郭 輝，陳 燦，張曉麗，秦學(xué)毅，馮 銳

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所/廣西水稻遺傳改良生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530007)

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廣西野生稻耐冷性鑒定與遺傳純合研究

郭 輝，陳 燦，張曉麗，秦學(xué)毅，馮 銳*

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所/廣西水稻遺傳改良生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530007)

【目的】篩選耐冷性強(qiáng)的野生稻種質(zhì)，研究野生稻耐冷性遺傳的穩(wěn)定性，為水稻耐冷性育種和研究提供抗源?！痉椒ā坷萌斯夂蛳鋵?duì)收集的廣西野生稻資源進(jìn)行苗期耐冷性鑒定，在桂北高寒山區(qū)自然低溫條件下進(jìn)行宿根期耐冷性評(píng)價(jià)；選擇耐冷性較強(qiáng)的材料通過連續(xù)套袋自交或花藥培養(yǎng)進(jìn)行耐冷性遺傳純合研究。【結(jié)果】篩選出苗期1級(jí)耐冷材料廣西普通野生稻20份，廣西藥用野生稻1份，普通野生稻花培株系92份；宿根期3級(jí)耐冷材料廣西普通野生稻43份，藥用野生稻2份，普通野生稻花培株系5份；耐冷性較強(qiáng)的直立或半直立型種質(zhì)8份；廣西普通野生稻苗期和宿根期耐冷性呈極顯著正相關(guān)(r=0.26)，廣西藥用野生稻苗期和宿根期耐冷性相關(guān)性不顯著(r=-0.11)；廣西普通野生稻在苗期耐冷性與宿根期耐冷性上，平均耐冷等級(jí)均表現(xiàn)為匍匐型耐冷性最強(qiáng)，傾斜型次之，半直立型與直立型間無差異且最弱；來自桂北的野生稻苗期耐冷性最強(qiáng)；來自桂南的野生稻宿根期耐冷性表現(xiàn)最強(qiáng)?！窘Y(jié)論】鑒定篩選出的材料可用于耐冷育種及抗逆機(jī)理研究。篩選出的材料可用于水稻耐冷性研究和育種，同時(shí)可以通過套袋自交與花藥培養(yǎng)加快獲得耐冷性更強(qiáng)的純合株系。

普通野生稻；藥用野生稻；耐冷性；遺傳純合；

【研究意義】低溫是影響水稻生產(chǎn)發(fā)育、產(chǎn)量和限制種植面積的重要因素，對(duì)水稻生產(chǎn)威脅極大，我國(guó)每年因低溫冷害損失稻谷30～50億kg[1]。在高緯度高海拔地區(qū)冷害優(yōu)為嚴(yán)重，而在低緯度低海拔的南方稻區(qū)，早造的倒春寒與晚造的寒露風(fēng)均嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量，甚至失收[2-3]。減少低溫對(duì)水稻生產(chǎn)的不利影響，選育及推廣耐冷性強(qiáng)的品種是防御冷害經(jīng)濟(jì)有效的途徑之一。廣西野生稻資源極為豐富，野生稻作為天然的基因庫，蘊(yùn)藏著無數(shù)栽培稻沒有或已削弱的特異優(yōu)良基因[4]，因此挖掘野生稻的耐冷性材料對(duì)水稻耐寒育種利用創(chuàng)新具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】耐冷性種質(zhì)資源的鑒定、篩選與利用是抗寒育種的材料基礎(chǔ)[5]，許多研究學(xué)者在水稻耐冷鑒定篩選中做了大量工作，獲得了一批耐冷性強(qiáng)的優(yōu)異種質(zhì)。張建華等[6]在控溫條件下從690份中日雙方提供的稻種資源中，分別篩選出芽期和苗期極耐冷材料25和14份。戴陸園[7]從2763份云南稻種資源中篩選出芽期耐冷性(1～3級(jí))資源79份，從475份稻種資源中發(fā)掘出苗期耐冷性資源5份。韓龍植等[8]從879份水稻種質(zhì)資源中篩選出芽期耐冷性極強(qiáng)的種質(zhì)資源39份。夏秀忠等[9]對(duì)419份廣西水稻地方初級(jí)核心種質(zhì)進(jìn)行芽期、苗期的耐冷鑒定，篩選出極強(qiáng)耐冷種質(zhì)分別為24和27份?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前對(duì)野生稻部分材料耐冷性評(píng)價(jià)已有相關(guān)研究[10-11]，但對(duì)廣西野生稻苗期與宿根期耐冷的相關(guān)性及野生稻耐冷性的遺傳純合的研究較少?！緮M解決的關(guān)鍵問題】對(duì)廣西野生稻及其花培株系進(jìn)行苗期與宿根期耐冷性鑒定，了解不同野生稻種質(zhì)的苗期與宿根期耐冷性差異，探討純合野生稻的方法，篩選極強(qiáng)耐冷的優(yōu)異野生稻種質(zhì)資源，為基礎(chǔ)研究及育種利用提供良好的供試材料。

