林明敏曲寧寧趙燕春
(1.威海市文登區(qū)張家產(chǎn)畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;2.威海市文登區(qū)侯家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;3.威海市文登區(qū)葛家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440)
豬傳染性腦脊髓炎的診斷與防治研究
林明敏1曲寧寧2趙燕春3
(1.威海市文登區(qū)張家產(chǎn)畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;2.威海市文登區(qū)侯家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;3.威海市文登區(qū)葛家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440)
豬傳染性腦脊髓炎在國(guó)內(nèi)當(dāng)前發(fā)病較少,但是隨著與國(guó)際養(yǎng)豬業(yè)的交流日益頻繁,其發(fā)病幾率陡然升高,加強(qiáng)對(duì)其了解非常必要。本文對(duì)該病進(jìn)行了較為詳盡的分析,重點(diǎn)分析了其診斷方法和防治措施,希望能引起相關(guān)部門(mén)的重視。
豬傳染性腦脊髓炎;診斷;防治
病原為小RNA病毒科腸道病毒屬成員。病原可分為兩類,即豬捷申病毒(PTV)和豬腸道病毒(PEV)。病毒對(duì)外界環(huán)境具有很強(qiáng)的抵抗力,15℃下能存活168d,在液體糞尿中保存很長(zhǎng)時(shí)間。病毒對(duì)乙醚有抵抗力,在眾多消毒劑中,次氯酸鈉、20%漂白粉和70%乙醇能使病毒完全失活。病毒在pH2~9條件下穩(wěn)定,在低溫下保存時(shí)間較長(zhǎng),如保存于50%甘油中可于4℃下長(zhǎng)期保持毒力,-70℃下存活數(shù)年。冷凍干燥明顯降低毒力。
病豬和帶毒豬是本病的傳染源,病毒隨糞便排出體外,污染飼料、飲水和圈舍等。臨床康復(fù)豬在第7周仍能通過(guò)糞便排毒。
本病毒主要通過(guò)糞便-口腔途徑傳播,此外,也可通過(guò)呼吸道和帶毒的公豬精液傳播。通過(guò)消化道和呼吸道感染后,病毒很快在腸道內(nèi)復(fù)制。強(qiáng)毒感染后,能夠形成病毒血癥,但弱毒感染則不能形成病毒血癥。豬是本病唯一的易感動(dòng)物,成年豬往往為隱性感染,仔豬感染后死亡率很高。迄今為止,尚未發(fā)現(xiàn)其他動(dòng)物能感染豬腸病毒的報(bào)道,然而妊娠豚鼠感染豬腸道病毒后(PEV-8),胎盤(pán)可發(fā)生病變。
潛伏期2~28d,平均14d。
PTV血清1型強(qiáng)毒株感染豬后,引起嚴(yán)重的腦脊髓炎癥狀,即傳統(tǒng)的捷申病,發(fā)病率可達(dá)50%,死亡率達(dá)70~90%。病初出現(xiàn)發(fā)熱,體溫達(dá)41℃,厭食,精神不振,隨后出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)、跟球震顫、抽搐和角弓反張、昏迷等癥狀。麻痹是疾病晚期的癥狀,此時(shí),如果有聲音或觸摸等刺激,角弓反張和抽搐癥狀更加嚴(yán)重。出現(xiàn)癥狀后3~4d通常死亡。如果食欲恢復(fù),動(dòng)物可耐過(guò),但可出現(xiàn)肌肉萎縮或癱瘓等。發(fā)生麻痹后,皮膚反射降低或消失。有的文獻(xiàn)報(bào)道,可觀察到豬眼瞼水腫、視物不清等。
由毒力較低的血清1型毒株和其他血清型毒株引起的“泰法病”,又稱為溫和性地方流行性麻痹,發(fā)病率和死亡率低。癥狀輕微,病初體溫也升高,逐漸發(fā)展為運(yùn)動(dòng)失調(diào)和背部軟弱,幾天內(nèi)消失。很少發(fā)生完全麻痹。
由腸道病毒屬病毒感染導(dǎo)致的其他臨床癥狀還有妊娠中期的繁殖障礙,即所謂的SMEDI和不育。此外,還可引起腹瀉、肺炎、心包炎、心肌炎以及表皮損傷等。但是其與腦脊髓炎病例的相關(guān)性尚未清楚。
腦脊髓炎病例的特征性病變不明顯。病豬腦膜水腫,腦膜和腦血管充血,心肌和骨骼肌萎縮,腸絨毛膜不萎縮,其他組織無(wú)可見(jiàn)肉眼變化。組織學(xué)變化主要是典型的非化膿性腦脊髓灰質(zhì)變化。:主要部位是脊髓的腹側(cè)柱、小腦灰質(zhì)和腦干。神經(jīng)細(xì)胞變性壞死,或增生聚集,有明顯的噬神經(jīng)現(xiàn)象,小血管周?chē)辛馨图?xì)胞浸潤(rùn),神經(jīng)細(xì)胞漿內(nèi)有嗜酸性包涵體。
