鄭志方 陳國(guó)利 劉 霞 馮小娜 蔣海燕 金子超

血清淀粉樣蛋白A、超敏C反應(yīng)蛋白和降鈣素原檢測(cè)在兒童原發(fā)性腎病綜合征中的應(yīng)用價(jià)值及相關(guān)性分析*

鄭志方①*陳國(guó)利②劉 霞①馮小娜③蔣海燕③金子超④

目的：探討血清淀粉樣蛋白A(SAA)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)和降鈣素原(PCT)檢測(cè)在兒童原發(fā)性腎病綜合征(PNS)病變中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法：選取醫(yī)院收治的95例PNS患兒，分為兩組，單純型腎病患兒分為單純組(67例)，腎炎型腎病患兒分為腎炎組(28例)；另選取同期健康體檢的50名健康兒童為健康對(duì)照組。采集3組的靜脈血，應(yīng)用膠體金法測(cè)定SAA，電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清PCT水平，免疫比濁法測(cè)定hs-CRP水平。比較各組SAA、hs-CRP、PCT、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、白細(xì)胞(WBC)和中性粒細(xì)胞百分比(N)水平等。結(jié)果：?jiǎn)渭兘M患兒SAA、hs-CRP和PCT水平分別為(31.59±13.40)mg/L、(11.68±13.35)mg/L和(0.93±1.70) ng/ml；腎炎組患兒SAA、hs-CRP和PCT水平分別為(70.73±19.49)mg/L、(22.31±20.10) mg/L和(1.61±1.19)ng/ml，均高于健康對(duì)照組的(5.23±2.18)mg/L、(3.43±2.29)mg/L和(0.20±0.17)ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=13.76，t=23.63，t=4.34，t=6.61，t=3.01，t=8.27；P＜0.05)。單純組中SAA、hs-CRP與BUN均呈現(xiàn)正相關(guān)(r=0.253，r=0.251；P＜0.05)。結(jié)論：SAA、hs-CRP和PCT在一定程度上參與了PNS疾病的過(guò)程，聯(lián)合監(jiān)測(cè)SAA、hs-CRP和PCT可為PNS的診斷、病情監(jiān)測(cè)等方面提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

血清淀粉樣蛋白A、超敏C反應(yīng)蛋白；降鈣素原；原發(fā)性腎病綜合征；兒童

臨床上，腎病綜合征(nephrotic syndrome，NS)以大量蛋白尿、低蛋白血癥、高脂血癥以及水腫為特點(diǎn)，病理及生理改變使腎小球基底膜通透性增加，使大量血漿蛋白從尿中丟失。在病因上，NS可分為原發(fā)性、繼發(fā)性和先天性三種，而原發(fā)性腎病綜合征(primary nephrotic syndrome，PNS)最多見(jiàn)，占小兒時(shí)期NS總數(shù)的90%左右。但是，PNS的病因及發(fā)病機(jī)制并不十分明確，常伴有嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。本研究回顧性分析了95例PNS患兒，并對(duì)其進(jìn)行感染性指標(biāo)血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A，SAA)、超敏C反應(yīng)蛋白(high sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)和降鈣素原(procalcitonin，PCT)的水平測(cè)定，進(jìn)一步探討炎性指標(biāo)在兒童PNS中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2009年12月至2014年12月承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的95例PNS患兒，其中男性72例，女性23例；年齡1.45～13.00歲，平均年齡(6.28±2.78)歲；將其中單純型腎病患兒分為單純組(67例)，腎炎型腎病患兒分為腎炎組(28例)，另選取同期健康體檢的50名健康兒童為健康對(duì)照組。單純組中男性48例，女性19例；年齡1.97～13.00歲，平均年齡(6.42±2.80)歲。腎炎組中男性24例，女性4例；年齡1.45～12.60歲，平均年齡(5.93±2.75)歲。健康對(duì)照組中男性39例，女性11例；年齡1.23～12.25歲，平均年齡(6.00±2.98)歲。3組的一般資料無(wú)差異，具有可比性。本研究為回顧性分析，獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①0.25歲＜發(fā)病年齡≤14歲；②所有患兒診斷均符合2009年中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)腎臟病學(xué)組制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。即大量蛋白尿，l周內(nèi)3次尿蛋白3+～4+，24 h尿蛋白≥50 mg/kg，白蛋白≤25 g/L；③總膽固醇≥5.7 mmol/L；④不同程度的水腫。按照標(biāo)準(zhǔn)中臨床分型可分為：?jiǎn)渭冃秃湍I炎型；⑤患者及家屬簽署知情同意書(shū)。

