郭軍蕊 董曉芳佟建明

（中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193）

枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞生產(chǎn)性能、血常規(guī)指標、血清生化指標及
免疫球蛋白含量的影響

郭軍蕊 董曉芳?佟建明

（中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193）

本試驗旨在研究枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞生產(chǎn)性能、血常規(guī)指標、血清生化指標及免疫球蛋白含量的影響。選用27周齡健康的海蘭褐殼蛋雞360只，隨機分為5個組，每個組6個重復(fù)，每個重復(fù)12只雞。對照組（1組）飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組（2～5組）分別在基礎(chǔ)飼糧中添加1.0×105、1.0×106、1.0×107和1.0×108CFU/g枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921。試驗期24周。結(jié)果表明：各組產(chǎn)蛋率、采食量、蛋重、只產(chǎn)蛋量及死淘率均無顯著差異（P＞0.05），但試驗2、4、5組料蛋比顯著低于對照組（P＜0.05）；飼糧添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921顯著升高了血清葡萄糖含量（第2、3、12、16、20周）（P＜0.05），顯著降低了血清尿素含量（第2、3、8、12周）（P＜0.05）；飼糧添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921顯著提高了血液白細胞（第1、3、4、8、12、16、20、24周）和淋巴細胞數(shù)目（第2、3、4、8、12、16、20、24周）（P＜0.05），顯著升高了血清免疫球蛋白G（第1、4周）和免疫球蛋白M含量（第2、4、8、16周）（P＜0.05）。綜上所述，飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921降低了料蛋比，對血清葡萄糖、尿素含量和血常規(guī)指標指標有一定改善作用，且在一定程度上促進了蛋雞免疫力的提升。

蛋雞；枯草芽孢桿菌；生產(chǎn)性能；血常規(guī)指標；血清生化指標；免疫球蛋白

近些年來，微生物飼料添加劑在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用越來越廣泛。乳酸菌是目前認為應(yīng)用最早，為生產(chǎn)者、養(yǎng)殖者所認可的一種益生菌，而芽孢桿菌因其在高溫、酸性環(huán)境等不利條件下具有較高的穩(wěn)定性［1］也逐漸受到人們的青睞。其中，枯草芽孢桿菌已于1999年被農(nóng)業(yè)部列入《允許使用的飼料添加劑品種目錄》。研究表明，在動物飼糧中添加枯草芽孢桿菌，可以提高腸道蛋白酶、淀粉酶等消化酶的活性［2］，改善腸道結(jié)構(gòu)［3］，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率［4］，促進動物的生長發(fā)育［5-6］；抑制病原菌定植［7］，增強機體抗病能力［8］；減少有害物質(zhì)的排放，改善養(yǎng)殖環(huán)境［9-10］等。但關(guān)于枯草芽孢桿菌對產(chǎn)蛋雞的影響未見有進行長期連續(xù)性的觀察。本試驗旨在研究飼糧中添加不同水平的枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞生產(chǎn)性能、血常規(guī)指標、血清生化指標及免疫球蛋白含量的影響，為其在蛋雞飼糧中的應(yīng)用提供理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗菌種

試驗選用的枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921菌種購自中國普通微生物菌種保藏中心，由滄州華雨藥業(yè)有限公司生產(chǎn)制備，含量為 1.105× 1010CFU/g。

1.2 試驗動物與試驗設(shè)計

選用27周齡健康的海蘭褐殼蛋雞360只，隨機分為5組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)12只雞。1組為對照組，飼喂不添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921的基礎(chǔ)飼糧，試驗2～5組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加1.0×105、1.0×106、1.0×107和1.0×108CFU/g枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921。試驗期24周。基礎(chǔ)飼糧參照NRC（1994）蛋雞營養(yǎng)需要配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet（air-dry basis） %

1.3 飼養(yǎng)管理

采用 2層籠養(yǎng)，每個重復(fù)由相鄰 2籠組成（80 cm×60 cm×50 cm），每籠6只雞。每日飼喂3次，自由采食；乳頭式飲水器，自由飲水。采用16 h光照（06：00—22：00），自動控溫、供暖、通風。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能

