胡雄貴，蔡文杰，鄧 緣，張 星，3，陳 晨，張翠永（.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南 長(zhǎng)沙 403；2.湖南三和生物科技有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 4025；3.湖南鑫廣安農(nóng)牧股份有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 4000）

玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬免疫力和豬瘟抗體水平的影響

胡雄貴1，2，蔡文杰1，2，鄧 緣1，張 星1，3，陳 晨1，張翠永1
（1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410131；2.湖南三和生物科技有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410125；3.湖南鑫廣安農(nóng)牧股份有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410100）

試驗(yàn)旨在研究玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬豬瘟免疫效果和血清免疫力的影響。試驗(yàn)選用初始體重相近的杜長(zhǎng)大三元仔豬60頭，隨機(jī)分為5個(gè)處理組，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭豬，試驗(yàn)期21 d。試驗(yàn)Ⅰ組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)Ⅱ組至試驗(yàn)Ⅴ組分別在飼糧中添加100、200、400、600 mg/kg的玉屏風(fēng)散多糖。結(jié)果表明：1）免疫后添加200 mg/kg以上的玉屏風(fēng)散多糖的試驗(yàn)Ⅲ至Ⅴ組與對(duì)照組相比豬瘟平均阻斷率有顯著差異（P<0.05），添加劑量為400 mg/kg的試驗(yàn)Ⅳ組的豬瘟平均阻斷率最高，離散度最低。2）隨著玉屏風(fēng)散多糖添加量的提高，仔豬血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量逐漸提高。IgA含量在添加200 mg/kg時(shí)即可達(dá)到顯著差異（P<0.05），IgG和IgM達(dá)到顯著性差異的濃度分別為400和600 mg/kg。結(jié)果表明，飼糧中添加玉屏風(fēng)散多糖可增強(qiáng)仔豬對(duì)豬瘟的免疫效果，添加量以400 mg/kg效果最好。同時(shí)可提高仔豬血清的免疫球蛋白含量，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，添加量以600 mg/kg效果最好。

玉屏風(fēng)散；仔豬；豬瘟抗體；免疫球蛋白

玉屏風(fēng)散在醫(yī)學(xué)臨床上應(yīng)用非常廣泛，涉及免疫系統(tǒng)、血液病以及消化系統(tǒng)、皮膚病等等，具有提高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)抗氧化力的作用[1]。藥方由防風(fēng)30 g、黃芪60 g（蜜炙）、白術(shù)60 g組成一劑。玉屏風(fēng)提取物中的玉屏風(fēng)散多糖含黃芪多糖、白術(shù)多糖和防風(fēng)多糖等，具有廣泛的免疫增強(qiáng)作用[2]。在動(dòng)物研究中，可加強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫功能、提高機(jī)體的抗氧化力，對(duì)生長(zhǎng)性能具有促進(jìn)作用[3]，但在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用較少。本研究以斷奶仔豬為試驗(yàn)對(duì)象，探索玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬免疫指標(biāo)和豬瘟抗體的影響，旨在為玉屏風(fēng)散多糖在畜牧生產(chǎn)中，特別是新型綠色飼料添加劑在仔豬飼養(yǎng)上的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)豬為杜長(zhǎng)大三元雜種斷奶仔豬。玉屏風(fēng)散多糖由湖南三和生物科技有限公司提供，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，玉屏風(fēng)散多糖中總還原糖為35.13%、粗蛋白質(zhì)為17.70%、粗脂肪為0.92%、粗灰分為9.36%、水分為5.03%、粗纖維為0.67%，純度約為80%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì)

采用單因素完全隨機(jī)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將體重相近（7.7±0.51）kg、遺傳基礎(chǔ)一致的60頭杜長(zhǎng)大三元仔豬隨機(jī)分為5個(gè)處理組，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭豬，預(yù)試期為3 d，均飼喂基礎(chǔ)飼糧，正試期為21 d。試驗(yàn)Ⅰ為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)Ⅱ至試驗(yàn)Ⅴ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加玉屏風(fēng)散多糖100、200、400、600 mg/kg。

1.3 飼養(yǎng)試驗(yàn)

