陳靖云，張莉，王安燕，虞崇慶，王敏珠，李德升

(國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局，杭州醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，杭州 310009)

分光光度法測(cè)定人工晶狀體中清洗劑磺基琥珀酸二辛酯鈉殘留

陳靖云，張莉，王安燕，虞崇慶，王敏珠，李德升

(國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局，杭州醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，杭州 310009)

建立分光光度法分析眼科植入物人工晶體中清洗劑磺基琥珀酸二辛酯鈉殘留的方法?；腔晁岫刘ピ谒嵝运芤航橘|(zhì)中與亞甲基藍(lán)形成離子對(duì)，用三氯甲烷提取并在651 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度?；腔晁岫刘モc的質(zhì)量濃度在1.0～5.0 μg／mL內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系，線性相關(guān)系數(shù)r2=0.990 1，檢出限為0.4 μg／mL。測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.21%(n=6)，日間重復(fù)性為2.06%(n=6)；加標(biāo)回收率為90%～97%。該方法檢出限低，再現(xiàn)性好，適用于人工晶狀體中磺基琥珀酸二辛酯鈉殘留量的測(cè)定。

分光光度法法；人工晶狀體；磺基琥珀酸二辛酯鈉；絡(luò)合物

1949年英國(guó)的Harold Ridley［1］首次將聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)人工晶狀體(IOL)植入人的眼球，揭開了白內(nèi)障病人恢復(fù)視力的最有效方法；Epstein于1976年將首枚軟性晶體植入人眼［2］。然而人工晶體的材料、類型、加工過(guò)程及在小切口白內(nèi)障手術(shù)中的應(yīng)用諸多方面均有待于進(jìn)一步研究。例如人工晶狀體材料中對(duì)人體有害的小分子或低聚物等是否會(huì)在體液中溶出、析出，這是對(duì)人體構(gòu)成危害的關(guān)鍵因素，同時(shí)也會(huì)影響IOL植入手術(shù)是否成功，因此需要建立可靠方法檢測(cè)有害物質(zhì)，以便控制人工晶狀體的質(zhì)量。YY 0290.5–2008《 眼科光學(xué)人工晶狀體》第5部分明確提出對(duì)眼科植入物人工晶體產(chǎn)品中濾離物成分進(jìn)行定量和定性分析的技術(shù)要求。標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)濾離物進(jìn)行說(shuō)明，如加工可能產(chǎn)生的雜質(zhì)、殘留單體或添加劑以及其它的溶出成分。人工晶狀體在生產(chǎn)過(guò)程中往往會(huì)采用清洗這一程序，這樣就會(huì)引入清洗劑殘留，該殘留直接關(guān)系到產(chǎn)品質(zhì)量及其安全性，應(yīng)明確其在各類人工晶體中的殘留量。因此建立一種科學(xué)、精確、有效、可行的殘留檢測(cè)方法是當(dāng)務(wù)之急。

目前人工晶體使用最多的清洗劑是易溶于水的陰離子表面活性劑磺基琥珀酸二辛酯鈉及十二烷基苯磺酸，有研究報(bào)道這種陰離子表面活性劑進(jìn)入人體后，會(huì)出現(xiàn)肝臟損害、脾臟縮小、體重增加等慢性癥狀，甚至具有致畸性和致癌性，給人類健康帶來(lái)嚴(yán)重威脅［3–8］。關(guān)于十二烷基苯磺酸殘留的測(cè)定方法較多［9–14］，而關(guān)于人工晶體中陰離子表面活性劑磺基琥珀酸二辛酯鈉殘留的分析未見報(bào)道。在進(jìn)行眼科植入物人工晶體殘留分析時(shí)，往往先采用某種合適的浸提液對(duì)成品進(jìn)行萃取，再對(duì)萃取液中所有濾離物進(jìn)行分析。當(dāng)測(cè)定基體復(fù)雜的低濃度殘留物如磺基琥珀酸二辛酯鈉時(shí)，樣品中的雜質(zhì)峰會(huì)干擾其準(zhǔn)確定量，因此目前還沒(méi)有有效的方法對(duì)該類樣品進(jìn)行檢測(cè)。基于磺基琥珀酸二辛酯在酸性水溶液介質(zhì)中與亞甲基藍(lán)形成離子對(duì)的原理，筆者采用分光光度法測(cè)定該絡(luò)合物的存在，以此建立了眼科植入物人工晶狀體中磺基琥珀酸二辛酯鈉殘留量的方法，該方法測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

