林玉萍+王津+趙聲蘭+虎春艷

【摘要】利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）技術(shù)對云南娃兒藤（Tylophora yunnanensis Schltr）莖葉中的揮發(fā)性成分進行分析。從云南娃兒藤莖葉中鑒定出18個化合物，其結(jié)構(gòu)類型多樣，并運用氣相色譜峰面積百分比法確定各個化合物的相對百分含量。其結(jié)果為云南娃兒藤的化學成分和藥理活性的研究提供理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】云南娃兒藤；揮發(fā)性成分；氣相色譜-質(zhì)譜法

【中圖分類號】R2841【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）08-0024-03

Abstract：To analyze the chemical constituents of volatile components from Tylophora yunnanensis Schltr. The air-dried stems and leaves of Tylophora yunnanensis Schltr were extracted with the petroleum ether and identified by GC-MS18 constituents were identified from the petroleum ether extraction of Tylophora yunnanensis Schltr，and the relative contents of the components were determined with area percentage method. The research provides a theoretical basis for the study of chemical constituents and pharmaceutical activities of Tylophora yunnanensis Schltr.

Keywords：Tylophora yunnanensis Schltr； Volatile components； GC-MS

云南娃兒藤（Tylophora yunnanensis Schltr）為蘿藦科娃兒藤屬植物，其根在彝藥中稱為小白薇，常用來治療尿路感染、腎炎、痢疾、氣虛無力等[1]。其主要生長于海拔2000m以下的山向陽曠野及草地，主產(chǎn)于云南、貴州和四川，云南分布較為廣泛，在大理、楚雄、昆明等均有分布[2]。娃兒藤屬植物在前期研究中具有抗腫瘤、抗炎活性[3-4]。在前期的活性研究中發(fā)現(xiàn)[5]，云南娃兒藤乙醇提取物和不同萃取部位對炎癥晚期肉芽組織增生有顯著的抑制作用[5]。為進一步明確抗炎活性成分，促進資源的綜合利用，研究利用氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)對其莖葉中的揮發(fā)性成分進行分析鑒定，以期為進一步全面認識云南娃兒藤的化學成分和生物活性研究提供理論依據(jù)。

1儀器與材料

11材料與試劑云南娃兒藤莖葉于采自云南楚雄，經(jīng)云南中醫(yī)學院藥用植物教研室普春霞副教授鑒定為蘿摩科Asclepiadaceae娃兒藤屬Tylophora云南娃兒藤Tylophora yunnanensis Schltr，本論文研究材料為云南娃兒藤的莖葉；石油醚（分析純，天津市風帆化學試劑科技有限公司），甲醇（色譜級，德國默克公司）。

12儀器與設(shè)備Varian CP 3900-Varian saturn 2100T 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）；HHS11-4電熱恒溫水浴鍋； RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（亞榮生化儀器廠）。

2方法

21樣品處理方法200g干燥的楚雄產(chǎn)地云南娃兒藤的莖葉，粉碎成粗粉，以石油醚回流提取3次，每次3h，合并3次提取液，減壓回收溶劑，得揮發(fā)性組分。取少量揮發(fā)性樣品，將樣品溶于色譜級甲醇中，備測。

22氣相色譜條件色譜柱：DB-5（30m×025mm毛細柱；進樣器溫度：280℃；升溫程序條件：初溫80℃，保持3min，程序升溫 20℃/min，終溫280℃保持10min；載氣：He（99998%），流速：10mL/min；進樣量1μL；分流比：30∶1。

23質(zhì)譜條件EI離子源，離子源溫度：150℃，Manifold溫度：50℃，傳輸線溫度：280℃；掃描范圍m/z：40～650；背景質(zhì)量：45u；標準質(zhì)譜圖檢索庫NIST。

