王靜靜+譚月強(qiáng)+張自坤+李騰飛+李華+王磊+常培培+賀洪軍

摘要：以9個(gè)菜心品種為試材，通過(guò)測(cè)定脯氨酸含量、相對(duì)電導(dǎo)率、成活率、提早抽薹率以及冷害指數(shù)等，對(duì)其耐寒性進(jìn)行了綜合評(píng)價(jià)與聚類(lèi)分析。結(jié)果表明，低溫下，菜心的耐寒性與脯氨酸含量、成活率呈正比，而與相對(duì)電導(dǎo)率、提早抽薹率和冷害指數(shù)呈反比；菜心的冷害指數(shù)與脯氨酸含量、成活率呈極顯著負(fù)相關(guān)，與相對(duì)電導(dǎo)率、提早抽薹率呈極顯著正相關(guān)；聚類(lèi)分析得出，尖葉40天、油綠粗薹和四九-19號(hào)為不耐寒型，油綠70天、油綠701和油綠702為較耐寒型，油綠80天、遲心4號(hào)和油綠802為耐寒型。山東及周邊地區(qū)早春與晚秋季節(jié)適宜栽培遲心4號(hào)和油綠802等耐寒性較好的晚熟菜心品種。

關(guān)鍵詞：山東地區(qū)；菜心品種；耐寒性評(píng)價(jià)；聚類(lèi)分析

中圖分類(lèi)號(hào)：S634.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2017）05-0023-04

Evaluation of Cold Tolerance and Cluster Analysis of

Nine Flowering Chinese Cabbage Cultivars

Wang Jingjing， Tan Yueqiang， Zhang Zikun， Li Tengfei， Li Hua， Wang Lei， Chang Peipei， He Hongjun

（Dezhou Academy of Agricultural Sciences， Dezhou 253015， China）

AbstractThe content of proline， relative electrical conductivity， survival rate， early bolting rate and chilling injury index were measured in nine flowering Chinese cabbage cultivars， and their cold tolerance were evaluated and conducted cluster analysis. The results showed that the cold resistance of cabbage was proportional to proline content and survival rate at low temperature， but inversely proportional to relative electrical conductivity， early bolting rate and chilling injury index. The chilling injury index of flowering Chinese cabbage was significantly negatively correlated with proline content and survival rate， and had significantly positive correlations with relative electrical conductivity and early bolting rate. The results of cluster analysis showed that Jianye 40 Days， Youlücutai and Sijiu-19 were non-cold-resistant type， and Youlü 70 Days， Youlü 701 and Youlü 702 were relatively more cold-resistant type， Youlü 80 Days， Chixin 4 and Youlü 802 were cold-resistant type. The cold-resistant and late-flowering cabbage varieties， Chixin 4 and Youlü 802， were suitable for cultivation in early spring and late autumn in Shandong and surrounding areas.

KeywordsShandong area； Flowering Chinese cabbage cultivar； Cold tolerance evaluation； Cluster analysis

菜心，也叫菜薹，屬于十字花科蕓薹屬白菜亞種的一個(gè)變種，是廣東省栽培面積最大的主要蔬菜[1]。因其風(fēng)味獨(dú)特，近些年菜心越來(lái)越受到北方人的歡迎，在北方各地的種植面積也在不斷擴(kuò)大。菜心生長(zhǎng)需要相對(duì)冷涼的氣候，發(fā)芽適溫為20～30℃，抽薹適溫為15～25℃[2]。山東地區(qū)氣候溫和，四季分明，在4～10月份適宜露地菜心的正常生長(zhǎng)。但是早春（4月初）與晚秋（9月底至10月初）季節(jié)氣溫較低且不穩(wěn)定，溫度突降現(xiàn)象常有發(fā)生。由于菜心對(duì)溫度較敏感，低溫會(huì)使其提早開(kāi)花抽薹，影響菜薹質(zhì)量。所以，早春與晚秋季節(jié)選擇耐寒性強(qiáng)的菜心品種進(jìn)行種植顯得尤為重要。目前關(guān)于菜心的耐熱性研究較多[1，3-7]，而對(duì)菜心的耐寒性研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)于2015年通過(guò)室內(nèi)鑒定（相對(duì)電導(dǎo)率、脯氨酸含量）與田間調(diào)查（成活率、提早抽薹率和冷害指數(shù)）相結(jié)合的方式對(duì)9個(gè)優(yōu)良菜心品種進(jìn)行了耐寒性評(píng)價(jià)與聚類(lèi)分析，對(duì)山東及周邊地區(qū)引種菜心品種具有重要的指導(dǎo)意義。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

