蒙順武

（廣西省來賓市人民醫(yī)院檢驗科，廣西 來賓 546100）

來賓地區(qū)地中海貧血基因攜帶及其紅細胞參數(shù)特點研究

蒙順武

（廣西省來賓市人民醫(yī)院檢驗科，廣西 來賓 546100）

目的探究來賓地區(qū)地中海貧血基因攜帶情況以及紅細胞參數(shù)的特點，為來賓地區(qū)地中海貧血的臨床診斷與治療提供參考。方法采用回顧性分析的方法，收集來賓地區(qū)地中海貧血基因診斷標本，共收集到2 000例，其中成人診斷標本為1 500例，兒童診斷標本為500例，用擴增法對常見的來賓地區(qū)地中海貧血基因進行檢驗，對突變型β地中海貧血基因、缺失型α地中海貧血基因以及CD41-42雜合子進行相應(yīng)的分析。采用統(tǒng)計學分析的方法探究紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞平均體積等指標之間的差異。結(jié)果調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，含CD41-42基因型為142例，其低頻攜帶率達到了7.1%，CD41-42雜合子為108例，占5.4%；CD41-42復合α地中海貧血為27例，占1.35%，CD41-42復合β地中海貧血為12例，占0.06%。且CD41-42復合α地中海貧血成人的基因攜帶與兒童的基因攜帶狀況無明顯區(qū)別，差異無統(tǒng)計學意義。而CD41-42復合β地中海貧血基因成人與兒童之間的基因攜帶率差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論來賓地區(qū)CD41-42β地中海貧血中CD41-42雜合子較為常見。且CD41-42雜合子能夠與其他地貧突變合并存在，使紅細胞參數(shù)出現(xiàn)明顯的差異。且人們的性別、年齡與CD41-42基因攜帶有一定的關(guān)系。

來賓；地中海；貧血基因攜帶；紅細胞參數(shù)；特點

地中海貧血在我國的華南地區(qū)出現(xiàn)較多，尤其以廣東、廣西一帶出現(xiàn)最為繁多，嚴重威脅著人們的生命安全。單基因常染色體遺傳作為其中發(fā)病率最高的一種遺傳路徑，其表現(xiàn)形式多種多樣[1]。人體的紅細胞參數(shù)受到極大的影響，成為臨床醫(yī)學篩選的一大指標。在廣西省的來賓地區(qū)，β地貧基因攜帶率已經(jīng)達到4.63%，尤其以CD41-42最為常見，成為地貧基因突變高發(fā)地區(qū)。為了探究來賓地區(qū)地中海貧血基因攜帶情況及紅細胞參數(shù)的特點，特收集2 000例地貧診斷標本，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本研究收集的標本皆是來自廣西省來賓市人民醫(yī)院2013年3月～2015年9月行婚前、孕前、兒科門診等檢查的外周血。所有的標本皆符合統(tǒng)計指標，排除由其它因素引起的貧血、感染等情況，另外由于藥物服用導致紅細胞參數(shù)變化的患者不在本次標本收集范圍內(nèi)，年齡未滿1歲的幼兒血細胞指標不穩(wěn)定，也不在統(tǒng)計范圍。共收集標本2000例，其中成人為1500例，兒童為500例，所有患者受檢時，均未輸過血或距離上次輸血時間超過1個月。

1.2 檢測儀器 本次檢測用到的儀器有血細胞分析儀（XT-4000i），希森美康醫(yī)用電子（上海）有限公司生產(chǎn)，另外還有廣州中山達安公司生產(chǎn)的HEMA-9600PCR擴增儀，檢驗試劑為廠家的配套試劑[2]。

1.3 檢測方法

1.3.1 地貧基因攜帶分析 采用枸鹽酸抗凝管抽取適量的靜脈血，然后用廠家配送的DNA提取試劑將靜脈血中的DNA提取出來，進而用PCR擴增儀進行擴增。再用PCR-膜反向點雜交技術(shù)對人群基因組DNA中β珠蛋白基因突變的8個常見位點以及9個少見位點進行檢測，對中國人中常出現(xiàn)的3種缺失型α地貧基因用跨斷裂位點法進行檢測[3]。

1.3.2 血細胞參數(shù)分析 采用EDTA抗凝管抽取適量靜脈血，將其直接放置血細胞分析儀進行檢測，對紅細胞的計數(shù)、血紅蛋白以及MCH等進行分析判斷[4]。

1.4 統(tǒng)計學方法 本研究數(shù)據(jù)均用SPSS15.0統(tǒng)計軟件處理，計量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義[5]。

