王玄+歐陽羅丹+代春美+馬莉+肖小河

[摘要] 動物類中藥是中藥中極具特色的一部分，其藥性峻猛，藥效成分不明確。現(xiàn)行動物類中藥的質(zhì)量控制和評價方法無法有效地控制其有效性及安全性，嚴重制約了動物類中藥的發(fā)展。生物評價不拘泥于個別成分的作用，以生物效應(yīng)直接關(guān)聯(lián)藥效和安全性。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，生物芯片、高內(nèi)涵分析等新技術(shù)的涌現(xiàn)，從相關(guān)靶點、通路或關(guān)鍵生化因子入手，拓展了生物評價方法的領(lǐng)域。生物評價具有藥效相關(guān)、整體可控等優(yōu)勢，符合中醫(yī)藥質(zhì)量控制的特點，將成為動物類中藥質(zhì)量標準化的重要發(fā)展方向之一。

[關(guān)鍵詞] 中藥； 動物類中藥； 質(zhì)量控制； 生物評價

[Abstract] Animal medicine is a unique part of traditional Chinese medicine. They have strong effects， but their effective compounds are not entirely known. The efficiency and safety of animal medicines can′t be effectively controlled by current quality assurance system and evaluation method， which has deeply influenced the development of animal medicines. Biological assay does not focus on efficacy of single component， but directly reflects the pharmacodynamics and safety of animal medicines by biological effect. With the development of biotechnology， many new technologies have emerged， such as biochip and high content analysis. Based on the related targets， pathways and key biochemical factors， the field of biological assay has been expanded. With advantages of pharmacology andoverall controllability， as well as the characteristics of in line with the quality control of Chinese Medicine， biological assay will become one of the important development directionsfor quality standardization of animal medicines.

[Key words] traditional Chinese medicine； animal medicine； biological assay； quality control

動物類中藥（簡稱為動物藥），又稱為蟲類藥。即來源于動物整體、器官、生理或病理產(chǎn)物等供藥用的中藥材。動物藥使用歷史悠久，早在戰(zhàn)國時期，中醫(yī)始有運用動物藥的文獻記載?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》中有動物藥67種，占18.4%。《本草綱目》中有動物藥461 種，占24.4%。近年調(diào)查我國中藥有12 807種，其中動物藥1 581種，占12.3%[1]。動物藥大多成分復(fù)雜，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究不明確，且功效與成分難以關(guān)聯(lián)。隨著野生資源逐漸匱乏，偽劣品不斷出現(xiàn)，這對現(xiàn)行動物藥的質(zhì)量控制體系提出挑戰(zhàn)。生物評價具有藥效相關(guān)、整體可控等技術(shù)優(yōu)勢，隨著新技術(shù)的不斷涌現(xiàn)，動物藥質(zhì)量生物評價實施的條件已日趨成熟。本文擬從動物藥的特點及質(zhì)量控制現(xiàn)狀進行分析，闡述生物評價在動物藥質(zhì)量控制中的優(yōu)勢，應(yīng)用與發(fā)展。

1 動物藥的特點

1.1 成分復(fù)雜，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確

目前從動物藥中分離得到的活性成分主要有蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸類及其他小分子物質(zhì)。動物藥成分復(fù)雜，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確。以動物藥水蛭為例，水蛭素是目前已知的作用最強的凝血酶特異性抑制劑，一般從水蛭唾液腺中獲得[2]。中醫(yī)臨床多以動物全體入藥，經(jīng)高溫炮制后入藥仍具有較強的活性，水蛭真正發(fā)揮臨床療效是水蛭素還是其它成分，目前尚無定論。

1.2 功效多，成分與藥效難以關(guān)聯(lián)

動物藥大多具有多種功效。美洲大蠊古稱蜚蠊，《神農(nóng)本草經(jīng)》記載：“主血瘀，寒熱，破積聚，喉咽痹，內(nèi)寒，無子?！薄秳e錄》：“通利血脈”?，F(xiàn)代藥理作用包括促進創(chuàng)面愈合，抗炎、鎮(zhèn)痛、消腫，抑制腫瘤細胞的增殖活性，提高機體免疫功能，抗氧化等作用。目前研究表明其含有蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、脂肪和脂肪酸、信息素、糖類、酶及豐富的礦物質(zhì)和微量元素等成分[3]。眾多的成分與眾多的功效如何對應(yīng)？不同的功效是否對應(yīng)著不同的活性成分？各藥效成分之間是否存在協(xié)同增效的可能？動物藥組成復(fù)雜，單以成分為指標，難以實現(xiàn)動物藥質(zhì)量控制的突破。