參試的菜心品種共9個(gè)，尖葉40天和油綠粗薹菜心由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，四九-19號(hào)、油綠70天、油綠701、油綠702、油綠80天、油綠802和遲心4號(hào)由廣州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院提供。

1.2試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2015年在山東省德州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院試驗(yàn)基地和實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。2月15日，將9份材料在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)播種于盛有育苗基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)缽中，每個(gè)品種300粒。

試驗(yàn)Ⅰ：待菜心幼苗長(zhǎng)至三葉一心時(shí)，每個(gè)品種取30株長(zhǎng)勢(shì)一致的幼苗轉(zhuǎn)移至光照培養(yǎng)箱進(jìn)行低溫處理，10株為1組，3次重復(fù)。在4℃、16 h光照條件下培養(yǎng)5 d，測(cè)定其葉片的相對(duì)電導(dǎo)率和脯氨酸含量。相對(duì)電導(dǎo)率的測(cè)定參考劉鴻先等[8]的方法略加改進(jìn)。幼苗經(jīng)低溫處理后，取相同部位葉片，用直徑0.5 cm打孔器在菜心葉片上取20個(gè)小圓片，放入小燒杯中，用蒸餾水洗凈后定容至20 mL，靜置2.5 h后，測(cè)定初始電導(dǎo)率（R1），煮沸10 min，冷卻至初始溫度，重新定容至20 mL，測(cè)定電導(dǎo)率R2。兩次電導(dǎo)率的比值即為相對(duì)電導(dǎo)率[R′（%）=R1/R2×100]。脯氨酸采用磺基水楊酸提取法[9]測(cè)定。

試驗(yàn)Ⅱ：于3月18日（幼苗已達(dá)三葉一心），每個(gè)品種取90株長(zhǎng)勢(shì)旺盛的植株移栽至日平均氣溫10℃左右的試驗(yàn)田中，30株為1組，3次重復(fù)。定植5 d后調(diào)查菜心的冷害指數(shù)和成活率，定植緩苗后統(tǒng)計(jì)菜心的提早抽薹率。冷害共分6級(jí)（0、1、3、5、7、9級(jí)），0級(jí)：植株生長(zhǎng)正常；1級(jí)：植株外圍少數(shù)葉片干枯；3級(jí)：植株1/3左右葉片表現(xiàn)受害癥狀；5級(jí)：植株半數(shù)左右葉片表現(xiàn)受害癥狀；7級(jí)：植株2/3左右葉片受害，但未死亡；9級(jí)：植株死亡或已無(wú)經(jīng)濟(jì)價(jià)值。冷害指數(shù)=∑（X×Xi）/（A×N）×100，其中X代表冷害級(jí)數(shù)，Xi代表X冷害級(jí)數(shù)下植株數(shù)，A代表最高級(jí)數(shù)，N代表調(diào)查總株數(shù)。

1.3數(shù)據(jù)分析

用Microsoft Excel 2007軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和作圖，用DPS 7.05軟件進(jìn)行聚類(lèi)分析和多重比較（Duncans新復(fù)極差法）。

2結(jié)果與分析

2.1低溫對(duì)菜心葉片相對(duì)電導(dǎo)率的影響

相對(duì)電導(dǎo)率代表植物細(xì)胞質(zhì)膜受損傷程度，其值越高，受損程度越嚴(yán)重。由圖1可以看出，未經(jīng)低溫處理時(shí)，各菜心品種的相對(duì)電導(dǎo)率差異很小，均在10%左右。低溫處理之后，各菜心品種的相對(duì)電導(dǎo)率均大幅上升。變化最大的為尖葉40天，達(dá)到54.32%，比CK高4.56倍；其次是四九-19號(hào)和油綠粗薹菜心，分別比CK高4.28倍和3.62倍；油綠70天、油綠701和油綠702變化幅度較一致，分別比對(duì)照高2.35倍、2.52倍和2.15倍；油綠802和油綠80天分別比CK高1.73倍和1.91倍；變化最小的為遲心4號(hào)，僅比CK高1.22倍。說(shuō)明在低溫條件下，遲心4號(hào)質(zhì)膜受損程度最小，其次是油綠802和油綠80天。

