劉曉鴿 曾錦婷 王金生 潘小燕

深圳寶安區(qū)不同年齡健康兒童血清中CK-MB正常值參考區(qū)間的建立*

劉曉鴿①曾錦婷①王金生①潘小燕②

目的：建立深圳寶安區(qū)不同年齡健康兒童血清中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)正常值參考區(qū)間，為本地區(qū)兒童心肌損傷的診斷提供科學依據(jù)。方法：采用數(shù)表法隨機選取2016年2月至2017年1月在醫(yī)院體檢的健康兒童3176名，按年齡分為＜1歲、1～3歲、4～6歲和7～15歲4組，并選擇同期18～50歲健康成年人1549名，分別采用免疫抑制法檢測血清中CK-MB含量，并對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，CK-MB濃度水平呈偏態(tài)分布，采用百分位數(shù)(P95)作為參考區(qū)間的單側(cè)上限，確定本區(qū)相應的生物參考區(qū)間，并比較分析不同年齡和性別兒童血清中CK-MB濃度水平之間的差異性。結(jié)果：同年齡的4組兒童男性與女性血清中CK-MB濃度水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=1.293，t=0.962，t=0.529，t=0.415；P＞0.05)。4組兒童血清中CK-MB濃度水平檢測，＜1歲組明顯高于其他3組兒童，差異有統(tǒng)計學意義(t=5.915，t=12.657，t=8.615；P＜0.05)；1～3歲組高于4～6歲組和7～15歲組，差異有統(tǒng)計學意義(t=3.092，t=3.781；P＜0.05)；而4～6歲組與7～15組之間差異無統(tǒng)計學意義(t=1.385，P＞0.05)。健康成年人組血清中CK-MB濃度水平明顯低于健康兒童組，差異有統(tǒng)計學意義(t=13.592，P＜0.05)。＜1歲組、1～3歲組和4～15歲組健康兒童血清中CK-MB正常值參考區(qū)間分別為0～58 U/L、0～45 U/L和0～37 U/L。結(jié)論：深圳寶安區(qū)健康兒童CK-MB濃度水平與性別無關，而與年齡相關，且隨著年齡增長CK-MB水平呈下降趨勢。建立本區(qū)不同年齡兒童血清中CK-MB正常值參考區(qū)間，可為兒童心肌損傷的診斷提供科學依據(jù)。

健康兒童；肌酸肌酶MB同工酶；免疫抑制法；參考區(qū)間；心肌損傷

血清中肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase isoenzyme-MB，CK-MB)作為心肌損傷診斷的一種特異性酶，對心肌梗死、心肌炎及心肌損傷的診斷、治療及療效判斷具有重要的價值，曾為心肌梗死、心肌炎及心肌損傷診斷的金指標[1-3]。免疫抑制法因其方法簡單，適于自動化，是目前國內(nèi)檢測血清CK-MB活性最常用方法，但免疫抑制法試劑盒給出的CK-MB正常值參考區(qū)間未區(qū)分兒童和成年人，統(tǒng)一為0～24 U/ L，而實際檢測中大部分健康體驗兒童常出現(xiàn)CK-MB濃度水平高于正常值的現(xiàn)象，因此對兒童急性心肌梗死、心肌炎及心肌損傷的診斷、治療及療效判斷帶來一定的誤區(qū)，甚至易造成誤診或?qū)е虏槐匾拇_診項目檢查，以致導致兒童因確診項目檢查而帶來身體創(chuàng)傷，并增加醫(yī)療費用及家庭經(jīng)濟負擔，浪費公共醫(yī)療資源。為此，本研究對深圳寶安區(qū)健康兒童血清中CK-MB進行調(diào)查分析，旨在建立深圳寶安區(qū)不同年齡健康兒童血清中CK-MB正常值參考區(qū)間。

表1 同年齡不同性別的4組兒童血清中CK-MB濃度水平比較±s，U/L)

表1 同年齡不同性別的4組兒童血清中CK-MB濃度水平比較±s，U/L)

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1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年2月至2017年1月在深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院體檢的健康兒童3176名，其中男性1495名，女性1681名；年齡0～15歲，平均年齡(6.75±5.82)歲；按不同年齡分為＜1歲組(852名)、1～3歲組(816名)、4～6歲組(803名)和7～15歲組(705名)。同期選擇體檢的健康成年人1549名，其中男性817名，女性732名；年齡18～50歲，平均年齡(35.09±11.32)歲。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：①所有體檢兒童經(jīng)體檢科醫(yī)生嚴格體格檢查，均發(fā)育正常；②心電圖(electrocardiogram，ECG)、B超檢查均正常；③血常規(guī)檢查白細胞(white blood cell，WBC)及分類計數(shù)均在正常范圍內(nèi)。

(2)排除標準：①近期上呼吸道感染史及肌內(nèi)注射史；②有心肌、腦部、骨骼肌及皮膚炎癥等疾病；③有劇烈活動、藥物及非疾病因素的影響；④有急、慢性疾病、肝、腎疾病及心臟病家族史。

