馬先杰+崔保松+韓少偉+李帥

[摘要] 采用硅膠、ODS、Sephadex LH-20、RP-HPLC等色譜分離方法，對白及的90%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位進行化學成分研究，根據(jù)化合物的波譜數(shù)據(jù)進行結構鑒定。從該植物中分離得到18個化合物，分別為5-羥基-2-（對羥基芐基）-3-甲氧基聯(lián)芐（1）、shancigusin B（2）、shanciguol（3）、arundinan（4）、3′，5-二羥基-2，4-二（對-羥基芐基）-3-甲氧基聯(lián)芐（5）、arundin（6）、3，3′-二羥基-2-（4-羥基芐基）-5-甲氧基聯(lián)芐（7）、3，3′-二羥基-2′，6′-二（對羥芐基）-5-甲氧基聯(lián)芐（8）、7-羥基-2，4-二甲氧基菲（9）、bleformin B（10）、nudol（11）、3，7-二羥基-2，4-二甲氧基菲（12）、2，7-二羥基-4-甲氧基-9，10-二氫菲（13）、bleformin D（14）、4，4′-二甲氧基-9，10-二氫-[6，1′-聯(lián)菲]-2，2′，7，7′-四醇（15）、gymconopin C（16）、（2，3-反式）-2-（4-羥基-3-甲氧基苯基）3-羥甲基-10-甲氧基-2，3，4，5-四氫菲[2，1-b]呋喃-7-醇（17）、shanciol（18）。其中化合物1為新的聯(lián)芐類化合物，化合物2～6，9，15～18為首次該屬植物中分離得到。

[關鍵詞] 白及；化學成分；聯(lián)芐類；菲類；二氫菲類

Chemical constituents from tuber of Bletilla striata

MA Xian-jie，CUI Bao-song，HAN Shao-wei，LI Shuai*

（State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines，Institute of Materia Medica，

Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing 100050，China）

[Abstract] Eighteen compounds were isolated from the EtOAc soluble fraction of Bletilla striata by various chromatographic techniques，such as silica gel，ODS，Sephadex LH-20，RP-HPLC. Their structures were identified by spectroscopic methods and physicochemical properties，as 5-hydroxy-2-（p-hydroxybenzyl）- 3- methoxybibenzyl（1），shancigusins B（2），shanciguol（3），arundinan（4），3′，5-dihydroxy-2，4-di（p-hydroxybenzyl）-3-methoxybibenzyl（5），arundin（6），3，3′-dihydroxy-2-（p-hydroxybenzyl）-5-methoxybibenzyl（7），3，3′-dihydroxy-2′，6′-bis（p-hydroxybenzyl）-5-methoxybibenzyl（8），7-hydroxy-2，4-dimethoxyphenanthrene（9），bleformin B（10），nudol（11），3，7-dihydroxy-2，4-dimethoxyphenanthrene（12），2，7-dihydroxy-4-methoxy-9，10-dihydrophenathrene（13），bleformin D（14），4，4′-dimethoxy-9，10-dyhydro-[6，1′-biphenanthrene]-2，2′，7，7′-tetraol（15），gymconopin C（16），（2，3-trans）-2-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-3-hydroxymethyl-10-methoxy-2，3，4，5-tetrahydro-phenanthro[2，1-b]furan-7-ol（17），shanciol（18）. Among them，compound 1 was a new compound，Compounds 2-6，9，15-18 were isolated from this genus for the first time.

[Key words] Bletilla striata；chemical constituents；bibenzyls；phenanthrenes；dihydrophenanthrenes

中藥白及來源于蘭科植物白及Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f. 的干燥塊莖，其味苦、甘、澀，微寒，歸肺、肝、胃經(jīng)，具有收斂止血，消腫生肌的功效，用于咯血，吐血，外傷出血，瘡瘍腫毒，皮膚皴裂[1]。目前，關于白及的化學成分報道主要集中在聯(lián)芐類、二氫菲類、菲類、聯(lián)菲類等，其藥理活性主要有止血作用、抗腫瘤作用、抗菌作用、抗炎鎮(zhèn)痛作用和促進創(chuàng)傷愈合作用等[2-4]，尤其是以細胞毒、抗炎和抗菌活性作用顯著，可能為中藥白及發(fā)揮抗腫瘤、抗炎和抗菌活性的物質基礎，而且與其傳統(tǒng)功效“消腫”及主治“瘡瘍腫毒”相一致。