1 材料與方法

1.1 植物材料

本試驗(yàn)材料是在廣西46個(gè)縣148個(gè)野生稻分布點(diǎn)收集，試驗(yàn)中廣西普通野生稻共鑒定1657份，其中苗期鑒定983份，宿根越冬期鑒定1487份；廣西藥用野生稻共鑒定199份，其中苗期鑒定98份，宿根越冬期鑒定199份；普通野生稻花培材料共鑒定128份，其中苗期鑒定92份，宿根期鑒定128份；對(duì)照分別為耐冷粳稻品種滕坂5號(hào)和對(duì)冷敏感秈稻品種IR 8。

1.2 耐冷鑒定

1.2.1 苗期耐冷鑒定及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 參照韓龍植和張三元的方法[12]，將浸種催芽的種子播于托盤，待3葉期或3葉1心期時(shí)去除小弱苗，置于人工氣候箱冷處理，處理?xiàng)l件為溫度6 ℃，相對(duì)濕度80 %，光照5000 lx，光/暗各12 h循環(huán)，連續(xù)處理6 d后，置于室內(nèi)有散光處自然恢復(fù)7 d后調(diào)查死苗率，死苗率( %)=死苗株數(shù)/總株數(shù)×100，重復(fù)3次。

耐冷評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：1級(jí)死苗小于10 %(極強(qiáng))；3級(jí)死苗在11 %～30 %(強(qiáng))；5級(jí)死苗在31 %～50 %(中等)；7級(jí)死苗在51 %以上(弱)；9級(jí)全部死亡(極弱)。

1.2.2 宿根越冬耐寒鑒定及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 宿根越冬采用高寒山區(qū)自然低溫鑒定，試驗(yàn)點(diǎn)設(shè)在廣西桂林市龍勝縣和全州縣，在2000-2006年，于每年7月份移栽種植，越冬前調(diào)查野生稻分蘗及生長(zhǎng)情況，次年3月份開始調(diào)查越冬后野生稻存活及生長(zhǎng)狀況，按耐冷鑒定分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估和統(tǒng)計(jì)。

宿根越冬分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：整個(gè)越冬期共調(diào)查3次。第1次在初霜前調(diào)查越冬前成活材料數(shù)，分3級(jí)記載其生長(zhǎng)情況，第2次在次年3月上旬，按越冬期耐冷鑒定的5級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，第3次在4月下旬，仍按5級(jí)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查。耐冷分級(jí)采用目測(cè)法，其標(biāo)準(zhǔn)為1級(jí)：老莖基部及再生苗能越冬，再生苗多，長(zhǎng)勢(shì)好，死苗在20 %以內(nèi)；3級(jí)：大部分(>70 %)老莖基部及再生苗能越冬，再生苗數(shù)量及長(zhǎng)勢(shì)中等；5級(jí)：大約半數(shù)(50 %～70 %)老莖基部能越冬，再生苗較少，長(zhǎng)勢(shì)較弱；7級(jí)：少數(shù)(50 %以下)老莖基部能越冬，再生苗少，長(zhǎng)勢(shì)弱；9級(jí)：老莖基部及再生苗全部枯死。

