蔣向輝+苑靜

摘要：以魚的常規(guī)飼料和四棱豆作添加劑的飼料為對(duì)照，探討了金銀花作添加劑的魚飼料對(duì)青、草、鳙、鯉4種家魚生長(zhǎng)情況的影響。結(jié)果表明：金銀花飼料對(duì)4種魚體質(zhì)量的影響都是呈前期減少，后期增加的趨勢(shì)；而四棱豆飼料飼養(yǎng)的魚一直表現(xiàn)體質(zhì)量增加的趨勢(shì)；金銀花飼料飼養(yǎng)的魚在前期的排泄物明顯增多，后期則慢慢減少；金銀花飼料對(duì)魚的成活率也有顯著影響，金銀花飼料喂養(yǎng)的草魚成活率最低，且金銀花與飼料的比例為1 ∶[KG-3]1時(shí)，4種魚成活率都最低，隨著金銀花比例降低，成活率增高，當(dāng)且金銀花與飼料的比例為1 ∶[KG-3]4時(shí)，4種魚的成活率都比常規(guī)飼料喂養(yǎng)時(shí)要高。研究認(rèn)為，金銀花飼料對(duì)不同的魚有不同的影響，金銀花飼料對(duì)鳙魚、草魚體質(zhì)量的增加是有利的，且效果好于四棱豆，而對(duì)鯉魚、青魚的效果則不及四棱豆飼料。金銀花飼料能有效增強(qiáng)魚類肝臟總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性，減少丙二醛含量，且這種作用在鯉魚表現(xiàn)較為明顯，而青魚中相對(duì)較弱。

關(guān)鍵詞：金銀花；草魚；青魚；鯉魚；鳙魚；飼料；生長(zhǎng)

中圖分類號(hào)： S963文獻(xiàn)標(biāo)志碼：

文章編號(hào)：1002-Q949.921302（2016）07-0309-04

金銀花（Lonicera japonica Thunb.）系忍冬科忍冬屬多年生常綠藤本植物，別稱金花、銀花和忍冬花。其藥用價(jià)值較高，具有廣譜抗菌和散風(fēng)消腫的功效。常用于清熱解毒、治療癰腫疔瘡、丹毒和血痢等病癥[1]，近年來(lái)被逐漸推廣到飼料添加劑領(lǐng)域。大量的研究表明[2-5]，金銀花的主要成分中有木犀草素、異綠草酸、綠原酸、肌醇等多種藥效成分，對(duì)多種致病菌和病毒均有一定的抑制作用。金銀花中還含多種氨基酸、糖類和維生素以及大量生物體需要的微量元素，將金銀花開(kāi)發(fā)為一種魚飼料添加劑將有很好的發(fā)展前景。

在家魚喂養(yǎng)的過(guò)程中，飼料的種類與數(shù)量是決定養(yǎng)魚經(jīng)濟(jì)效益的最主要因素。因此，必須綜合考慮魚類生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)、抗病抑菌能力、對(duì)飼料的有效利用等多方面的因素，對(duì)飼料進(jìn)行科學(xué)配制、合理投放，才能既保證魚類健康生長(zhǎng)，又能增加魚肉的質(zhì)量與品質(zhì)，充分發(fā)揮魚飼料的最佳效能，獲得最佳的經(jīng)濟(jì)效益。目前，許多學(xué)者對(duì)不同種中草藥對(duì)鯉、鯽的生長(zhǎng)和免疫的影響進(jìn)行了相關(guān)研究[6-8]。四棱豆系藥食兩用植物，其種子、塊根、嫩莢、嫩葉均含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)[9]，這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)均能被魚所利用，四棱豆中含有的黃酮類化合物是其主要的抗氧化、抑菌、消炎成分[10]。金銀花中含有豐富的有機(jī)酸類、黃酮類、三萜皂苷類、微量元素類等有效成分，具有抑菌、抗病毒、增強(qiáng)免疫力、抗氧化等生物活性[11]。四棱豆與金銀花都含有豐富的黃酮類化合物而表現(xiàn)出良好的抗氧化和抑菌活性，而兩者由于活性成分種類及含量的差異在作為飼料添加劑時(shí)又表現(xiàn)了不同的效能，四棱豆作為一種增加蛋白質(zhì)含量的飼料添加劑逐步得到了推廣和應(yīng)用，而金銀花作為飼料添加劑在增強(qiáng)魚類免疫力方面有良好的發(fā)展前景。因此，本研究以魚的常規(guī)飼料和四棱豆作添加劑的飼料為對(duì)照，探討藥用金銀花作添加劑的魚飼料對(duì)青、草、鳙、鯉4種家魚生長(zhǎng)情況的影響，為研制出既能保證魚類生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)成分又能增強(qiáng)魚類免疫力的金銀花魚飼料提供參考。