2.2低溫對(duì)菜心葉片脯氨酸含量的影響

在逆境條件下脯氨酸的積累可作為膜受損的早期信號(hào)，脯氨酸積累越多說(shuō)明抗逆性越強(qiáng)。如圖2所示，低溫處理后不同菜心品種脯氨酸含量變化明顯。遲心4號(hào)增長(zhǎng)幅度最大，比CK高4.39倍，其次增長(zhǎng)較多的是油綠802和油綠80天，分別比CK高4.20倍和3.86倍；尖葉40天、油綠粗薹和四九-19號(hào)增長(zhǎng)幅度較小，分別比CK高1.41倍、1.49倍和1.19倍，其中四九-19號(hào)增幅最??；油綠70天、油綠701和油綠702增幅居中，分別比CK高2.51倍、2.03倍和2.60倍。未經(jīng)低溫處理的各菜心品種的脯氨酸含量均很少，品種間差異較小。

2.3田間冷害指標(biāo)調(diào)查情況

由表1可以看出，不同菜心品種的耐低溫程度各不相同。油綠80天、遲心4號(hào)和油綠802成活率均在90%以上，定植5 d后冷害指數(shù)較低，均在10以下，其中遲心4號(hào)僅為3.33，生長(zhǎng)期內(nèi)只有油綠80天極小部分提早抽薹；油綠70天、油綠701和油綠702成活率在85%～90%，冷害指數(shù)居中，提早抽薹率在50%～60%；尖葉40天、油綠粗薹和四九-19號(hào)菜心的成活率最低，冷害指數(shù)最高，與其他6個(gè)菜心品種差異顯著，并且因低溫全部提前開(kāi)花抽薹。

如表2所示，低溫下菜心各指標(biāo)之間具有明顯相關(guān)性。冷害指數(shù)與脯氨酸、成活率呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，與相對(duì)電導(dǎo)率、提早抽薹率呈顯著或極顯著正相關(guān)關(guān)系。由此說(shuō)明，低溫下菜心的脯氨酸含量、相對(duì)電導(dǎo)率、成活率和提早抽薹率4個(gè)指標(biāo)能夠用來(lái)綜合評(píng)價(jià)不同菜心品種的耐寒性。

2.5不同菜心品種聚類(lèi)分析

綜合脯氨酸含量、相對(duì)電導(dǎo)率、成活率、抽薹率以及冷害指數(shù)等指標(biāo)，以最短距離法對(duì)9個(gè)品種進(jìn)行聚類(lèi)，在歐氏距離為36.43處，將9個(gè)菜心品種分為三類(lèi)。第Ⅰ類(lèi)為尖葉40天、油綠粗薹和四九-19號(hào)，不耐寒型；第Ⅱ類(lèi)為油綠70天、油綠701和油綠702，較耐寒型；第Ⅲ類(lèi)為油綠80天、遲心4號(hào)和油綠802，耐寒型。按照熟性劃分，尖葉40天、油綠粗薹和四九-19號(hào)屬于早熟型，油綠70天、油綠701和油綠702為中熟型，油綠80天、遲心4號(hào)和油綠802為晚熟型，說(shuō)明晚熟型菜心耐寒性強(qiáng)。