試驗期間，以重復(fù)為單位每天記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、死淘雞只數(shù)，每周結(jié)料，稱取并記錄剩余料重，計算產(chǎn)蛋率、采食量、蛋重、料蛋比、只產(chǎn)蛋量和死淘率。

1.4.2 血清生化指標測定

試驗開始前（第0周）及試驗第 1、2、3、4、8、12、16、20、24周，以重復(fù)為單位隨機選取4只雞，采血前禁食12 h，自由飲水。通過翅下靜脈采集血液于普通真空采血管中，靜置待有少量血清析出后，2 000 r/min離心10 min，取上清液于EP管中待測。用日本東芝TBA-120FR全自動生化分析儀進行血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性及總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽紅素（TBIL）、葡萄糖（GLU）、尿素（UREA）、尿酸（UA）、肌酐（CREA）、甘油三酯（TG）和膽固醇（CHOL）含量的測定。

1.4.3 血常規(guī)指標測定

試驗開始前（第0周）及試驗第 1、2、3、4、8、12、16、20、24周，以重復(fù)為單位隨機選取4只雞，采血前禁食12 h，自由飲水。通過翅下靜脈采集血液分別于5 mL的乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝真空采血管和2 mL檸檬酸鈉抗凝真空采血管，輕輕混勻。采用電阻抗法，由江西特康全自動三分群血細胞分析儀（TEK-Ⅱmini）進行白細胞（WBC）、淋巴細胞（LYM）、中間細胞（MID）、中性粒細胞（NEU）、紅細胞（RBC）、血小板（PLT）數(shù)目及紅細胞壓積（HCT）和血紅蛋白（HGB）含量測定；采用魏氏法，由北京普利生XC-40B全自動RBC沉降率測定儀進行紅細胞沉降率（ESR）的測定。

1.4.4 血清免疫球蛋白含量的測定

采樣方法同1.4.2。血清中免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白 G（IgG）、免疫球蛋白 M（IgM）含量采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），按照上海朗頓生物科技有限公司提供的雞免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒進行測定。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計分析。采用單因素方差分析（one-way ANOVA）和最小顯著差數(shù)（LSD）法進行多重比較，顯著水平設(shè)為P＜0.05，試驗數(shù)據(jù)表示為平均值±標準差。

2 結(jié)果與分析

2.1 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對第1～24周產(chǎn)蛋率、蛋重、采食量、只產(chǎn)蛋量以及死淘率均無顯著影響（P＞0.05）；但試驗2、4、5組的料蛋比顯著低于對照組（P＜0.05），試驗3組料蛋比與其他各組之間無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清生化指標的影響

由表 3可知，試驗 2、5組（第 1周）的血清ALT活性顯著高于對照組（P＜0.05），而各試驗組（第 24周）血清 ALT活性有降低趨勢（P＝0.072）；對于血清AST活性，僅試驗3（第2周）、4（第8周）、5組（第3、20周）顯著高于對照組（P＜0.05）。

表2 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on performance of laying hens

表3 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清ALT和AST活性的影響Table 3 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on serum ALT and AST activities of laying hens U/L

由表4可知，試驗5組（第3周）的血清TP和GLB含量顯著高于其他各組（P＜0.05），試驗5組（第2周）血清ALB含量顯著高于對照組和試驗3組（P＜0.05），試驗2組（第2周）血清GLB含量顯著高于對照組和試驗3、5組（P＜0.05）。試驗2組（第2周）血清白蛋白/球蛋白（A/G）顯著低于對照組和試驗5組（P＜0.05），試驗5組（第3周）血清A/G顯著低于其他各組（P＜0.05）。

表4 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清TP、ALB、GLB含量及A/G的影響Table 4 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on serum TP，ALB，GLB content and A/G of laying hens

