畢海林， 肖裕章， 胡 軍,2， 宋小紅， 袁啟峰， 潘 瑤,2， 唐建華,2

(1.重慶方通動(dòng)物藥業(yè)有限公司， 重慶榮昌402460； 2.西南大學(xué)榮昌校區(qū)， 重慶榮昌402460)

番瀉葉的研究概況

畢海林1， 肖裕章1， 胡 軍1,2， 宋小紅1， 袁啟峰1， 潘 瑤1,2， 唐建華1,2

(1.重慶方通動(dòng)物藥業(yè)有限公司， 重慶榮昌402460； 2.西南大學(xué)榮昌校區(qū)， 重慶榮昌402460)

番瀉葉為豆科植物狹葉番瀉葉尖葉番瀉葉的干燥小葉的統(tǒng)稱。狹葉番瀉葉產(chǎn)于東非洲近海及島嶼上，阿拉伯南部及印度西北部、南部；尖葉番瀉葉產(chǎn)于熱非洲尼羅河流域，現(xiàn)國(guó)內(nèi)廣東、南海、云南均已引種栽培。番瀉葉甘、苦、寒，歸大腸經(jīng)，是一種常用的瀉下藥，具有瀉熱行滯、通便、利水之功能。主治熱結(jié)積滯、便秘腹痛、水腫脹滿，人醫(yī)臨床已廣泛作為導(dǎo)瀉劑。番瀉葉主要成分為番瀉葉苷A、B、C、D，大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素和多糖等?，F(xiàn)代藥理證明：番瀉葉除瀉下作用外，還具有抗菌、止血和肌肉松弛解痙等作用，臨床上主要用于便秘、急性胰腺炎、膽結(jié)石與膽囊炎、細(xì)菌性痢疾、急性胃出血及十二指腸出血等疾病[1-2]。本文對(duì)其有效成分、有效成分提取方法及其定量分析方法和藥理作用以及臨床應(yīng)用等進(jìn)行概述。

1 有效成分

1.1 蒽醌及其衍生物類 蒽醌類化合物是番瀉葉尖葉和狹葉番瀉葉主要有效成分，尖葉番瀉葉含番瀉苷A、B、C及蘆薈大黃素-8-葡萄糖苷、大黃酸-1-葡萄糖苷、大黃酸-8-葡萄糖苷、蘆薈大黃素、大黃酸[3]。尖葉番瀉葉的根中含游離蒽醌、蒽醌苷、二蒽酮苷等18個(gè)蒽醌衍生物，二蒽酮類衍生物是番瀉葉瀉下、止血活性成分[4-5]；狹葉番瀉葉含番瀉苷A及B(兩者互為立體異構(gòu)體)、番瀉苷C及D(兩者互為立體異構(gòu)體)、蘆薈大黃素雙蒽醌苷、大黃酸葡萄糖苷、蘆薈大黃素-8-葡萄糖苷)、大黃酸、蘆薈大黃素[6]。狹葉番瀉葉果實(shí)中含番瀉苷A、B及大黃酸、大黃酚[7]。此外，番瀉葉中尚含有大黃酸-8-雙葡萄糖苷、初級(jí)苷、大黃酸蒽醌-8-葡萄糖苷[8]。但是番瀉苷A、B、C、D是目前被研究的番瀉葉瀉下作用的最主要成分，尤其是番瀉苷A、B的瀉下作用強(qiáng)于其他含蒽醌類的瀉下作用。

1.2 其他 番瀉葉中還含有多糖和揮發(fā)油，番瀉葉多糖有抑菌、抗病毒等多種生物活性。狹葉番瀉葉中酸性多糖含量為7%，主要是由L-鼠李唐-阿拉伯糖，半乳糖及半乳糖醛酸等連接而成；干燥葉含約0.048%揮發(fā)油，包括200多種成分，主要分為：?jiǎn)屋?，倍半萜，有機(jī)酸及酯，苯丙素類等。此外，尖葉番瀉葉還含植物甾醇及其苷類。

綜上所述，尖葉番瀉葉與狹葉番瀉葉在瀉下成分蒽醌類部分基本相同，兩者僅在黃酮類有少部分區(qū)別。因此，作為瀉下使用的尖葉番瀉葉和狹葉番瀉葉應(yīng)無明顯差異。

