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腎移植術(shù)后并發(fā)急性腎損傷患者尿液中NGAL水平及臨床意義

2017-02-06 17:19:04王琳崔應(yīng)麟王長安石小玉
中國醫(yī)藥科學(xué) 2016年15期
關(guān)鍵詞:亞組尿液特異性

王琳+崔應(yīng)麟+王長安+石小玉

[摘要]目的探討尿液中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)檢測在急性腎功能損傷(AKI)早期診斷中的意義。方法收集腎移植術(shù)后并發(fā)AKI患者36例,根據(jù)其病情嚴(yán)重程度將AKI患者分為3個(gè)亞組:危險(xiǎn)(R)組、損傷(I)組和衰竭組(R)組,同時(shí)隨機(jī)選取同期健康體檢者29例(NC)作為對照,分析不同級別的患者尿液NGAL水平,結(jié)合傳統(tǒng)指標(biāo)、臨床表現(xiàn),綜合評估NGAL對診斷AKI的臨床應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果NC組和AKI組兩組在SBUN、SCr、eGFR及UNGAL水平進(jìn)行方差分析,兩組SBUN水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),在SCr、eGFR及UNGAL水平,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),各亞組在SCr、eGFR及UNGAL水平,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),經(jīng)Pearson檢驗(yàn)及線性回歸分析,UNGAL水平與eGFR水平呈負(fù)相關(guān),r值為-0.632(P<0.01)。結(jié)論尿液NGAL的水平的檢測過程簡便易行,有助于腎移植術(shù)后并急性腎損傷的早期診斷和預(yù)后評估,可作為腎移植術(shù)后高危人群的常規(guī)檢查在臨床工作中推廣應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞]腎移植;器官移植;急性腎損傷;尿液;中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白

腎移植手術(shù)作為治療終末期腎功能衰竭方法,其療效已為廣大患者認(rèn)可。但其術(shù)后往往存在多種并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn),其中移植腎功能延遲恢復(fù)(delayedgraft function,DGF)是較為嚴(yán)重的并發(fā)癥。DGF引起的急性腎損傷(acute kidney injury,AKI)可導(dǎo)致心力衰竭及電解質(zhì)紊亂,對于腎移植術(shù)后出現(xiàn)的AKI,仍以血清肌酐和尿量的變化為診斷標(biāo)準(zhǔn),但缺乏敏感性和特異性。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL),屬于Lipocalin-2家族成員之一的脂蛋白,是當(dāng)前具有臨床應(yīng)用價(jià)值的腎損傷早期診斷生物化學(xué)標(biāo)志物之一。我們選取腎移植術(shù)后并發(fā)AKI的患者,與健康對照組比較,分析不同級別的患者尿液NGAL水平,結(jié)合傳統(tǒng)指標(biāo)、臨床表現(xiàn),綜合評估NGAL對診斷AKI的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1對象與方法

1.1研究對象

選取2013年1月~2015年12月在我院確診的腎移植術(shù)后并發(fā)AKI患者36例,年齡(39.6±12.3)歲,其中男24例,女12例,腎移植供者為心臟死亡器官捐獻(xiàn)。AKI診斷及分級參照2005年急性腎損傷網(wǎng)絡(luò)(acute kidney injurynewwork,AKIN)制定的AKI診斷標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)2002年急性透析質(zhì)量倡議組(acute dialysis qualityinitiative group,ADQI)關(guān)于AKI的RIFLE分期標(biāo)準(zhǔn)(表1),將AKI患者分為3個(gè)亞組:危險(xiǎn)(riskof renal dysfunction,R)亞組、損傷(iniury to thekidney,I)亞組和衰竭組(failure of kidney function,R)亞組,同時(shí)隨機(jī)選取同期健康體檢者29例(normal contral,NC)作為對照,年齡(43.0±17.8)歲,其中男18例,女11例,NC組和AKI組在年齡、性別構(gòu)成上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。TG、TC、ALP等生化檢查差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示兩組基線資料具有隨機(jī)性、均衡性。入選的所有研究對象均無冠心病、肝病、感染、膠原疾病、腦梗死及肺部疾病,所有受試者均簽署了自愿參加實(shí)驗(yàn)的知情同意書,并通過了鄭州市第七人民醫(yī)院倫理委員會(huì)的倫理評審。

1.2研究方法

各組患者于早晨空腹抽取靜脈血,采用日本Hitachi公司7170型全自動(dòng)生化分析儀測量生化指標(biāo):血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(serum creatinine,SCr)、甘油三酯(TG,triglyceride)、膽固醇(total cholesterol,TC)及白蛋白(albumin,ALB);將患者24h尿液樣本應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測定;腎小球?yàn)V過率估算值(estimated glomerular filtration rate,eGFR)的換算公式為校正的MDRD公式:eGFR『mL·min。(1.73㎡-1]=175x[血肌酐÷88.6]x[年齡]x[女性x0.79];晨起留取清潔中段尿5mL,4000r/min離心5min,取上清液,應(yīng)用免疫層析技術(shù),通過AQT90 FLEX快速免疫定量分析儀進(jìn)行尿液NGAL含量(UNGAL)測定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,計(jì)量資料以(x±s)的形式表示,計(jì)量資料的組間比較采用ANOVA方差分析,尿液中NGAL水平和GFR估算值的相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)分析

NC組和AKI組兩組在SBUN、SCr、eGFR及差異UNGAL水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,其中各組SBUN水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而組間在SCr水平,R亞組與NC組相比,t=14.63;I亞組與NC組相比,t=20.10;F亞組與NC組相比,t=26.57;組間eGFR水平,R亞組與NC組相比,t=18.79;I亞組與NC組相比,t=29.67;F亞組與NC組相比,t=18.32;組問UNGAL水平,R亞組與NC組相比,t=24.09;I亞組與NC組相比,t=16.16;F亞組與NC組相比,t=1 7.92;差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.2 AKI患者UNGAL與eGFR的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson檢驗(yàn),UNGAL水平與eGFR水平呈負(fù)相關(guān),r值為-0.632(P=0.02)。見圖1。