1材料與方法

1.1材料

青、草、鳙、鯉4種家魚苗各5 000尾，金銀花與四棱豆干樣，魚飼料（青干草粉40%、棉籽餅粉30%、豆餅粉10%、菜籽餅粉5%、蠶蛹粉5%、魚粉5%、大麥粉5%），F(xiàn)W177系列中草藥粉碎機(jī)、1.5 m×1.5 m×1.5 m玻璃缸、萬(wàn)分之一電子分析天平、制氧機(jī)等。

1.2方法

1.2.1飼料的制備

將金銀花和四棱豆分別用小型粉碎機(jī)粉碎，過(guò)60目網(wǎng)篩，再把飼料粉碎成細(xì)末，根據(jù)前期預(yù)備試驗(yàn)顯示，當(dāng)采用魚飼料和金銀花質(zhì)量比為1 ∶[KG-3]2喂養(yǎng)魚時(shí)，魚的成活率不足50%；而當(dāng)魚飼料和金銀花質(zhì)量比為4 ∶[KG-3]5時(shí)，魚成活率在90%以上；當(dāng)采用魚飼料和四棱豆質(zhì)量比為1 ∶[KG-3]1、2 ∶[KG-3]1、4 ∶[KG-3]1喂養(yǎng)魚時(shí)，魚的成活率均在90%以上；本研究將飼料和金銀花分別按質(zhì)量比為1 ∶[KG-3]1、2 ∶[KG-3]1、3 ∶[KG-3]1、4 ∶[KG-3]1的比例進(jìn)行混合，飼料和四棱豆按質(zhì)量比為4 ∶[KG-3]1的比例進(jìn)行混合，都以蒸餾水?dāng)嚢杌靹?，制?.0 mm顆粒烘干后干燥備用。

1.2.2喂養(yǎng)

用于喂養(yǎng)常規(guī)飼料的玻璃缸3個(gè)、用于喂養(yǎng)金銀花飼料的玻璃缸12個(gè)、用于喂養(yǎng)四棱豆飼料的玻璃缸3個(gè)，并貼上標(biāo)簽，放入半缸水。將青、鳙、鯉、草魚各選150尾分別放入不同玻璃缸。在缸內(nèi)裝好制氧機(jī)，隔天定期喂養(yǎng) 15 g 混合飼料。

1.2.3稱質(zhì)量與觀察

把魚分裝好后第1次稱體質(zhì)量，數(shù)據(jù)精確到小數(shù)點(diǎn)后2位。每隔15 d稱1次，且每隔2 d換1次水，換水后同樣向3個(gè)缸加入等量的對(duì)應(yīng)的飼料顆粒，每天進(jìn)行觀察。

1.2.4消化酶活性測(cè)定

胃、腸蛋白酶活性測(cè)定參照周惠等的方法[12]。

1.2.5金銀花飼料對(duì)魚脾臟相對(duì)質(zhì)量的影響

分別切取金銀花飼料與常規(guī)飼料喂養(yǎng)的不同種類魚的脾臟稱質(zhì)量，參照王吉橋等等的方法[13]計(jì)算脾臟與魚體質(zhì)量的相對(duì)比，即脾臟體質(zhì)量/魚總體質(zhì)量×100%。

1.2.6血清和肝臟抗氧化指標(biāo)測(cè)定

參照魏炳棟等的方法[14]，采用紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)測(cè)定魚肝臟總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性以及丙二醛（MDA）含量。

1.2.7數(shù)據(jù)處理[JP3]

根據(jù)不同種類魚的生長(zhǎng)情況，最后計(jì)算魚的相對(duì)生長(zhǎng)率與成活率。借助 SPSS 16.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在 ANOVA 過(guò)程中先對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，若有顯著差異，再作LSD多重比較。相關(guān)計(jì)算公式：成活率=（試驗(yàn)?zāi)┗铘~總數(shù)/試驗(yàn)初投入魚的總數(shù)）×100%；相對(duì)生長(zhǎng)率=（魚的最終體質(zhì)量-最初體質(zhì)量）/最初體質(zhì)量×100%。