為了尋找這些活性物質成分，本研究對白及塊莖進行了系統(tǒng)的化學成分研究，分離得到18個化合物，其中包括聯(lián)芐類化合物8個（1～8），菲及二氫菲類化合物4個（9～13），菲類二聚體3個（14～16），二氫菲并呋喃類化合物1個（17），二氫菲并吡喃類化合物1個（18）。本研究分離得到1個新的聯(lián)芐類化合物1，并首次對化合物6的碳信號進行報道并歸屬。以上分離得到的化合物類型屬于白及中的活性成分聯(lián)芐類、菲類和二氫菲類化合物，為白及作為傳統(tǒng)中藥的化學成分研究奠定了物質基礎。

1 材料

Agilent 1000 Series LC-MSD-Trap-SL 型 ESI-MS質譜儀（美國Agilent公司）；Inova-500型核磁共振光譜儀（美國Varian 公司）；LabAlliance液相色譜儀（美國科學系統(tǒng)）；半制備色譜柱（Sill Green）為Rp-18（10 mm × 250 mm，5 μm）（北京綠百草科技發(fā)展有限公司）；Shimadzu高效液相色譜儀；葡聚糖凝膠Sephadex LH-20 （瑞士 Pharmacia Biotech 公司）；柱色譜硅膠（200～300 目）（青島海洋化工廠），薄層色譜硅膠GF254（煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司）；所有實驗試劑均購自北京化工廠，級別為分析純或色譜純。

白及藥材于2013年5月購自云南昆明市官渡區(qū)菊花園中藥材市場，經(jīng)中國醫(yī)學科學院藥物研究所馬林副研究員鑒定為白及B. striata的干燥塊莖。植物標本保存于中國醫(yī)學科學院藥物研究所標本室（樣品編號ID-S-2766）。

2 提取與分離

白及干燥塊莖100 kg，粉碎，用90%乙醇浸泡，回流提取2次，每次2 h。減壓回收乙醇得浸膏。加入適量水混懸，用乙酸乙酯萃取，回收溶劑后得乙酸乙酯部位400 g。乙酸乙酯部位進行硅膠柱色譜分離，石油醚-丙酮（20∶1，5∶1，2∶1，1∶1）梯度洗脫，得到12個組分A～L。

組分F（8.5 g）經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚-乙酸乙酯（5∶1，2∶1）等度洗脫，得8個亞組分F1～F8；亞組分F4（1.6 g）經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，石油醚-氯仿-甲醇（5∶5∶1）洗脫得11個組分a～k，F(xiàn)4-k（10 mg）經(jīng)過RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（68∶32）為流動相，制備得化合物9（5 mg）；組分H（32 g）經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚-乙酸乙酯（10∶1～3∶1）梯度洗脫，得9個亞組分H1～H9；亞組分H4經(jīng)過RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（65∶35）為流動相，制備得化合物11（20 mg）和12（30 mg）；亞組分H5（12 g）經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，石油醚-氯仿-甲醇（5∶5∶1）洗脫得12個流份a～l，H5-G（200 mg）經(jīng)過RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（68∶32）為流動相，制備得化合物1（5.0 mg），4（3.0 mg）；亞組分H6（4.5 g）經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，石油醚-氯仿-甲醇（5∶5∶1）洗脫得13個流份a～m，H6-h（200 mg）經(jīng)過RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（60∶40）為流動相，制備得化合物5（3.1 mg），7（12 mg），8（8 mg）；組分I（28 g）經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚-乙酸乙酯（4∶1～1∶1）梯度洗脫，得13個亞組分I1～I13；亞組分I5（3 g）經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，石油醚-氯仿-甲醇（5∶5∶1）洗脫得12個亞組分a～l，I5-c（100 mg）經(jīng)過RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（55∶45）為流動相，制備得化合物13（30 mg）和17（10 mg）；I5-h（150 mg）經(jīng)過RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（55∶45）為流動相，制備得化合物6（10 mg）和10（3.0 mg）；亞組分19（50 mg）經(jīng)過RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（55∶45）為流動相，制備得化合物18（9 mg）；組分L（22 g）經(jīng)反相硅膠柱色譜，甲醇-水（50∶50～65∶35）梯度洗脫，得13個亞組分L1～L9；亞組分L3與L4合并共7 g，經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，氯仿-甲醇（1∶1）洗脫得10個流分a～j，亞組分L3-f（200 mg）經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，再經(jīng)RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（58∶42）為流動相，制備得化合物16（7.2 mg）；亞組分L3-h（290 mg）經(jīng)RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（60∶40）為流動相，制備得化合物2（3.0 mg），14（2.5 mg），15（5.2 mg）；L3-I（90 mg）經(jīng)RP-18 HPLC分離，以甲醇-水（60∶40）為流動相，制備得化合物3（4.0 mg）。