1.3 儀器與試劑

日立7600型全自動生化免疫分析儀、試劑、校準品及室內(nèi)質(zhì)控品均由日本日立公司提供；試劑盒由寧波美康生物科技股份有限公司提供。

1.4 標本采集與檢測方法

(1)所有研究對象均于凌晨空腹按標本留取統(tǒng)一標準方法抽取靜脈血2～3 ml于一次性無抗凝劑干燥管內(nèi)，及時送檢。

(2)收到標本于室溫靜置30 min后置于離心機內(nèi)以3500 r/min離心5 min，分離血清用免疫抑制法測定CK-MB濃度水平，所有標本均于2 h內(nèi)檢測完畢。標本檢測前對7600生化分析儀進行維護、保養(yǎng)和定校，然后進行室內(nèi)質(zhì)控物檢測，待室內(nèi)質(zhì)控物檢測結(jié)果均在質(zhì)量控制數(shù)值范圍內(nèi)后，再行研究標本檢測，所有操作均嚴格按儀器和實驗室的標準作業(yè)程序(standard operating procedures，SOP)文件進行。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料采用均數(shù)±標準差(x-±s)表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義；因CK-MB濃度呈偏態(tài)性分布，參考區(qū)間建立采用百分位數(shù)(P95) (x＋1.96 s)作為參考區(qū)間的單側(cè)上限。

2 結(jié)果

2.1 同年齡不同性別患者血清中CK-MB濃度水平比較

在4組同年齡組不同性別兒童中，檢測血清中CK-MB濃度水平之間比較，＜1歲組、1～3歲組、4～6歲組和7～15歲組不同性別兒童的血清中CK-MB濃度水平差異均無統(tǒng)計學意義(t=1.293，t=0.962，t=0.529，t=0.415；P＞0.05)，見表1。

2.2 4組健康兒童血清中CK-MB含量比較

在4組健康兒童中，＜1歲組兒童血清中CK-MB濃度水平明顯高于其他3組，差異有統(tǒng)計學意義(t=5.915，t=12.657，t=8.615；P＜0.05)；1～3歲組高于4～6歲組和7～15歲組，差異有統(tǒng)計學意義(t=3.092，t=3.781；P＜0.05)；而4～6歲組與7～15組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(t=1.385，P＞0.05)，見表2。

2.3 健康兒童與健康成年人血清中CK-MB濃度比較

健康成年人血清中CK-MB含量均值為(10.84± 4.76)U/L，明顯低于健康兒童的均值(25.62±7.32)U/L，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(t=13.592，P＜0.05)。

2.4 血清中CK-MB濃度水平正常值參考區(qū)間

同年齡不同性別兒童血清中CK-MB濃度水平之間差異無統(tǒng)計學意義，將同年齡不同性別兒童CK-MB結(jié)果建立統(tǒng)一參考區(qū)間；4～6歲組與7～15歲組CK-MB濃度水平之間差異無統(tǒng)計學意義，總體水平穩(wěn)定，將4～15歲年齡段兒童建立統(tǒng)一參考區(qū)間。CK-MB濃度測得結(jié)果呈偏態(tài)分布，采用單指標百分數(shù)法計算參考區(qū)間，結(jié)合CK-MB濃度臨床意義取單側(cè)上限，以95%分位數(shù)(+1.96 s)為參考區(qū)間上限。＜1歲組、1～3歲組和4～15歲組健康兒童血清中CK-MB正常值參考區(qū)間分別為0～58 U/L、0～45 U/L和0～37 U/L。

表2 四組健康兒童血清中CK-MB含量±s，U/L)

表2 四組健康兒童血清中CK-MB含量±s，U/L)

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3 討論

血清中CK-MB是心肌細胞中的一種特異性酶，當心肌受損，心肌細胞破壞增加時，CK-MB釋放入血，導致血清中CK-MB濃度水平增高，是心肌梗死、心肌炎及心肌損傷的一個敏感性指標[4-7]。目前，CK-MB濃度水平檢測仍是急性心肌損傷診斷的首選指標之一，其濃度水平升高可作為心肌炎診斷的特異性指標之一，頗受臨床醫(yī)生重視[8-10]。

肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)主要存在腦組織、胃腸道及子宮平滑肌中，腦組織中幾乎全部為CKBB。如果血清中有存在導致CK-BB升高的因素，即可造成CK-MB假性升高。兒童，尤其是嬰幼兒、學齡前兒童由于其血腦屏障發(fā)育不夠完善，外周血中會出現(xiàn)很多CK-BB，濃度可明顯高于成年人[11]；吳鳳麗等[12]在CK同工酶電泳時也發(fā)現(xiàn)，兒童患者在電泳中出現(xiàn)大量的CK-BB。因此，采用免疫抑制法測得的CK-MB活性就會出現(xiàn)假陽性反應。本研究結(jié)果顯示，＜1歲的健康兒童血清中CK-MB濃度水平明顯高于其他年齡組的兒童，1～3歲組高于4～6歲組和7～15歲組，差異均有統(tǒng)計學意義，且隨著兒童年齡的增長，CK-MB濃度也逐漸下降，但與兒童性別無關，這可能與兒童血腦屏障不斷發(fā)育完善和血清中CK-BB逐漸減少有關。