2結(jié)果與分析

2.1不同配比金銀花飼料對(duì)魚成活率的影響

金銀花飼料缸中，可能由于金銀花中有部分藥用成分對(duì)魚的生長(zhǎng)有一定的毒害作用，隨著金銀花比例的增高，魚的成活率逐漸降低，但由于鯉魚生性好動(dòng)，生活力強(qiáng)，在常規(guī)飼料 ∶[KG-3]金銀花比為1 ∶[KG-3]1的缸中，其成活率在60%以上，其他魚種成活率均在50%以下（表1）。隨著金銀花比例的減少，在常規(guī)飼料 ∶[KG-3]金銀花比為4 ∶[KG-3]1的缸中各種魚的成活率在90%以上，其中鯉魚、鳙魚的成活率最高，青魚次之，草魚最低。

2.2金銀花飼料對(duì)魚體質(zhì)量生長(zhǎng)的影響

由圖1可知，僅以常規(guī)飼料喂養(yǎng)的鯉魚的體質(zhì)量變化不明顯，表明鯉魚在用常規(guī)飼料喂養(yǎng)時(shí)，很快就能適應(yīng)新的環(huán)境，但前2個(gè)月增長(zhǎng)不明顯。以常規(guī)飼料加四棱豆喂養(yǎng)的鯉魚體質(zhì)量在2個(gè)月內(nèi)逐漸增加，表明四棱豆對(duì)魚的生長(zhǎng)沒(méi)有產(chǎn)生不良影響，反而促進(jìn)了魚的生長(zhǎng)，可能是由于四棱豆種子含有豐富的蛋白質(zhì)，給鯉魚提供了較豐富的氨基酸營(yíng)養(yǎng)，有效地促進(jìn)了鯉魚的生長(zhǎng)。而以常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）喂養(yǎng)的鯉魚在第2次稱量時(shí)，有體質(zhì)量減小的現(xiàn)象，可能是由于環(huán)境和飼料的變化，對(duì)鯉魚的生長(zhǎng)影響較大，而第3次、第4次稱量時(shí)則呈鯉魚質(zhì)量緩慢增加，表明鯉魚對(duì)金銀花飼料已經(jīng)能慢慢接受，由于體質(zhì)的某些變化能將金銀花中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為自己所需要的營(yíng)養(yǎng)，從而促進(jìn)其生長(zhǎng)。結(jié)果表明，金銀花飼料也有利于鯉魚的生長(zhǎng)，但其對(duì)鯉魚體質(zhì)量增長(zhǎng)的效果不如四棱豆明顯。

魚類對(duì)新飼料和環(huán)境的變化的選擇能力由魚類對(duì)飼料生物的喜好性和飼料對(duì)魚類的易得性決定。青魚的生活習(xí)性不太活潑，主要棲息在水層的中下部，成魚好以螺螄、蚌、蛤等軟體動(dòng)物為食；而在幼魚階段，好以浮游動(dòng)物和微生物為食。由圖2可知，僅以常規(guī)飼料喂養(yǎng)的青魚體質(zhì)量一直呈減少的趨勢(shì)，說(shuō)明青魚的生長(zhǎng)對(duì)環(huán)境條件的改變較為敏感，但后來(lái)體質(zhì)量減輕的速度越來(lái)越小，表明青魚已逐漸適應(yīng)環(huán)境條件的改變。以常規(guī)飼料加四棱豆喂養(yǎng)的青魚體質(zhì)量一直在逐漸增加，青魚能夠消化四棱豆中的蛋白質(zhì)，從而得到了所需要的氨基酸類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但越到后面增加的幅度越小，可能是由于青魚喜肉食，飼料條件影響其體質(zhì)量的增加。以常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）喂養(yǎng)的青魚第2次稱質(zhì)量時(shí)體質(zhì)量有所減小，可能是由于短期內(nèi)青魚不能適應(yīng)金銀花飼料喂養(yǎng)的環(huán)境。而第3次、第4次稱量時(shí)，體質(zhì)量有所增加，但差異不顯著。金銀花飼料對(duì)青魚體質(zhì)量的增加效果不明顯。結(jié)果表明，對(duì)青魚而言，金銀花飼料沒(méi)有四棱豆飼料的效果好。