2 有效成分的提取方法

番瀉苷是番瀉葉瀉下作用的有效成分，其中以番瀉苷A、B為主，因此番瀉葉的提取工藝優(yōu)劣多以番瀉苷A、番瀉苷B或是番瀉苷A、B總苷提取率進(jìn)行評(píng)價(jià)，番瀉苷主要以游離的有機(jī)酸和鹽兩種形式存在，正確選擇提取溶劑種類和量可顯著提高番瀉苷的提取率。

2.1 超聲波提取法 超聲波法提取中藥有效成分是通過增大所用提取溶劑的分子運(yùn)動(dòng)速度、增強(qiáng)溶劑的穿透力以提取生物有效成分，該法提取率高，提取時(shí)間短，提取溫度低等優(yōu)點(diǎn)，是目前中藥有效成分提取的常用方法。王文莉等[9]利用正交試驗(yàn)研究超聲法提取番瀉葉中總番瀉苷工藝發(fā)現(xiàn)：在 95 ℃ 下，40 kHz超聲15 min，總番瀉苷提取率高達(dá)99.1%。強(qiáng)茂[10]等采用甲醇超聲法提取30 min，番瀉苷A濃度為0.2012 mg/mL。同年，王文莉[11]等通過試驗(yàn)比較超聲提取與常規(guī)水提法總番瀉苷提取率，結(jié)果得超聲提取率高。

2.2 乙醇提取法 乙醇可溶解多種有效提取成分，常配制成一定濃度通過加熱回流、浸漬、滲漉等方法對(duì)有效成分進(jìn)行分離提取。乙醇沸點(diǎn)低，較水提取法可顯著降低濃縮的溫度和縮短濃縮時(shí)間，減少番瀉苷的降解，故加入一定濃度的乙醇可提高總苷的提取率。張亞東等[12]通過正交試驗(yàn)篩選以乙醇為溶媒對(duì)總番瀉苷的提取工藝，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，70%乙醇回流提取3次，每次提取1 h可提取得較高濃度的番瀉苷；鄧遠(yuǎn)輝[13]試驗(yàn)：用15倍量的65%乙醇，提取2次，每次提取10 min，提得總番瀉苷含量為1.28%。曹蔚[14]等以每次10倍量的50%乙醇為溶劑，室溫下浸提24 h，提取2次，提取液中番瀉苷A的濃度為1.35 mg/mL，計(jì)算提取率為91.2%。雷燕[15]等通過試驗(yàn)篩選得番瀉苷B提取最佳工藝為12倍45%乙醇浸提，每次10 min。該方法無特殊設(shè)備要求，常規(guī)設(shè)備即可滿足生產(chǎn)要求，加入乙醇后縮短了提取、濃縮的時(shí)間，降低了濃縮、干燥的溫度，提高番瀉苷在提取過程中的穩(wěn)定性。

2.3 水提法 水提法是以水為介質(zhì)通過加熱回流或沸水煎煮提取有效成分，是目前最廉價(jià)的傳統(tǒng)提取方式。林觀樣[16]等以番瀉苷A浸出率為指標(biāo)比較不同浸泡方法對(duì)番瀉葉中番瀉苷A浸出率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，溫度對(duì)番瀉苷A含量影響較大，最佳提取條件為100 ℃水浸泡4次，每次30 min，平均提取率為0.52%。強(qiáng)茂[10]等取番瀉葉50 g至1 000 mL沸水浸提3次，每次20 min，測(cè)得番瀉苷A濃度為0.4426 mg/mL。張現(xiàn)濤[17]等用10倍量0.5%NaHC03溶液，90 ℃，提取2次．每次30 min，番瀉苷A、番瀉苷B的浸出率為86.2%～87.2%。該法操作簡(jiǎn)單，成本低，濃縮時(shí)間較長(zhǎng)，番瀉苷損耗較大。

