覃麗英 曾丹丹 馬育林 盛志峰

1.南方醫(yī)科大學附屬小欖醫(yī)院體檢中心，廣東 中山 528415 2.中山火炬開發(fā)區(qū)醫(yī)院內分泌科，廣東 中山 528437 3.中南大學湘雅二醫(yī)院代謝內分泌研究所，湖南 長沙 410011

肌肉生長抑制素(moystatin，MS)是屬于轉化生長因子(transforming growth factor β，TGF-β)超家族的分泌性生長及分化因子，負性調節(jié)骨骼肌生長[1]。在小鼠、牛及人類中，MS功能缺失會導致肌量增加[2]。MS信號阻滯會改善肌萎縮蛋白缺乏mdx小鼠肌肉生長[3]，能增加高脂飲食誘導肥胖大鼠股骨頸骨量丟失和骨微結構退變[4]，MS抗體能提高18月齡去卵巢小鼠骨密度(bone mineral density，BMD)及血骨形成標志物水平[5]。目前資料顯示MS可能直接影響骨形成細胞的增殖分化[6]，MS拮抗劑及抗體能促進肌肉量及骨強度的增加。近期研究揭示MS能抑制前脂肪細胞的分化，可能影響脂代謝。在絕經后婦女，血MS水平與BMD、體成分、血骨轉換標志物及血脂成分的關系尚不清楚。

本研究的目的是闡明絕經后婦女血MS水平與BMD、體成分、血骨轉換標志物及血脂成分的關系。筆者在中國中南地區(qū)進行了一項橫斷面研究，納入175名年齡在51～75歲的絕經后婦女。

1 材料和方法

1.1 研究對象

在社區(qū)中心，研究納入居住在城區(qū)的175名年齡在51～75歲的絕經后婦女(見表1)。所有研究對象均身體健康、生活自理，未服用影響骨骼、軟組織及肌肉代謝的藥物。經調查問卷、詢問病史及體格檢查，吸煙、飲酒及喝咖啡者排除在外，其他影響骨代謝的情況、包括服用高血壓及冠心病藥物者亦排除在外。所有研究對象均簽署知情同意書，研究經中南大學湘雅二醫(yī)院倫理委員會同意。

表1 175名婦女人體學測量、體成分測量及臨床資料Table 1 Densitometric, anthropometric, and clinical data of the 175 women studied

1.2 臨床資料

體重及身高測量分別精確到0.1 kg及0.1 cm，測量時脫去鞋子、穿單衣。體重指數(body mass index，BMI)等于體重(kg)除以身高(m)的平方。早晨8點抽取空腹血，儲存于-80 ℃冰箱待檢。

1.3 雙能X線吸收(dual energy X-ray absorptiometry，DEXA)骨密度儀測量BMD及體成分

采用美國GE-Lunar Prodigy Advance扇形束DEXA骨密度儀測量每例研究對象腰椎正位腰1～4、左側股骨頸、左側全髖部面積BMD(g/cm2)。正位腰椎BMD、股骨頸BMD、全髖部BMD及體成分測量的變異系數(coefficient of variation，CV)分別為1.2%、1.1%、0.9%及1.4%。根據WHO推薦的骨質疏松診斷標準及筆者研究所建立的峰值骨密度參考數據庫，研究個體的BMD低于同性別峰值骨量的2.5SD以上被確定為骨質疏松癥。

血肌酐用自動酶色譜法測定(羅氏診斷)，25羥維生素D[25 hydroxy vitamin D，25-(OH)D]用定量夾心酶聯免疫吸附試劑盒測定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)(IDS，Boldon，Wear，UK)。血骨堿性磷酸酶(bone alkaline phosphatase，BAP)及I型膠原C末端肽(type I collagen C terminal peptide，CTX)用ELISA試劑盒測定(IDS，Boldon，Wear，UK)。血MS采用ELISA試劑盒測定(皮內及批間變異系數分別為<8%和<5%，Immundiagnostik AG，Germany)。總膽固醇(total cholesterol，TCHO)、高密度膽固醇(high density cholesterol，HDL-C)、低密度膽固醇(low density cholesterol，LDL-C)和甘油三酯(triglyceride，TG)用酶法測定 (Roche Molecular Biochemicals，Mannheim，Germany)。

1.4 統計學處理

骨轉換標志物經對數轉換后呈正態(tài)分布，結果以均數±標準差表示。對數據進行正態(tài)分布性檢驗。骨質疏松和非骨質疏松組之間連續(xù)變量比較用獨立樣本t檢驗，采用Pearson相關分析各變量之間的相關性。分別以腰椎、股骨頸、全髖部、全身BMD為應變量，以年齡、絕經年齡、身高、體脂含量、瘦重、血BAP、CTX及MS等為自變量，通過多元逐步回歸分析確定BMD的主要影響因素。應用SPSS 13.0統計軟件進行分析。

2 結果

骨質疏松及非骨質疏松婦女體成分、人體學測量、血清MS、血清骨轉換標志物及臨床資料見表2。與骨質疏松婦女相比，非骨質疏松婦女BMI(P<0.01)、體脂含量(P<0.01)及瘦體重(P<0.01)更高。骨質疏松婦女年齡較非骨質疏松婦女大(P<0.01)。經年齡校正后，兩組之間血清BAP、CTX、25-(OH)D、PTH、血脂及MS水平差異無統計學意義。見表2。

分別以腰1～4椎體、股骨頸、全髖部、全身BMD為應變量的多元逐步回歸分析結果見表3。各部位BMD與絕經年齡、體脂含量及瘦體重成正相關，與年齡、血清BAP及身高成負相關。血清MS與TG負相關，與體成分及各部位骨密度無相關。