鳙魚通常生活在水層的中上部，其運(yùn)動(dòng)較為緩慢，且不喜歡跳躍，好以浮游生物和藻類為食，鳙魚的抗低氧能力最弱，對(duì)環(huán)境的改變適應(yīng)能力較弱。由圖3可知，以常規(guī)飼料、四棱豆飼料喂養(yǎng)的魚體質(zhì)量一直減少，直到后期體質(zhì)量才有略微增加，說(shuō)明鳙魚不能很快適應(yīng)新的環(huán)境，且不能利用四棱豆中的高蛋白，而常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）飼料喂養(yǎng)的魚體質(zhì)量一直增長(zhǎng)，前期增長(zhǎng)較小，可能是由于鳙魚適應(yīng)新環(huán)境時(shí)產(chǎn)生的應(yīng)激引起的，而第3次、第4次稱量時(shí)，體質(zhì)量都有明顯的增加，且增幅越來(lái)越大，說(shuō)明鳙魚能利用金銀花中的有效物質(zhì)。所以四棱豆飼料不利于鳙魚的生長(zhǎng)，而金銀花飼料則對(duì)鳙魚的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。

草魚生性活潑，以草為食，也可以輔助人工飼料。由圖4可知，以常規(guī)飼料和四棱豆飼料喂養(yǎng)的草魚體質(zhì)量一直呈下降趨勢(shì)，可能是由于青飼料補(bǔ)充不夠，草魚得不到所需的營(yíng)養(yǎng)，只有用常規(guī)飼料加金銀花（4 ∶[KG-3]1）飼料喂養(yǎng)的草魚的體質(zhì)量有稍上升的趨勢(shì)，表明金銀花飼料對(duì)草魚的生長(zhǎng)有利。

綜上所述，金銀花飼料對(duì)鳙魚、草魚體質(zhì)量的增加是有利的，且效果好于四棱豆，而對(duì)鯉魚、青魚的效果則不及四棱豆飼料。

2.3金銀花對(duì)魚生理反應(yīng)的影響

每次換水時(shí)，將排泄物進(jìn)行收集，由于魚在前期不能完全吸收金銀花及四棱豆中的部分成分，在水缸中時(shí)，金銀花飼料

缸里的排泄物呈細(xì)小的圓筒狀，四棱豆飼料缸里則成細(xì)小的粉末狀，收集后發(fā)現(xiàn)金銀花飼料缸里的排泄物是棕灰色的，很黏稠，且氣味很濃，而四棱豆飼料缸中的排泄物，收集出來(lái)后呈灰白色，沒(méi)有明顯的氣味。常規(guī)魚飼料喂養(yǎng)的缸中由于魚生長(zhǎng)代謝正常，收不到明顯的排泄物。

2.4金銀花飼料對(duì)魚脾臟相對(duì)質(zhì)量變化的影響

攝食金銀花飼料的青、草、鳙、鯉4種家魚脾臟相對(duì)質(zhì)量都比對(duì)照組（常規(guī)飼料喂養(yǎng)）高，分別高13.10%、9.27%、1531%、7.86%，差異達(dá)到顯著水平（P<0.05），結(jié)果（表2）顯示鯉魚脾臟相對(duì)質(zhì)量最小，鳙魚脾臟相對(duì)質(zhì)量最大，這可能與不同魚類對(duì)金銀花副作用的緩解能力不同有關(guān)。魚的胸腺、腎臟和脾臟是其主要的免疫器官，大量的研究表明，魚類免疫器官的質(zhì)量與其免疫能力的強(qiáng)弱有密切的關(guān)系[15]。對(duì)金銀花飼料飼養(yǎng)的魚肝臟、脾臟顏色、成分等各方面的變化還有待進(jìn)一步的研究。

2.6金銀花飼料對(duì)魚肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過(guò)氧化物酶是動(dòng)物體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)中的重要酶系，丙二醛是細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)物，其含量可間接反映細(xì)胞的損傷程度。由表4可知，不同飼料添加劑對(duì)肝臟抗氧化酶及丙二醛含量有明顯影響。金銀花飼料喂養(yǎng)的魚中，除青魚外，其他魚類肝臟總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性極顯著高于四棱豆飼料喂養(yǎng)的魚（P<0.01），MDA含量在2種飼料喂養(yǎng)的魚之間有顯著的差異（P<0.05）；青魚無(wú)論是用金銀花飼料喂養(yǎng)還是用四棱豆飼料喂養(yǎng)，肝臟中總超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性都較低，丙二醛含量也相應(yīng)較高；而鯉魚則恰好相反，這可能與2種魚的抗氧化能力有關(guān)，鯉魚抗氧化能力較強(qiáng)，表現(xiàn)為與抗氧化能力相關(guān)的酶的活性較高。