由表5可知，對于血清CREA含量，試驗5組（第16周）顯著高于對照組和試驗 2、3組（P＜0.05），試驗2（第 0、8周）、3（第 0周）、4（第 1、2周）、5組（第1周）顯著低于對照組（P＜0.05）。對于血清TBIL含量，試驗5組（第1周）顯著高于其他各組（P＜0.05），而其他各組（第3周）顯著低于對照組（P＜0.05）。

表5 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清CREA及TBIL含量的影響Table 5 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on serum CREA and TBIL contents of laying hens μmol/L

由表6可知，對于血清UREA含量，試驗2、3、5組（第1周）顯著高于對照組（P＜0.05），而試驗2（第8、12周）、4（第 3、12周）、5組（第 2、3、12周）顯著低于對照組（P＜0.05）；對于血清UA含量，試驗2、5組（第20周）顯著低于對照組和試驗3組（P＜0.05）。

由表7可知，對于血清GLU含量，試驗3（第1、8周）、4（第8周）、5組（第1、8周）顯著低于對照組（P＜0.05），試驗 2（第 12周）、3（第 2、3、20周）、4（第 3、12、16周）、5組（第 2、3、12、16、20周）顯著高于對照組（P＜0.05）。

其他時間點，各組間血清ALT、AST活性及TP、ALB、GLB、TBIL、CREA、UREA、UA含量和A/G（數(shù)據(jù)未列出）均無顯著差異（P＞0.05）。飼糧中添加枯草芽孢桿菌 CGMCC 1.921對血清CHOL和TG含量（數(shù)據(jù)未列出）無顯著影響（P＞0.05）。

表6 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清UREA及UA含量的影響Table 6 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on serum UREA and UA contents of laying hens

表7 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清GLU含量的影響Table 7 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on serum GLU content of laying hens mmol/L

綜上所述，飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921除在一定程度上升高了血清GLU含量，降低了UREA含量之外，在整個試驗期對其他血清生化指標的影響不大。

2.3 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血常規(guī)指標的影響

由表8可知，對于血液WBC數(shù)目，試驗2（第1、12、16、24周）、3（第 3、16、20、24周）、4（第 1、3、4、8、16、20、24周）、5組（第 1、3、4、8、20、24周）顯著高于對照組（P＜0.05），試驗2組（第12周）顯著高于試驗3、4組（P＜0.05），試驗3組（第20周）顯著高于試驗2組（P＜0.05），試驗4組（第3、4周）顯著高于試驗2、3組（P＜0.05），試驗4組（第8、20周）顯著高于其他各組（P＜0.05），試驗5組（第1周）顯著高于其他各組（P＜0.05），試驗5組（第3、4、20周）顯著高于試驗2組（P＜0.05）。

由表9可知，對于血液LYM數(shù)目，試驗2（第12、16、24周）、3（第2、3、4、20、24周）、4（第 3、4、8、20、24周）、5組（第3、4、8、20、24周）顯著高于對照組（P＜0.05），而試驗4組（第0、12、16周）顯著低于其他各組（P＜0.05），試驗2組（第4周）顯著低于對照組（P＜0.05），試驗3、4、5組（第3、4、8周）顯著高于試驗2組（P＜0.05）。

由表10可知，對于血液MID數(shù)目，試驗2（第1、12周）、3（第16周）、4（第0、12、16、20、24周）、5組（第0、1、3、12、16、20、24周）顯著高于對照組（P＜0.05），試驗4、5組（第0、20、24周）顯著高于其他各組（P＜0.05），試驗5組（第1、3周）顯著高于試驗3、4組（P＜0.05）。

表8 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液WBC數(shù)目的影響Table 8 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on blood WBC count of laying hens 109/L

表9 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液LYM數(shù)目的影響Table 9 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on blood LYM count of laying hens 109/L

表10 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液MID數(shù)目的影響Table 10 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on blood MID count of laying hens 109/L