2 結(jié)果

2.1 地貧基因攜帶情況以及分布 通過對2 000例標本的監(jiān)測分析，CD41-42基因型為142例，攜帶率達到了7.1%，CD41-42雜合子為108例，占5.4%，CD41-42復合α地中海貧血為27例，占1.35%，復合β地中海貧血為12例，占0.06%。CD41-42雜合子攜帶率、CD41-42復合α地貧基因攜帶率兒童與成人之間差異不明顯，無統(tǒng)計學意義，CD41-42復合β地中海貧血基因成人與兒童的攜帶率比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。且成人中僅發(fā)現(xiàn)CD41-42雜合子復合βEM一種雙重雜合子。見表1。

表1 地貧基因攜帶情況以及分布Table 1 Thalassemia carrier status and distribution

2.2 CD41-42基因組合紅細胞參數(shù)特點 CD41-42雜合子和CD41-42復合α地貧基因攜帶者的紅細胞參數(shù)表現(xiàn)為小細胞低色素性輕度貧血，其中Hb、Htc、MCV、MCH參數(shù)組間沒有明顯差異無統(tǒng)計學意義，MCV、MCH組間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。CD41-42復合β地貧表現(xiàn)為小細胞低色素性中度貧血，Hb、Hct參數(shù)與其他兩組基因相比，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），MCV、MCH與CD41-42雜合子相比，其差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），與CD41-42復合α地貧相比差異無統(tǒng)計學意義。見表2。

表2 CD41-42基因組合紅細胞參數(shù)特點（±s）Table 2 CD41-42 combination of genes characteristic of red blood cell parameters（±s）

表2 CD41-42基因組合紅細胞參數(shù)特點（±s）Table 2 CD41-42 combination of genes characteristic of red blood cell parameters（±s）

項目CD41-42雜合子Hb（g/L）Hct（%）MCV（fL）MCH（pg）124.4±24.2 0.4±0.5 65.5±12.1 23.4±2.43 CD41-42復合α地貧126.3±26.6 0.38±0.7 68.4±23.1 25.5±6.6 CD41-42復合β地貧72.3±35.7 0.21±0.1 75.4±12.6 27.5±4.9

3 討論

3.1 地中海貧血的分布與分型 作為世界上極為常見的單基因遺傳病之一，地中海貧血對人們的身心健康有著重要的影響，在我國的云南、海南、臺灣等地區(qū)都有不同程度的發(fā)生，且我國的α地貧主要包括-α3.7、-α4.2、--SEA三種不同的類型，β地貧基因則主要分為β0地貧以及β+地貧，前者主要表現(xiàn)為β鏈完全缺失，后者則表現(xiàn)為β鏈合成減少[6]。目前，臨床醫(yī)學中對地中海貧血進行了深入的研究，并取得了一定的研究成果。以往對地中海貧血的篩查主要通過血常規(guī)測定、紅細胞脆性檢驗等方法，這些方式盡管操作簡便，成本較低，但是準確率不高，成為目前臨床面臨的一大難題[7]。

3.2 地中海貧血基因攜帶及其紅細胞參數(shù)特點目前采用gap-PCR技術(shù)進行檢驗，具有一定的科學性與有效性，不僅方便、快捷，而且能夠?qū)θ笔?、重排進行檢測，是當前檢測缺失型地貧最常用的一種檢測方法，具有極大的優(yōu)越性[8]。通過對以上2000例標本的檢測分析，顯示來賓地區(qū)CD41-42基因型攜帶率在這個基因攜帶中占據(jù)較高的水平。在復合型的地貧基因組合中，CD41-42復合α地貧基因較為常見，復合β地貧基因則以兒童為主，嚴重的貧血癥狀威脅到人們的生存，一般情況下，需要輸血來維持患者的生命安全。在對標本的血細胞進行檢測時，發(fā)現(xiàn)CD41-42雜合子的RBC、Hct受性別的影響較大，男性明顯高于女性。CD41-42復合β地貧基因組中，成人的攜帶率明顯低于兒童的原因，也正是CD41-42復合α地貧基因攜帶率高于CD41-42復合β地貧基因攜帶率的原因。對于CD41-42復合α地貧基因攜帶者來說，他們的β珠蛋白生成障礙過程中同時也造成了α珠蛋白的生成障礙，這在一定程度上使α/β鏈的不平衡現(xiàn)象得到了環(huán)節(jié)，在血液學表型改變中并不突出，臨床表現(xiàn)也比較輕，這也使兒童與成人之間的攜帶率沒有明顯的差異[9-10]。在對不同人群單純CD41-42雜合子的紅細胞參數(shù)研究中，可以發(fā)現(xiàn)CD41-42雜合子的Hb、Hct有性別差異，且男性明顯高于女性，與臨床醫(yī)學的檢驗結(jié)果是基本一致的[11-12]。本文通過對來賓地區(qū)地貧基因攜帶情況以及紅細胞參數(shù)特點的分析與探討，發(fā)現(xiàn)兒童與成人在MCV以及MCH指標方面有著明顯地差異，在進行地貧RBC指標篩選時，要充分將年齡、性別作為考慮因素，以防出現(xiàn)漏診。

[1]林金端,李介華,黃振勇,等.清遠地區(qū)CD41-42β地中海貧血人群基因型組合特點及紅細胞參數(shù)特點分析[J].廣東醫(yī)學,2015（3）:410-413.