(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎及紫癜性腎炎等的繼發(fā)性腎病綜合征；②病患為Wilms瘤等有腎外表現(xiàn)。

1.3 儀器與材料

SAA應(yīng)用SAA-SPOT定量試劑盒(上海奧普生物醫(yī)藥有限公司)，通過(guò)膠體金法進(jìn)行檢測(cè)。PCT試劑盒購(gòu)自上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司，采用羅氏COBAS E411電化學(xué)發(fā)光儀(羅氏診斷產(chǎn)品有限公司，瑞士)測(cè)定。C反應(yīng)蛋白試劑盒(上海奧普生物醫(yī)藥有限公司)，通過(guò)膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法測(cè)定。白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)采用希森美康Sysmex XN-3000型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(日本，希森美康生物技術(shù)公司)進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 檢測(cè)方法

在患兒入院時(shí)抽取靜脈血，急查血常規(guī)、血生化、SAA、PCT、hs-CRP。SAA結(jié)果以SAA≥8 mg/ L為陽(yáng)性。PCT結(jié)果以PCT≥0.5 ng/ml為陽(yáng)性。C反應(yīng)蛋白結(jié)果以CRP≥8 mg/L為陽(yáng)性。WBC計(jì)數(shù)結(jié)果以WBC≥10×109/L為陽(yáng)性。

1.5 觀察與評(píng)價(jià)指標(biāo)

檢測(cè)分析各組SAA、CRP、PCT、尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、肌酐(urine creatinine，Cr)、WBC和中性粒細(xì)胞百分比(Neutrophil percentage，N)值水平；對(duì)SAA、hs-CRP和PCT測(cè)定值與BUN和Cr進(jìn)行相關(guān)分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，計(jì)數(shù)資料表示為率(%)，均數(shù)兩兩比較應(yīng)用t檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 各組檢測(cè)SAA、hs-CRP、PCT、BUN、Cr、WBC以及N值水平

2 結(jié)果

2.1 各組檢測(cè)SAA、hs-CRP、PCT、BUN、Cr、WBC水平和N值的情況比較

單純組和腎炎組測(cè)定的SAA、hs-CRP、PCT、BUN、Cr、WBC和N值水平均高于健康對(duì)照組；單純組SAA、hs-CRP、PCT、BUN和Cr與健康對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=13.76，t=4.34，t=3.01，t=7.18，t=8.47；P＜0.05)；腎炎組SAA、hs-CRP、PCT、BUN和Cr與健康對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=23.63，t=6.61，t=8.27，t=12.21，t=14.88；P＜0.05)，見(jiàn)表1。單純組與腎炎組之間的SAA、hs-CRP和PCT水平比較無(wú)差異。提示SAA、hs-CRP和PCT的3項(xiàng)指標(biāo)能夠在PNS的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮作用，因此可在PNS明確診斷及監(jiān)測(cè)病情時(shí)作為重要的檢測(cè)指標(biāo)。

2.2 SAA、hs-CRP和PCT測(cè)定值與BUN和Cr的相關(guān)分析比較

兩組的95例患兒SAA、hs-CRP和PCT為自變量，分別與BUN和Cr進(jìn)行相關(guān)分析比較。結(jié)果顯示，單純組SAA、hs-CRP與BUN均呈正相關(guān)(r=0.253，r=0.251；P＜0.05)。相關(guān)性比較如圖1、圖2所示。