由表11可知，對于血液NEU數(shù)目，試驗2（第1周）、3（第 16周）、4（第 0、12、16、24周）、5組（第0、12、16、24周）顯著高于對照組（P＜0.05），試驗3組（第 0、2、20周）顯著低于對照組（P＜0.05），試驗4、5組（第0、12、24周）顯著高于試驗2、3組（P＜0.05）。

表11 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液NEU數(shù)目的影響Table 11 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on blood NEU count of laying hens 109/L

由表12可知，對于血液RBC數(shù)目，試驗2（第1、3周）、4（第2、12周）、5組（第1、2、3、12周）顯著低于對照組（P＜0.05），而試驗3、4、5組（第16、20周）顯著高于對照組和試驗2組（P＜0.05）。

表12 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液RBC數(shù)目的影響Table 12 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on blood RBC count of laying hens 1012/L

由表13可知，對于血液HGB含量，試驗2（第1、3、4、20周）、3（第 3、20、24周）、4（第 1、3、12周）、5組（第1、12周）顯著低于對照組（P＜0.05），而試驗3、4、5組（第16周）顯著高于對照組和試驗2組（P＜0.05）。

由表14可知，對于血液 HCT，試驗2（第3周）、4（第2、3、12周）、5組（第1、2、3、12周）顯著低于對照組（P＜0.05）；試驗 2（第 24周）、3（第16、20、24周）、4（第 16、20、24周）、5組（第 16、20、24周）顯著高于對照組（P＜0.05）。

由表15可知，對于血液PLT數(shù)目，試驗2（第24周）、3（第24周）、4（第16、24周）、5組（第16、24周）顯著高于對照組（P＜0.05）。

表13 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液HGB含量的影響Table 13 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on blood HGB content of laying hens g/L

表14 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液HCT的影響Table 14 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on HCT in blood of laying hens %

表15 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液PLT數(shù)目的影響Table 15 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on blood PLT count of laying hens 109/L

由表16可知，對于血液ESR，試驗2（第20周）、3（第3、20、24周）、4（第3、20周）、5組（第3、4、8、20周）顯著高于對照組（P＜0.05）。

表16 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血液ESR的影響Table 16 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on ESR in blood of laying hens mm/h

綜上所述，飼糧添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921提高了血液WBC和LYM數(shù)目，降低了試驗第1、2、3和12周的血液RBC數(shù)目和HCT，但提高了試驗第16、20和24周的血液RBC、PLT數(shù)目和HCT。

2.4 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清免疫球蛋白含量的影響

由表17可知，飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對血清IgA含量（第3周）有升高趨勢（P＝0.083）。對于血清IgG含量，試驗5組（第1周）顯著高于對照組和試驗2、3組（P＜0.05），試驗4、5組（第4周）顯著高于對照組（P＜0.05），而試驗2組（第20周）顯著低于對照組和試驗3組（P＜0.05）。對于血清IgM含量，試驗5組（第2、8周）顯著高于其他各組（P＜0.05），試驗3、4、5組（第4周）顯著高于對照組（P＜0.05），試驗3組（第16周）顯著高于其他各組（P＜0.05）。其他時間點，各組間血清IgA、IgG和IgM含量（數(shù)據(jù)未列出）無顯著差異（P＞0.05）。

表17 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清免疫球蛋白含量的影響Table 17 Effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on serum immunoglobulins contents of laying hens mg/mL