3 結構鑒定

化合物1 白色無定型粉末，UV（MeOH）λmax（logε）∶203（3.95），281（3.62）；ESI-MS給出的準分子離子峰m/z 335.0 [M+H]+，HR-ESI-MS給出準分子離子峰m/z 335.165 8[M+H]+（C22H23O3計算值為335.164 2），結合13C-NMR譜數(shù)據(jù)，確定其分子式為C22H22O3，不飽和度為12。 化合物的1H-NMR譜中顯示有10個芳香氫信號，δ 7.20（2H，t，J=7.5 Hz），7.11（1H，t，J=7.5 Hz）和7.03（2H，d，J=8.0 Hz）表明分子中含有1個單取代苯環(huán)片段，δ 6.86（2H，d，J=8.5 Hz）和6.62（2H，d，J=8.5 Hz）表明子中含有1個對位取代的苯環(huán)片段，δ 6.33（1H，d，J=2.5 Hz）和6.27（1H，d，J=2.5 Hz）為2個間位偶合的芳香氫信號，δ 3.76（3H，s）為1個甲氧基上的氫信號，δ 3.85（2H，s）為1個亞甲基上的氫信號，且亞甲基與苯環(huán)相連；δ 2.69～2.74（2H，m）和2.58～2.63（2H，m）顯示分子中含有2個亞甲基?；衔?的13C-NMR譜中顯示22個碳信號，其中18個芳香碳、1個甲氧基碳和3個亞甲基碳信號；以上數(shù)據(jù)與本研究中的化合物4非常相似，差別在于取代基的位置不同。為了準確確定化合物1的結構，進行了2D NMR實驗。首先采用HSQC對其進行碳氫信號歸屬；在此基礎上，HMBC譜顯示H-4與C-2，5，6相關，H-6與C-2，4，5，β相關，3-OCH3與C-3相關，H-α與C-1′，2′，6′，β相關，H-β與C-1，2，6，α相關，H-2′，6′與C-3′，4′，5′，α相關，H-3′，5′與C-1′，2′，6′相關；H-4′與C-2′，6′相關，H-3″，5″與C- 1″，4″相關，H-7″與C-1，2，3，1″，2″，6″相關，以上結果確定了該化合物為聯(lián)芐類化合物的母核結構，以及甲氧基和對羥基芐基的取代位置分別為3位和2位。在NOESY譜中，H-6與H-β的相關，表明H-6與聯(lián)芐母核的亞甲基處于鄰位；H-4與3-OCH3相關，表明酚羥基處于H-4和H-6之間，而甲氧基與H-4處于鄰位；至此化合物的結構得以確定，并命名為5-羥基-2-（對羥基芐基）-3-甲氧基聯(lián)芐，見圖1。

化合物1 白色粉末，ESI-MS m/z 335 [M+H]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.20（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.11（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.03（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），6.86（2H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.62（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″，5″），6.33（1H，d，J=2.5 Hz，H-4），6.27（1H，d，J=2.5 Hz，H-6），3.83（2H，s，H-7″），3.74（3H，s，3-OCH3），2.69～2.74（2H，m，H-β），2.58～2.63（2H，m，H-α）。13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：143.6（C-1），119.8（C-2），160.1（C-3），97.9（C-4），157.5（C-5），109.3（C-6），143.3（C-1′），129.4（C-2′，6′），129.2（C-3′，5′），126.8（C-4′），134.2（C-1″），129.9（C-2″，6″），115.8（C-3″，5″），156.0（C-4″），30.5（C-7″），55.9（5-OCH3），38.5（C-α），36.5（C-β）。