圖1 單純組SAA與BUN相關(guān)性比較散點(diǎn)圖

圖2 單純組hs-CRP與BUN相關(guān)性比較散點(diǎn)圖

3 討論

PNS在臨床中多呈隱匿性起病，病因和發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，臨床上的治療仍以糖皮質(zhì)激素為首選藥物。雖然目前已報(bào)道的許多單基因突變?nèi)鏝PHS1、NPHS2、WT1、PLCE1、CD2AP和ACTN4可導(dǎo)致激素耐藥型腎病綜合征(steroid-resistant nephrotic syndrome，SRNS)，但臨床上仍已激素敏感型腎病綜合征(steroid-sensitive nephrotic syndrome，SSNS)占大多數(shù)[2-14]。腎小球基底膜由于受到許多炎性細(xì)胞及介質(zhì)侵犯而使其通透性增加，導(dǎo)致大量血清蛋白透過(guò)濾過(guò)屏障，致使PNS患兒尿液中蛋白含量增加。目前一致認(rèn)為感染是影響本病激素療效的重要因素[15]。因此，炎性細(xì)胞因子和炎性反應(yīng)的研究為探討PNS患兒的病情發(fā)生、發(fā)展提供了新的研究方向。對(duì)此，本研究通過(guò)回顧性分析PNS患兒的臨床資料，對(duì)其炎性指標(biāo)(SAA、hs-CRP、PCT)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PNS合并細(xì)菌感染患兒的SAA、hs-CRP和PCT均高于健康對(duì)照組，表明SAA、hs-CRP和PCT參與了PNS疾病的發(fā)生以及發(fā)展過(guò)程，可能是導(dǎo)致PNS患兒發(fā)病的原因之一。

SAA屬于急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，是組織SAA的前體物質(zhì)，一種高度異質(zhì)性蛋白，主要在肝臟分泌，是一類多基因編碼的多形態(tài)蛋白家族，組織SAA的前體物質(zhì)。在健康人血液中少量存在，但當(dāng)人體處于炎癥、疾病活動(dòng)期或組織損傷時(shí)，可迅速在8～24 h內(nèi)升高，尤其當(dāng)細(xì)菌或病毒感染時(shí)。在炎癥刺激下，肝臟分泌大量的SAA，比CRP積聚更明顯，SAA血漿濃度上升更快，Tanaka等[16]報(bào)道顯示，在細(xì)菌、病毒或真菌，甚至外傷、腫瘤，急性炎癥等相關(guān)疾病中均有檢測(cè)到SAA升高，與本組研究發(fā)現(xiàn)的PNS患兒血清中SAA的水平明顯高于對(duì)照組報(bào)道一致。

CRP由肝臟合成，是一種在全身性炎癥反應(yīng)過(guò)程中所產(chǎn)生的急性期重要的極其敏感的非特異性炎性標(biāo)志物之一。CRP通常在正常人體內(nèi)含量極少，但在病毒或細(xì)菌感染、梗塞、免疫復(fù)合物沉積等因素導(dǎo)致的組織損傷后，由巨噬細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素等刺激肝細(xì)胞合成CRP迅速增加。hs-CRP采用超敏感檢測(cè)技術(shù)，之后檢測(cè)到較低濃度的CRP，而hs-CRP對(duì)于檢測(cè)炎癥反應(yīng)更靈敏、準(zhǔn)確。在PNS患兒中，由于多種不同致病因素的共同作用，使腎小球內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)損傷，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞及炎性介質(zhì)釋放入血而發(fā)生一系列病理改變，從而使腎小球損傷令hs-CRP升高。

本研究中PNS患兒血清中hs-CRP的水平高于健康對(duì)照組，比較結(jié)果表明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，hs-CRP與BUN相關(guān)性研究結(jié)果顯示，單純組C反應(yīng)蛋白與BUN呈正相關(guān)，表明在患病情況下，監(jiān)測(cè)CRP水平不僅能反映其與PNS的發(fā)病情況，同樣也能表明其可以反映PNS患兒的腎功能情況。研究亦對(duì)單純型和腎炎型NS的CRP水平與對(duì)照組進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示均有顯著差異，且腎炎型腎病其CRP水平與對(duì)照組相比，差異更顯著，表明CRP在PNS患兒中具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

