周元靂，張藝凡，龍飛

（1．成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 611137；2．四川西部醫(yī)藥技術(shù)轉(zhuǎn)移中心，四川 成都 610041）

美國FDA關(guān)于模擬灌裝警告信的分析和討論

周元靂1，張藝凡2，龍飛1

（1．成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 611137；2．四川西部醫(yī)藥技術(shù)轉(zhuǎn)移中心，四川 成都 610041）

通過對2005年至今美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）官網(wǎng)已公布的關(guān)于無菌藥品生產(chǎn)模擬灌裝的警告信進行歸納和整理，對制藥企業(yè)在模擬灌裝試驗中常見的缺陷進行分析和討論，為將來擬通過美國FDA檢查的無菌制藥企業(yè)在模擬灌裝方案設(shè)計和執(zhí)行時提供更多的信息參考。

美國食品藥品監(jiān)督管理局；模擬灌裝；警告信

美國現(xiàn)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（cGMP）要求制藥企業(yè)保證所生產(chǎn)無菌藥品必須免受微生物污染，所有的無菌加工工藝和滅菌工藝都需要經(jīng)過驗證程序[1]。美國FDA還發(fā)布了一個關(guān)于采用無菌工藝藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理的指南文件，其中第九章的A節(jié)專門對無菌工藝模擬灌裝進行了具體的要求，包括方案設(shè)計、試驗頻率和次數(shù)、試驗批量、灌裝速度、環(huán)境條件、培養(yǎng)基選擇、樣品培養(yǎng)條件和結(jié)果判斷的準(zhǔn)則[2]。除了以上的法規(guī)要求和指南文件，任何人都可以通過美國FDA官方網(wǎng)站從美國FDA公布的警告信中查詢制藥企業(yè)在設(shè)計無菌藥品模擬灌裝方案和試驗執(zhí)行過程中發(fā)現(xiàn)的缺陷項。本文將美國FDA自2005年以來在官網(wǎng)上公布的警告信中關(guān)于模擬灌裝的觀察項進行匯總和分析，希望制藥企業(yè)能夠通過這些匯總的案例汲取經(jīng)驗和教訓(xùn)，完善和提高本企業(yè)模擬灌裝試驗執(zhí)行水平。現(xiàn)報告如下。

1 案例解析

在美國FDA警告信發(fā)布網(wǎng)址（http://www.fda.gov/ ICECI/EnforcementActions/WarningLetters/default.htm）輸入關(guān)鍵詞“Media Fill”進行搜索[3]。從2005年以來，共計有55個制藥企業(yè)收到的警告信中涉及模擬灌裝的缺陷項，部分企業(yè)還涉及多項缺陷項。其中模擬灌裝方案設(shè)計和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）存在缺陷的有19家制藥企業(yè)，試驗失敗但調(diào)查不充分的有11家，樣品剔廢沒有正當(dāng)理由的有6家，培養(yǎng)基相關(guān)缺陷項的有4家，存在人員資質(zhì)問題的有4家，存在文件記錄缺陷的有3家，不同工序樣品前后數(shù)量不平衡的問題有3家，涉及其他缺陷項目的有6家。見圖1。

圖1 美國FDA警告信中模擬灌裝相關(guān)缺陷匯總

1.1 方案和SOP設(shè)計

涉及模擬灌裝方案及相關(guān)SOP在設(shè)計和起草的缺陷是最多的。從搜索出的案例來看，缺陷主要分為3類：①制藥企業(yè)為了盡可能順利通過模擬灌裝試驗，在試驗設(shè)計時并沒有完全模擬實際生產(chǎn)條件，如試驗過程中未模擬最長灌裝時間，風(fēng)險較大的干預(yù)操作等“最差條件”；②在模擬灌裝過程中，設(shè)計不合理的挑戰(zhàn)，如在試驗過程中使用破損的手套進行無菌操作；③設(shè)計的試驗條件并不能真正代表整個生產(chǎn)線或者設(shè)計本身就不合理，例如有制藥企業(yè)試驗中采用的包裝系統(tǒng)并不能涵蓋生產(chǎn)線上的所有產(chǎn)品類型、采用不便于觀察的內(nèi)包材、或者設(shè)計的培養(yǎng)基灌裝量并不合理。

