龔卻卓瑪 （青海省共和縣畜牧獸醫(yī)站 813000）

共和縣布魯氏菌病的血清學(xué)調(diào)查

龔卻卓瑪 （青海省共和縣畜牧獸醫(yī)站 813000）

應(yīng)用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)和試管凝集試驗(yàn)(SAT)，2008～2016年間對(duì)共和縣4個(gè)半農(nóng)半牧鄉(xiāng)鎮(zhèn)的9000份奶牛血清，進(jìn)行布魯氏菌病檢測(cè)，檢出陽(yáng)性血清15份，陽(yáng)性率0.116%，結(jié)果表明共和縣奶牛布魯氏病在近幾年得到了有效控制。

布魯氏菌病(以下簡(jiǎn)稱布病)，是由布氏桿菌感染引起的慢性接觸性人畜共患的傳染病，其特征是妊娠母畜發(fā)生流產(chǎn)，公畜呈現(xiàn)睪丸炎。奶牛感染發(fā)病后臨床特征為生殖器官的胎膜發(fā)炎，發(fā)生流產(chǎn)，引發(fā)子宮內(nèi)膜炎、胎衣不下、卵巢囊腫等病而久配不孕。傳播途徑以消化道為主，其次為自然交配，皮膚、眼結(jié)膜、呼吸道感染都可引起本病。該病的發(fā)生不但對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，還嚴(yán)重威脅著畜產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生安全和人類健康。因此筆者認(rèn)為奶牛布魯氏菌病檢測(cè)工作是當(dāng)前動(dòng)物防疫工作中的一項(xiàng)關(guān)鍵性任務(wù)，也是動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)中最為重要的一項(xiàng)工作。為全面掌握共和縣奶牛布魯氏菌病近幾年的疫情動(dòng)態(tài)和流行規(guī)律，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理疫情，預(yù)測(cè)和分析發(fā)病特點(diǎn)及風(fēng)險(xiǎn)因素，制定科學(xué)防控措施。本人對(duì)共和縣2008～2016年奶牛布魯氏菌病血清學(xué)檢測(cè)情況進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 診斷液 每年所用虎紅平板抗原；標(biāo)準(zhǔn)陰性、陽(yáng)性血清；試管凝集抗原均由青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。

1.1.2 稀釋液 0.5%石碳酸生理鹽水。

1.1.3 被檢血清 來(lái)源于全縣養(yǎng)殖奶牛的4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，共9000份血清。

1.2 方法

每年首先用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)對(duì)被檢奶牛血清進(jìn)行初篩，檢出的陽(yáng)性和可疑血清再用試管凝集試驗(yàn)(SAT)進(jìn)行復(fù)檢，以試管凝集試驗(yàn)做為檢測(cè)的最終判定結(jié)果。操作及判定標(biāo)準(zhǔn)按照(GB/18646-2002)進(jìn)行。

1.2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)步驟 在潔凈的玻璃板上劃分成數(shù)個(gè)4cm2的方格，編號(hào)，用加樣器滴加相應(yīng)的血清0.03ml，在被檢血清旁滴加抗原0.03ml，用牙簽攪動(dòng)血清和使之混合。每次設(shè)立陰、陽(yáng)性血清對(duì)照。

1.2.2 試管凝集試驗(yàn)步驟 準(zhǔn)備4支玻璃試管，將每份被檢血清分別按1∶50、1∶100、1∶200、1∶400四個(gè)稀釋度稀釋，即第1管加1.2ml稀釋液，第2～4管各加入0.5ml稀釋液，然后用吸管吸取0.05ML被檢血清加入第1管，反復(fù)吹打3次，吸取混合液0.25ml棄之，再吸取0.5ml混合液沿管壁加入到第2管中，用該吸管如前述方法混勻，再吸取第2管混合液0.5ml至第3管，如此倍比稀釋至第4管，從第4管棄去混合液0.5ml。稀釋完畢，將0.5ml20倍稀釋的抗原加入已稀釋好的各血清管中并振搖均勻。作陰性、陽(yáng)性和抗原對(duì)照，并配置比濁管，將全部試管、對(duì)照管及比濁管充分振蕩后置37℃溫箱中培養(yǎng)20～22h，取出后置室溫2h，然后以比濁管為標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。