3討論

AKI臨床表現(xiàn)為無誘因出現(xiàn)急性少尿、無尿、腎功能進(jìn)行性惡化,是腎移植術(shù)后較為嚴(yán)重的并發(fā)癥。如不盡早進(jìn)行干預(yù)治療,可能導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的腎功能損害。目前,臨床上不斷積極探索和尋求適合在實(shí)際工作中應(yīng)用研究的新型生物標(biāo)記物,以進(jìn)行腎臟早期損傷的監(jiān)測及預(yù)后的評估。據(jù)研究發(fā)現(xiàn),可反映急性腎損傷(AKI)的生物學(xué)指標(biāo)有:轉(zhuǎn)鐵蛋白(uransferrin,Tf)、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cystatin C)、NGAL、Na+/H+交換體(NHE-3)等多種分子學(xué)標(biāo)記物。Scr、BUN等常規(guī)檢測指標(biāo)常常在腎小球損傷>50%時(shí)才有所體現(xiàn),且存在一定滯后性,故作為AKI的診斷標(biāo)準(zhǔn)存在一定局限性。就應(yīng)用價(jià)值而言,大多數(shù)檢測項(xiàng)目針對基礎(chǔ)研究開展較多,并不適合基層醫(yī)院應(yīng)用,缺乏實(shí)用型、特異性。而作為其中之一的NGAL,作為診斷急性腎損傷特異性較高的生物學(xué)標(biāo)志之一,逐漸為醫(yī)學(xué)界所關(guān)注。

目前研究表明,NGAL作為一種脂質(zhì)運(yùn)載蛋白,腎、肺、胃和結(jié)腸等中以很低的水平表達(dá),參與細(xì)胞內(nèi)鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)、炎癥反應(yīng)和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移等。當(dāng)相關(guān)器官的上皮細(xì)胞受到損傷性刺激時(shí),其在組織內(nèi)的濃度將顯著上升,可用于評價(jià)炎癥導(dǎo)致的內(nèi)皮損傷嚴(yán)重程度。當(dāng)腎臟發(fā)生缺血、再灌注損傷后,可引起腎小管升支粗段NGAL分泌明顯升高,腎臟發(fā)生缺血3h后,即可在血清和尿液中檢測到NGAL,且NGAL的水平與腎臟缺血程度、持續(xù)時(shí)間成正比。在急性腎損傷中,尿液NGAL水平升高表現(xiàn)尤為明顯,具有較高的敏感性和特異性。血尿素氮作為腎功能監(jiān)測的指標(biāo)之一,但其受飲食、營養(yǎng)狀況影響較大,在本研究中,腎移植術(shù)后合并急性腎損傷時(shí),AKI各組的BUN值與NC組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,一方面可能與樣本數(shù)量偏少造成的偏倚,一方面與該值穩(wěn)定性較差,并不能很好地反映機(jī)體的腎功能狀態(tài)有關(guān)。相比之下,血清肌酐與體內(nèi)肌肉總量關(guān)系密切,不易受飲食影響,在該研究也顯示出其作為腎功能監(jiān)測指標(biāo)的優(yōu)勢;尿液中NGAL水平較正常對照組明顯升高,均值>100mg/L,遠(yuǎn)高于正常對照組<50mg/L水平,同時(shí)與患者的eGFR呈負(fù)性相關(guān),與文獻(xiàn)報(bào)道一致。其在本實(shí)驗(yàn)中,NGAL呈現(xiàn)出良好的敏感性和特異性,說明尿液NGAL的增高有可能成為診斷早期急性腎損傷的敏感生物學(xué)指標(biāo)。從病理生理學(xué)角度上分析,患者發(fā)性急性腎損害時(shí),NGAL作為急性期反應(yīng)蛋白,參與免疫應(yīng)答及趨化作用,并通過轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞內(nèi)鐵質(zhì),抑制氧化應(yīng)激反應(yīng),清除自由基,減少對腎臟上皮細(xì)胞的應(yīng)激損傷;同時(shí),作為炎性蛋白,NGAL可介導(dǎo)中性粒細(xì)胞凋亡,減輕炎癥介質(zhì)對機(jī)體正常細(xì)胞的破壞,促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞的恢復(fù)、再生和修復(fù)。本研究提示,檢測尿液NGAL的水平在AKI患者中明顯升高,且隨著病情進(jìn)展在不同分期中表達(dá)進(jìn)行性增強(qiáng),與腎小球?yàn)V過率估算值呈正相關(guān),有助于腎病綜合征合并急性腎損傷的早期診斷和預(yù)后評估。

本研究不足之處在于研究樣本數(shù)量較小,統(tǒng)計(jì)學(xué)上未行ROC曲線繪制,并進(jìn)行檢驗(yàn)指標(biāo)的特異性、敏感性等分析。在今后的工作中,我們將進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量,并將NGAL在體液中的水平與其他生物學(xué)檢驗(yàn)指標(biāo)作對照,通過篩選、比較、分析,全面衡量NGAL表達(dá)水平與病情嚴(yán)重程度的關(guān)系,評估其在早期診斷AKI的檢驗(yàn)學(xué)價(jià)值,進(jìn)一步證實(shí)尿液NGAL作為早期診斷指標(biāo)的優(yōu)越性??傊?,尿液NGAL取材方便、操作快捷,檢測過程簡便易行,可作為腎移植術(shù)后高危人群的監(jiān)測指標(biāo)在臨床工作中推廣應(yīng)用。

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