試驗(yàn)在湖南鑫廣安農(nóng)牧股份有限公司的豬場(chǎng)進(jìn)行，正試期開(kāi)始于2016年9月1日，結(jié)束于2016年9月21日，試驗(yàn)期為21 d。仔豬舍為半開(kāi)放式，自由飲水，粉料飼喂，自由采食。舍內(nèi)溫度控制在28～32℃，濕度控制在60%～80%。試驗(yàn)前對(duì)豬舍進(jìn)行全面消毒，按照豬場(chǎng)常規(guī)管理對(duì)仔豬進(jìn)行驅(qū)蟲與免疫接種。

1.4 豬瘟抗體和血清免疫力測(cè)定

試驗(yàn)開(kāi)始第1天對(duì)每頭仔豬進(jìn)行豬瘟疫苗免疫，接種劑量為2頭份/頭。在試驗(yàn)開(kāi)始（免疫前）和試驗(yàn)結(jié)束后的第2天清早進(jìn)行前腔靜脈采血，試驗(yàn)前采血5 mL，用于檢測(cè)豬瘟抗體水平，試驗(yàn)后采血10 mL，用于豬瘟抗體和免疫球蛋白檢測(cè)。血液于4℃、3 500 r/min離心10 min，分離出血清，分裝于EP管中，－20℃保存。血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）的含量測(cè)定采用全自動(dòng)生化分析儀，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，豬瘟病毒抗體檢測(cè)使用ELISA試劑盒，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)愛(ài)德士生物科技有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)采用Excel進(jìn)行前期數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)算結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)差異性分析，采用單因素方差分析和Duncan法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉屏風(fēng)散多糖對(duì)豬瘟抗體水平的影響

由表1可見(jiàn)，免疫前豬瘟阻斷率無(wú)顯著性差異（P＞0.05），離散度均值為30.3。免疫21 d后檢測(cè)豬瘟阻斷率最高為試驗(yàn)Ⅳ組的（92.12±12.2）%，最低為對(duì)照組的（67.32±11.0）%，離散度最低為試驗(yàn)Ⅳ組的13.87，最高為試驗(yàn)Ⅰ組的23.57，均值為17.3。免疫后試驗(yàn)Ⅲ至Ⅴ與試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組的豬瘟阻斷率有顯著差異（P＜0.05）。從以上數(shù)據(jù)分析說(shuō)明，添加玉屏風(fēng)散多糖400 mg/kg對(duì)提高仔豬豬瘟抗體水平效果最好。

表1 添加不同劑量的玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬豬瘟抗體水平的影響

2.2 玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬血清免疫力的影響

玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬免疫力的影響見(jiàn)表2。IgA、IgG、IgM值均隨玉屏風(fēng)散多糖含量的增加而提高，且以試驗(yàn)Ⅴ組最高，其中試驗(yàn)Ⅲ至Ⅴ組的IgA值與試驗(yàn)Ⅰ組有顯著差異（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅳ組和試驗(yàn)Ⅴ組的IgG值與試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組有顯著差異（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅴ組的IgM值與試驗(yàn)Ⅰ組有顯著差異（P＜0.05）。

表2 添加不同劑量的玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬血清免疫力的影響

3 討論

3.1 玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬豬瘟抗體水平的影響

玉屏風(fēng)散的主要成分為黃芪多糖、白術(shù)多糖和防風(fēng)多糖，均具有較強(qiáng)的免疫增強(qiáng)作用[4]，可有效提高仔豬機(jī)體對(duì)豬瘟、藍(lán)耳病等疫病的抗體免疫水平。楊建平[5]研究表明，在仔豬飼料中添加玉屏風(fēng)散超微粉，豬瘟抗體水平在免疫后7 d開(kāi)始逐漸上升，在免疫后21 d達(dá)到最高，然后緩慢下降，以添加0.5%玉屏風(fēng)散超微粉組對(duì)提高豬瘟抗體水平效果最好。姚敬明等[6]研究發(fā)現(xiàn)用黃芪多糖直接稀釋豬瘟活疫苗可顯著提高豬瘟疫苗抗體水平，同時(shí)還可提高體內(nèi)干擾素－γ（IFN－γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）濃度，降低豬白細(xì)胞介素-4（IL-4）濃度，證明了在使用豬瘟疫苗免疫時(shí)添加黃芪多糖可增強(qiáng)仔豬免疫力，提高豬瘟免疫效果。本研究中，添加200 mg/kg以上的玉屏風(fēng)散多糖即可起到顯著增強(qiáng)平均阻斷率，降低離散度的作用，實(shí)際應(yīng)用中添加量為400 mg/kg效果最好。