綜上所述，提取方法的選擇應(yīng)根據(jù)所要提取的目標(biāo)物質(zhì)的理化性質(zhì)決定，番瀉苷對(duì)溫度不穩(wěn)定，提取溫度、時(shí)間過長(zhǎng)均會(huì)顯著影響番瀉苷的含量，加入如乙醇類低沸點(diǎn)的介質(zhì)可顯著提高番瀉苷最后得率。目前乙醇提取法、水提取法是番瀉葉提取的常用的已投入大規(guī)模生產(chǎn)的方法，其他如超聲、微波、超臨界萃取技術(shù)等研究對(duì)于番瀉葉而言還處于實(shí)驗(yàn)室階段。

3 有效成分定量分析法

番瀉葉中有效成分的方法有分光光度法、高效液相色譜法、薄層掃描法、高效毛細(xì)管電泳法等，2005版《中國(guó)藥典》采用紫外-可見分光光度法測(cè)定番瀉葉中的有效成分，但操作復(fù)雜且結(jié)果誤差大，因此2010、2015版《中國(guó)藥典》及2010版《中國(guó)獸藥典》均采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。薄層色譜法和毛細(xì)管電泳法操作時(shí)間長(zhǎng)，過程繁瑣，且需特定條件。目前高效液相色譜測(cè)定法廣泛應(yīng)用于番瀉葉有效成分、提取物及相關(guān)制劑的含量測(cè)定，該法操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確度高。

3.1 分光光度法 分光光度法是根據(jù)被檢測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)的吸光度，通過對(duì)照品、吸收系數(shù)等計(jì)算被檢物質(zhì)的含量，該法所用儀器較普及，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果重現(xiàn)性好，但專屬性不強(qiáng)，對(duì)同一類物質(zhì)均可顯相同的正反應(yīng)。王曉林[18]等采用紫外-可見分光光度法以蘆丁為對(duì)照品在490 nm波長(zhǎng)處來測(cè)定番瀉葉提取物總黃酮含量。鄧遠(yuǎn)輝[13]等采用紫外-可見分光光度法來測(cè)定番瀉葉中總番瀉苷含量，但發(fā)現(xiàn)番瀉苷含量易受溫度的影響。

3.2 高效液相色譜法 高效液相色譜法是一種非常成熟的檢測(cè)技術(shù)，因其操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度和精密度高、專屬性強(qiáng)，常被寫入國(guó)家或地方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)作為質(zhì)量控制方法?！吨袊?guó)藥典》、《中國(guó)獸藥典》《日本藥局方》中均采用高效液相色譜法測(cè)定番瀉葉中番瀉苷A、B的含量。鄔秋萍[19]等采用HPLC法測(cè)定番瀉葉中5種主要化學(xué)成分的含量，結(jié)果顯示，5種化學(xué)成分分離好，各成分線性關(guān)系良好；何偉[20]等以乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液為流動(dòng)相梯度洗脫直接測(cè)定番瀉葉中番瀉苷A和番瀉苷B的含量，結(jié)果可靠；王童[21]等以流動(dòng)相為乙腈-5 mmol/L四庚基溴化銨的醋酸-醋酸鈉緩沖液測(cè)定番瀉葉中番瀉苷A、番瀉苷B的含量，結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，適用于該產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

綜上所述，高效液相色譜法和紫外分光光度法是目前用于番瀉葉有效成分檢測(cè)的常用方法。番瀉葉中瀉下的有效成分番瀉苷A、B為二蒽酮類，紫外-可見分光光度法只能檢測(cè)黃酮一類物質(zhì)，無法準(zhǔn)確測(cè)定番瀉苷A、B含量；高效液相色譜法可將番瀉苷A、B完好分離，故可準(zhǔn)確測(cè)定其含量。

4 藥理與臨床

番瀉葉性寒、味甘苦，歸大腸經(jīng)。現(xiàn)代研究證明，番瀉葉除具瀉下作用外，還有抗菌、止血、松弛肌肉、抗胃黏膜損傷等藥理作用，在人醫(yī)臨床廣泛用于消化系統(tǒng)疾病的治療，但獸醫(yī)臨床使用鮮有報(bào)道。與其他導(dǎo)瀉劑相比, 番瀉葉瀉下作用較強(qiáng)、對(duì)腸黏膜無損傷作用、使用方便、價(jià)廉等特點(diǎn), 已廣泛用于消化系統(tǒng)疾病、泌尿系統(tǒng)疾病、外科手術(shù)腸道準(zhǔn)備和手術(shù)后腸功能恢復(fù)、產(chǎn)褥期便秘、流行性出血熱等。