化合物2 黃色固體，ESI-MS m/z 449 [M+Na]+。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.18（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′），7.10（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），6.97（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′），6.93（4H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.63（4H，d，J=8.5 Hz，H-3″，5″），6.40（1H，s，H-4），3.92（4H，s，H-7″），2.64～2.69（2H，m，H-β），2.29～2.35（2H，m，H-α）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：142.7（C-1），118.8（C-2，6），155.5（C-3，5），101.6（C-4），143.7（C-1′），129.2（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），126.6（C-4′），134.5（C-1″），130.0（C-2″，6″），115.8（C-3″，5″），155.9（C-4″），31.2（C-7″），33.4（C-α），37.6（C-β）。以上數(shù)據(jù)與文獻[5]報道對比，故鑒定化合物2為shancigusin B。

化合物3 黃色粉末，ESI-MS m/z 465[M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.01（1H，t，J=8.0 Hz，H-5′），6.93（4H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.63（4H，d，J=8.5 Hz，H-3″，5″），6.55（1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-4′），6.51（1H，br s，H-2′），6.47（1H，br d，J=8.0 Hz，H-6′），6.39（1H，s，H-4），3.91（4H，s，H-7″），2.62～2.68（2H，m，H-α），2.25～2.29（2H，m，H-β）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：145.4（C-1），119.0（C-2，6），155.9（C-3，5），101.6（C-4），142.8（C-1′），116.0（C-2′），158.3（C-3′），113.7（C-4′），130.2（C-5′），120.6（C-6′），134.6（C-1″），130.1（C-2″，6″），115.9（C-3″，5″），155.6（C-4″），37.7（C- 7″），31.3（C-α），33.4（C-β）。以上數(shù)據(jù)與文獻[6]報道對比，故鑒定化合物3為shanciguol.

化合物4 白色粉末，ESI-MS m/z 357[M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.20（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.12（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.03（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.63（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″，5″），6.30（1H，d，J=2.5 Hz，H-4），6.23（1H，d，J=2.5 Hz，H-6），3.86（2H，s，H-7″），3.69（3H，s，5-OCH3），2.71～2.76（2H，m，H-β），2.58～2.63（2H. m，H-α）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：143.8（C-1），119.7（C-2），157.5（C-3），100.7（C-4），160.0（C-5），107.3（C-6），143.4（C-1′），129.4（C-2′，6′），129.2（C-3′，5′），126.7（C-4′），134.2（C-1″），130.1（C-2″，6″），115.8（C-3″，5″），156.0（C-4″），30.7（C-7″）55.4（5-OCH3），38.5（C-α），36.6（C-β），。以上數(shù)據(jù)與文獻[7-8]報道對比，故鑒定化合物4為arundinan。

化合物5 白色粉末，ESI-MS m/z 479 [M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.04（2H，d，J=8.5 Hz，H-2，6），7.01（1H，t，J=8.0 Hz，H-5′），6.85（2H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.64（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″，3，5″，5），6.56（1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-4′），6.54（1H，s，H-6），6.50（1H，br s，H-2′），6.49（1H，br d，J=8.0 Hz，H-6′），3.91（2H，s，H-7″），3.85（2H，s，H-7），3.44（3H，s，3-OCH3），2.63～2.68（2H，m，H-α），2.55～2.61（2H，m，H-β）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：144.8（C-1），124.2（C-2），159.4（C-3），120.4（C-4），158.3（C-5），113.5（C-6），141.8（C-1′），116.2（C-2′），156.2（C-3′），113.7（C-4′），130.2（C-5′），120.8（C-6′），134.1（C-1″，1），130.0（C-2″，6″），115.7（C-3″，5″），155.9（C-4″），36.2（C-7″），130.3（C-2，6），116.0（C-3，5），156.0（C-4），38.6（C-7），62.1（3-OCH3），31.5（C-α），29.7（C-β）. 以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道對比，故鑒定化合物5為3′，5-二羥基-2，4-二（對-羥基芐基）-3-甲氧基聯(lián)芐。