1.3 野生稻遺傳純合

野生稻多為雜合體，為了便于利用研究，對(duì)其進(jìn)行遺傳純合。選取初篩后耐冷性較好的材料，進(jìn)行套袋自交，收種后繼續(xù)進(jìn)行耐冷性鑒定，再選取耐冷性較強(qiáng)的單株套袋自交收種，如此自交選擇3～5代，以期獲得耐冷性純合的株系。

花藥培養(yǎng) 參照馮銳等[18]的方法，在野生稻花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂的單核靠邊期剪取稻穗，于6～8 ℃條件下預(yù)處理6～8 d，小穗在0.1 %升汞溶液中消毒6 min，取花藥接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)，待獲得的2 mm大小愈傷組織時(shí)，接種于分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng)，愈傷組織分化出的綠苗經(jīng)煉苗、移栽和套袋收種。

誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方：N6大量和微量元素+MS有機(jī)物+甘氨酸4 mg/L+丙氨酸2 mg/L+水解乳蛋白(LH)400 mg/L+2,4-D 2 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L+蔗糖5 %。

綠苗分化培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基+水解酪蛋白(CH)500 mg/L +IAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+ Kinetin 1.5 mg/L+蔗糖5 %。

圖1 廣西普通野生稻材料苗期、宿根期耐冷級(jí)別分布 Fig.1 Distribution of cold tolerance of the Oryza rufipogon in Guangxi at germinating and seeding stage

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel、DPS 7.05等軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 廣西普通野生稻耐冷性鑒定結(jié)果

廣西普通野生稻苗期耐冷性鑒定984份，平均耐冷等級(jí)5.97級(jí)，變異系數(shù)30.52 %。多數(shù)種質(zhì)材料集中在5和7級(jí)，這2個(gè)等級(jí)材料占總參試材料的75.10 %，而1、3、9級(jí)分別占參試材料的2.03 %、15.14 %、7.72 %(圖1)。宿根期耐冷性鑒定1488份，平均耐冷等級(jí)6.62級(jí)，變異系數(shù)21.91 %。其耐冷性分布與苗期耐冷分布相似，以耐冷5級(jí)與7級(jí)材料較多，但未發(fā)現(xiàn)1級(jí)耐冷材料，3、5、7、9級(jí)材料分別占參試材料的2.89 %、29.03 %、52.49 %、15.59 %(圖1)。

對(duì)943份廣西普通野生稻苗期和宿根期耐冷級(jí)別相關(guān)性分析表明，兩者呈極顯著正相關(guān)(r=0.26)。從中篩選到耐冷性較強(qiáng)的直立或半直立型種質(zhì)8份(表1)，其中直立型材料1008苗期耐冷級(jí)別為3級(jí)，半直立型材料1507苗期耐冷級(jí)別達(dá)1級(jí)，半直立型材料753苗期與宿根期耐冷均為3級(jí)。

2.2 廣西藥用野生稻耐冷性鑒定結(jié)果

廣西藥用野生稻苗期耐冷性鑒定98份，平均耐冷級(jí)別4.78級(jí)，變異系數(shù)30 %，其中5級(jí)材料占多數(shù)，未發(fā)現(xiàn)9級(jí)材料，1、3、5、7級(jí)材料分別占參試材料的1.02 %、28.57 %、51.02 %、19.39 %。宿根期耐冷性共鑒定198份，平均耐冷級(jí)別6.15級(jí)，變異系數(shù)16.76 %，以5和7級(jí)材料占多數(shù)，分別占參試材料的40.40 %和58.49 %，3級(jí)材料僅2份，占參試材料的3.90 %，未發(fā)現(xiàn)1和9級(jí)材料(圖2)。對(duì)97份廣西藥用野生稻苗期和宿根期耐冷級(jí)別相關(guān)性分析表明，兩者相關(guān)性不顯著(r=-0.11)。