3.2 玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬血清免疫力水平的影響免疫球蛋白是具有抗體活性的動(dòng)物蛋白，主要參與體液免疫調(diào)節(jié)[7]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明[8]，玉屏風(fēng)散對(duì)機(jī)體IgA、IgG、IgM能起免疫促進(jìn)作用。特別對(duì)呼吸道患者的血清IgA水平有明顯增加作用。動(dòng)物試驗(yàn)研究表明，玉屏風(fēng)散多糖可顯著促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和刀豆蛋白A誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，并促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的活化吞噬能力和增殖功能，從而增強(qiáng)機(jī)體的體液免疫效果[9-10]并可促進(jìn)免疫抑制模型小鼠在病毒感染時(shí)sIgA的分泌[11]，也可提高正常小鼠機(jī)體的IgA水平[12]。本研究中，免疫球蛋白中IgA、IgG、IgM的濃度均隨玉屏風(fēng)散多糖添加量的增加而提高，其中對(duì)IgA的影響最為顯著，添加200 mg/kg即可達(dá)到顯著影響，IgG和IgM達(dá)到顯著影響的濃度分別為400和600 mg/kg，從以上數(shù)據(jù)分析，添加600 mg/kg的玉屏風(fēng)散多糖對(duì)提高仔豬免疫力水平效果最好。

4 結(jié)論

飼糧中添加玉屏風(fēng)散多糖可增強(qiáng)仔豬對(duì)豬瘟的免疫效果，添加量以400 mg/kg效果最好。同時(shí)可提高仔豬血清的免疫球蛋白含量，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，添加量以600 mg/kg效果最好。

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（編輯：郭玉翠）

Effect of Yupingfeng San Polysaccharide on Serum Immunity Index and CSFV Antibod of Piglets

HU Xionggui1,2,CAI Wenjie1,2,DENG Yuan1,ZHANG Xing1,3,CHEN Chen1,ZHANG Cuiyong1
(1.Hu'nan Institute of Animal and Veterinary Science,Changsha 410131,China;2.Hu'nan Sanhe Biotechnology Co.,Ltd.,Changsha410125,China;3.Hu'nanXinguang'anAgriculturalHusbandryCo.,Ltd.,Changsha410100,China)

The purpose of this study was to investigate the effects of Yupingfeng san polysaccharide on serum immunity index and CSFV Antibod of piglets.The initial test of similar weight of 60 D×L×Y piglets were randomly divided into 5 treatment groups,each treatment consisted of 4 replications of 3 pigs per replicate.The test period is 21 d.GroupⅠwas the control group with basal diet,Yupingfeng san polysaccharide test groupⅡtoⅤwere supplemented with 100,200,400,600 mg/kg in the diet.The results show that:1)Add above 200 mg/kg Yupingfeng san polysaccharide compared with the control group,the average blocking rate of CSFV Antibod had significant difference(P<0.05),the additive amount was 400 mg/kg groupⅣhave highest CSFV Antibod average blocking and the lowest dispersion.2)With the increase of the amount of Yupingfeng san polysaccharide,the contents of serum immunoglobulin IgA,IgG and IgM were gradually increased.IgA content was significantly increased when the addition of 200 mg/kg(P<0.05),IgG and IgM reached a significant effect of the concentration is 400 and 600 mg/kg(P<0.05).The results show that the addition of Yupingfeng san polysaccharide can enhance the immune effect of piglets of CSFV Antibod,the diets of 400 mg/kg has the best effect.At the same time,it can improve the immune globulin content and enhance the immunity of piglets,and the diets of 600 mg/kg has the best effect.

Yupingfeng san;piglet;CSFV Antibod;immunoglobulin

S816.7

A

1002-1957(2017)02-0121-03

2017-01-19

湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2016NK3001）

胡雄貴（1975-），男，湖南雙峰人，副研究員，碩士，主要從事動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究工作.E-mail：59601723@qq.com