化合物6 白色粉末，ESI-MS m/z 463 [M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.18（2H，t，J=7.5，7.5 Hz，H-3′，5′），7.10（1H，t，J=7.5，7.5 Hz，H-4′），6.97（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J=8.5 Hz，H-2，6），6.85（2H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.63（2H，d，J=8.5 Hz，H-3，5），6.61（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″，5″），6.49（1H，s，H-4），3.94（2H，s，H-7），3.91（2H，s，H-7″），3.76（3H，s，5-OCH3），2.66～2.72（2H，m，H-α），2.31～2.36（2H，m，H-β）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：142.6（C-1），119.5（C-2），158.4（C-3），98.0（C-4），155.9（C-5），120.2（C-6），143.6（C-1′），129.1（C-2′，6′），129.2（C-3′，5′），126.7（C-4′），134.3（C-1″），129.9（C-2″，6″），115.9（C-3，5），156.0（C-4″），31.2（C-7″），134.3（C-1），130.0（C-2，6），115.8（C-3″，5″），156.0（C-4），31.1（C-7），55.9（5-OCH3），37.7（C-β），33.4（C-α）。以上數(shù)據(jù)與文獻[10-12]報道對照，故鑒定化合物6為arundin。

化合物7 白色固體，ESI-MS m/z 351[M+H]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.03（1H，t，J=8.0 Hz，H-5′），6.93（2H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.64（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″，5″），6.57（1H，br d，J=8.0 Hz，H-4′），6.54（1H，m，H-6′），6.53（1H，br s，H-2′），6.30（1H，d，J=2.0 Hz，H-4），6.23（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），3.86（2H，s，H-α′），3.70（3H，s，5-OCH3），2.69～2.74（2H，m，H-α），2.51～2.57（2H，m，H-β）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：143.9（C-1），119.7（C-2），157.4（C-3），100.1（C-4），160.0（C-5），107.2（C-6），144.9（C-1′），113.7（C-2′），158.3（C-3′），116.3（C-4′），130.2（C-5′），120.8（C-6′），134.2（C-1″），130.1（C-2″，6″），115.9（C-3″，5″），156.0（C-4″），30.7（C-7″），55.5（5-OCH3），38.5（C-β），36.6（C-α）。以上數(shù)據(jù)與文獻[13-14]報道對照，故鑒定化合物7為3，3′-二羥基-2-（4-羥基芐基）-5-甲氧基聯(lián)芐。

化合物8 淡黃色粉末，ESI-MS m/z 479 [M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.01（1H，t，J=8.0，7.5 Hz，H-5′），6.93（2H，d，J=8.5 Hz，H-2″，6″），6.86（2H，d，J=8.5 Hz，H-2，6），6.63（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″，5″），6.62（2H，d，J=8.5 Hz，H-3，5），6.55（1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6′），6.50（1H，br s，H-2′），6.48（1H，s，H-4），6.47（1H，br d，J=8.0 Hz，H-4′），3.94（2H，s，H-7″），3.91（2H，s，H-7），3.76（3H，s，5-OCH3），2.66～2.71（2H，m，H-α），2.26～2.31（2H，m，H-β）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：142.6（C-1），120.3（C-2），158.2（C-3），98.0（C-4），158.3（C-5），119.5（C-6），145.2（C-1′），113.7（C-2′），155.9（C-3′），115.9（C-4′），130.2（C-5′），120.5（C-6′），134.4（C-1″），130.0（C-2″，6″），115.9（C-3″，5″），156.0（C-4″），31.2（C-7″），134.3（C-1），129.9（C-2，6），115.8（C-3，5），155.9（C-4），31.1（C-7），55.9（5-OCH3），37.7（C-α），33.3（C-β）。以上數(shù)據(jù)與文獻[15]報道對比，故鑒定化合物8為3，3′-二羥基-2′，6′-二（對-羥基芐基）-5-甲氧基聯(lián)芐。

