王宏偉　曹明智　張金玉　張　崢　王秀麗　葛銀林

摘要：選擇血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)基因為靶基因，設(shè)計兩組針對VEGF mRNA的小干擾RNA，合成DNA寡核苷酸鏈，體外轉(zhuǎn)錄合成siRNA。以人大腸癌細(xì)胞系HT-29為靶細(xì)胞，應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法，將siRNA導(dǎo)入細(xì)胞。MTT法檢測siRNA對細(xì)胞增殖率的影響，RT-PCR法比較轉(zhuǎn)染前后VECF mRNA表達(dá)水平的變化，ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中VEGF蛋白分泌量的變化。結(jié)果表明，兩組siRNA轉(zhuǎn)染后均能有效地抑制HT-29細(xì)胞的生長，VEGF mRNA的表達(dá)量大幅度減少；相對應(yīng)的VEGF蛋白水平也顯著降低，而作為陰性對照的錯義序列組siRNA轉(zhuǎn)染后則無上述作用。

關(guān)鍵詞：小干擾RNA；HT-29；血管內(nèi)皮生長因子；基因治療

中圖分類號：Q753；R392．11

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1007—7847(2005)04—0356—05