王翠蘭

（山東省乳山市畜牧獸醫(yī)工作站 264500）

犬瘟熱臨床病理學(xué)和SLAM細(xì)胞受體的研究進(jìn)展

王翠蘭

（山東省乳山市畜牧獸醫(yī)工作站 264500）

犬瘟熱是一種危害寵物飼養(yǎng)業(yè)、野生動(dòng)物保護(hù)業(yè)，以及水貂、狐貍、貉等毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的重要傳染病，發(fā)病率和死亡率較高。本文從臨床病理學(xué)、細(xì)胞受體等方面對(duì)犬瘟熱病毒的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

犬瘟熱(Canine Distemper, CD)是由犬瘟熱病毒(Canine Distemper Virus，CDV)感染引起的犬科、鼬科和其他食肉目動(dòng)物的急性或亞急性、高度接觸致死性傳染病，對(duì)當(dāng)前養(yǎng)犬業(yè)、特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)和野生動(dòng)物保護(hù)業(yè)危害巨大。1905 年卡爾(Carre)發(fā)現(xiàn)其病原為一種病毒，所以本病也曾稱(chēng)為Carre氏病。l926年，Laidlaw和Duncan通過(guò)人工感染試驗(yàn)，主要是用完全隔離飼養(yǎng)的犬和易感性極高的雪貂，結(jié)果也確定了本病的病原為病毒。我國(guó)于1980年從病犬體內(nèi)首次分離到犬瘟熱病毒，現(xiàn)在犬瘟熱病已在全國(guó)各廣泛流行。該病是目前對(duì)我國(guó)養(yǎng)犬業(yè)、毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)和野生動(dòng)物保護(hù)業(yè)危害最大的疫病之一。

1 臨床與病理學(xué)

1.1 臨床表現(xiàn) CDV的潛伏期根據(jù)傳染來(lái)源的不同差異較大，同種動(dòng)物感染潛伏期為3-10 d，異種動(dòng)物感染可達(dá)30-90d，病毒需要在異種動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行一段時(shí)間的適應(yīng)。臨床癥狀會(huì)因病毒毒力、動(dòng)物機(jī)體狀況、免疫水平、外界環(huán)境的差異而表現(xiàn)多種多樣[1]。CDV具有淋巴親嗜性(Lymphotropic)和神經(jīng)侵蝕性(Neurotropic)，會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)和體外的細(xì)胞病理學(xué)感染和持續(xù)感染感染[1]。一般情況下，急性感染會(huì)引起呼吸道或胃腸道疾病，在早期或晚期還包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)的感染。自然感染早期發(fā)熱一般不易被發(fā)現(xiàn)，犬瘟熱急性病例典型表現(xiàn)體溫雙向熱，主要表現(xiàn)為結(jié)膜炎，眼分泌物增多，初期為漿液性分泌物，后為膿性粘液；鼻鏡干燥，打噴嚏，咳嗽，先干咳后轉(zhuǎn)為濕咳，呼吸加快，肺泡呼吸音粗劣，出現(xiàn)鑼音；嘔吐，腹瀉，糞便有時(shí)呈暗紅色血便水樣，有惡臭味。犬瘟熱的神經(jīng)癥狀是影響預(yù)后和感染恢復(fù)的最重要因素，由于CDV侵害部位不同臨床表現(xiàn)有所差異。幼犬經(jīng)胎盤(pán)感染可在28～42d時(shí)產(chǎn)生神經(jīng)癥狀，母犬表現(xiàn)輕微或無(wú)明顯癥狀。慢性病例后期共濟(jì)失調(diào)，后軀麻痹。少數(shù)病犬的足墊表現(xiàn)為腫脹，最后表現(xiàn)過(guò)度增生、角化，形成所謂硬腳掌病。

1.2 病理變化 新生幼年動(dòng)物患犬瘟熱的主要病變隨病程的發(fā)展和有無(wú)繼發(fā)感染的發(fā)生而存在差異，未繼發(fā)細(xì)菌感染時(shí)僅見(jiàn)胸腺萎縮與膠樣浸潤(rùn)，脾、扁桃體等組織臟器中的淋巴組織減少，在發(fā)生細(xì)菌繼發(fā)感染后會(huì)伴發(fā)呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。成年動(dòng)物感染主要表現(xiàn)為結(jié)膜炎、化膿性鼻炎，支氣管肺炎或化膿性肺炎，卡他性或出血性胃腸炎。出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病犬早期可見(jiàn)有非化膿性腦炎與白質(zhì)中的空泡形成；晚期病犬則有可能見(jiàn)到由自體抗原--抗體反應(yīng)引起的脫髓鞘現(xiàn)象。