化合物9 白色粉末，ESI-MS m/z 255[M+H]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：9.35（1H，d，J=9.0 Hz，H-5），7.58（1H，d，J=9.0 Hz，H-10），7.53（1H，d，J=9.0 Hz，H-9），7.15（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），7.08（1H，dd，J=9.0，2.5 Hz，H-6），6.94（1H，d，J=2.5 Hz，H-1），6.80（1H，d，J=2.5 Hz，H-3），4.08（3H，s，4-OCH3），3.92（3H，s，2-OCH3）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：102.6（C-1），160.5（C-2），100.3（C-3），158.9（C-4），117.1（C-4a），125.5（C-4b），130.4（C-5），117.4（C-6），155.6（C-7），112.3（C-8），135.7（C-8a），128.6（C-9），128.3（C-10），135.0（C-10a），56.1（4-OCH3），55.8（2-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[16]報道對照，故鑒定化合物9為7-羥基-2，4-二甲氧基菲。

化合物10 白色粉末，ESI-MS m/z 399[M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：9.34（1H，d，J=9.0 Hz，H-5），7.73（1H，d，J=9.0 Hz，H-10），7.40（1H，d，J=9.0 Hz，H-9），7.09（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），7.07（1H，d，J=9.0，2.5 Hz，H-6），7.00（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.62（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），4.34（2H，s，H-7′），4.05（3H，s，4-OCH3），3.94（3H，s，3-OCH3）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：119.3（C-1），148.0（C-2），142.7（C-3），150.8（C-4），119.8（C-4a），125.1（C-4b），129.4（C-5），117.5（C-6），155.9（C-7），112.1（C-8），134.6（C-8a），127.0（C-9），124.5（C-10），129.3（C-10a），133.6（C-1′），130.6（C-2′，6′），115.9（C-3′，5′），156.1（C-4′），31.1（C-7′），61.6（3-OCH3），60.2（4-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[17]報道對照，故鑒定化合物10為bleformin B。

化合物11 棕黃色固體，ESI-MS m/z 269[M-H]-；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：9.36（1H，d，J=9.0 Hz，H-5），7.51（2H，q，J=9.0 Hz，H-9，10），7.20（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），7.18（1H，s，H-1），7.17（1H，dd，J=9.0，2.5 Hz，H-6），4.11（3H，s，4-OCH3），3.97（3H，s，3-OCH3）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：108.2（C-1），147.6（C-2），133.6（C-3），153.2（C-4），119.0（C-4a），124.4（C-4b），128.6（C-5），112.0（C-6），140.9（C-7），116.5（C-8），129.7（C-8a），127.4（C-9），126.4（C-10），131.3（C-10a），61.5（4-OCH3），59.8（3-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[18]報道對照，故鑒定化合物11為nudol。

化合物12 棕黃色固體。ESI-MS m/z 269[M-H]-。1H-NMR（CD3COCD3，500 MHz）δ：9.33（1H，d，J=9.5 Hz，H-5），7.58（1H，d，J=9.0 Hz，H-9），7.44（1H，d，J=9.0 Hz，H-10），7.23（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），7.22（1H，s，H-1），7.17（1H，dd，J=9.5，2.5 Hz，H-6），3.98（3H，s，4-OCH3），3.92（3H，s，2-OCH3）；13C-NMR（CD3COCD3，125 MHz）δ：105.9（C-1），145.3（C-2），141.1（C-3），155.9（C-4），135.0（C-4a），120.0（C-4b），125.3（C-5），112.2（C-6），148.4（C-7），117.4（C-8），123.9（C-8a），129.0（C-9），128.1（C-10），126.4（C-10a），59.6（4-OCH3），56.3（2-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[19]報道對照，故鑒定化合物12為3，7-二羥基-2，4-二甲氧基菲。

化合物13 白色針狀結晶，ESI-MS m/z 265 [M+Na]+。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.94（1H，d，J=9.5 Hz，H-5），6.56（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），6.55（1H，dd，J=9.5，2.5 Hz，H-6），6.33（1H，d，J=2.0 Hz，H-1），6.24（1H，d，J=2.0 Hz，H-3），3.74（3H，s，4-OCH3），2.56（4H，s，H-9，10）。13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：108.3（C-1），159.1（C-2），99.3（C-3），156.0（C-4），116.7（C-4a），126.1（C-4b），130.0（C-5），115.0（C-6），157.5（C-7），113.6（C-8），141.8（C-8a），31.8（C-9），31.2（C-10），140.4（C-10a），55.8（4-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[20]報道對照，故鑒定化合物13為2，7-二羥基-4-甲氧基-9，10二氫菲。