正常代謝下，甲狀腺C細(xì)胞產(chǎn)生PCT，并分泌激素活性的降鈣素，PCT是降鈣素原的前肽物質(zhì)，是一種無(wú)激素活性的糖蛋白，產(chǎn)生快、半衰期短、穩(wěn)定性好、不易被降解是其臨床特點(diǎn)。健康人血清中PCT的濃度一般＜0.05 ng/ml，但在各種細(xì)菌毒素和炎性細(xì)胞因子的刺激下，PCT可異常升高，甚至有時(shí)可高達(dá)10～1000 ng/mL。與本研究中PNS患兒的PCT檢測(cè)水平高于健康對(duì)照組，且比較結(jié)果顯示有顯著差異的報(bào)道結(jié)果一致。

本研究通過(guò)PNS患兒檢測(cè)SAA、hs-CRP及PCT水平，發(fā)現(xiàn)其測(cè)定值均高于正常健康兒童，且SAA、hs-CRP水平與BUN均呈正相關(guān)，表明感染指標(biāo)SAA、hs-CRP和PCT參與了PNS的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。因此，臨床上檢測(cè)SAA、hs-CRP和PCT對(duì)于PNS的診斷及監(jiān)測(cè)病情等方面具有重要的臨床意義，并可提供一定的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

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The application value and correlation analysis of SAA, hs-CRP and PCT in primary nephrotic syndrome of children/ZHENG Zhi-fang, CHEN Guo-li, LIU Xia, et al//China Medical Equipment,2017,14(7):88-91.

Objective: To explore the implication value of serum amyloid A (SAA), high sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) and procalcitonin (PCT) in primary nephrotic syndrome (PNS) of children in clinical practice. Methods: 95 children with PNS were divided into simple type group (67 patients with simple nephrotic syndrome) and nephritis group (28 patients with nephritic nephrosis), and 50 healthy children were divided in healthy control group. The venous bloods of three groups were collected, and series of indicators including SAA detected by colloidal gold method, PCT detected by electrochemiluminescence and hs-CRP detected by immunoturbidimetry were detected. And then, the SAA, hs-CRP, PCT, blood urea nitrogen (BUN), creatinine (Cr), white blood cell (WBC) and neutrophil percentage (N) among different groups were compared and analyzed, respectively. Results: In simple type group, SAA, hs-CRP and PCT were (31.59±13.40)mg/L, (11.68±13.35)mg/L, (0.93±1.70)ng/ml, respectively. In nephritis group, the three indicators were (70.73±19.49)mg/L, (22.31±20.10)mg/L and (1.61±1.19) ng/ml, respectively. These indicators of the two groups were significant higher than those (5.23±2.18mg/L, 3.43±2.29mg/L, 0.20±0.17ng/mL) of healthy group (t=13.76, t=23.63, t=4.34, t=6.61, t=3.01, t=8.27, P＜0.05), respectively. In simple type group, there was positive correlation between SAA and BUN and between hs-CRP and BUN, respectively (r=0.253, r= 0.251, P＜0.05). Conclusion: SAA, hs-CRP and PCT participate the progress of PNS in some extent, therefore, the combinative detections of SAA, hs-CRP and PCT can provide references of laboratory for diagnosis and monitoring of PNS.

Serum amyloid A; High sensitivity C-reactive protein; Procalcitonin; Primary nephrotic syndrome; Children [First-author’s address] Department of Pediatrics, Affiliated Hospital of Chengde Medical University, Chengde 067000, China.

鄭志方,女,(1984- ),碩士，主治醫(yī)師。承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院小兒內(nèi)科，從事小兒內(nèi)科的診治工作。

2017-02-18

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.07.022

1672-8270(2017)07-0088-04

R446.113

A

承德市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃(20151028)“承德地區(qū)感染因素對(duì)小兒原發(fā)性腎病綜合征的影響”

①承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院小兒內(nèi)科 河北 承德 067000

②承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院外一科 河北 承德 067000

③承德寬城滿族自治縣醫(yī)院 河北 承德 067600

④承德市寬城滿族自治縣中心衛(wèi)生院 河北 承德 067600

*通訊作者：zhengzhifang126@126.com