2 SLAM細(xì)胞受體

2.1 信號(hào)淋巴細(xì)胞激活因子(SLAM) 現(xiàn)在已經(jīng)證實(shí)的與CDV感染有關(guān)的細(xì)胞受體是信號(hào)淋巴細(xì)胞激活因子(Signaling lymphocyte activation molecules，SLAM，也稱(chēng)為CD150, CDw150, PIO-3)和肝素/硫酸肝素(Heparan/ heparan sulfate，HP/HS)受體。SLAM是近些年被證實(shí)為麻疹病毒屬病毒的識(shí)別受體，在高親和力受體SLAM存在的情況下，類(lèi)肝素樣受體的作用是微弱的，SLAM是CDV感染宿主的主要受體[2]。SLAM是包含有胞質(zhì)內(nèi)尾部和特征信號(hào)序列的一類(lèi)雙功能受體，屬于免疫球蛋白CD2超家族成員之一。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者主要從建立SLAM受體細(xì)胞系、利用免疫組化進(jìn)行受體組織定位、構(gòu)建動(dòng)物模型進(jìn)行攻毒試驗(yàn)、以及分析病毒遺傳變異性等方面探索細(xì)胞受體影響CDV感染的分子機(jī)制。Wenzlow等[3](2007)使用CDV強(qiáng)毒株A75/17接種CDV抗體檢測(cè)陰性的犬，待發(fā)病后用免疫組化檢測(cè)SLAM受體在CDV感染犬組織中的分布和數(shù)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CDV感染引起腸系膜淋巴結(jié)、胃、腸、肺、腦和膀胱中SLAM受體的上調(diào)。Pillet S等[4](2009)建立了作為研究麻疹病毒的發(fā)病機(jī)制、并發(fā)癥和疫苗的雪貂模型，該模型已被用于評(píng)估輔助蛋白C和V，以及SLAM的作用。Sawatsky B等[5](2012)為了研究上皮細(xì)胞在麻疹病毒致病中的重要性，利用上皮細(xì)胞受體(EPR)缺失的CDV進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)這種病毒低效率地感染犬和鼬的上皮細(xì)胞，但并沒(méi)有引起細(xì)胞融合形成合胞體。另一方面，EPR缺失的CDV在表達(dá)犬SLAM受體的細(xì)胞中復(fù)制，與野生型CDV有相似動(dòng)力學(xué)。EPR缺失的CDV感染的動(dòng)物沒(méi)有產(chǎn)生疾病的臨床癥狀，但導(dǎo)致白細(xì)胞減少癥和淋巴細(xì)胞增殖活性抑制。上述研究表明CDV上皮細(xì)胞的感染是產(chǎn)生臨床癥狀必需的，但不適用于免疫。因此，建立開(kāi)展SLAM受體研究的相關(guān)技術(shù)平臺(tái)，從SLAM受體的角度探尋CDV的感染機(jī)制和增殖特性，分析SLAM受體分布和表達(dá)量變化規(guī)律與病毒感染之間相關(guān)性，有助于深入研究SLAM受體影響CDV感染的分子機(jī)制，有助于解釋CDV在宿主體內(nèi)的組織嗜性和感染宿主的廣泛性

[6]，為開(kāi)展阻斷CDV感染的藥物和防控技術(shù)等領(lǐng)域的研究奠定重要理論基礎(chǔ)。

2.2 穩(wěn)定表達(dá)SLAM的細(xì)胞系 為了在體外研究CDV，傳統(tǒng)上犬腎細(xì)胞(MDCK細(xì)胞)或非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero細(xì)胞)被用來(lái)進(jìn)行病毒的分離和增殖，但這些細(xì)胞不表達(dá)CDV感染的主要受體犬信號(hào)淋巴細(xì)胞激活分子(SLAM)，CDV的分離培養(yǎng)通常不會(huì)有明顯的細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)，但穩(wěn)定表達(dá)SLAM受體細(xì)胞系能提高分離CDV的敏感性和保持病毒毒力，這對(duì)開(kāi)展CDV的體外研究和疫苗研制十分重要。Nielsen O等[7](2008)用表達(dá)SLAM的Vero細(xì)胞系、Vero細(xì)胞和原代海豹腎(primary seal kidey, PSK)細(xì)胞，分離海豹瘟熱病毒(Phocine distemper virus, PDV)，表達(dá)SLAM的Vero細(xì)胞系無(wú)論接細(xì)胞毒還是病料毒，敏感性和接毒后的病毒含量均優(yōu)于Vero細(xì)胞或PSK細(xì)胞。閆如勛(2011)[8]建立了穩(wěn)定表達(dá)犬、狐貍、貉和水貂受體SLAM的Vero細(xì)胞系，病毒分離敏感性和分離CDV毒力評(píng)價(jià)結(jié)果表明，建立的Vero細(xì)胞系能顯著提高分離CDV的效率，并且很好的保持了病毒毒力，為CDV強(qiáng)毒株的獲得提供保障。

3 研究展望

CDV進(jìn)入易感組織需要由細(xì)胞受體介導(dǎo)，膜表面受體與CDV H結(jié)合并引起穿膜活動(dòng)，在病毒粘附與侵染過(guò)程中起重要作用。目前受體是研究熱點(diǎn)，改善不同細(xì)胞組織對(duì)某一病毒的敏感性起到立竿見(jiàn)影的作用。通過(guò)開(kāi)展細(xì)胞受體的相關(guān)研究，探索阻斷CDV感染的機(jī)制，對(duì)于該病的預(yù)防與控制具有重要意義。

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