化合物14 白色粉末，ESI-MS m/z 611 [M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：8.07（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），8.05（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），7.02（2H，d，J=8.0 Hz，H-2″，6″），6.65（2H，d，J=8.0 Hz，H-3″，5″），6.63（2H，m，H-8，8′），6.62（2H，m，H-6，6′），6.62（1H，s，H-3），4.06（1H，d，J=15.5 Hz，H-7″a），4.01（1H，d，J=15.5 Hz，H-7″b），3.90（3H，s，4-OCH3），3.25（3H，s，4′-OCH3），2.64（2H，m，H-10′），2.58（2H，m，H-9′），2.58（2H，m，H-9），2.48（2H，m，H-10）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：112.8（C-1），156.2（C-2），99.3（C-3），159.0（C-4），117.6（C-4a），126.4（C-4b），130.4（C-5），113.5（C-6），156.0（C-7），114.9（C-8），140.9（C-8a），30.9（C-9），27.5（C-10），142.2（C-10a），122.2（C-1′），153.1（C-2′），117.7（C-3′），156.0（C-4′），121.5（C-4′a），126.4（C-4′b），129.8（C-5′），114.2（C-6′），156.6（C-7′），114.8（C-8′），140.7（C-8′a），31.0（C-9′），28.7（C-10′），140.4（C-10′a），133.5（C-1″），130.2（C-2″，6″），116.0（C-3″，5″），156.1（C-4″），31.8（C-7″），60.0（4′-OCH3），55.9（4-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[17]報道對照，故鑒定化合物14為bleformin D。

化合物15 棕黃色粉末，ESI-MS m/z 503[M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：9.43（1H，d，J=9.0 Hz，H-5′），8.00（1H，s，H-5），7.44（1H，d，J=9.0 Hz，H-9′），7.43（1H，d，J=9.0 Hz，H-10′），7.11（1H，d，J=2.5 Hz，H-8′），7.08（1H，dd，J=9.0，2.5 Hz，H-6′），6.92（1H，s，H-3′），6.85（1H，s，H-8），6.35（1H，d，J=2.0 Hz，H-3），6.34（1H，d，J=2.0 Hz，H-1），4.13（3H，s，4′-OCH3），3.68（3H，s，4-OCH3），2.76（4H，s，H-9，10）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：108.4（C-1），157.6（C-2），99.3（C-3），159.2（C-4），116.8（C-4a），126.6（C-4b），133.9（C-5），121.6（C-6），154.4（C-7），115.7（C-8），140.2（C-8a），31.1（C-9），31.9（C-10），142.0（C-10a），115.0（C-1′），153.4（C-2′），100.4（C-3′），160.0（C-4′），116.8（C-4′a），125.7（C-4′b），130.6（C-5′），117.2（C-6′），155.4（C-7′），112.0（C-8′），134.6（C-8′a），128.0（C-9′），126.4（C-10′），134.7（C-10′a），56.1（4′-OCH3），56.0（4-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[21]報道對照，故鑒定化合物15為4，4′-二甲氧基-9，10-二氫-[6，1′-聯(lián)菲]-2，2′，7，7′-四醇。

化合物16 白色粉末，ESI-MS m/z 505 [M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：8.03（1H，d，J=8.5 Hz，H-5），7.88（1H，s，H-5′），6.76（1H，s，H-8′），6.63（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6），6.60（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.57（1H，s，H-3），6.32（1H，d，J=2.0 Hz，H-1′），6.37（1H，d，J=2.0 Hz，H-3′），3.87（3H，s，4-OCH3），3.74（3H，s，4′-OCH3），2.70（4H，s，H-9′，10′），2.54-2.59（2H，m，H-9），2.49～2.53（2H，m，H-10）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：118.3（C-1），155.0（C-2），99.4（C-3），158.2（C-4），117.6（C-4a），126.4（C-4b），130.4（C-5），113.5（C-6），156.1（C-7），114.7（C-8），141.3（C-8a），31.2（C-9），28.9（C-10），140.9（C-10a），108.4（C-1′），157.6（C-2′），99.4（C-3′），159.2（C-4′），116.8（C-4′a），126.6（C-4′b），133.0（C-5′），122.2（C-6′），153.9（C-7′），115.5（C-8′），139.9（C-8′a），31.0（C-9′），31.9（C-10′），141.9（C-10′a），56.0（4，4′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[13]報道對比，故鑒定化合物16為gymconopin C。