4.1 瀉下作用 瀉下導(dǎo)滯是番瀉葉主要作用，已被廣泛用于便秘、腸梗阻、腸麻痹、外科手術(shù)前腸道準(zhǔn)備和手術(shù)后腸功能恢復(fù)等。番瀉葉中有效成分為蒽苷，其中番瀉苷A、B的瀉下作用強(qiáng)。番瀉苷A、B由胃和小腸吸收，在肝中分解，分解產(chǎn)物經(jīng)血行興奮骨盆神經(jīng)節(jié)以收縮大腸、刺激結(jié)腸，增強(qiáng)大腸蠕動(dòng)而致瀉[22]。劉氏[23]等對(duì)38例開顱手術(shù)便秘患者研究發(fā)現(xiàn)，患者服用番瀉葉后多感到腹中胃腸蠕動(dòng)增強(qiáng)、輕松有力，且藥效持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，通便的同時(shí)，還利于預(yù)防開顱后感染和上消化道出血等并發(fā)癥的發(fā)生；番瀉葉沖泡茶對(duì)治療習(xí)慣性便秘效果明顯[24]。乳酸菌素片與番瀉葉聯(lián)合治療小兒慢性便秘，優(yōu)于其他方法[25]。治療單純性腸梗阻時(shí)，在常規(guī)的禁食，胃腸減壓，糾正電解質(zhì)平衡和抗炎的同事，用番瀉葉泡服，全部梗阻解除，癥狀體征消失[26]。此外，據(jù)李俐等報(bào)道[27]，用單味番瀉葉治療因炎癥繼發(fā)的腸梗阻或腸梗阻合并腹膜炎，起效時(shí)間3～5 h。據(jù)滿維新等[28]報(bào)道，單味番瀉葉用于治療細(xì)菌性痢疾并發(fā)頑固中毒性腸麻痹，可收到滿意效果，且比新斯的明安全，并有抗菌作用；番瀉葉在外科的應(yīng)用日益廣泛，如番瀉葉浸泡劑調(diào)整腹部手術(shù)后胃腸道功能紊亂、手術(shù)前腸道準(zhǔn)備、骨折便秘、肛門疾病手術(shù)前后，放射檢查前，腸麻痹等。

4.2 抗菌作用 番瀉葉中部分羥基蒽醌類成分對(duì)多種細(xì)菌有抑制作用。金亞城[29]等經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，10%番瀉葉溶出液對(duì)大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、甲型鏈球菌和白色念球菌均有明顯抑制作用。林阿素等[30]試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，番瀉葉的醇提取物對(duì)葡萄珠菌、白喉?xiàng)U菌、傷寒桿菌、副傷寒桿菌、大腸桿菌等多種細(xì)菌有抑制作用，但水提物僅對(duì)傷寒桿菌有效。此外，還有文獻(xiàn)報(bào)道，番瀉葉浸劑(1 ∶4)在試管內(nèi)對(duì)奧杜盎氏小芽孢癬菌和星形奴卡菌等皮膚真菌有抑制作用[31]。

4.3 止血作用 番瀉葉口服后可增加血小板和纖維蛋白原含量有助于止血，番瀉葉中的晶纖維和草酸鈣簇晶有局部止血作用。番瀉葉中分離出番瀉苷A、B、C、D經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)證明有明顯止血作用。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[32]，30%番瀉葉水浸液噴于出血病灶，有立即止血作用(胃鏡觀察)。以番瀉葉苷與等體積生理鹽水分別給動(dòng)物腹腔注射，行斷尾毛細(xì)血管法測(cè)定，表明番瀉葉苷具有止血作用，且高劑量組與低劑量組的止血效果幾無差別，表明小劑量即可達(dá)到止血的效果。黃漢升等[33]用番瀉葉泡服對(duì)消化道出血病人進(jìn)行治療，有效率100%(胃、十二指腸潰瘍27例，糜爛性出血性胃炎18例)，止血時(shí)間比其他止血?jiǎng)┛?～3倍。