紫外–可見分光光度計(jì)：UV–2550型，日本島津公司；

超純水系統(tǒng)：美國(guó)Millipore公司；

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：R–502型，上海科興儀器有限公司；

索氏提取器：X0134–125型，杭州曠維實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司；

磺基琥珀酸二辛酯鈉對(duì)照品：美國(guó)Sigma–Aldrich公司

三氯甲烷：色譜純；

無(wú)水硫酸鈉、亞甲基藍(lán)、濃硫酸：分析純；

實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

1.2 溶液配制

亞甲基藍(lán)溶液：精密稱取約0.5 g亞甲基藍(lán)至100.0 mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線。

酸性洗滌液：精密加入120 mL 1 mol／L的硫酸至500 mL水中，然后稀釋至1 L。

酸性亞甲基藍(lán)溶液：加入120 mL的1 mol／L的硫酸至500 mL水中，加入50 g的無(wú)水硫酸鈉和6 mL的亞甲基藍(lán)溶液，用水稀釋至1 L。

磺基琥珀酸二辛酯鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：25.0 μg／mL，稱取約62.5 mg的磺基琥珀酸二辛酯鈉至250.0 mL容量瓶中，并用水稀釋至標(biāo)線，使用時(shí)進(jìn)一步稀釋至25 μg／mL。

磺基琥珀酸二辛酯鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：3 μg／mL，移取3.0 mL磺基琥珀酸二辛酯鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至25 mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。

1.3 磺基琥珀酸二辛酯鈉的提取方法

1.3.1 索氏提取器準(zhǔn)備

使用前需要徹底清洗并烘干索氏提取器、玻璃器皿、沸騰石以及樣品小瓶(使用20%的Micro-90去污劑在50～75℃下超聲清洗10～30 min，然后用大量的超純水沖洗后，再用相應(yīng)萃取劑沖洗)，并將所有的玻璃器皿在(120±10)℃下干燥至恒重，備用。

將編號(hào)1到6的索氏提取器組裝起來(lái)，將冷卻裝置設(shè)定為5℃，分為兩組，各加入相應(yīng)萃取劑，然后讓每個(gè)索氏提取器運(yùn)行1～2 h以調(diào)整儀器狀態(tài)。最終調(diào)整為以4～6次／h的萃取速率沖刷套管，然后讓儀器自然冷卻，并丟棄萃取劑。

1.3.2 提取方法

稱取200 mg經(jīng)滅菌的人工晶狀體成品兩份，用超純水100 mL(約占索氏提取器接收瓶的70%體積)萃取6 h，同時(shí)進(jìn)行只有溶劑的空白對(duì)照試驗(yàn)。然后分別取1 mL樣品溶液、標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液和純水至不同的試管中(以水作為空白)。

1.4 檢測(cè)方法

在上述1 mL試樣溶液中分別加入1.0 mL的酸性亞甲基藍(lán)溶液混合后，分別加入3.0 mL三氯甲烷混合15 min，反應(yīng)完全后重復(fù)分離(加入8 mL 1.1中的酸性洗滌液劇烈混合10 min，離心分離去除上層水相)直至無(wú)水相出現(xiàn)。取出三氯甲烷層，以空白液為參比在651 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。

2 結(jié)果與討論

2.1 三氯甲烷的用量

相比是影響萃取率的一個(gè)重要因素，保持水相不變，即在酸性亞甲基藍(lán)溶液和酸性溶液含量不變的前提下，逐漸改變?nèi)燃淄榈挠昧?，測(cè)定651 nm處的吸光度，結(jié)果見表1。根據(jù)表1數(shù)據(jù)確定三氯甲烷的最佳用量為3 mL。

表1 不同氯仿用量對(duì)應(yīng)的吸光度

2.2 提取混合時(shí)間

在試液中加入3 mL三氯甲烷后充分震蕩混合，選擇混合時(shí)間分別為5，10，15，20，30 min進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見表2。由表2可知，當(dāng)混合時(shí)間為15 min時(shí)，提取比較完全，因此實(shí)驗(yàn)選擇提取混合時(shí)間為15 min。

表2 不同混合時(shí)間對(duì)應(yīng)的吸光度

2.3 干擾試驗(yàn)

