彭麗梨++黎丹++王雪蓉
金銀 花 為 忍 冬 科 (Caprifoliaceae)忍 冬 屬(Lonicera)忍Lonicera japonica Thunb .植物的干燥花蕾 , 金銀花又名雙花,簡稱金花或者銀花,為忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或帶出開的花,為常用清熱解毒和抗菌消炎中藥材。其主要藥效活性成分為綠原酸(簡稱CHA),綠原酸含量高低是評價金銀花質(zhì)量的重要依據(jù)。綠原酸在植物中分布廣泛,從高等雙子葉植物到蕨類植物均有,主要存在于忍冬科忍冬屬、菊科蒿屬及杜仲科杜仲屬植物中,含量較高的植物主要有葵花籽仁、粕、可可豆、咖啡豆、沙棘果及傳統(tǒng)中草藥,如金銀花、杜仲。在從植物提取的過程中,氧化作用引起有效成分的提取效率明顯下降,我們通過對金銀花中的綠原酸的提取,考察綠原酸在抗氧化劑中的穩(wěn)定性。本文對綠原酸的最新研究現(xiàn)狀作一綜述。
金銀花中綠原酸的提取
綠原酸類化合物因為含有羥基和鄰二酚羧基,因此綠原酸非常容易溶于乙醇,還易溶于熱水、甲醇等溶液,但是難以溶解于氯仿、乙醚等這些弱極性的試劑,因此可以利用這個特性將綠原酸從植物中提取出來。本次實驗使用95%的乙醇溶液來進行提取。利用溶劑提取法提取金銀花中的綠原酸,采用乙醇作為提取溶劑以提取綠原酸,利用紫外分光光度法測定綠原酸的含量。選用不同的抗氧化劑來對做比較,最后得出抗氧化劑對金銀花中綠原酸穩(wěn)定性有什么影響。將金銀花的干花苞用高速萬能粉碎機來研磨粉碎,并且準確用電子天平稱取研磨粉碎之后的干物質(zhì)1克(g)左右,然后放置于250ml帶膠塞的錐形瓶中,然后加入約為50ml的95%的乙醇溶液來溶解金銀花粉末樣品,并且置于60℃的恒溫水浴鍋(溫差±1℃)中恒溫水浴,放置約為4小時。水浴時間4小時到達之后,取出帶膠塞的錐形瓶放置冷卻至室溫,過濾后之加入95%的乙醇溶液定容至250ml的容量瓶中,待用。
綠原酸標準工作曲線
以95%乙醇為空白,將上述配制好的濃度為(mg/mL)0.005、0.01、0,015、0.02、0.025、0.03的綠原酸標準品供試液,在波長327nm條件下測定其吸光值。結(jié)果如下
以測量值減去空白值即得出實際的吸光值,以綠原酸標準品濃度(mg/mL)為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪制標準工作曲線,標準方程為:y=55.114x+0.0137,R2=0.9997
不同的抗氧化劑對綠原酸穩(wěn)定性的研究
抗氧化劑是指能夠清除氧自由基,抑制或消除以及減緩氧化反應(yīng)的一類物質(zhì)??寡趸瘎┓N類繁多,性質(zhì)各異,不同的應(yīng)用領(lǐng)域有不同的分類方法。由于氧自由基和氧化反應(yīng)普遍存在,由氧自由基和氧化反應(yīng)引起的負面影響已經(jīng)引起人們的高度重視。淬滅生物體內(nèi)的過多氧自由基,阻斷由氧化反應(yīng)引起的食品氧化腐敗,可以通過添加抗氧化劑來實現(xiàn)。本文主要研究不同抗氧化劑對綠原酸穩(wěn)定性的考察。抗氧化劑的研究和開發(fā)是近年來生物、醫(yī)藥、食品、飼料界非常令人關(guān)注的一個研究領(lǐng)域。
維生素C。維生素C又稱抗壞血酸,包括L-抗壞血酸和L-脫氫抗壞血酸。兩種抗壞血酸在一定的條件下可以可逆地相互轉(zhuǎn)化。