1.2 調(diào)查

一旦樣品在培養(yǎng)后出現(xiàn)陽性結(jié)果，如何調(diào)查微生物污染來源是一個比較棘手的問題。調(diào)查不充分或找不到微生物污染來源，特別是此次污染并不是一個孤立事件，而是發(fā)生過多次，很容易成為一個缺陷項。根據(jù)對這些案例的分析，主要的缺陷項來源包括：①受污染菌未進行鑒別或鑒別以后仍然未能確定污染物的來源；②沒有完成調(diào)查前，就繼續(xù)開始日常生產(chǎn)或未對模擬灌裝失敗以前受影響的產(chǎn)品批次進行恰當(dāng)?shù)脑u估；③根據(jù)調(diào)查結(jié)果，雖然確定了糾正措施，但后來的無菌檢驗或者模擬灌裝試驗結(jié)果仍然失敗，表明先前制定的糾正措施是無效的，產(chǎn)品無菌性仍然得不到保證。

1.3 樣品剔除

案例中有6家制藥企業(yè)在模擬灌裝中，在人員干預(yù)操作后或在燈檢過程中剔除了密封完整的樣品，而在試驗記錄中也不注明樣品剔除的任何原因，或者每次操作應(yīng)該剔除的數(shù)量未在任何SOP中進行規(guī)定，無法確定是否與實際生產(chǎn)剔除的數(shù)量和要求一致。根據(jù)美國FDA在警告信中的建議，企業(yè)應(yīng)在書面程序中清楚定義日常生產(chǎn)干預(yù)后會剔除的產(chǎn)品數(shù)量并要求詳細定義燈檢中應(yīng)該剔除樣品的類型而不得剔除存在外觀缺陷的樣品。

1.4 培養(yǎng)基

培養(yǎng)基有關(guān)的缺陷主要涉及促生長試驗和類型選擇問題。例如，有企業(yè)未進行促生長試驗或者無法提供試驗原始數(shù)據(jù)、促生長試驗樣品的培養(yǎng)溫度與模擬灌裝樣品培養(yǎng)溫度不一致、選擇的培養(yǎng)基類型不正確、生產(chǎn)線產(chǎn)品殘留或使用的物料對培養(yǎng)基的生長能力有抑制作用。其中有一個特殊的案例，即由于企業(yè)沒有足夠的培養(yǎng)箱，將灌裝好的樣品放置在培養(yǎng)箱外長達數(shù)天并且對放置最長時限的制定沒有任何合理的評估數(shù)據(jù)。

1.5 人員資質(zhì)

模擬灌裝作為無菌生產(chǎn)操作人員資質(zhì)確認(rèn)的重要手段，還是有制藥企業(yè)的無菌操作人員在未成功參與模擬灌裝試驗前，就直接承擔(dān)日常生產(chǎn)無菌操作。在另外一個案例中，企業(yè)安排質(zhì)量保證（QA）人員而非質(zhì)量檢驗（QC）人員來對培養(yǎng)后的樣品進行觀察，但美國FDA檢查官對于QA人員是否具備足夠的微生物知識以及觀察微生物生長的能力產(chǎn)生了質(zhì)疑并給出了缺陷項。

1.6 批記錄

有企業(yè)由于批記錄不完全、記錄填寫不完全或提供不出批記錄的問題而導(dǎo)致產(chǎn)生缺陷項。

1.7 數(shù)量平衡

還有企業(yè)在每個生產(chǎn)工序中記錄的樣品數(shù)量前后不一致。例如，操作人員在將樣品送交QC人員處進行檢查或?qū)悠匪腿肱囵B(yǎng)箱前并未對收到樣品的數(shù)量進行確認(rèn)，待發(fā)現(xiàn)樣品前后不一致時，已無法進行調(diào)查。

