李婷婷,鄭薇薇,韓曉琳,李小娟,劉 穎

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科,黑龍江 哈爾濱150086)

*通訊作者

血清及胸水中MMP-9和CD147的檢測對肺癌惡性胸腔積液的診斷價(jià)值

李婷婷*,鄭薇薇,韓曉琳,李小娟,劉 穎

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科,黑龍江 哈爾濱150086)

胸腔積液增多是各醫(yī)院呼吸內(nèi)科常見的并發(fā)癥，主要病因包括肺結(jié)核、胸膜炎和惡性肺部腫瘤等[1]。在所有的胸腔積液中，惡性胸腔積液所占的比例相對較大，有文獻(xiàn)報(bào)道顯示占比高達(dá)45%以上[2]。目前對于胸腔積液的良惡性的判斷主要還是通過胸膜活檢和胸腔鏡等方式[3]。本文通過對比惡性和非惡性胸腔積液患者血清和胸水的MMP-9和CD147兩種腫瘤標(biāo)志物中含量差異，分析兩種腫瘤標(biāo)志物對于鑒別良惡性胸腔積液的臨床意義。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2015年1月-2016年6月期間在我院住院的胸腔積液患者82例作為本次研究的觀察對象，根據(jù)是否為由于肺癌引起的胸腔積液分組。其中觀察組42例：男/女：26/16；年齡45-68歲，平均年齡(51.2+14.6)歲；診斷標(biāo)準(zhǔn)：患者經(jīng)胸膜活檢和組織學(xué)鑒定胸腔積液中存在腫瘤細(xì)胞，并排除有細(xì)菌和結(jié)核感染等其他非惡性腫瘤因素引起的胸腔積液。其中腺癌、鱗癌、大細(xì)胞癌和腺鱗混合癌分別為：18、15、8和1例。經(jīng)超聲影像學(xué)證實(shí)其中出現(xiàn)肺組織周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的12例，未轉(zhuǎn)移患者30例；對照組40例：男/女：23/17；年齡42-63歲，平均年齡(47.3±12.9)歲；其中結(jié)核性胸腔積液的患者26例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床癥狀種有低熱盜汗，消瘦癥狀出現(xiàn)等，實(shí)驗(yàn)室血液結(jié)核菌鑒定陽性，胸水白細(xì)胞成分以淋巴細(xì)胞為主；(2)經(jīng)過結(jié)核藥物的治療，臨床癥狀減輕，同時(shí)胸水明顯吸收減少。肺炎胸腔積液9例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床有發(fā)熱和胸痛典型的肺炎表現(xiàn)，同時(shí)胸水成分檢測白細(xì)胞以中性粒細(xì)胞為主，胸水細(xì)菌培養(yǎng)有非結(jié)核菌群生長；(2)抗生素治療及介入性引流患者的病情具有明顯的改善。心臟功能不全患者5例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)具有明確的心臟功能不全的臨床癥狀和診斷依據(jù)[4]；(2)排除腫瘤和結(jié)核等因素引起的胸部積液。兩組患者在年齡和性別比例等一般資料不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2 方法

血清樣本采集無菌采取兩組患者清晨空腹靜脈血3 ml,靜置30 min,離心(3 000 r/min,10 min),收集上層血清，然后分裝入無菌EP管,-80℃保存。抽取新鮮胸水3 ml進(jìn)行同血液血測定前的離心和上清液提取保存過程。樣本統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法對血液和胸水中的MMP-9和CD147進(jìn)行測定，MMP-9和CD147試劑盒由北京中杉金橋生物制品有限公司提供，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。使用儀器：高速低溫離心機(jī)(長沙維爾康湘鷹離心機(jī)有限公司)，冷藏冰箱及微量加樣器(賽默飛公司)，酶標(biāo)儀(美國伯樂公司)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組患者M(jìn)MP-9和CD147在血清和胸水中的含量

觀察組中的血清及胸水中的MMP-9顯著的高于對照組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；觀察組中的血清及胸水中的CD147顯著的高于對照組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見表1。

2.2 診斷臨界點(diǎn)確定及診斷效能

通過做血清MMP-9、胸水MMP-9、血清CD147和胸水中CD147水平的ROC曲線，曲線下的面積分別為0.75(靈敏度：67.8%；特異度：73.4%)，0.74(靈敏度為：64.2%；特異度：81.7%)，0.78(靈敏度：67.2%；特異度：72.5%)和0.79(靈敏度：79.5；特異度：88.1%)，見表2。通過對ROC曲線的觀察來確定MMP-9和CD147的最佳臨界點(diǎn)，血清和胸水中MMP-9的最佳臨界點(diǎn)分別為：18.6ng/ml和27.16ng/ml，血清及胸水中CD147最佳臨界點(diǎn)分別為11.42ng/ml和16.11ng/ml。在平行診斷中發(fā)現(xiàn)血清MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為89.2%和55.1%；胸水MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為92.5%和72.3%；在系列診斷實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)血清MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為45.3%和93.2%；胸水中MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為51.8%和96.7%。

表1 兩組患者M(jìn)MP-9和CD147在血清和胸水中的含量

表2 血清及胸水中MMP-9、CD147診斷臨界點(diǎn)及診斷效能

3 討論

腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移必須要經(jīng)過粘附和降解基底膜進(jìn)入基底膜的過程，其中最關(guān)鍵的步驟就是細(xì)胞基質(zhì)降解，MMP-9廣泛的表達(dá)于肺癌、前列腺癌和乳腺癌等惡性腫瘤細(xì)胞內(nèi)，它能降解除了多糖以外所有的細(xì)胞外基質(zhì)成分[4]。文獻(xiàn)報(bào)道MMPs-9無論是在體內(nèi)腫瘤組織還是體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞珠中都與腫瘤細(xì)胞的侵潤和轉(zhuǎn)移能力具有較強(qiáng)相關(guān)性，主要是其能夠通過破壞膠原組織和層連蛋白等細(xì)胞間的組織來破壞細(xì)胞屏障，降解基質(zhì)破壞細(xì)胞間聯(lián)系在ECM中發(fā)揮重要作用[5]。CD147作為基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子中的一員在多種腫瘤組織具有高表達(dá)性。CD147在腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移過程中主要是通過促進(jìn)MMPs-9產(chǎn)生的過程間接參與。MMPs-9主要產(chǎn)生于腫瘤相關(guān)組織成纖維細(xì)胞，有文獻(xiàn)報(bào)道CD147可以通過自分泌和旁分泌的方式刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生MMPs-9[6]。本文研究結(jié)果中顯示惡性胸腔積水組(觀察組)MMPs-9和CD147無論是在胸水中和血清中都要顯著高于良性胸腔積水(對照組)(P<0.05),同時(shí)還發(fā)現(xiàn)胸水中二者的水平要高于血清中,說明二者在胸水形成的過程中發(fā)揮了重要的作用。胸腔積液中的MMP-9和CD147可以作為鑒別診斷是否由于肺癌原因引起的胸腔積液重要指標(biāo)，具有較好的臨床價(jià)值。

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1007-4287(2017)07-1163-02

2016-08-30)