動物醫(yī)學進展,2013,34(5):110-114.
[28] 陳魯勇.雞卵黃抗體對仔豬生長性能的影響[J].養(yǎng)豬,2010(6):13-14.
[29] 吳春燕,陳代文,張克英.早期斷奶仔豬腸黏膜免疫與氨基酸關系的研究[J].畜禽業(yè),2002(1):26-28.
[30] 冷靜,戴志明,楊國明.日糧中添加抗生素對斷奶仔豬血清溶菌酶活性的影響[J].中國飼料,2004(2):19-20.
[31] HAMPSON D J.Alterations in piglet small intestinal structure at weaning[J].Research in Veterinary Science,1986,40(1):32-40.
[32] 任曼,霍應峰,楊鳳娟,等.仔豬斷奶前后腸道形態(tài)和相關免疫蛋白基因表達的變化[J].動物營養(yǎng)學報,2014,26(3):614-619.
[33] 顧憲紅.斷奶仔豬小腸結(jié)構(gòu)和功能的變化及其影響因素[J].中國飼料,1999(1):27-29.
[34] 朱偉云,姚文,毛勝勇.變性梯度凝膠電泳法研究斷奶仔豬糞樣細菌區(qū)系變化[J].微生物學報,2003,43(4):503-508.
[35] 胥桂華,苗玉和,張勇飛,等.大腸桿菌病純化凍干卵黃抗體對大腸桿菌感染新生仔豬的治療試驗及藥理機制研究[J].中國動物保健,2010(7):16-20.
[36] 孫欽偉.腸產(chǎn)毒素大腸桿菌高免蛋黃粉抗體的吸收及若干因子對其活性影響的初步研究[D].碩士學位論文.南京:南京農(nóng)業(yè)大學,2003.
*Corresponding author, professor, E-mail: wtguan@scau.edu.cn
(責任編輯 武海龍)
Effects of Dietary Supplementation of Immunoglobulin of Yolk on Growth Performance, Serum Biochemical Parameters, Intestinal Morphology and Microbial Flora of Weaned Piglets
ZHANG Wenfei1,2LIU Pingping1,2GUAN Wutai1,2*CHEN Fang1DENG Yuelin1
(1.CollegeofAnimalScience,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China; 2.UncoilFeedingOil&FatResearchCentre,CollegeofAnimalScience,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China)
This experiment was conducted to investigate the effects of dietary supplementation of immunoglobulin of yolk (IgY) on growth performance, serum biochemical parameters, intestinal morphology and microbial flora of weaned piglets. One hundred and sixty (25±1)-day-old ‘Duroc×Landrace×Large Yorkshire’ weaned piglets were assigned to 4 groups with 4 replicates per group and 10 pigs per replicate. Weaned piglets in the 4 groups were fed 4 diets as follows: basis diet (control group), basis diet+0.4 kg/t colistin (antibiotic group), basis diet+1.0 kg/t IgY (IgY group) and basis diet+0.2 kg/t colistin+0.5 kg/t IgY (combine group), respectively. The experiment lasted for 28 days. The results showed as follows: 1) compared with the control group, the average daily gain of weaned piglets in IgY group was significantly improved (P<0.05), the ratio of feed to gain and diarrhea rate of weaned piglets was significantly decreased (P<0.05), and there was no significant effect on average daily feed intake of weaned piglets (P>0.05). Compared with the antibiotic group, IgY group had no significant effect on growth performance of weaned piglets (P>0.05), and both showed similar results. 2) Compared with the control group, the contents of total protein and albumin in serum of weaned piglets in IgY group were significantly improved (P<0.05). 3) Compared with the control group, the villus height and ratio of villus height to crypt depth (VH/CD) in ileum of weaned piglets in IgY group were significantly improved (P<0.05), and there were no significant effects on villus height, crypt depth and VH/CD in duodenum and jejunum of weaned piglets (P>0.05). 4) Compared with the control group, the number ofE.coliin ileum and cecum of weaned piglets in IgY group were significantly decreased (P<0.05), and the numbers ofLactobacilliin ileum and cecum of weaned piglets in IgY group were significantly increased (P<0.05). In conclusion, dietary supplementation of IgY can improve the growth performance of weaned piglets, enhance the immunity, improve gut health levels, and promote the growth of beneficial bacteria. It has the same effect of the use of antibiotics and is the most promising alternatives to antibiotics.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(1):271-279]
immunoglobulin of yolk; weaned piglets; antibiotic; growth performance; serum biochemical parameters; intestinal morphology; intestinal microbial
10.3969/j.issn.1006-267x.2017.01.031
2016-07-12
廣東省生豬產(chǎn)業(yè)技術體系崗位專家研究專項
張文飛(1991—),男,滿族,河南西平人,碩士研究生,動物營養(yǎng)與飼料科學專業(yè)。E-mail: 1101529942@qq.com
*通信作者:管武太,教授,博士生導師,E-mail: wtguan@scau.edu.cn
S828
A
1006-267X(2017)01-0271-09