1.3 結(jié)果判定

1.3.1 虎紅平板凝集試驗(yàn) 在陰、陽(yáng)性血清對(duì)照成立的條件下，被檢血清在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集現(xiàn)象者判為陽(yáng)性，無(wú)凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性。

1.3.2 試管凝集反應(yīng) 在陰陽(yáng)性對(duì)照成立的前提下，被檢血清在1∶100稀釋度出現(xiàn)“﹢﹢”以上的凝集現(xiàn)象時(shí)，判為陽(yáng)性；1∶50稀釋度出現(xiàn)“﹢﹢”以上的凝集現(xiàn)象時(shí)，可判為可疑，可疑反應(yīng)的牛經(jīng)過(guò)3～4周后重新采血檢驗(yàn)，如果仍可疑，可判定為陽(yáng)性。

2 檢測(cè)結(jié)果

2008～2014年間共檢測(cè)奶牛血清8004份，檢出陽(yáng)性奶牛15頭，陽(yáng)性率為0.19%，每年的檢測(cè)情況祥見(jiàn)附表。

附表 2008～2014年奶牛布魯氏菌病檢測(cè)結(jié)果 (頭、%)

附圖 2008～2016年布魯氏菌病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

3 討論

（1）通過(guò)對(duì)共和縣4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)9000份奶牛血清連續(xù)9年進(jìn)行布魯氏菌病檢測(cè)，共檢出陽(yáng)性血清15份，平均陽(yáng)性率為0.16%，說(shuō)明共和縣奶牛布病感染率并不高，在有效控制范圍內(nèi)，而且從2010年以后每年呈下降趨勢(shì)。2009年陽(yáng)性率高達(dá)1.4%。這與2008年由于實(shí)施本縣扶貧開發(fā)項(xiàng)目，從外縣引進(jìn)的奶牛數(shù)量大，檢疫工作把關(guān)不嚴(yán)，使本縣奶牛的布魯氏菌病陽(yáng)性率達(dá)到了歷年的高峰期，見(jiàn)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比圖。（2）本縣采取以監(jiān)測(cè)、檢疫、隔離、陽(yáng)性畜的及時(shí)撲殺、消毒和無(wú)害化處理等綜合措施，特別是加大了陽(yáng)性畜及時(shí)撲殺和調(diào)運(yùn)奶牛的檢疫監(jiān)督力度，切斷傳染源和傳播途徑，使奶牛陽(yáng)性率從2009年的1.4% 下降到2010年和2011年的0.4%和0.08%，且2012～2016年連續(xù)五年未檢出陽(yáng)性血清，這進(jìn)一步說(shuō)明布病防治措施的科學(xué)性和有效性。（3）為了鞏固布病防治效果，防治疫情回升，還要繼續(xù)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)工作，隨時(shí)掌握疫情動(dòng)態(tài)，制定合理的綜合防治規(guī)劃。加強(qiáng)檢疫監(jiān)督，嚴(yán)把檢疫關(guān)，引進(jìn)種畜和調(diào)運(yùn)畜群時(shí)，嚴(yán)格按規(guī)范要求檢疫。同時(shí)要加強(qiáng)布病防治知識(shí)的宣傳力度，提高養(yǎng)殖戶對(duì)布病危害的認(rèn)識(shí)，增強(qiáng)防治意識(shí)。（4）布魯氏菌病的防制是一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的工作，在工作中要堅(jiān)持“預(yù)防為主”的方針，采取以監(jiān)測(cè)、檢疫、隔離、陽(yáng)性畜及時(shí)撲殺等綜合防治措施，控制傳染源，切斷傳播途徑。做到加強(qiáng)聯(lián)防、群防群治，同時(shí)加強(qiáng)畜間檢疫，按省上下達(dá)的監(jiān)測(cè)任務(wù)，合理采樣，規(guī)范檢測(cè)，注意疫情動(dòng)態(tài)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并撲殺病畜，直至成為無(wú)病畜群。（5）加強(qiáng)牲畜飼養(yǎng)和衛(wèi)生管理，嚴(yán)格撲殺陽(yáng)性畜及污染物的無(wú)害化處理。堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，逐步選育更新種牛，這樣才能加快共和縣奶牛布魯氏菌病凈化的進(jìn)程，使布魯氏菌病得到長(zhǎng)期穩(wěn)定的控制。

S851.34+7

A

1007-1733(2017)06-0063-02

2017–02–17）