白乙拉 孟和 王蘇寧

【摘要】目的：采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定三子散中川楝素的含量。方法：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-001%甲酸溶液（31∶[KG-*3/5]69）為流動相；采用單級四極桿質(zhì)譜檢測器，電噴霧離子化（ESI）負(fù)離子模式下選擇質(zhì)荷比（m/z）573離子進(jìn)行檢測。結(jié)果：川楝素對照品在000997～014988μg范圍之內(nèi)與兩個峰面積之和具有良好的線性關(guān)系（r=099999）；平均加樣回收率為998%，RSD為06%（n=6）。結(jié)論：該方法穩(wěn)定、準(zhǔn)確，可用于三子散的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】三子散；川楝素；高效液相色譜-質(zhì)譜法

【中圖分類號】R284【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）06-0023-02

三子散為2015版《中國藥典》一部[1]收載的品種，由訶子、川楝子和梔子三味藥材組成，具有清熱涼血、解毒的功效，主要用于溫?zé)帷⒀獰?、新久熱。其中川楝子具有疏肝泄熱、行氣止痛、殺蟲的功效。川楝素是從楝科植物苦楝皮和川楝子中提取、分離得到的一種四環(huán)三萜類化合物。作為天然藥物，川楝素在驅(qū)蟲、治療肉毒毒素中毒、抗腫瘤、抑菌等方面均顯示了良好的藥理活性。為了該制劑的安全、有效、質(zhì)量可控，采用高效液相色譜-質(zhì)譜法測定該藥中川楝素的含量。

1儀器和材料

11儀器LCMS-8030液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（島津公司）；WatersXBridgeC18色譜柱（21mm×100mm，25μm）；XS3DU百萬分之電子天平（梅特勒） 。

12材料川楝素對照品（批號：111842-201503，含量968%，中國食品藥品檢定研究院），三子散（批號：1511034、1601056、1601057，內(nèi)蒙古蒙藥股份有限公司）。乙腈為色譜純，水為高純水。

2方法和結(jié)果

21色譜條件流動相為乙腈-001%甲酸溶液（31∶[KG-*3/5]69）；采用單級四極桿質(zhì)譜檢測器，電噴霧離子化（ESI）負(fù)離子模式下選擇質(zhì)荷比（m/z）573離子進(jìn)行檢測；進(jìn)樣量：5μL。理論板數(shù)按川楝素峰計算應(yīng)不低于8000。陰性對照色譜在川楝素兩個峰保留時間處無干擾。見圖1。

22對照品溶液的制備精密稱取川楝素對照品，加甲醇制成每1mL含000997mg的溶液，即得。

23樣品溶液的制備取三子散1g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

24陰性對照溶液按處方比例及生產(chǎn)工藝制備的不含川楝子的粉末，并按樣品溶液制備方法制成陰性對照溶液。

25線性關(guān)系考察精密稱取川楝素對照品4985mg，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。在精密量取上述對照品溶液2mL，置100mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密吸取對照品溶液1、2、5、8、10、15μL注入儀器中，記錄色譜圖，以對照品的進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，以兩個峰面積之和為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=33978×107X-20673830，r=099999，結(jié)果表明川楝素在000997～014988μg范圍之內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

26精密度試驗(yàn)取供試品（批號：1601056），按“23”方法制備樣品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定川楝素色譜峰面積，川楝素的兩個峰面積之和計算6次的平均面積為3119856，RSD為08%。

27重復(fù)性試驗(yàn)取供試品（批號：1601056）6份，分別按“23”方法制備樣品溶液，進(jìn)行含量測定，結(jié)果川楝素的平均含量為086mg/g，RSD為06%。表明本試驗(yàn)重復(fù)性良好。

28穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品（批號：1601056）樣品溶液，分別于0、2、5、10、15、24h進(jìn)樣測定，記錄峰面積，結(jié)果峰面積的RSD為13%，表明本樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

29加樣回收率試驗(yàn)[5]取已知含量的樣品（批號：1601056，含量：086mg/g）6份，每份約05g，精密稱定，分別精密加入川楝素對照品適量，按“23”方法測定含量，并計算回收率。

3討論

按2015版《中國藥典》一部川楝子的含量測定方法對三子散中川楝素進(jìn)行含量測定，此方法具有樣品預(yù)處理簡單、回收率高、重復(fù)性好、專屬性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可作為三子散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法，能夠更有效控制樣品的質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[2]楊冠華，李陽，張麗，等. 反相高效液相色譜法測定川楝子中阿魏酸含量[J].廣州化工，2011（3）：11-12.

[3]南京中醫(yī)藥大學(xué)編.中藥大辭典[M].上海：上?？萍汲霭嫔?，2006：308-310.

[4]常新全，丁麗霞.中藥活性成分分析手冊[M].北京：學(xué)苑出版社，2002：292-293.

[5]劉素梅，方忠意，韓立，等.三子散中川楝子的鑒別及梔子苷的含量測定[J].中國獸藥雜志，2013（3）：38-40.