3 討 論

3.1 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

有研究表明，飼糧中添加益生菌可以提高動物的生產(chǎn)性能，但其相關(guān)研究的結(jié)論不盡相同。本研究表明，與對照組相比，添加1×105、1×106、1×107和1×108CFU/g枯草芽孢桿菌 CGMCC 1.921對產(chǎn)蛋率影響不顯著，但較對照組產(chǎn)蛋率分別提高了3.24%、3.35%、3.35%和4.02%；且飼糧添加1×105、1×107和1×108CFU/g枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921顯著降低了料蛋比，而添加1×105、1×106、1×107和1×108CFU/g枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921的各組間無顯著差異，故在本試驗條件下枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921適宜添加水平為1×105CFU/g。Zhang等［11］研究表明，飼糧中添加3.6×106CFU/g枯草芽孢桿菌可以顯著降低料蛋比，對產(chǎn)蛋率、蛋重、采食量影響不顯著，但在一定程度上提高了產(chǎn)蛋率，這與本試驗結(jié)果相一致。Ribeiro等［12］在飼糧中添加8×105CFU/g枯草芽孢桿菌可以提高產(chǎn)蛋率和蛋重。另外，有研究表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌等對肉雞［13］、仔豬［14］及水產(chǎn)動物［15］的生長性能均有一定的改善作用。Deng等［16］試驗發(fā)現(xiàn)，飼糧添加1×107CFU/g地衣芽孢桿菌可以緩解熱應(yīng)激對蛋雞生產(chǎn)性能造成的不利影響。這可能與益生菌可以提高消化酶的活性［17］、改善腸道結(jié)構(gòu)［18-19］，從而提高了營養(yǎng)的利用率有關(guān)［20］。 而 Forte等［21］發(fā)現(xiàn)添加0.1%嗜酸乳桿菌和0.05%枯草芽孢桿菌對海蘭蛋雞的生產(chǎn)性能均無顯著影響。Sobczak等［22］報道添加枯草芽孢桿菌ATCC PTA-6737沒有改善羅曼褐蛋雞的生產(chǎn)性能。這可能與添加水平、動物的生產(chǎn)周期、飼養(yǎng)環(huán)境或者菌株特性有關(guān)。

3.2 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血清生化指標的影響

本試驗發(fā)現(xiàn)飼糧添加不同水平枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921在試驗期間對血清ALT、AST活性基本無影響。ALT、AST主要存在于肝細胞中，其活性高低反映肝細胞的損傷程度，當肝細胞受損時，大量ALT、AST進入血液，則血清中兩者活性增高。有研究表明，飼糧中添加益生菌可以顯著降低血清 ALT和 AST活性［21，23］。 而 Li等［24］和Ma等［25］報道，飼糧添加枯草芽孢桿菌對紹興鴨和蛋雞血清ALT和AST活性無顯著影響，與本試驗結(jié)果相一致。血清TP、ALB、GLB含量及A/G是衡量肝臟合成和儲備功能的指標，血清TBIL含量反映肝臟的分泌和排泄功能是否正常。ALB是由肝臟合成的，肝臟損傷則血清ALB含量減少；而若肝臟發(fā)生炎癥則會引起血清GLB和TBIL含量的升高。對于血清TP、ALB、GLB、TBIL含量及A/G，各試驗組與對照組之間總體上沒有大的差異，說明飼糧添加不同水平枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞肝臟功能沒有產(chǎn)生不良影響。UREA、UA和CREA是衡量腎臟功能的重要指標，本試驗表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對血清UA和CREA含量沒有明顯改善作用，但降低了血清UREA含量。UREA是蛋白質(zhì)代謝的產(chǎn)物，反映動物機體蛋白質(zhì)的分解代謝水平。一般而言，血清UREA含量升高說明蛋白質(zhì)的沉積率下降，本試驗血清UREA含量降低，說明飼糧添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921提高了蛋白質(zhì)的沉積，減少了UREA在腎臟的積累，從而在一定程度上起到了保護腎臟的作用。Hatab等［26］在蛋雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌和屎腸球菌顯著降低了血清UA含量，對血清CREA含量無顯著影響，另外，蛋雞血清GLU含量顯著升高。本試驗也發(fā)現(xiàn)添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921在一定程度上提高了血清GLU含量，GLU是機體所需能量的主要來源，其含量的升高說明枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921的添加可以給機體提供相對較多的能量。而血清GLU含量的升高可能是因為益生菌的添加增強了對碳水化合物的消化、糖原的分解以及糖異生的發(fā)生。對于血清 CHOL和 TG含量，F(xiàn)orte等［21］和Hatab等［26］報道添加枯草芽孢桿菌和屎腸球菌可以減少蛋雞血清CHOL和TG的含量。本試驗結(jié)果表明，添加不同水平枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對各試驗時期血清CHOL和TG含量沒有影響。Sobczak等［22］報道飼糧中添加枯草芽孢桿菌 ATCC PTA-6737沒有對蛋雞血清CHOL和TG的含量產(chǎn)生顯著影響，與本試驗研究結(jié)果相一致。這可能與試驗周期、菌種或菌株等因素有關(guān)。