組別年齡 (歲)絕經年齡 (歲)絕經時間 (年)身高(cm)體重(kg)BMI(kg/m2)體脂 (kg)瘦體重 (kg)25(OH)D (nmol/L)BAP (μg/L)CTX (ng/mL)TG(mmol/L)T-CHOL(mmol/L)LDL-CHO(mmol/L)HDL-CHO (mmol/L)MS (ng/mL)總BMD (g/cm2)腰椎BMD (g/cm2)股骨頸BMD (g/cm2)髖部BMD(g/cm2)無骨質疏松婦女(n=111)61.7±5.849.6±3.812.1±6.4154.3±4.957.6±6.724.2±2.719.8±4.634.8±3.144.4±14.722.5±7.510.53±0.221.68±1.315.35±1.023.17±0.755.35±1.037.37±2.361.05±0.071.01±0.130.80±0.110.89±0.10骨質疏松婦女(n=64)64.3±5.649.0±3.415.3±6.6153. 7±4.853.5±6.822.6±2.617.4±4.933.2±2.743.0±13.722.7±7.820.56±0.251.54±1.105.35±0.723.11±0.715.35±0.727.59±2.110.95±0.070.82±0.110.63±0.080.71±0.08P<0.010.29<0.010.43<0.01<0.01<0.01<0.010.550.890.340.531.000.631.000.53<0.01<0.01<0.01<0.01

注：BMI：體重指數；BAP：骨源性堿性磷酸酶；CTX：I型膠原C末端肽；TG：甘油三酯；T-CHOL：總膽固醇；LDL-CHO：低密度脂蛋白；HDL-CHO：高密度脂蛋白；MS：肌肉生長抑制素

表3 以腰椎、全髖部、全身BMD為應變量的多元逐步回歸分析結果Table 3 Multiple linear stepwise regression analysis with BMD at total body, BMD at Lumbar1-4 spine or BMD at total hip as the dependent variable

注：β：標化的回歸系數，R2C：校正的R2C；—：剔除的值

3 討論

研究資料表明非骨質疏松婦女瘦體重高于骨質疏松婦女，各部位BMD與瘦體重呈正相關，結果與肌肉量及強度的增加伴隨骨量增加的共識一致[7-8]。另外，本研究發(fā)現，即使骨質疏松及非骨質疏松婦女瘦體重有顯著差別，但血清MS并無顯著差別，Ratkevicius等[9]在年輕男性及肌肉萎縮的老年男性中報告了相似的結果。然而，以前研究表明青年男性血MS水平高于老年男性[10-11]，但無論青年還是老年男性血MS水平與瘦體重差異無統計學意義。最近研究發(fā)現血清MS與總體脂、腹部體脂及外周體脂含量呈負相關，與瘦體重無相關[11]。這些資料似乎表明血清MS水平不是肌肉量的決定因素，似乎是脂代謝的重要調節(jié)因子。

最初MS被認為只阻止肌肉量過度增加，而肌肉量會影響B(tài)MD，MS還能影響骨髓基質細胞的分化，進而影響脂肪、骨骼肌及骨量。但最近研究顯示，在不同生理狀況下MS的生理作用有差異。本研究是第一次揭示絕經后婦女血清MS水平與BMD的關系，研究資料表明在中國中南地區(qū)絕經后婦女，血清MS水平與各部位BMD無相關性。然而，Zhang 等[12]發(fā)現中國年輕婦女MS基因多態(tài)性影響峰值骨密度的獲得，在青年男性則無影響[13]。最近研究發(fā)現抑制MS不能顯著增加缺乏運動者的肌肉量[14]，另一研究則發(fā)現抑制MS能增加肌肉量和肌纖維體積，但不能增加BMD和骨強度[15]。這些資料似乎表明，在青年男性及絕經后婦女，運動伴隨的肌肉量增加對BMD的影響大于血清MS水平的影響。另一方面，參與調節(jié)肌肉和骨骼代謝的藥物也可能促進或抑制MS的生理活性。需進一步研究來闡明MS在增齡相關的骨骼退變中的調節(jié)作用。

在普通飼料或高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠，最新研究顯示抑制脂肪組織MS信號轉導對體成分、增重、糖代謝、胰島素抵抗無影響[16]。相反，在高脂飲食誘導的肥胖小鼠，抑制肌肉組織MS信號轉導增加瘦體重、減少體脂、改善糖代謝。Moster等[14]發(fā)現用siRNA抑制MS會顯著降低小鼠血TG水平，而本研究發(fā)現血清MS與血TG呈負相關，提示MS對血脂代謝的影響是通過影響脂肪細胞代謝的改變，比如抑制肌肉間脂肪前體細胞的增殖分化[21]。MS不僅能抑制前脂肪細胞分化[17-20]，還能通過降低甘油三酯脂肪酶和激素敏感脂肪酶在肌內脂肪細胞中的表達而減少甘油的釋放[21]。最近研究發(fā)現，MS基因敲除小鼠體重顯著降低，而脂肪合成增加可能是為了給肌肉生長供給足夠營養(yǎng)[22]。上述研究似乎表明MS抑制脂肪細胞對TG的攝取。

本研究提示血清MS濃度與瘦體重及骨量無相關性，將來需要進行以多種族為基礎的研究以揭示MS在調控骨代謝中的作用。肌肉、脂肪組織及骨組織之間的相互作用需要進一步研究來闡明。