1.3 藥性峻猛，大多有毒

動物藥藥性峻猛，大多有毒。蟲類藥多含有異體蛋白，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為，異體蛋白易引起人體過敏反應(yīng)，以其致敏性損傷機體[4-5]。目前動物藥不良反應(yīng)、毒性特征不完全清楚，毒性物質(zhì)基礎(chǔ)和中毒機制暫不明確。在歷代本草專著和現(xiàn)行《中國藥典》中，動物藥僅有有毒無毒的記載及毒力強弱的分級（如大毒、有毒和小毒），尚缺乏客觀的判斷標準。因此，動物藥的安全性評價也需要加強。

1.4 來源復(fù)雜，資源緊缺

動物藥的來源十分復(fù)雜。尤其一部分來源于動物的分泌物、排泄物及生理病理產(chǎn)物，如麝香、五靈脂、蟬蛻、牛黃等，或為動物的加工品，如阿膠、血余炭等。再加上飲片加工炮制等原因，很多原有性狀特征無法鑒別。而且《野生動物保護法》將許多動物藥列入保護動物，而現(xiàn)有人工養(yǎng)殖技術(shù)還有待提高，導(dǎo)致目前許多動物藥資源緊缺。在供不應(yīng)求的市場上，偽品、劣品、混淆品和習(xí)用品泛濫，這使在動物藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣的質(zhì)量把控上有更大的難度。

2 動物藥質(zhì)量控制的現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)

目前動物藥質(zhì)量控制主要有以下幾種控制模式。

2.1 找成分，測成分

現(xiàn)行動物藥質(zhì)量評價與控制的模式大部分是依據(jù)指標性成分定性檢測與定量測定而制定的，但這些指標性成分大多是為了檢測而檢測，其不一定是專屬性成分，也不一定是有效成分；即使既是專屬性成分也是有效成分，其譜效關(guān)系、量效關(guān)系、毒效關(guān)系目前尚不清楚。以膠類藥材為例，在2015年版《中國藥典》中，龜甲膠、阿膠和鹿角膠3種藥材均以L-羥脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、 L-脯氨酸這4種氨基酸作為質(zhì)控成分。雖同為膠類藥材，均有滋陰補血之效，但龜甲膠偏于養(yǎng)陰清虛熱，阿膠偏于滋補陰血，鹿角膠則偏于溫陽補腎。由此可見，這4種氨基酸專屬性不強，不能很好地解釋膠類藥材各自功效的特點。又如冬蟲夏草以腺苷為檢測指標。冬蟲夏草的常見混淆品和偽品中腺苷含量雖然略低于冬蟲夏草的腺苷含量，可是均高于藥典標準[6]。如果僅以腺苷含量為依據(jù)，這幾種藥材皆可以等同于冬蟲夏草入藥，可這顯然有悖于實際應(yīng)用。隨著技術(shù)手段的進步，如液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，使可檢測的成分越來越多，檢測指標也由單一成分轉(zhuǎn)向多指標同步測定。例如除了腺苷以外，核苷、麥角甾醇、糖類以及氨基酸等也均被作為指標性成分進行蟲草的質(zhì)量控制[7-10]。但這仍沒有解決動物藥質(zhì)量控制與功效未很好關(guān)聯(lián)的問題。

2.2 基于主要成分或一類成分的質(zhì)量控制模式

作為動物藥的主要成分，蛋白質(zhì)及多肽的研究也越來越多。童芯鋅等[11]使用雙向電泳篩選得到蟲草特有的21種蛋白質(zhì)，為有效物質(zhì)的確立奠定基礎(chǔ)。張晗星等[12]采用iTRAQ 技術(shù)從蛋白質(zhì)組的水平上對蟲草有效成分進行更深入的鑒定，為質(zhì)量標準提供科學(xué)參考。程顯隆等[13]利用蛋白質(zhì)酶切技術(shù)和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)分析其蛋白質(zhì)及多肽的分子質(zhì)量及其分布規(guī)律，得到膠原蛋白特征肽段，以用來鑒別膠類藥材。

