聶林+黃素麗

摘要：目的 利用我院就診患者獲取宮頸脫落細(xì)胞，比較不同年齡段HPV E6、E7mRNA檢測的陽性率及特異性、靈敏度，探討其對(duì)宮頸癌及癌前病變的早期篩查價(jià)值。方法 運(yùn)用分年齡層方法獲取我院就診595例作為本次研究對(duì)象，同時(shí)進(jìn)行TCT和HPV E6、E7mRNA檢測，對(duì)細(xì)胞學(xué)ASCUS及以上結(jié)果進(jìn)行組織病理檢查，比較不同年齡段HPV E6、E7mRNA檢測和TCT的陽性率，及其與組織病理檢測的符合性，將數(shù)據(jù)錄入Excel表格，采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 有效調(diào)查人數(shù)為559份，有效率100%。其中根據(jù)年齡分組，HPV E6E7 mRNA陽性率分別為：30歲以下35.76%，30以上41.62 %。此外，對(duì)HPV E6E7 mRNA及TCT均為陽性患者進(jìn)行病理學(xué)檢測，其中病變?yōu)镃IN2以上患者靈敏度及特異性均高于TCT。結(jié)論 比較不同年齡兩組人群，30歲以下年齡組中E6、E7 mRNA檢測靈敏度、特異性更高，可見在宮頸高級(jí)別病變的篩查中，尤其是年輕女性的篩查中，其在反映宮頸疾病的進(jìn)展方面具有極其重要意義。

關(guān)鍵詞：HPV E6、E7mRNA；宮頸癌；陽性率；特異性

大量研究表明HPV感染率隨著宮頸病變的惡性級(jí)別升高而逐漸上升，HR-HPV 是宮頸癌感染的主要誘因[1]，并且HPV DNA 檢測較之宮頸細(xì)胞學(xué)檢查更加敏感[2]，但是由于宿主免疫系統(tǒng)的清除作用，大量HPV感染只是短暫的。因此，基于 DNA 的 HPV 檢測在高級(jí)別宮頸病變的診斷中特異性及陽性預(yù)測值均較低[3]，有報(bào)道表示 HPV-DNA 在凋亡細(xì)胞及細(xì)胞碎屑中也可表達(dá)[4]，也說明 HPV-DNA 檢測的低特異性。另有研究表明高危型HPV是通過E6E7蛋白發(fā)揮致癌性的[5]，E6蛋白通過E6-AP能特異性結(jié)合P53蛋白形成復(fù)合物。促使P53蛋白快速降解，導(dǎo)致細(xì)胞周期失控，其效應(yīng)等同于P53突變。E7蛋白和PRb有高親和性，使E2F和PRb復(fù)合物解離，使細(xì)胞周期失控而發(fā)生永生化。有文獻(xiàn)報(bào)道，E6、E7mRNA水平與病變的嚴(yán)重程度相關(guān)[6]，Molden及Sterdal[7] 等對(duì)宮頸病變患者進(jìn)行幾年隨訪發(fā)現(xiàn)，HPV mRNA較HPV DNA具更高特異性及陽性預(yù)測值。為了解孝感地區(qū)HPV E6E7mRNA不同年齡段陽性率及特異性，特對(duì)孝感市婦幼保健院就診成年女性進(jìn)行調(diào)查研究，現(xiàn)將調(diào)查結(jié)果匯報(bào)如下。

1資料與方法

1.1一般資料 采用分年齡層整群抽樣方法我院門診就診年齡≥20歲的559例成年女性做為調(diào)查對(duì)象。

1.2研究方法 細(xì)胞取材：將采集器的中央刷毛部分輕輕插入宮頸管，柔和的向前抵住采樣器，并按同一個(gè)時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)采樣器5周整，將采樣器按入保存液小瓶底，迫使刷毛全部散開，共10次，在溶液中快速擺動(dòng)采樣器以漂洗樣本。同時(shí)進(jìn)行E6、E7 mRNA及TCT檢測。