在人工晶體生產(chǎn)加工中往往使用多種清洗劑，最常見的是十二烷基苯磺酸與磺基琥珀酸二辛酯鈉同時(shí)清洗，按照美國(guó)愛(ài)爾康公司丙烯酸酯人工晶體生產(chǎn)工藝中加入的清洗劑配方，配制含兩種比例(清洗液中含十二烷基苯磺酸0.5%、磺基琥珀酸二辛酯鈉0.5%；含十二烷基苯磺酸0.7%、磺基琥珀酸二辛酯鈉0.3%)的清洗劑溶液對(duì)人工晶體進(jìn)行清洗后，按1.2方法提取兩種清洗劑殘留后進(jìn)行分析。結(jié)果表明，651 nm波長(zhǎng)處的吸光度均與空白值相當(dāng)，清洗劑十二烷基苯磺酸不影響磺基琥珀酸二辛酯鈉的殘留測(cè)定，因此該方法具有專屬性。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線及檢出限

以純水為參比，移取不同量的磺基琥珀酸二辛酯鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，分別用水稀釋定容，得到質(zhì)量濃度分別為1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 μg／mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。按1.3方法分別測(cè)定吸光度，以溶液的質(zhì)量濃度X為橫坐標(biāo)、吸光度Y為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得回歸方程為Y＝0.102 5X–0.064 1，r2=0.990 1，線性范圍為1.0～5.0 μg／mL。

移取3份1.0 μg／mL的磺基琥珀酸二辛酯鈉標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按1.3方法進(jìn)行測(cè)定，以3倍基線噪聲比(S／N=3)計(jì)算磺基琥珀酸二辛酯鈉的檢出限為0.4 μg／mL。

2.5 精密度試驗(yàn)

配制3 μg／mL的磺基琥珀酸二辛酯鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液試樣，平行測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果見表3。用同樣的試樣進(jìn)行日間重復(fù)性試驗(yàn)，結(jié)果見表4。

表3 精密度試驗(yàn)結(jié)果

表4 日間重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

由表3可知，磺基琥珀酸二辛酯鈉6次測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.21%。由表4可知，日間重復(fù)性為2.06%。

2.6 回收試驗(yàn)

向同一處理好的樣品中加入3種不同濃度的磺基琥珀酸二辛酯鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.3方法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果及回收率計(jì)算結(jié)果見表5。由表5可知，磺基琥珀酸二辛酯鈉的加標(biāo)回收率為90%～97%，表明該法測(cè)量準(zhǔn)確度較高。

表5 加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)分析眼科植入物人工晶體中的清洗劑，建立了分光光度法測(cè)定人工晶狀體中清洗劑磺基琥珀酸二辛酯鈉殘留量的分析方法。該方法靈敏度、精密度、專屬性和重現(xiàn)性均良好，可以作為人工晶狀體質(zhì)量安全控制的方法之一。

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Determination of Residue of Surfactant–Sodium Dioctyl Sulfosuccinate in Intraocular Lens by Spectrophotometry

Cheng Jingyun， Zhang Li， Wang Anyan， Yu Chongqinq， Wang Minzhu， Li Desheng
(Medical Device Supervising and Testing Center of Hangzhou， State Food and Drug Administration， Hangzhou 310009， China)

Spectrophotometric method was established for determining residue of sodium dioctyl sulfosuccinate in the detergent of artifcial lens. Sodium dioctyl sulfosuccinate reacted with methylene blue to form ion pair in the acidic solution. The ion pair was extracted by organic solvent chloroform and determined at 651 nm. The mass concentration of sodium dioctyl sulfosuccinate was linear with absorbance in the range of 1.0–5.0 μg／mL，the linear correlation coeffcient (r2) was 0.990 1，and the detection limit was 0.4 μg／mL. The relative standard deviation of the detection results was 1.21%(n=6)，and the daytime repeatability of experiment was 2.06%(n=6). The addition recovery rate ranged from 90% to 97%. This method has low detection limit and good reproducibility，it is suitable for the determination of sodium dioctyl sulfosuccinate residue in artifcial lens.

spectrophotometry; intraocular lens; sodium dioctyl sulfosuccinate; complex

O657.3

：A

：1008–6145(2017)01–0082–03

10.3969／j.issn.1008–6145.2017.01.021

聯(lián)系人：陳靖云；E-mail: 15906622672@139.com

2016–10–12