CK-MB濃度水平測定方法頗多，傳統(tǒng)方法有電泳及離子交換層析法，但由于其敏感性差和操作繁瑣等原因，給檢驗和臨床工作帶來不便。酶質(zhì)量測定法測定CK-MB濃度，效果很好，但試劑價格昂貴，很難普及，而免疫抑制法方法簡單，便于自動化，是目前國內(nèi)實驗室應用最多的檢測方法，其采用抗M亞基的抗血清，標本中的全部CK-MM活性和50%的CK-MB活性被抑制，而CK-MB和CK-BB中B亞基的活性則不受影響。成年人血清中因CK-BB含量甚微而可忽略不計，故將CK-BB活性測定值乘以2即可認為大致代表CK-MB的活性[13-16]。本研究結(jié)果顯示，健康成年人血清中CK-MB濃度明顯低于健康兒童，差異有統(tǒng)計學意義，這可能與成年人血腦屏障發(fā)育已完善，血清中CK-BB含量甚微有關。

CK-MB免疫抑制法檢測試劑盒所提供的正常參考區(qū)間未區(qū)分年齡，統(tǒng)一為0～24 U/L。本研究結(jié)果顯示，免疫抑制法檢測健康兒童血清中CK-MB含量明顯高于健康成年人，且不同年齡兒童血清中CK-MB含量之間有統(tǒng)計學差異。因此，應用免疫抑制法檢測兒童血清中CK-MB濃度水平不能直接引用試劑盒所提供的參考區(qū)間，應建立不同年齡段兒童血清中CK-MB的正常值參考區(qū)間。

健康兒童血清中CK-MB濃度水平明顯高于健康成年人，且不同年齡兒童之間也存在差異性。因此，采用免疫抑制法檢測兒童血清中CK-MB濃度水平時不能直接引用試劑盒提供的正常參考區(qū)間，應及時建立本區(qū)健康兒童不同年齡段CK-MB水平正常值參考區(qū)間，以便更好地為本區(qū)兒童急性心肌梗死、心肌炎及心肌損傷的診斷提供科學依據(jù)。

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The establishment of normal reference range for serum CK-MB of healthy children in different age in baoan district of Shenzhen/LIU Xiao-ge, ZENG Jin-ting, WANG Jin-sheng, et al//China Medical Equipment, 2017,14(7):92-95.

Objective: To establish the normal reference range of serum creatine kinase isoenzyme MB (CK -MB) for healthy children of different age in Baoan district of Shenzhen so as to provide scientific reference for the myocardial injury of children in this district. Methods: 3176 cases were selected from healthy children

physical examination since February 2016 to January 2017 as random number table and they were divided into four groups as age stage (＜1 year old, 1-3 years old, 4-6 years old and 7-15 years old). Besides, 1549 healthy adults (18-50 years old) were selected in the research. The CK-MB concentration in all of these cases were detected by immune suppression method, and the statistical analysis of these data revealed that the concentration level of CK-MB was skewed distribution. The P95 was determined as the up limit of unilateral in the reference interval, and then the relevant biological reference range was determined as above data. The concentration of CK-MB among different age stages and that of CK-MB between different genders were compared. Results: In every age group, the difference of concentration of CK-MB between male and female was no significant (t=1.293, t=0.962, t=0.529, t=0.415, P＞0.05). In the four groups, the concentration of ＜1 year group was significantly higher than other three groups (t=5.915, t=12.657, t=8.615, P＜0.05). And the group of 1-3 years old was significantly higher than group of 4-6 years old and group of 7-15 years old (t=3.092, t=3.781, P＜0.05), respectively. While the difference of concentration between group of 4-6 years old and group of 7-15 years old was no significant (t=1.385, P＞0.05). Besides, the concentration of healthy adult was significantly lower than that of healthy children (t=13.592, P＜0.001). The normal reference interval of group of ＜1 years old, group of 1-3 years old and group of 4-15 years old were (0～58)U/L, (0～45)U/ L and (0～37)U/L, respectively. Conclusion: The concentration of CK-MB in healthy children of Baoan district is not correlative with gender while it is correlative with age. Besides, the concentration of CK-MB is decreased with the increasing of age. To establish the normal reference range of serum CK-MB for children in different age stage can provide science reference for the diagnosis of myocardial injury in children.

Healthy children; Creatine kinase isoenzyme MB (CK - MB); Immune suppression method; Reference interval; Myocardial injury.

Department of Clinical Laboratory, Baoan District Fuyong People's Hospital of Shenzhen, Shenzhen 518103, China.

劉曉鴿,女,(1983- ),本科學歷，主管技師。深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院檢驗科，從事臨床生化檢驗工作。

2017-03-19

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.07.023

1672-8270(2017)07-0092-04

R446.11

A

深圳市寶安區(qū)科技局資助項目(2016cx273)“不同年齡健康兒童免疫抑制法測定肌酸激酶MB型同工酶正常參考區(qū)間的建立”

①深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院檢驗科 廣東 深圳 518103

②深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院兒科 廣東 深圳 518103