4.1 一般性診斷
本病發(fā)生于2~6月齡豬,出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,聲音和觸摸刺激后,癥狀加劇,死亡率較高等,可作為流行病學(xué)初步診斷依據(jù)。
4.2 病原學(xué)診斷
(1)病原分離鑒定
應(yīng)采集剛出現(xiàn)神經(jīng)癥狀小豬的脊髓、腦干和小腦或流產(chǎn)胎兒的肺臟。木乃伊胎中往往不含有活的病毒,因而不能用于病毒分離。哺乳仔豬由于母源抗體的保護(hù),從腸道中很少分離出病毒。樣品需冷藏或放人50%甘油生理鹽水中,送往實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。
將含毒組織勻漿處理后接種敏感細(xì)胞(如PK-15細(xì)胞),如病料中含有病毒,接種后3~4d出現(xiàn)病變,再進(jìn)一步連續(xù)盲傳3代,使病毒穩(wěn)定。免疫熒光試驗(yàn)、免疫過(guò)氧化物酶試驗(yàn)和中和試驗(yàn),可以確認(rèn)病毒。最后,用仔豬接種來(lái)測(cè)定毒株的致病性。
(2)免疫熒光技術(shù)
采用病毒感染后12~16h(細(xì)胞病變產(chǎn)生之前)的細(xì)胞玻片,PBS洗滌后,室溫干燥,用冷丙酮固定,依次用抗PTV的多抗或單抗、異硫氰酸熒光素標(biāo)記的二抗進(jìn)行染色。單抗的效果較好,因?yàn)槎嗫谷旧^易產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
(3)血清中和試驗(yàn)
進(jìn)行病毒分離株的血清型確定。將病毒液作10倍連續(xù)稀釋,與不同的標(biāo)準(zhǔn)血清混合后在4℃或37℃下孵育1h,接種單層細(xì)胞,37℃繼續(xù)培養(yǎng)。72h后,觀察判定。與陰性對(duì)照血清組相比,如果某一種標(biāo)準(zhǔn)血清能使病毒致細(xì)胞病變的毒價(jià)下降103,那么,就可以判定分離的病毒為該血清型的PTV。
(4)免疫組化試驗(yàn)
對(duì)石蠟包埋的組織切片,采用此方法進(jìn)行檢測(cè)。過(guò)程較為復(fù)雜,不同批次之間結(jié)果不太一致。所以本法不太常用。
(5)RT-PCR
一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)使用RT-PCR來(lái)檢測(cè)PTV,巢式PCR能夠進(jìn)一步區(qū)分PTV和PEV。
4.3 血清學(xué)診斷
采集急性期和康復(fù)期的血清進(jìn)行ELISA和中和試驗(yàn),血清效價(jià)增加4倍以上,才能具有診斷意義。
5.1 預(yù)防
綜合防控措施:加強(qiáng)檢疫,避免引人感染后帶毒的豬。對(duì)發(fā)病豬隔離,移至光線陰暗、安靜的地方。用敏感的消毒劑對(duì)環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格的消毒。豬場(chǎng)糞便堆積發(fā)酵可殺滅其中的病毒??刂气B(niǎo)類、加強(qiáng)滅鼠等有助于本病的預(yù)防。
免疫預(yù)防:中歐和馬達(dá)加斯加在發(fā)生PTV-1引起的捷申病時(shí),曾使用滅活疫苗和培養(yǎng)致弱的活疫苗,對(duì)健康易感犬進(jìn)行免疫預(yù)防,但目前在這些地區(qū)已經(jīng)不再使用疫苗。
通過(guò)將后備母豬在配種前1個(gè)月與不同來(lái)源的豬混養(yǎng)而實(shí)現(xiàn)自然感染,產(chǎn)生的抗體可以保護(hù)仔豬。
5.2 治療
目前尚無(wú)有效的治療措施與抗病毒藥物。據(jù)報(bào)道,聯(lián)合使用長(zhǎng)效磺胺、地塞米松、清熱解毒的中藥制劑以及黃芩多糖等藥物,有一定的療效。
5.3 診療注意事項(xiàng)
本病應(yīng)與表現(xiàn)神經(jīng)癥狀的其他疾病相區(qū)分,如豬鏈球菌病、日本乙型腦炎、李氏桿菌病、豬偽狂犬病、血凝性腦脊髓炎和食鹽中毒等相區(qū)分。
[1] 劉振豐,張希鳳.豬傳染性腦脊髓炎的診斷報(bào)告[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),1994,(1):29-30.