指紋圖譜在動物藥質(zhì)量控制的研究也日益增多。用于動物藥指紋圖譜研究的方法分為光譜法和色譜法2類，以色譜法居多。光譜法例如那麗丹等[14]采用¹H-NMR 代謝組學(xué)法得到不同廠家阿膠經(jīng)酸水解后的¹H-NMR 圖譜，并進行化學(xué)成分差異性分析，為質(zhì)量控制提供了新方法和新思路。陳罡等[15]建立了冬蟲夏草核磁特征指紋圖譜。 趙建國[16]、周健等[17]則采用傅里葉變換紅外光譜法 （FTIR） 得到僵蠶、麝香的紅外光譜指紋圖譜，可直觀有效地鑒別正品和偽品，以此為生藥鑒定與品質(zhì)評價提供參考。而色譜法例如通過HPLC指紋圖譜對冬蟲夏草、海龍的品種真?zhèn)芜M行有效鑒別[18-19]。高效毛細管電泳技術(shù)（HPCE） 因具有分析核酸、多肽和蛋白質(zhì)生物大分子的優(yōu)勢，在動物藥的指紋圖譜中研究很多。目前已報道建立了土鱉蟲、僵蠶、蛤蚧、蘄蛇、烏梢蛇、金錢白花蛇、菲牛蛭等的HPCE指紋圖譜，以此作為其品種鑒定與質(zhì)量控制方法[20-26]。但是由于動物藥成分極其復(fù)雜，雖然反映了整體化學(xué)信息，但所檢測的特征指紋有可能并不完全包含其有效成分，“譜-效”關(guān)系不能得到體現(xiàn)，所以控制一類成分也只能是一種過渡性質(zhì)量控制方法。

2.3 基于核酸分子鑒定技術(shù)的動物藥來源真實性考察

如采用基于聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）分子鑒定技術(shù)[27-28]及環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法（LAMP）鑒定技術(shù)[29]和基于 ITS序列的條形碼技術(shù)[30]等對冬蟲夏草進行真?zhèn)舞b定。Kumeta等[31]以細胞色素b基因作為引物，成功地鑒別出阿膠的動物基源以及摻假與否。 Yuan G等[32]通過建立RAPD-HPCE法能快速鑒別鹿茸真?zhèn)?。近年來，DNA條形碼技術(shù)成為動物藥材鑒定的新工具。鄢丹等[33]利用COⅠ 序列可以對羚羊角、鹿角等傳統(tǒng)角類藥材及其偽品進行很好地鑒別。張輝等[34]利用DNA 條形碼可以對《中國藥典》45種動物藥材及其混偽品進行相互區(qū)分。2014年，石林春等[35]構(gòu)建了中國動物藥材 DNA 條形碼數(shù)據(jù)庫。

目前動物藥研究重點主要關(guān)注其來源的真實性及個別成分或某一類成分的變化規(guī)律，見表1，并未重點關(guān)注動物藥的生物藥效。其優(yōu)劣等級如何區(qū)分，人工養(yǎng)殖品與野生品之間的臨床功效差異幾何？對于動物藥這種多成分復(fù)雜體系，單以成分為指標，難以實現(xiàn)動物藥質(zhì)量控制的突破，亟待探索新的研究方法。

3 動物藥的生物評價研究

生物評價（biological assay），是指在特定的試驗條件下，評價供試藥物作用于生物體系所表達出的特定生物效應(yīng)的方法，用于定性或定量評價供試藥物的質(zhì)量。生物評價研究建立的方法須具備定量藥理學(xué)與藥檢分析的雙重屬性和要求。即以藥理實驗研究為基礎(chǔ)，例如解熱、抗炎、活血等實驗，建立基于生物效應(yīng)的動物藥評價模式，然后用生物統(tǒng)計的方法篩選出比較適宜的生物效價檢測方法。理論上說，多數(shù)藥理方法通過數(shù)理統(tǒng)計均可用作生物測定方法，但由于藥品檢驗工作對生物測定的要求有其特殊性，以及多數(shù)中藥量效關(guān)系不明顯，因此一般的藥理方法有時并不適合直接作為生物評價方法，故應(yīng)對生物評價方法進行優(yōu)化和選擇?？偠灾瑒游锼庂|(zhì)量生物評價與控制并非常規(guī)藥效試驗的定量化，而是在生物檢定思想的基礎(chǔ)上，切合中藥的自身特點，在滿足藥物質(zhì)量控制操作可行性的前提下，最大程度地表征動物藥的內(nèi)在質(zhì)量，達到質(zhì)量評價與控制的目的。