1.3 HPV E6E7mRNA的意義 HPV基因組由早期基因區(qū)（E）、晚期基因區(qū)（L）以及長度控制區(qū)（LCR）構(gòu)成；其中 E6、E7是主要的致癌基因，具有促進(jìn)和維持整合狀態(tài)的功能，可與p53和Rb等細(xì)胞周期調(diào)控因子結(jié)合，影響其功能，導(dǎo)致細(xì)胞分化異常，形成惡性增殖[12]；E6、E7基因編碼的蛋白是導(dǎo)致宮頸上皮癌變的重要因子。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS V19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用χ2檢驗(yàn)及二元Logistic回歸分析方法分析HPV E6E7mRNA的陽性率及靈敏度、特異性。

2結(jié)果

2.1一般情況 595例調(diào)查的成年女性中HPV E6E7 mRNA陽性率分別為：30歲以下35.76%，30以上41.62 %。調(diào)查對(duì)象的年齡為18～70歲，平均年齡為36.07歲。

2.2分組比較細(xì)胞學(xué)與HPV E6E7 mRNA分析結(jié)果 針對(duì)TCT與HPV E6E7 mRNA進(jìn)行年齡分組對(duì)比分析，結(jié)果顯示E6/E7 mRNA檢測，陽性預(yù)測值高，特異性強(qiáng)，見表1，表2。

2.3結(jié)合病理學(xué)不同病變結(jié)果HPV E6E7 mRNA與TCT分析結(jié)果 將上述單因素分析結(jié)果中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)引入二元Logistic回歸分析，結(jié)果顯示其中30歲以下CIN I及以下陽性為24例（14.55%），CINII及以上陽性35例（21.21%）；30歲以上CIN I及以下陽性為77例（19.54%），CINII及以上陽性87例（22.08%），見表3，表4。

2.4 HPV E6/E7 mRNA與TCT對(duì)病變的靈敏度、特異性比較 不同年齡組CINII及以上（尤其年輕組<30歲）比對(duì)分析HPV E6/E7 mRNA的靈敏度、特異性明顯高于對(duì)照組（TCT），兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表5。

3討論

本研究首次在本地區(qū)進(jìn)行TCT和HPV E6、E7mRNA檢測對(duì)比。HPV E6、E7mRNA具有更高的特異性和陽性預(yù)測值，適用于婦女宮頸癌篩查，特別適合于TCT異常（≥ASCUS）患者，HPV E6E7mRNA是HR-HPV致癌活動(dòng)最佳提示指標(biāo)，可作為CINⅠ+期患者手術(shù)和術(shù)后療效評(píng)估首選項(xiàng)目。

綜上所述，通過流行病學(xué)調(diào)查，了解到E6、E7 mRNA與TCT聯(lián)合檢測是一種目前最佳的宮頸癌風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估檢測組合，降低宮頸癌早期可疑病變的手術(shù)率，降低醫(yī)療耗損，從而提高社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益，維護(hù)婦女身心健康，可實(shí)現(xiàn)早期篩查、分流管理及治療后隨訪。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉桐宇，謝榕，鄭雄偉，等.TCT 標(biāo)本檢測高危 HPV E6/E-7mRNA 及在宮頸病變中的應(yīng)用研究[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志（電子版），2011，7（3）：202-205.

[2]梁東霞，張彥娜.宮頸癌與 HPV 關(guān)系的研究進(jìn)[J].實(shí)用癌癥雜志，2010，25（2）：202-205.

[3]Franco EL，F(xiàn)erenczy A.Cervical cancer screening following the implementation of prophylactic human papillomavirus vaccination[J].Future Oncol，2007，3（3）：319-327.

[4]Brink AA，Snijders PJ，Meijer CJ，et al.HPV testing in cervical screening[J].Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol，2006，20（2）：253-266.

[5]Chua KL，Hjerpe A.Human papillomavirus analysis as a prognostic marker following conization of the cervix uteri[J].Gynecol Oncol，1997，66（1）：108-113.

[6]謝幸，茍文麗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2013，6.

[7]Molden T，Nygard JF，Kraus I，et al，Predicting CIN2+when detecting HPV mRNA and DNA by PreTect HPV-proofer and consensus PCR：A 2-year follow-up of women with ASCUS or LSIL Pap smear[J].Int J Cancer.2005.114（6）：973-976.

編輯/丁一