董勤敏

·論著·

濾除白細胞對懸浮紅細胞不同貯存期溶血率的影響

董勤敏

目的 對懸浮紅細胞濾除白細胞后，其不同貯存期溶血率受到的影響情況展開分析。方法 將80名健康志愿者捐獻的血液制備成80份懸浮紅細胞，并根據(jù)隨機數(shù)字表法將其分為兩組，一組為對照組，未將白細胞濾除；另一組為觀察組，濾除白細胞。將兩組懸浮紅細胞樣品保存在4℃的環(huán)境中，并在保存當天，以及保存1周、2周、3周、4周、5周這幾個時間點取樣，并對保存液中的鉀離子、鈉離子以及游離血紅蛋白(FHb)的含量進行檢測與對比。結(jié)果 兩組懸浮紅細胞樣品中的鉀離子及鈉離子含量隨著貯存時間的延長而不斷下降，但兩組數(shù)據(jù)差異無明顯差異(P>0.05)；兩組的FHb隨著貯存時間的延長而不斷上升，且觀察組各時間段的水平明顯高于對照組(P<0.05)。此外，兩組樣品的溶血率也隨著時間的延長而不斷增加，自貯存至3周起，觀察組的溶血率與對照組相比發(fā)生明顯升高，但均符合標準要求。結(jié)論 對于貯存期不超過5周的懸浮紅細胞，在貯存前將白細胞濾除，不會對其溶血率及質(zhì)量產(chǎn)生明顯影響。

懸浮紅細胞 濾除白細胞 溶血率

在血液及紅細胞制品中，游離血紅蛋白(FHb)為一項非常重要的質(zhì)控指標，當FHb含量過高時，很有可能導(dǎo)致受血者出現(xiàn)急性腎功能衰竭的情況[1]。當前，臨床已經(jīng)正式通過將血液制品中的白細胞濾除，可有效預(yù)防因人類白細胞抗原系統(tǒng)同種抗體而造成的一系列免疫性輸血反應(yīng)，如非溶血性發(fā)熱反應(yīng)、輸血相關(guān)的移植物抗宿主病等。然而，國內(nèi)不少濾白(也即濾除白細胞)血制品的保質(zhì)期不長，容易造成浪費，并對臨床應(yīng)用及普及產(chǎn)生不利影響[2]?；诖耍疚木蛻腋〖t細胞濾除白細胞后，其不同貯存期溶血率受到的影響情況展開探究?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1.材料與方法

1.1 樣品來源 以2016年10月15日來我院獻血的80名健康志愿者為例，每人捐獻400ml血液，并置于CPDA-1的保養(yǎng)液中進行保存。隨后，在采血的8小時內(nèi)，將血液標本中的血漿分離，制備成80份懸浮紅細胞，并采取隨機數(shù)字表法將其分為兩組，一組為對照組(40份)，未將白細胞濾除；另一組為觀察組(40份)，濾除白細胞。將兩組懸浮紅細胞樣品保存在4℃的儲血冰箱中。實驗均獲得獻血志愿者的知情同意。

1.2 試劑及儀器 試劑主要包括本科室自主配置的血紅蛋白標準工作液，血紅蛋白標準貯存液，以及濃度為1%的雙氧水溶液。使用的儀器包括型號為Multiskan MK3的酶標儀，型號為羅氏COBAS 80000的生化分析儀，DU640型紫外分光光度計，NIHon Ko HDEN血細胞自動分析儀，由ROCHE 診斷公司生產(chǎn)的各項生化診斷試劑、加樣槍以及血液分裝五聯(lián)袋等。

1.3 留樣過程 將觀察組懸浮紅細胞血液樣品中的白細胞濾除以后，立即用五聯(lián)袋將兩組的樣品分裝起來，并置于4℃的專用冰箱中進行貯存。將每份采血袋中剩余的50ml樣品看作是保存當天樣品，并在保存當天，以及保存1周、2周、3周、4周、5周這幾個時間點取樣，對保存液中的鉀離子、鈉離子、游離血紅蛋白(FHb)的含量進行檢測與對比，并在保存2周、3周、4周、5周檢測兩組的溶血率。

1.4 樣品檢測 取出標本并搖勻，從每袋中抽取2ml血液送往生化科檢測鉀離子及鈣離子含量。并用血細胞自動分析儀將剩余樣品中的紅細胞比容(Hct)及血紅蛋白(Hb)直接測定出來，采取鄰甲聯(lián)苯胺法測定FHb的含量，并根據(jù)溶血率=[上清液或血漿游離血紅蛋白濃度×(1-血細胞比容)]÷總血紅蛋白濃度×100%的公式，計算出懸浮紅細胞的溶血率。

1.5 統(tǒng)計學方法 利用SPPSS18.0統(tǒng)計學軟件分析實驗中的數(shù)據(jù)，并用平均數(shù)與標準差表示計量數(shù)據(jù)，用t進行檢驗；計數(shù)資料則用百分比表示，用χ2檢驗，當P<0.05時，有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組懸浮紅細胞樣品中鉀離子、鈉離子及FHb含量比較 兩組樣品中的鉀離子含量隨著貯存時間的延長不斷上升，鈉離子隨時間延長不斷下降，但兩組數(shù)據(jù)差異無明顯差異(P>0.05)；兩組的FHb隨著貯存時間的延長而不斷上升，且觀察組各時間段的水平明顯高于對照組(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組樣品中鉀離子、鈉離子及FHb含量比較

注：與對照組相比，*P<0.05。

2.2 兩組樣品溶血率比較 兩組樣品的溶血率隨著時間的延長而不斷增加，自貯存至3周起，觀察組的溶血率與對照組相比發(fā)生明顯升高(P<0.05)，但均符合標準要求，詳見表2。