現(xiàn)有方法多是關(guān)聯(lián)功效或毒性的生物活性檢測（包括效價、生物活性限值和毒價測定等），主要用于動物藥質(zhì)量的優(yōu)劣、毒性大小等的評價。近年來，又發(fā)展起了生物芯片、組學(xué)技術(shù)、生物自顯影薄層色譜和高內(nèi)涵分析等新技術(shù)從相關(guān)細胞、靶點、通路或關(guān)鍵生化因子入手，建立起關(guān)聯(lián)機制的動物藥的生物評價。

3.1 關(guān)聯(lián)功效或毒性的動物藥生物活性檢測

關(guān)聯(lián)功效或毒性的生物活性檢測可以定量表征動物藥的功效、活性或生物學(xué)效應(yīng)。生物評價具有關(guān)聯(lián)功效的優(yōu)勢，尤其適用于組成復(fù)雜、理化方法難以測定，而且理化測定也不能反映其臨床功效的動物藥。根據(jù)常用動物藥的主要功效，對其藥理作用和相應(yīng)生物活性評價方法進行了概述，見表2。

3.1.1 攻毒散結(jié)類動物藥 攻毒散結(jié)類動物藥可治療濁痰、瘀血等結(jié)聚而形成的瘡瘍腫毒瘰疬結(jié)核諸證?，F(xiàn)多用于抗腫瘤治療。主要通過直接抑制腫瘤增生，促進細胞凋亡，阻止腫瘤細胞向周圍組織浸潤而起作用。以其功效構(gòu)建生物評價的方法，從動物藥對癌細胞生長抑制作用[36-37]，對RNA和蛋白質(zhì)合成的抑制作用，以及誘導(dǎo)細胞凋亡[38]，抑制雞胚血管生成[39]等進行生物評價。例如王晶娟等[40-41]以改良MTT法、流式細胞法研究全蝎蛋白藥效組分對Bel7402細胞和HepG 2細胞毒和細胞周期抑制的作用，來評價全蝎的抗腫瘤活性。

3.1.2 清熱解毒類動物藥 清熱解毒類動物藥多用于里熱證，即現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的多種急性傳染病、感染性疾病及其他如腫瘤等。以其生物學(xué)效應(yīng)構(gòu)建方法，見表3。

以臨床廣泛用于治療瘡瘍腫毒、咽喉腫痛、跌打損傷等癥的麝香為例，羅云等[43]采用酶免疫 （EIA） 法，測定人工麝香對環(huán)氧合酶Ⅱ （COX-2） 的抑制率，構(gòu)建人工麝香對COX-2 抑制作用的量效關(guān)系，為建立人工麝香的體外抗炎效價測定方法提供基礎(chǔ)。此外，羅云等[44]采用微量熱法，測定人工麝香對其抑制作用過程的熱效應(yīng)變化，并獲得其相應(yīng)的熱動力學(xué)參數(shù)，從而對人工麝香對金黃色葡萄球菌抑制作用強度進行定性定量的評價。

3.1.3 活血化瘀類動物藥 活血化瘀類動物藥以疏通血脈、消散瘀血為主要作用，臨床常用于各種血瘀證的治療。同時，活血化瘀藥因能改善機體的高黏狀態(tài)，影響腫瘤細胞的血行擴散與轉(zhuǎn)移，抑制新生血管生成而具有抗腫瘤作用[45]。以其生物學(xué)效應(yīng)構(gòu)建方法，見表4。

例如角甲類藥物，基于其活血通絡(luò)的作用，Luo等[53]采用血漿復(fù)鈣實驗，凝血酶時間，凝血酶滴定實驗以及體外血栓法和全血凝塊法分別對羚羊角，山羊角，水牛角，穿山甲，鱉甲，龜甲，鹿角等角甲類藥的抗凝血、抗血栓活性進行了生物評價。并且根據(jù)生物評價結(jié)果對珍稀瀕危物種尋找替代品提供借鑒依據(jù)。

3.1.4 補血滋陰類動物藥 補血滋陰類動物藥可以補益人體氣血不足，提高機體免疫力，延緩衰老等。在抗腫瘤治療中也發(fā)揮著扶正驅(qū)邪的作用。以其生物學(xué)效應(yīng)構(gòu)建方法，見表5。