[2]余相,林玉甜,陳江濤.廣東惠州市城鎮(zhèn)人群α、β地中海貧血流行病學調(diào)查及突變類型分析[J].當代醫(yī)學,2013,19（17）:160-161.

[3]楊秀堂,何劍峰,李亞紅.β地中海貧血基因攜帶者及G6PD缺乏的產(chǎn)前篩查與血液學指標評價[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2007,23（23）:3488-3490.

[4]梁志洪,王云秀,唐芳，等.廣東地區(qū)地中海貧血基因攜帶者全血細胞計數(shù)結(jié)果分析[J].熱帶醫(yī)學雜志,2014,14（7）:846-849.

[5]呂連英,許定英,陳世新.來賓市興賓區(qū)2010～2012年婚檢對象地中海貧血檢測結(jié)果與評價[J].中國婦幼保健,2015,30 (14)：2254-2256.

[6]陳文強,陳萍,龐麗紅,等.廣西地區(qū)地中海貧血基因 Hb Westmead突變情況及其臨床、地域和民族分布特點[J].山東醫(yī)藥,2015(48):19-21.

[7]Kensara OA,Azzeh FS.Nutritional status of low birth weight infants in Makkah region:Evaluation of anthropometric and biochemical parameters[J].Jpma the Journal of the Pakistan Medical Association, 2016,66(4):125-126.

[8]Vichinsky E,Neumayr L,Trimble S,et al.Transfusioncomplicationsinthalassemiapatients:areport from the Centers for Disease Control and Prevention(CME)[J].Transfusion,2014,54(4):972–981.

[9]Silva-Pinto AC,Dias-Carlos C,Saldanha-Araujo F,et al.Hydroxycarbami demodulates components involved in the regulation of adenosine levels in blood cells from sickle-cell anemia patients[J].Annals of Hematology,2014,93(9):1457-1465.

[10]Ravelojaona M,Féasson L,Oyono-Enguéllé S,et al. Evidence for a Profound Remodeling of Skeletal Muscle and Its Microvasculature in Sickle Cell Anemia[J]. American Journal ofPathology,2015,185(5):1448-1456.

[11]Marques MB,Singh N,Reddy VVB.Out with the bad and in with the good;red cell exchange,white cell reduction,and platelet reduction[J].Journal of Clinical Apheresis,2014,29(4):220-227.

[12]Liem RI,Reddy M,Pelligra SA,et al.Reduced fitness and abnormal cardiopulmonary responses to maximal exercise testing in children and young adults with sickle cell anemia[J].Physiological Reports, 2015,3(4):23-24.

Thalassemia guest area carrying red blood cell parameters and characteristics study

Meng Shun-wu
(Guangxi Laibin People's Hospital，Laibin,Guangxi,546100,China)

Objective To explore the area carry thalassemia gene guests as well as the characteristics of red blood cell parameters,Provide a reference for clinical diagnosis and treatment of thalassemia in the guest area.MethodsA retrospective analysis of the collected specimens thalassemia gene diagnosis guest area were collected to 2 000 cases,including 1 500 adult diagnostic specimens,and children for diagnostic specimens of 500 patients with amplification of the common guest area thalassemia gene tested for β-thalassemia mutant gene deletion α-thalassemia gene and heterozygotes CD41-42 corresponding analysis.Explore the red blood cell count,hemoglobin concentration difference,mean corpuscular volume and other indicators between.ResultsThe survey datashow that 142 cases containing CD41-42 genotype,which carries a low frequency rate reached 7.1%,CD41-42 heterozygotes of 108 cases,accounting for 5.4%;CD41-42 composite α-thalassemia was 27 cases,1.35%,CD41-42 composite β thalassemia 12 cases,accounting for 0.06%.And CD41-42 composite α-thalassemia gene carrying adults and children carrying the gene Condition No visible difference was not statistically significant.The gene adults and children between CD41-42 composite β thalassemia carrier rate significantly different,statistically significant(P＜0.05).ConclusionsGuest area CD41-42β thalassemia heterozygotes CD41-42 more common.And to work with other CD41-42 heterozygous thalassemia mutations in combination,make red blood cell parameters significant differences.And people's gender,age and CD41-42 gene carries a certain relationship.

Guest;Mediterranean;Anemia gene carries;Red blood cell parameters;Features

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.02.003