抗壞血酸為無色結(jié)晶體,易溶于水,微溶于丙酮,在乙醇中溶解度更低??箟难岬乃苄跃哂酗@著的酸性。結(jié)晶抗壞血酸在空氣中穩(wěn)定,它的水溶液則易被空氣和其他氧化劑氧化,生成脫氫抗壞血酸??箟难岬难趸盏綁A、熱、光及微量重金屬離子的催化而加速,特別是銅、鐵離子的催化。
維生素C是維持人體健康不可缺少的物質(zhì),它是活細胞氧化還原反應(yīng)的催化劑,參與身體內(nèi)多種代謝,具有促進體內(nèi)多種合成的生理作用。肌體內(nèi)缺乏維生素C極易發(fā)生壞血病,嚴重時可造成死亡。目前國外維生素C的主要用途是保健品,即多種維生素營養(yǎng)劑,其消耗量占總量的42%左右。維生素C還被廣泛地用于食品添加劑和化妝行業(yè)。
焦亞硫酸鈉。焦亞硫酸鈉為白色或黃色結(jié)晶粉末或小結(jié)晶,帶有強烈的SO2氣味,比重 1.4,溶于水,水溶液呈酸性,與強酸接觸則放出SO2而生成相應(yīng)的鹽類, 久置空氣中,則氧化成Na2S2O6,故該產(chǎn)品不能久存。高于150攝氏度,即分解出SO2。溶于水,水溶液呈酸性(20℃時為54g/100ml水;100℃時為81.7g/100ml水)。溶于甘油,微溶于乙醇。相對密度1.4。溶于水溶于甘油,微溶于乙醇。
焦亞硫酸鈉比亞硫酸鹽有更強烈的還原性,作用與亞硫酸鈉相似。我國規(guī)定可用于蜜餞、餅干、食糖、冰糖、飴糖、糖果、葡萄糖、液體葡萄糖、竹筍、蘑菇和蘑菇罐頭,最大使用量0.45g/kg。蜜餞、竹筍、蘑菇及蘑菇罐頭、葡萄和黑加侖濃縮汁的殘留量(以SO2計)小于0.05g/kg;餅干、食糖、粉絲及其他品種的殘留量小于0.1g/kg;液體葡萄糖的殘留量不得過0.2g/kg。在食品工業(yè)中作漂白劑、防腐劑、疏松劑、抗氧化劑、護色劑及保鮮劑。醫(yī)藥工業(yè)用于生產(chǎn)氯仿、苯丙砜和苯甲醛。橡膠工業(yè)用作凝固劑。印染工業(yè)用作棉布漂白后的脫氯劑、棉布煮煉助劑。制革工業(yè)用于皮革處理,能使皮革柔軟、豐滿、堅韌,具有防水、抗折、耐磨等性能?;瘜W工業(yè)用于生產(chǎn)羥基香草醛、鹽酸羥胺等。感光工業(yè)用作顯影劑等。
L-半胱胺酸鹽。L-半胱氨酸是一種具有生理功能的氨基酸,是組成蛋白質(zhì)的20多種氨基酸中惟一具有還原性基團巰基(-SH)的氨基酸,現(xiàn)今已在醫(yī)藥、食品添加劑和化妝品中廣泛應(yīng)用。2002年全世界對半胱氨酸的需求達到4400-4600噸,而且以每年2-3%速度遞增。其中西歐需求的遞增速度達到3-4%,日本則為2%。國內(nèi)現(xiàn)今,L一半胱氨酸的生產(chǎn)主要依靠人或動物的毛發(fā)經(jīng)酸水解或堿水解提取L-胱氨酸后,再經(jīng)過電解還原制得L一半胱氨酸。該方法收率低,能耗高,水解過程產(chǎn)生大量刺激性氣體,廢酸處理困難,對環(huán)境污染嚴重。隨著L一半胱氨酸生產(chǎn)技術(shù)的發(fā)展,微生物轉(zhuǎn)化法制生產(chǎn)L-半胱氨酸逐漸取代了毛發(fā)水解制備L-半胱氨酸。微生物轉(zhuǎn)化法制備工藝以其反應(yīng)條件溫和、專一性強、對環(huán)境友好等優(yōu)點而日益受到重視。德國的WACKER公司已經(jīng)成功的進行商業(yè)化生產(chǎn)發(fā)酵法L-半胱氨酸,其年產(chǎn)量已經(jīng)達到世界總產(chǎn)量的30%,相信在不久的將來,在國內(nèi)占主導地位的水解法L-胱氨酸生產(chǎn)的會成為歷史。
結(jié)果與討論
抗氧化劑對綠原酸有一定的抑制降解作用,其中L-半胱氨酸鹽效果最好,維生素C效果不明顯,亞硫酸鈉沒有明顯效果。