1.8 其他缺陷

除了以上的缺陷項，在模擬灌裝執(zhí)行的過程中還存在一些違反cGMP或試驗方案的情況。例如，有公司從未進行模擬灌裝試驗、在生產(chǎn)線大型維修后未重新進行模擬灌裝試驗就直接開始商業(yè)化生產(chǎn)、試驗相關(guān)的設(shè)備或系統(tǒng)在未完成確認(rèn)前就投入到模擬灌裝試驗、應(yīng)參與模擬灌裝試驗監(jiān)控的人員實際上并未參與而是填寫了假記錄、或者未對模擬灌裝試驗過程中出現(xiàn)的偏差進行調(diào)查等問題。

2 討論

2.1 完善的模擬灌裝SOP是成功起草一個方案的前提。企業(yè)首先應(yīng)根據(jù)cGMP法規(guī)、指南文件并結(jié)合企業(yè)自身情況，制定詳盡的SOP。在規(guī)程中將本企業(yè)進行模擬灌裝的方案起草、試驗頻率、試驗次數(shù)、試驗批量、試驗時長、灌裝的速度、干預(yù)操作類型、選擇培養(yǎng)基原則、培養(yǎng)條件、人員要求、結(jié)果判斷以及調(diào)查方法等原則性的要求進行規(guī)定。特別強調(diào)，應(yīng)詳盡地描述實際生產(chǎn)中常規(guī)干預(yù)和非常規(guī)干預(yù)，包括操作名稱、具體動作描述以及此干預(yù)涉及的剔除數(shù)量（完整的和非完整樣品），并將這些內(nèi)容作為模擬灌裝方案起草和執(zhí)行過程中人員操作和剔除數(shù)量的依據(jù)，避免美國FDA檢查官質(zhì)疑模擬灌裝過程中干預(yù)導(dǎo)致剔除數(shù)量多于日常生產(chǎn)。還應(yīng)該定期回顧上次成功模擬灌裝以來的批記錄，實際生產(chǎn)中如果出現(xiàn)了新的干預(yù)操作，應(yīng)及時更新SOP，在下次模擬灌裝操作中進行合理的模擬。

2.2 企業(yè)在起草模擬灌裝方案時，不應(yīng)是對以前方案簡單的復(fù)制粘貼操作，而應(yīng)根據(jù)上次模擬灌裝以來的實際生產(chǎn)情況的回顧進行適當(dāng)?shù)男抻?，參?shù)的設(shè)定都應(yīng)列出合理的理由或體現(xiàn)合理評估過程。制藥企業(yè)可以多參考美國注射劑協(xié)會（PDA）第22號技術(shù)報告《無菌灌裝藥品工藝模擬》（2011版）中方案的必要組成部分以及針對法規(guī)要求的具體理解和建議策略[3]。

2.3 模擬灌裝的批記錄應(yīng)盡可能和日常生產(chǎn)記錄一致，每個工序的樣品數(shù)量應(yīng)點清并形成書面記錄；在樣品完整性檢查的過程中，一定要培訓(xùn)燈檢人員，明確只能將存在完整缺陷的樣品剔除，其他存在外觀缺陷而不影響完整性的樣品絕對不能被錯誤剔除，并且這些要求應(yīng)在模擬灌裝批記錄中體現(xiàn)。

2.4 一旦出現(xiàn)染菌的陽性樣品，企業(yè)都應(yīng)進行充分調(diào)查。首先應(yīng)進行微生物鑒別，根據(jù)鑒別結(jié)果確認(rèn)污染來源。如果不清楚企業(yè)潔凈區(qū)環(huán)境、水系統(tǒng)、操作人員或設(shè)備等所帶微生物的種類和分布情況，會很難完全確定污染菌的來源，更談不上找到根本原因。因此，企業(yè)應(yīng)建立本工廠的微生物數(shù)據(jù)庫，以便對污染物的來源進行調(diào)查。