3討論

本研究發(fā)現(xiàn)用金銀花飼料喂魚時(shí)，在幼魚生長(zhǎng)的前期，魚的生長(zhǎng)受到一定的抑制，其體質(zhì)量表現(xiàn)都有輕微的減小現(xiàn)象，但隨著時(shí)間的增加，魚的體質(zhì)量逐漸增加。在成活率方面，前期，草魚最容易死亡，可能是由于草魚是一種草食性魚類，且食量大，在缸里飼養(yǎng)不能滿足其對(duì)青飼料的需求，導(dǎo)致其容易

死亡；中期，鳙魚陸續(xù)死亡，可能是由于鳙魚抗低氧能力較差且以浮游生物、菌落為食。金銀花飼料喂養(yǎng)的鳙魚成活率最高，且體質(zhì)量一直增長(zhǎng)，后期表現(xiàn)更為明顯，但常規(guī)飼料和四棱豆飼料喂養(yǎng)的鳙魚體質(zhì)量一直呈減小的趨勢(shì)，直到后期體質(zhì)量才有略微增加，可能是由于鳙魚好以浮游生物、菌落為食，而金銀花飼料對(duì)進(jìn)入體內(nèi)的不良菌落有一定的抑制作用。趙銀麗等研究金銀花內(nèi)生真菌對(duì)鯉魚腸道菌群的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，在魚飼料中添加一定量的金銀花可以抑制部分致病菌的生長(zhǎng)，且可以增加某些有益菌的種類和數(shù)量，對(duì)改善腸道微生態(tài)系統(tǒng)有很好的效果[16]。

金銀花飼料喂養(yǎng)的魚前期的排泄物明顯增多，排泄物呈棕灰色黏稠狀，且味較濃，用其他2種飼料喂養(yǎng)的魚缸里沒(méi)有明顯的條狀排泄物。影響魚排泄物的因素有攝食量、食物的組成、體質(zhì)量和溫度等多方面的原因。蛋白質(zhì)作為能源在魚體內(nèi)分解，其能量不能全部被魚所利用，部分能量物質(zhì)會(huì)被排泄到體外，魚類氮排泄物的來(lái)源除了飼料蛋白之外，還有由于魚體正常新陳代謝與適應(yīng)環(huán)境中引起組織蛋白的分解。周洪琪等研究表明，魚類排泄的氮以氨態(tài)氮和尿素為主[17]，本研究中發(fā)現(xiàn)，不同飼料喂養(yǎng)的魚排泄物氣味不同可能與排泄物中氮的形態(tài)不同有關(guān)，對(duì)魚排泄物的成分還需進(jìn)行下一步研究和探討。

魚類生活在水中，由于水溫相對(duì)恒定且有一定的浮力，魚類為維持體溫和維持身體平衡消耗的能量少，魚類的代謝產(chǎn)物是氨和氮，它們的生活、生長(zhǎng)、繁殖所需的能量主要是由體內(nèi)的蛋白質(zhì)提供。因此，魚類所需要的蛋白質(zhì)比其他動(dòng)物要高，魚類對(duì)氨基酸的需求也不少于10種，尤其對(duì)蛋氨酸、賴氨酸的需求最高[18]。研究結(jié)果表明，用四棱豆加常規(guī)飼料喂養(yǎng)時(shí)，對(duì)鯉魚與青魚的生長(zhǎng)都有明顯的促進(jìn)作用，這與四棱豆種子含有豐富的蛋白質(zhì)有關(guān)，能為魚類提供豐富的氨基酸，對(duì)于生長(zhǎng)健康、環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)的魚類四棱豆是一種很好的魚飼料添加劑。

大量研究表明，中草藥中由于有生物堿、多糖、皂苷、蒽類、揮發(fā)油和有機(jī)酸等多種有效成分，這些都與動(dòng)物的免疫能力緊密相關(guān)[19]。本研究表明金銀花作為魚飼料添加劑用于家魚養(yǎng)殖，在促生長(zhǎng)、增強(qiáng)代謝和提高飼料轉(zhuǎn)化上均能取得良好的效果，進(jìn)一步改良金銀花與常規(guī)魚飼料的配比，開(kāi)發(fā)金銀花魚飼料添加劑將有很好的發(fā)展前景。

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