表2 兩組樣品溶血率比較(%)

注：與對照組相比，*P>0.05，#P<0.05。

3.結(jié)論

近些年來，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進步與發(fā)展，血液制品在臨床中也得到了更加廣泛的應(yīng)用。而血液制品中的白細胞不但會作為病原載體傳播各種病毒，而且還可能引起一系列的發(fā)熱性輸血反應(yīng)[3]。因此，為有效減少輸血傳染病及輸血副反應(yīng)的發(fā)生，不少發(fā)達國家紛紛采取全面濾除白細胞(ULR)的措施，以期充分促進血液安全性的提高[4]。然而在實際應(yīng)用過程中，就有報道稱血液濾除白細胞后，出現(xiàn)了肉眼可見的溶血情況，究其原因，可能與過濾時對血液中的紅細胞產(chǎn)生了機械性損傷存在緊密聯(lián)系[5]。但也有學者認為，濾除血液中的白細胞后，有效防止了白細胞死亡后釋放水解酶，極大程度上降低紅細胞在貯存期以內(nèi)的溶血率[6]?？紤]到輸血的安全性及有效性會受到紅細胞溶血情況的而影響，因而歐盟及AABB均規(guī)定血液溶血程度的標準為貯存期末溶血率不超過0.8%，但國內(nèi)尚未明確規(guī)定紅細胞制品的溶血率標準[7]。

具體分析，紅細胞質(zhì)量一項非常重要的評估參數(shù)即為溶血，而血液中的鉀離子、鈉離子以及FHb均可作為溶血的關(guān)鍵指標[8]。由于臨床用的濾白血液均需要盡可能快地輸畢，因而本文對濾除白細胞與否的懸浮紅細胞在不同貯存期的鉀離子、鈉離子、FHb及溶血率進行測量與對比。結(jié)果顯示，隨著貯存期的不斷延長，兩組懸浮紅細胞鉀離子及鈉離子含量隨著貯存時間的延長而不斷下降，但兩組數(shù)據(jù)差異無明顯差異(P>0.05)，表明懸浮紅細胞中的鉀、鈉離子不會受到濾白與否的影響；兩組的FHb隨著貯存時間的延長而不斷上升，在貯存當天，由于觀察組的懸浮紅細胞在濾除白細胞過程中受到了機械性損傷，因而其FHb水平明顯高于對照組(P<0.05)。此外，兩組樣品的溶血率也隨著時間的延長而不斷增加，自貯存至3周起，觀察組的溶血率與對照組相比發(fā)生明顯升高，但均符合歐盟就AABB制定的紅細胞制品的溶血率標準要求。

綜上所述，在貯存前將白細胞濾除不會對貯存期不超過5周的懸浮紅細胞的溶血率及質(zhì)量產(chǎn)生明顯影響。

1 夏維英,張網(wǎng)蘭,蔣瓊.不同白細胞濾除方式對去白細胞懸浮紅細胞溶血的影響[J].中國輸血雜志,2013,26(7):646-647.

2 趙穎,曾嬌，鐘利，等.濾除白細胞的懸浮紅細胞制劑保存24小時質(zhì)量評價[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學,2012,38(4):264-266.

3 龔裕春,邱穎婕,金魏名，等.去白細胞懸浮紅細胞與懸浮紅細胞儲存期內(nèi)溶血率的比較[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2013,26(3):151-152.

4 尤兆雄,隋素琴,張瑞君,等.去白細胞懸浮紅細胞在保存期內(nèi)生化指標的變化[J].中國臨床研究,2015,28(3):301-302.

5 王超英.濾除白細胞對懸浮紅細胞保存期質(zhì)量的影響[J].安徽醫(yī)學,2014,35(5):658-661.

6 王紅,賀曾,吳瑕,等.濾除白細胞對全血保存質(zhì)量的影響[J].中國輸血雜志,2013,26(6):525-529.

7 陳菊芬,黃文光,溫程榮,等.儲存前去白細胞懸浮紅細胞在保存期內(nèi)質(zhì)量變化的研究[J].中國輸血雜志,2013,26(7):612-615.

8 羅圓圓,桂萍,潘繼春,等.濾除白細胞對懸浮紅細胞不同貯存期溶血率的影響[J].中國輸血雜志,2013,26(8):728-729.

The effect of removing white blood cells on hemolysis rate of red blood cells in different storage periods

(DONGQinmin.Nanyangdowntownbloodbank,Nanyang473000,China.)

Objectives To analyze the effect of different red blood cells on the hemolysis rate after the removal of white blood cells.Methods 80 healthy volunteers donated blood to prepare 80 copies of suspended red blood cells were divided into two groups according to random number table method will be divided into two groups，a group for the control group，the leukocyte filtration; another group for the observation group，leukocyte filtration.Two groups of suspended red blood cell samples stored at 4℃ in the environment，and to save the day，and saved 1，2，3，4，5 weeks this time a few samples，and ions，preservation solution of potassium and sodium ions and free hemoglobin(FHb) were detected and compared the content of.Results Potassium ion and sodium ion content of two groups of suspended red blood cells in the sample decreased continuously with the extension of storage time，but no significant difference between the two groups(P>0.05); the two group of FHb increased with the extension of storage time，and the observation group each time the water were significantly higher than that of the control group(P<0.05).In addition，the hemolysis rate of the two groups increased with the extension of time，and the hemolysis rate of the observation group was significantly higher than that of the control group，but all of them were in accordance with the standard requirements.Conclusion The red blood cells were stored for no more than 5 weeks，and the white blood cells were removed before storage.

WBC,RBC,hemolysis rate

河南省南陽市中心血站 成分科 473000

10.3969/j.issn.1672-4860.2017.03.013

2017-3-31