圖2 廣西藥用野生稻材料苗期、宿根期耐冷級(jí)別分布 Fig.2 Distribution of cold tolerance of the Oryza officinalis in Guangxi at germinating and seeding stage

2.3 廣西普通野生稻株型之間苗期、宿根期耐冷性的差異分析

廣西普通野生稻按生長(zhǎng)習(xí)性(株型)分為匍匐、傾斜、半直立和直立4個(gè)類型，對(duì)類型間進(jìn)行耐冷差異的比較分析。由表2可知，在苗期耐冷性與宿根期耐冷性上，匍匐型材料在平均耐冷級(jí)別、變異系數(shù)、表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源比例均最高，苗期的平均耐冷等級(jí)為5.65級(jí)，變異系數(shù)為33.98 %，表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源占該類型比例為23.83 %；宿根期的平均耐冷等級(jí)為6.28級(jí)，變異系數(shù)為21.02 %，表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源占該類型比例為3.98 %。在苗期耐冷性與宿根期耐冷性上，平均耐冷等級(jí)均表現(xiàn)為匍匐型耐冷性最強(qiáng)，傾斜型次之，半直立型與直立型間無差異且最弱。

表1 耐冷性較強(qiáng)的直立或半直立型種質(zhì)

表2 廣西普通野生稻株型之間苗期、宿根期耐冷性差異比較

2.4 廣西野生稻采集地區(qū)之間苗期、宿根期耐冷性的差異分析

把廣西野生稻的采集地按稻作區(qū)分為桂南、桂中、桂北3個(gè)區(qū)域，由表3可知，廣西普通野生稻在苗期耐冷性上，來源于桂北的材料在平均耐冷級(jí)別、變異系數(shù)、表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源比例均最高，其中平均耐冷等級(jí)為5.17級(jí)，變異系數(shù)為37.99 %，表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源占該區(qū)域比例為30.99 %。來源于桂中的材料在耐冷性表現(xiàn)最弱，平均耐冷等級(jí)為6.40級(jí)。廣西普通野生稻在宿根期耐冷性上，來源于桂南的材料在平均耐冷級(jí)別、變異系數(shù)、表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源比例均最高，其中平均耐冷等級(jí)為6.54級(jí)，變異系數(shù)為22.32 %，表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源占該區(qū)域比例為3.35 %。同樣是來源于桂中的材料在耐冷性表現(xiàn)最弱，平均耐冷等級(jí)為6.76級(jí)。藥用野生稻在宿根期耐冷性上，來源于桂南的材料耐冷性表現(xiàn)較強(qiáng)，其中平均耐冷等級(jí)為6.01級(jí)，變異系數(shù)為17.53 %，表現(xiàn)為3級(jí)以上耐冷資源占該區(qū)域比例為1.30 %。來源于桂中的材料在耐冷性表現(xiàn)較弱，平均耐冷等級(jí)為6.64級(jí)。

2.5 普通野生稻花藥純合株系耐冷性鑒定結(jié)果

普通野生稻多為雜合體，同一編號(hào)單株間其農(nóng)藝性狀和抗性存在一定的分離，導(dǎo)致難以育種利用，為得到耐冷性純合植株，在耐冷鑒定基礎(chǔ)上對(duì)一些耐冷性較好的材料進(jìn)行花藥培養(yǎng)，對(duì)花培植株H2株系進(jìn)行耐冷鑒定。從表4可知，來源于2個(gè)材料的花培后代株系耐冷性與形態(tài)特性均已穩(wěn)定，同一材料后代的花培株系間耐冷性出現(xiàn)分離，但未發(fā)現(xiàn)比原耐冷性更強(qiáng)的株系。