4.4 肌肉松弛與解痙 番瀉葉的部分羥基蒽醌類成分有箭毒樣作用，能阻斷運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢和骨骼接頭處乙酰膽堿與M受體結(jié)合，從而使肌肉松弛[34]。研究發(fā)現(xiàn)，番瀉葉有利膽、松弛奧狄氏括約肌的作用，在臨床上可用于治療急性胰腺炎。據(jù)滿維新等[28]研究報(bào)道，以單味番瀉葉治療急性胰腺炎，輕者用每天開水沖服10～15 g；重者除口服外，再配合灌腸，結(jié)果全部痊愈出院，腹痛緩解平均2.1 d。

4.5 毒理作用 中藥因安全性、綠色無殘留等特點(diǎn)被廣泛運(yùn)用，研究發(fā)現(xiàn)，番瀉苷的小鼠LD50為1.414 g/kg，折合原生藥為36.3 g/kg，大于臨床口服治療量的300倍；據(jù)劉順良等報(bào)道，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物長(zhǎng)期服用番瀉葉及有效成分，未有致癌、致突變等顯現(xiàn)，說明有效劑量的番瀉葉是安全、有效的，且不良反應(yīng)少。大劑量不正確的使用可引起低鉀血癥，腸黏膜損傷等癥狀。有學(xué)者用番瀉葉治療102例患者，對(duì)治療前后的尿常規(guī)、肌酐、尿素氮、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、黃疸指數(shù)及心電圖等檢查，未發(fā)現(xiàn)明顯異常。

綜上所述，番瀉葉在人醫(yī)臨床已被廣泛使用和研究，但在獸醫(yī)臨床報(bào)道較少。番瀉葉除上述作用外，還可用于泌尿疾病、膽石癥和膽囊炎等疾病的治療，但目前瀉下作用被廣泛研究。番瀉葉合理劑量范圍使用是安全有效的，價(jià)格低廉適宜于動(dòng)物臨床使用與推廣。

5 展望

番瀉葉有效成分提取方法很多，傳統(tǒng)常用水煎法、沸水浸泡法、醇回流等，但均存在浸出率低、浸提液體積大濃縮困難等問題。超聲技術(shù)應(yīng)用可有效解決以上問題，但實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)還是存在一些問題，故應(yīng)結(jié)合自身實(shí)際情況選擇合適的提取方法最宜；目前高效液相色譜法是番瀉葉有效成分的定量分析使用最廣泛的，伴隨高效液相技術(shù)的日趨成熟，該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好；番瀉葉是全世界應(yīng)用最廣泛的導(dǎo)瀉劑之一，除公認(rèn)的瀉下作用外，還具抗菌、止血、肌肉松弛與解痙以及抗胃黏膜損傷等作用。瀉下作用的機(jī)理明確，但其他作用還需進(jìn)一步研究。服用有效劑量番瀉葉及其制劑具有安全、有效和不良反應(yīng)小的特性，但其毒副作用也不可忽視，需持續(xù)研究。

番瀉葉多為進(jìn)口，國(guó)內(nèi)產(chǎn)量少，擴(kuò)大藥材來源是一個(gè)重要任務(wù)。番瀉葉在人醫(yī)臨床已被廣泛運(yùn)用研究，但是在獸醫(yī)臨床上的使用和研究鮮有報(bào)道，然而現(xiàn)代化養(yǎng)殖模式下獸醫(yī)臨床的便秘問題非常嚴(yán)重，然而番瀉葉用量小，且效果優(yōu)于鹽類、油類等常用瀉藥，因此深入研究番瀉葉及相關(guān)制劑的在動(dòng)物臨床上的使用具有重要臨床意義。

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2016-08-30

2016年重慶市科技計(jì)劃項(xiàng)目：社會(huì)事業(yè)與民生保障科技創(chuàng)新專項(xiàng)(cstc2016shmszx80094)

畢海林(1989-)，男，碩士生，從事新產(chǎn)品及新獸藥研發(fā)工作，E-mail：bi0416@163.com

唐建華，E-mail：tjh1818918@163.com

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