3.3 枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921對蛋雞血常規(guī)指標和免疫球蛋白含量的影響

全血血常規(guī)指標反映機體的健康狀況。WBC是機體血液中十分重要的一類血細胞，具有抵御病原體的能力。LYM反映機體的免疫功能水平，在機體免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮主要作用。MID包括單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞，單核細胞和NEU具有強大的吞噬功能，在非特異性細胞免疫系統(tǒng)中起重要作用。研究表明，益生菌具有預(yù)防疾病、控制感染、提高機體免疫力的作用［27］。Khan等［28］研究多菌株制劑對蛋雞血液指標的影響發(fā)現(xiàn)其顯著提高了LYM百分比。本研究表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921可以提高血液WBC和LYM數(shù)目，其中添加1×107和1× 108CFU/g枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921效果更明顯。Kim等［29］在蛋雞飼糧中添加益生菌制劑（枯草芽孢桿菌、乳酸菌及酵母）也顯著提高了血液WBC和LYM數(shù)目，與本試驗結(jié)果相似。這提示益生菌或其代謝產(chǎn)物可能對機體產(chǎn)生刺激從而對機體起到一定的免疫調(diào)節(jié)作用。Park等［30］飼喂給用鼠傷寒沙門氏菌KCCM 40253進行攻毒的肉雞含枯草芽孢桿菌RX7和B2A飼糧10 d，結(jié)果表明其對血液WBC和LYM數(shù)目無顯著影響。RBC是血液中數(shù)量最多的一種血細胞，它不僅是機體通過血液運送氧氣的主要媒介，而且還具有免疫功能。Gheisar等［31］在肉雞飼糧中添加屎腸球菌對血液 RBC數(shù)目無顯著影響。而 Strompfova等［32］研究表明，飼糧添加屎腸球菌的仔豬血液RBC數(shù)目和HCT均有顯著升高。Bonsu等［33］在肉雞飼糧中添加多菌株制劑對血液RBC數(shù)目無影響，但降低了血液HGB含量。本研究表明，飼糧添加枯草芽孢桿菌 CGMCC 1.921的蛋雞血液HGB含量及試驗前12周的血液RBC數(shù)目和HCT有一定的降低，而試驗16、20和24周血液RBC數(shù)目和HCT顯著升高，這可能與動物的生理狀態(tài)有關(guān)，但具體作用機制尚需進一步研究。對于血液PLT數(shù)目，Elzey等［34］報道 PLT在免疫系統(tǒng)中起重要作用，且正常小鼠血液中PLT數(shù)目減少會導(dǎo)致特異性抗體生成的減少。本試驗結(jié)果表明，與對照組相比，試驗5組在試驗16和20周顯著提高了血液PLT數(shù)目。Telli等［35］研究發(fā)現(xiàn)，在高飼養(yǎng)密度下的尼羅羅非魚中添加枯草芽孢桿菌對血液PLT數(shù)目影響不顯著，但在低飼養(yǎng)密度下可以顯著提高血液PLT數(shù)目。對于血液ESR，本試驗結(jié)果表明血液ESR在一定程度上稍有升高，血液ESR的升高可能與血液 RBC數(shù)目減少或血清GLU含量升高等有關(guān)，但其他各項血液指標無明顯不良變化，說明血液ESR的變化沒有對機體產(chǎn)生影響。此外，飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921在一定程度上可以提高血清免疫球蛋白的含量，尤其可以顯著提高血清IgM含量，且在本試驗條件下，枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921添加水平為1×108CFU/g時效果最佳。說明枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921在一定程度上可以提高機體的免疫防御機制。Kim等［29］飼喂蛋雞乳酸菌制劑顯著提高了血清IgG含量，對肉雞血清IgG含量有提高但差異不顯著。而Choi等［36］飼喂斷奶仔豬含枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、釀酒酵母的益生菌制劑對血清中IgA、IgG和IgM含量無顯著影響。鮑延娥等［37］添加 1×105、1×106、1×107、1×108CFU/g約氏乳桿菌極顯著降低了試驗第7天和第35天的血清IgA含量，但極顯著提高了試驗第28天的血清IgA含量。