化合物17 白色粉末，ESI-MS m/z 443 [M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.99（1H，d，J=9.0 Hz，H-9），6.90（1H，d，J=1.5 Hz，H-2′），6.79（1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6′），6.74（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），6.63（1H，d，J=2.5 Hz，H-6），6.62（1H，dd，J=9.0，2.5 Hz，H-8），6.54（1H，s，H-11），5.64（1H，d，J=3.0 Hz，H-2），3.84（1H，m，H-1″a），3.83（3H，s，10-OCH3），3.80（3H，s，3′-OCH3），3.58（1H，m，H-1″b），3.45（1H，m，H-3），2.58～2.70（4H，m，H-4，5）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：88.7（C-2），54.6（C-3），116.7（C-3a），137.5（C-3b），27.9（C-4），30.9（C-5），140.2（C-5a），114.9（C-6），156.2（C-7），113.7（C-8），130.2（C-9），118.0（C-9b），126.1（C-9a），159.4（C-10），93.8（C-11），160.5（C-11a），135.7（C-1′），110.1（C-2′），149.0（C-3′），147.2（C-4′），116.2（C-5′），119.0（C-6′），64.9（C-1″），56.4（3′-OCH3），56.2（10-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[21]中報道對比，鑒定化合物17為（2，3-反式）-2-（4-羥基-3-甲氧基苯基）3-羥甲基-10-甲氧基-2，3，4，5-四氫菲[2，1-b]呋喃-7-醇。

化合物18 白色固體，ESI-MS m/z 443 [M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：8.00（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），7.00（1H，d，J=1.5 Hz，H-2′），6.88（1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6′），6.81（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），6.64（1H，d，J=2.5 Hz，H-8），6.61（1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6），6.49（1H，s，H-3），4.64（1H，d，J=8.0 Hz，H-13），4.08（1H，ddd，J=5.5，8.0，8.5 Hz，H-12），3.85（3H，s，3′-OCH3），3.80（3H，s，4-OCH3），2.96（1H，dd，J=15.5，5.5 Hz，H-11a），2.67（1H，dd，J=15.5，8.5，H-11b），2.59～2.66（4H，m，H-9，10）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：131.9（C-1），154.7（C-2），99.6（C-3），157.5（C-4），118.7（C-4a），126.0（C-5a），130.4（C-5），114.7（C-6），156.3（C-7），113.6（C-8），140.3（C-8a），26.4（C-9），30.7（C-10），139.8（C-10a），111.2（C-1′），111.9（C-2′），148.9（C-3′），147.7（C-4′），116.0（C-5′），121.4（C-6′），82.9（C-13），69.2（C-12），32.4（C-12），56.4（3′-OCH3），55.9（4-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻[22]報道對比，故鑒定化合物18為shanciol。

4 討論

文獻報道，化合物7和8能夠顯著地抑制微管蛋白聚合，其IC50均為10 μmol·L-1；并且化合物7能夠顯著增強SN-38對于乳腺癌耐藥蛋白轉運紅白血病細胞株的細胞毒活性[23]。化合物10，14對超氧陰離子的產(chǎn)生和彈性蛋白酶的釋放具有抑制作用而表現(xiàn)出抗炎活性，其中化合物14對超氧陰離子的產(chǎn)生具有較強的抑制作用，其IC50為0.2 μmol·L-1 [17]；化合物11，12均對乙酰膽堿酯酶有抑制活性，推測該類化合物可能具有神經(jīng)保護的作用[21]；化合物13對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、糞腸球菌及枯草芽孢桿菌等革蘭陽性菌具有中等強度的抗菌作用（MIC 8～128 mg·L-1）[24]。因此，白及具有的抗腫瘤、抗菌、抗炎等作用可能與其所含的上述化合物的活性相關。

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[責任編輯 丁廣治]