3結(jié)果與分析

對從石油醚提取得到的揮發(fā)性成分樣品進行GC-MS分析，其總離子圖見圖1。經(jīng)過質(zhì)譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)（NIST）自動檢索上述樣品的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，將相似度低、離子峰低、無標準譜核對的組分等去除，得到揮發(fā)性成分。各組分的相對含量根據(jù)總離子圖由計算機采用峰面積百分比法計算而得。從云南娃兒藤莖葉的揮發(fā)性成分樣品中鑒定出18 個化合物，結(jié)果見表1。

以上分析結(jié)果表明，從云南娃兒藤莖葉石油醚提取的揮發(fā)性成分中分析鑒定了18個化合物，分別為甾醇類、黃酮類、生物堿類、酯類、羧酸類等，其結(jié)構(gòu)類型多樣、復雜，具有多種生物活性。其中馬錢子堿具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和抗心律失常、鎮(zhèn)痛等作用[6-9]，角鯊烯具有調(diào)控膽固醇的代謝、抗氧化、抗腫瘤、保肝等作用[10-11]，麥角甾醇具有抗菌、抗結(jié)核等作用[12-13]，β-谷甾醇具有抗氧化、抗腫瘤等作用[14-15]。由于石油醚提取得到的揮發(fā)性成分，極性較小，難于分離得到單一化合物，通過GC-MS可以對其化學成分進行分析和鑒定，為其進一步的研究鑒定基礎(chǔ)。

4結(jié)論

實驗利用氣相色譜-質(zhì)譜法研究了云南娃兒藤中的揮發(fā)性成分，鑒定其中18 種主要組分，并確定了它們的化學結(jié)構(gòu)，這些結(jié)果為云南娃兒藤的活性成分的研究和資源的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。參考文獻

[1]楊本雷.中國彝族藥學[M]. 昆明：云南民族出版社，2004：546.

[2]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京：科學出版社，1993：526-529.

[3]甄月英，黃學石，于德泉，等.卵葉娃兒藤中的抗癌活性生物堿[J].植物學報（英文版），2002，44（3）：349-353.

[4]楊超燕，陳艷芬，陶曙紅，等.光葉娃兒藤解熱抗炎作用實驗研究[J].中國實驗方劑學雜志，2013，14（4）：284-286.

[5]陳珠，陳海豐，楊彩霞，等.民族藥小白薇的抗炎活性成分的初步研究[J]. 云南中醫(yī)中藥雜志，2015，36（8）：68-70.

[6]Ganguly T，Sainis KB.Inhibition of cellular immune responses by Tylophora indica in experiment- al modes[J].Phytomedicine，2001，8 （5）：348-355.

[7]趙立民，劉玉國，牛作興.馬錢子堿抗腫瘤作用的研究進展[J].中華腫瘤防治雜志，2013，20（11）：877.

[8]徐金華，陳軍，蔡寶昌.馬錢子堿的研究進展[J].中國新藥雜志，2009，18（3）：213-216，221.

[9]唐敏，伍冠一，朱嬋，等.馬錢子堿鎮(zhèn)痛研究進展[J].中草藥，2014，45（12）：1791-1795.

[10]劉純友，馬美湖，靳國鋒，等.角鯊烯及其生物活性研究進展[J].中國食品學報，2015（5）：147-156.

[11]繆云萍，陳愛瑛，夏志國，等.角鯊烯對小鼠急性酒精性肝損傷的保護作用[J].食品工業(yè)科技，2015，36（16）：364-365.

[12]曹龍輝，李曉珺，趙文紅，等.麥角甾醇的研究進展[J].中國釀造，2014，33（4）：9-12.

[13]高虹，史德芳，楊德，等.巴西菇麥角甾醇抗腫瘤活性及作用機理初探[J].中國食用菌，2011（6）：35-39.

[14]董賀，張?zhí)?，李俊，?山楂中谷甾醇抑制腫瘤細胞的研究[J].中國生化藥物雜志，2009，30（4）：270-272.

[15]賀成，李偉，張建軍，等.阿薩伊油中β-谷甾醇及總甾醇含量測定和抗氧化活性研究[J].中國中藥雜志，2014（23）：4620-4624.

（收稿日期：2017-02-18編輯：梁志慶）