Wu等[56]建立由5-FU和γ射線導(dǎo)致的血虛證模型，選擇外周血象，骨髓和脾造血祖細胞，超氧化物歧化酶（SOD）、GSH-Px、ROS、脾表面集落形成單位（CFU-S）等功能指標對阿膠提取物進行增強造血作用評價。周丹蕾等[57]采用MTT比色法，通過其對刀豆蛋白A誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細胞增殖作用的影響來進行免疫活性生物評價，發(fā)現(xiàn)天然蟲草和人工蟲草均能增強免疫，但不同產(chǎn)地、品種和規(guī)格的蟲草在增強免疫的作用上存在差異，這為以人工蟲草替代天然蟲草的可行性提供了參考依據(jù)。王東亮等[58]建立D-半乳糖致小鼠衰老模型，通過檢測其血清、腦、肝中SOD，CAT，GSH-Px活性和MDA含量，以及采用Western blot法檢測p16和p21的表達等方法來評價阿膠的抗衰老活性。

3.1.5 壯陽益腎類動物藥 部分蟲類藥甘咸性溫，或為血肉有情之品，能溫補腎陽，強筋健骨。主治腎陽不足的畏寒肢冷、腰膝酸軟、陽痿不舉、宮冷不孕等。以其生物學(xué)效應(yīng)構(gòu)建方法，見表6。

龔偉等[61]通過比較不同規(guī)格鹿茸飲片對去勢骨質(zhì)疏松癥模型大鼠的影響，并進行聚類分析，建立起鹿茸飲片強筋健骨的生物學(xué)評價，從而為其飲片質(zhì)量進行分級。毛翠平等[62]則用體外培養(yǎng)的成骨細胞，建立了抗骨質(zhì)疏松中藥作用于骨形成的藥效學(xué)評價方法。

3.1.6 祛風(fēng)通絡(luò)類動物藥 爬行蟲類性善走竄，長于治風(fēng)，有祛風(fēng)通絡(luò)，解毒止痛之功。是臨床治療風(fēng)濕病的要藥。以其生物學(xué)效應(yīng)構(gòu)建方法，見表7。

3.1.7 其他 動物藥如麝香、蟾酥等具有開竅醒神的功效，主要用于各種竅閉神昏證?？蓮膶χ袠猩窠?jīng)系統(tǒng)的影響，腦保護及抗炎作用等進行開竅活性評價。

3.2 生物新技術(shù)在動物藥質(zhì)量評價中的應(yīng)用

隨著現(xiàn)代科學(xué)的發(fā)展，許多新技術(shù)如生物芯片技術(shù)，組學(xué)生物標志物，高內(nèi)涵分析技術(shù)以及生物自顯影技術(shù)等逐漸被應(yīng)用到動物藥的生物評價中，這也是目前生物評價發(fā)展的方向。

3.2.1 生物芯片 生物芯片可以將中藥研究與基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等系統(tǒng)生物學(xué)內(nèi)容聯(lián)系起來，在基因、蛋白質(zhì)等分子水平闡明中藥的作用靶點和機制，通過高通量檢測及表達譜形式表征中藥藥效，在中藥質(zhì)量評價和控制研究領(lǐng)域的應(yīng)用已日益增多。武麗斐等[64]應(yīng)用大鼠全基因表達譜芯片，通過差異表達基因發(fā)現(xiàn)冬蟲夏草主要通過抗炎、抗凋亡、抗氧化等途徑對缺血性神經(jīng)元起到保護作用，并通過神經(jīng)再生等作用對缺血部位的腦組織進行修復(fù)等。鄭重等[65]通過基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）功能基因芯片檢測篩選差異表達基因，結(jié)果表明康復(fù)新液能明顯抑制 MMP-3，MMP-13的表達，這為其改善急性大鼠實驗性結(jié)腸炎的作用機制提供了依據(jù)。

此外，利用表達譜對比研究動物藥或其提取物作用于機體前后，特定細胞中相關(guān)物質(zhì)表達的異常變化，可提示該動物藥在研究劑量下是否具有毒性，并能闡明其作用機制并控制其安全性[66]。楊愛文等[67]以蟾酥為研究對象，通過表達譜芯片篩查大鼠在灌胃給予蟾酥高、低劑量的基因表達差異，然后進行Ontology和Pathway富集分析，解釋蟾酥心臟毒性的作用機制及其劑量依賴性。