2.5 法規(guī)中已建議模擬灌裝所使用的兩種培養(yǎng)基，一種是常用的大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基，一種是針對厭氧環(huán)境的巰基乙酸鈉液體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基促生長試驗一般是在14天培養(yǎng)期結(jié)束后進行。美國FDA建議除《美國藥典》中要求的指示菌，還建議加入環(huán)境監(jiān)控中發(fā)現(xiàn)的其他具有代表性的微生物。此外，不可將產(chǎn)品的灌裝量等同于模擬灌裝中培養(yǎng)基灌裝量。確定培養(yǎng)基灌裝量的原則是培養(yǎng)基在倒立或旋轉(zhuǎn)過程中能夠足夠接觸到內(nèi)包材所有內(nèi)表面并且數(shù)量足夠支持觀察培養(yǎng)結(jié)果。為了證明灌裝量是足夠的，建議采用錄像或圖片記錄并附在方案后。

2.6 所有在生產(chǎn)過程中進入無菌灌裝區(qū)域的人員都需要定期參加模擬灌裝試驗，并且其在模擬灌裝中擔(dān)任的崗位應(yīng)該與實際生產(chǎn)一致。質(zhì)量部門人員應(yīng)全程監(jiān)督整個模擬灌裝過程，嚴(yán)格程度應(yīng)與日常生產(chǎn)一致。而QA人員并非是任何工作都可以參與，例如微生物生長結(jié)果的判斷，應(yīng)當(dāng)由具備微生物背景知識且經(jīng)過適當(dāng)培訓(xùn)的QC微生物人員執(zhí)行。

3 結(jié)論

3.1 模擬灌裝試驗應(yīng)盡可能模擬整個生產(chǎn)工藝，因此試驗過程應(yīng)與實際生產(chǎn)條件盡可能保持一致，并且工藝條件應(yīng)該選擇合理的“最差條件”。試驗方案以及記錄都應(yīng)該詳盡并反映實際生產(chǎn)條件，記錄的設(shè)計應(yīng)方便試驗人員填寫和記錄，并且應(yīng)定期根據(jù)實際生產(chǎn)變化進行動態(tài)修訂。

3.2 為了能夠充分地調(diào)查陽性樣品的污染來源，應(yīng)建立整個工廠的微生物數(shù)據(jù)庫，對微生物污染來源做到心里有數(shù)，否則無法順利地調(diào)查出染菌的根本原因，難以已銷售的批次產(chǎn)品進行影響評估，企業(yè)也無繼續(xù)產(chǎn)品生產(chǎn)。

3.3 企業(yè)應(yīng)詳細反復(fù)研究美國FDA法規(guī)、指南文件以及美國FDA官網(wǎng)公布的警告信中的典型案例，在實際運用中也應(yīng)多借鑒美國PDA的第22號技術(shù)報告《無菌灌裝藥品工藝模擬》（2011版），以便將來順利通過美國FDA對模擬灌裝試驗的檢查。

[1] Federal Government of the United States, 21 CFR 211.113(b)[EB/OL].(2016-04-01)[2016-07-21].https:// www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfCFR/ CFRSearch.cfm?fr=211.113.

[2] U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), et al.Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing - Current Good Manufacturing Practice[EB/OL].[2016-07-21].http://www. fda.gov/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatory Information/Guidances/UCM070342.pdf.

[3] Agalloco J,Baseman HS, Akers JE,et al. Technical Report No.22 Process Simulation for Aseptic Filled Products[M]. Revised 2011.Parenteral Drug Association.

本文編輯：馬宏宇

Analysis and Discussion of Warning Letters on Mock Filling by US FDA

Zhou Yuan-li1, Zhang Yi-fan2, Long Fei1
(1.Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Sichuan Chengdu 611137, China;
2.West China Medicine Technology Transfer Center, Sichuan Chengdu 610041, China)

The warning letters on mock flling in sterile drug production from FDA website since 2005 were summarized to analyze and discuss the common defects in mock flling test and provide more references for design and implementation of protocol for mock flling in the manufacturers passing the inspection by FDA.

FDA; Mock Filling ; Warning Letter

R97

A

10.3969/j.issn.2096-3327.2017.01.019

2016 - 07 - 22

周元靂，女，碩士。研究方向：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理。E-mail：47133511@qq.com

龍飛，男，博士，副教授。研究方向：中藥學(xué)。E-mail：lf_tcm@163.com