4 結(jié) 論

①飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921可以降低蛋雞料蛋比，適宜添加水平為 1.0× 105CFU/g。

②飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921在一定程度上可以升高血清GLU含量，降低血清UREA含量，但對其他血清生化指標無明顯改善作用。

③飼糧中添加枯草芽孢桿菌CGMCC 1.921可以提高血液WBC和LYM數(shù)目，提高血清免疫球蛋白含量，在一定程度上增強了蛋雞的免疫機能，且適宜添加水平為1.0×108CFU/g。

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Effects of Bacillus subtilis CGMCC 1.921 on Performance，Routine Blood Parameters，Serum Biochemical Parameters and Immunoglobulin Contents of Laying Hens

GUO Junrui DONG Xiaofang?TONG Jianming
（Institute of Animal Sciences，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing100193，China）

This study was conducted to investigate the effects ofBacillus subtilisCGMCC 1.921 on performance，routine blood parameters，serum biochemical parameters and immunoglobulin contents of laying hens.A total of 360 twenty-seven-week-old healthy Hy-Line brown laying hens were randomly allocated into 5 groups with 6 replicates per group and 12 birds per replicate.The control group（group 1）was fed a basal diet，and the experimental groups（groups 2 to 5）were fed the basal diets supplemented with 1.0×105，1.0×106，1.0× 107and 1.0×108CFU/gBacillus subtilisCGMCC 1.921，respectively.The experiment lasted for 24 weeks.The results showed that there were no significant differences in egg production，feed intake，egg weight，egg weight per hen and mortality among all groups（P＞0.05）.However，group 2，4，5 significantly decreased feed to egg ratio compared with the control group（P＜0.05）.DietaryBacillus subtilisCGMCC 1.921 supplementation significantly increased serum glucose content（weeks 2，3，12，16 and 20）（P＜0.05），and significantly decreased serum urea content（weeks 2，3，8 and 12）（P＜0.05）.DietaryBacillus subtilisCGMCC 1.921 supplementation significantly increased blood leucocytes（weeks 1，3，4，8，12，16，20 and 24）and lymphocytes counts（weeks 2，3，4，8，12，16，20 and 24）（P＜0.05），and significantly increased serum immunoglobulin G（weeks 1 and 4）and immunoglobulin M contents（weeks 2，4，8 and 16）（P＜0.05）.Therefore，dietaryBacillus subtilisCGMCC 1.921 supplementation can decrease the feed to egg ratio，improve serum glucose and urea contents and routine blood test parameters，and enhance immunity of laying hens to a certain extent.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2017，29（2）：465-478］

laying hens；Bacillus subtilis；performance；routine blood parameters；serum biochemical parameters；immunoglobulin

S831

A

1006-267X（2017）02-0465-14

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.02.014

（責任編輯 武海龍）

2016-08-28

國家蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項經(jīng)費（CARS-41-K16）；中國農(nóng)業(yè)科學院科技創(chuàng)新工程（ASTIP-IAS08）

郭軍蕊（1988—），女，河南新鄉(xiāng)人，博士研究生，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學。E-mail：gjr217＠yeah.net

?通信作者：董曉芳，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail：xiaofangd1124＠sina.com

?Corresponding author，associate professor，E-mail：xiaofangd1124＠sina.com