3.2.2 組學(xué)生物標志物 生物標志物是一種能客觀測量并評價正常生物過程、病理過程或?qū)λ幬锔深A(yù)反應(yīng)的指示物，是生物體受到干預(yù)時的重要指示指標，涉及細胞分子結(jié)構(gòu)和功能的變化，生化代謝過程的變化，生理活動的異常表現(xiàn)，個體、群體或整個生態(tài)系統(tǒng)的異常變化等。在動物藥質(zhì)量評價領(lǐng)域，生物標志物可以靈敏、綜合地反映中藥的生物效應(yīng)，為藥效的定量表征提供依據(jù)。

耿瀟等[68]運用雙向凝膠電泳結(jié)合 MALDI-TOF-MS 技術(shù)，比較分析腦心通膠囊給藥前后的蛋白表達變化，發(fā)現(xiàn)潛在的生物標志物，探討腦心通膠囊防治心腦血管疾病的可能作用機制。張鳳霞等[69]基于UFLC/MS-IT-TOF技術(shù)的代謝組學(xué)方法并結(jié)合多元統(tǒng)計學(xué)來研究通心絡(luò)干預(yù)下的抑郁-動脈粥樣硬化大鼠的血漿代謝譜，發(fā)現(xiàn)色氨酸、苯丙氨酸代謝及某些膽汁酸等標志物，從而為藥效的定量表征提供依據(jù)。梁曉萍等[70]運用UPLC/TOF-MS方法，比較空白組和蟾酥給藥組之間的代謝差異，找到潛在的生物標志物，發(fā)現(xiàn)蟾酥導(dǎo)致心臟損傷的途徑可能是通過阻礙自由脂肪酸再?；蚣せ畹鞍准っ竿犯蓴_了脂質(zhì)代謝，從代謝組學(xué)的角度為闡述蟾酥毒性作用機理提供了新思路。

3.2.3 高內(nèi)涵分析技術(shù) 高內(nèi)涵分析技術(shù)是一種基于細胞表型分析的高效篩選技術(shù)，能夠在保持細胞結(jié)構(gòu)和功能完整的前提下，同時檢測待測樣品對細胞形態(tài)、生長、周期、遷移、凋亡、代謝途徑及信號傳導(dǎo)等方面的影響，從單一試驗中獲取大量有關(guān)信息，從而確定化合物的生物活性以及潛在毒性，從而以更直觀、動態(tài)、定量的方式反映中藥質(zhì)量及藥效[71]。具有動態(tài)、活體、多個指標同步檢測綜合性強的特點，可以全面生動的反映細胞組學(xué)的整體變化進程。

3.2.4 生物自顯影技術(shù) 生物自顯影薄層色譜是一種將薄層色譜分離和生物活性測定相結(jié)合的活性篩選方法。薄層色譜-生物自顯影技術(shù)可使活性成分在薄層色譜板上直接顯現(xiàn)肉眼可見的活性斑點，在中藥檢驗中可直觀地對藥物活性成分作定性鑒別，實現(xiàn)了傳統(tǒng)薄層鑒別目的，且也可用于定量，能反映中藥的活性強弱。目前，應(yīng)用較廣的是對抗菌作用[72]、膽堿酶抑制作用[73]和抗氧化作用的評價[74-75]。

4 動物藥生物評價方法構(gòu)建

對于生物評價常規(guī)方法與技術(shù)的整體框架，見圖1。

5 總結(jié)

2015 年，美國 FDA 于發(fā)布《植物藥研發(fā)行業(yè)指南（草案）》，明確指出將生物評價作為植物藥在美國新藥注冊評審的重要內(nèi)容，其中就包括質(zhì)量控制。將生物評價方法引入動物藥質(zhì)量控制和評價體系，通過選擇合理的指標，盡可能多地反映其“功能主治”，以彌補目前動物藥質(zhì)量控制的缺陷。充分利用快速發(fā)展的科學(xué)技術(shù)，構(gòu)建更多、更好、更系統(tǒng)的生物評價方法，以評價藥效，觀察毒副作用，更好地保障動物藥的質(zhì)量，推動它的現(xiàn)代化、產(chǎn)業(yè)化和國際化發(fā)展。

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[責(zé)任編輯 孔晶晶]