3討論與結(jié)論

國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)植物的耐寒性做了多方面研究，提出了很多相關(guān)的形態(tài)指標(biāo)和生理生化指標(biāo)[10-13]，其中低溫脅迫下相對(duì)電導(dǎo)率和脯氨酸含量變化是耐寒性研究的主要內(nèi)容之一，并且大多數(shù)研究認(rèn)為，耐寒性愈強(qiáng)，相對(duì)電導(dǎo)率愈低，而脯氨酸含量愈高。李光光等[6]在研究菜心的耐熱性時(shí)統(tǒng)計(jì)了試驗(yàn)材料在田間高溫下的成活率，鄧仁菊等[14]在研究火龍果的抗寒性時(shí)也觀(guān)察了處理苗在田間的成活情況，說(shuō)明逆境條件下幼苗在田間的成活率能夠?qū)κ覂?nèi)測(cè)定的生理生化指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，為試驗(yàn)數(shù)據(jù)提供更加可靠的依據(jù)。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，低溫下菜心的耐寒性強(qiáng)弱與脯氨酸含量、成活率呈正比，而與相對(duì)電導(dǎo)率、提早抽薹率和冷害指數(shù)呈反比；冷害指數(shù)與脯氨酸含量、成活率呈顯著負(fù)相關(guān)，與相對(duì)電導(dǎo)率、提早抽薹率分別呈極顯著、顯著正相關(guān)。脯氨酸含量、相對(duì)電導(dǎo)率、成活率的變化規(guī)律與前人研究結(jié)果一致，而提早抽薹率是筆者根據(jù)菜心對(duì)低溫的敏感性來(lái)設(shè)定的，本試驗(yàn)證明它可以作為菜心耐寒性評(píng)價(jià)指標(biāo)之一。脯氨酸含量、相對(duì)電導(dǎo)率、成活率、提早抽薹率和冷害指數(shù)可用來(lái)綜合評(píng)價(jià)菜心的耐寒性，并且以這5個(gè)耐寒性指標(biāo)為依據(jù)進(jìn)行聚類(lèi)分析，可將參試的9個(gè)菜心品種分為三類(lèi)，這與按照熟性分類(lèi)的結(jié)果一致：油綠80天、遲心4號(hào)和油綠802屬于晚熟品種，耐寒性強(qiáng)；油綠70天、油綠701和油綠702為中熟品種，耐寒性一般；尖葉40天、油綠粗薹和四九-19號(hào)為早熟品種，不耐寒。山東及周邊地區(qū)早春與晚秋季節(jié)氣溫較低，在栽培菜心時(shí)不宜引種早、中熟品種，應(yīng)引種遲心4號(hào)和油綠802等耐寒性較好的晚熟菜心品種。

參考文獻(xiàn)：

[1]李光光， 張財(cái)順， 鄭巖松. 不同菜心品種耐熱性鑒定指標(biāo)的篩選[J]. 北方園藝， 2012（18）：1-5.

[2]范勇新， 羅妙明， 彭維， 等. 菜心優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培技術(shù)[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009（5）：177-178.

[3]李榮華， 郭培國(guó)， 張華， 等. 高溫脅迫對(duì)菜心農(nóng)藝性狀的影響[J]. 長(zhǎng)江蔬菜（學(xué)術(shù)版）， 2011（22）：39-43.

[4]李榮華， 郭培國(guó)， 張華， 等. 高溫脅迫對(duì)不同耐熱性菜心材料生理特性的差異研究[J]. 北方園藝， 2012（1）：1-6.

[5]曹毅， 李春梅， 鄧燏， 等. 不同菜心品種耐熱性研究[J]. 西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）， 2010， 35（5）：128-131.

[6]李光光， 張華， 黃紅弟， 等. 菜心高溫半致死溫度與耐熱適應(yīng)性[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)， 2012， 27（增刊）：202-204.

[7]李春梅. 高溫對(duì)不同菜心品種生長(zhǎng)及生理性狀的影響[J]. 佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）， 2011， 29（3）：76-78.

[8]劉鴻先， 曾韶西， 王以柔. 低溫對(duì)不同耐寒力的黃瓜（Cucumis sativus）幼苗子葉細(xì)胞器的超氧化物歧化酶（SOD）的影響[J]. 植物生理學(xué)報(bào)， 1985（11）：48-57.

[9]李合生. 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M]. 北京：高等教育出版社， 2000：195-197.

[10]Wada H， Gombos Z， Murata N. Enhancement of chilling tolerance of a cyanobacterium by genetic manipulation of fatty acid desaturation[J]. Nature， 1990， 347（3）：200-203.

[11]Deans J D， Billington F J， Harvey F J， et al. Assessment of frost damage to leafless stem tissues of Quercus petraea：a reappraisal of the method of relative conductivity[J]. Forestry， 1995， 68（1）：25-34.

[12]Kazuoka T， Oeda K. Heat-stable COR （cold-regulated） proteins associated with freezing tolerance in spinach[J]. Plant Cell Physiology， 1992， 33：1107-1114.

[13]徐燕， 薛立， 屈明. 植物抗寒性的生理生態(tài)學(xué)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 林業(yè)科學(xué)， 2007， 43（4）：88-94.

[14]鄧仁菊， 范建新， 王永清， 等. 低溫脅迫下火龍果的半致死溫度及耐寒性分析[J]. 植物生理學(xué)報(bào)， 2014， 50（11）：1742-1748.