對(duì)所有的花培株系進(jìn)行耐冷性鑒定統(tǒng)計(jì)，從表5可知，苗期耐冷鑒定92份，平均耐冷級(jí)別3.52級(jí)，變異系數(shù)40.26 %，其中以3級(jí)材料占多數(shù)，為參試材料的59.78 %，1、5、7級(jí)材料分別占參試材料的9.78 %、25 %、5.43 %，未發(fā)現(xiàn)9級(jí)材料。宿根期耐冷鑒定128份，平均耐冷級(jí)別5.02級(jí)，變異系數(shù)11.73 %,以5級(jí)材料最多，其中3、5、7級(jí)材料分別占參試材料的3.91 %、91.41 %、4.69 %，未發(fā)現(xiàn)1級(jí)和9級(jí)材料。對(duì)92份普通野生稻花培株系苗期耐冷與宿根期耐冷分析表明，兩者呈極顯著正相關(guān)(r=0.41)。

表3 廣西野生稻不同采集區(qū)域耐冷性差異比較

表4 普通野生稻花培植株耐冷性表現(xiàn)

表5 普通野生稻花培株系耐冷鑒定結(jié)果

2.6 普通野生稻自交純合苗期耐冷性分析

從984份苗期耐冷鑒定的普通野生稻中選出6份有代表性材料進(jìn)行自交遺傳純合，結(jié)果見表6，原平均苗期耐冷1級(jí)的材料315、1502，其自交1～2代都有1～3級(jí)耐冷分離，經(jīng)4代套袋自交及選擇后苗期耐冷性趨于1級(jí)穩(wěn)定。原平均苗期耐冷3級(jí)的材料1008、1085，其自交1～2代都有1～5級(jí)耐冷分離，經(jīng)4代套袋自交及選擇后苗期耐冷性基本在1～3級(jí)分離。原平均苗期耐冷5級(jí)的材料644、1372，其自交1～2代都有3～7級(jí)耐冷分離，經(jīng)4代套袋自交及選擇后，材料1372苗期耐冷性趨于穩(wěn)定，為3級(jí)；材料644苗期耐冷性基本為3～5級(jí)分離。

3 討 論

3.1 野生稻苗期和宿根期耐冷性與地理環(huán)境關(guān)系

曾亞文研究團(tuán)隊(duì)[13-14]分析了云南地方稻核心種質(zhì)孕穗期耐冷性、苗期耐冷性及地理生態(tài)差異；張建華等[5]分析了690份中日稻種資源芽期和苗期耐冷性及云南稻種地理分布區(qū)域；夏秀忠等[15]對(duì)廣西水稻核心種質(zhì)進(jìn)行稻作區(qū)之間芽期、苗期耐冷性差異分析。前人結(jié)果[5-8,16-17]表明水稻耐冷性與其來源地海拔和緯度有一定的相關(guān)性。本研究結(jié)果也表明，來源于廣西南部的普通野生稻與藥用野生稻資源，宿根期耐冷性均顯著高于其它區(qū)域的資源，而來源于是廣西北部的普通野生稻苗期耐冷性極顯著高于其它區(qū)域的資源，說明廣西野生稻苗期與宿根期耐冷性與地理環(huán)境有關(guān)。多位學(xué)者研究認(rèn)為，栽培稻種高緯度地區(qū)水稻耐冷性優(yōu)于低緯度地區(qū)[5,7,16-17]。本研究結(jié)果表明，宿根期耐冷性表現(xiàn)為普通野生稻桂南>桂北>桂中，藥用野生稻桂南>桂中，普通野生稻苗期耐冷性表現(xiàn)為桂北>桂南>桂中，這與栽培稻種資源的耐冷性規(guī)律有所不同。

表6 普通野生稻自交后代苗期耐冷性表現(xiàn)

3.2 普通野生稻遺傳純合與耐冷性

普通野生稻具有異花授粉特性，從原生地收集的材料資源絕大數(shù)是以雜合體形式保存下來，這些材料多數(shù)耐冷性水平較低，不能代表其真正的耐冷水平，若直接利用，很難獲得具有更強(qiáng)耐冷性的后代，另外對(duì)于一些優(yōu)異的隱性性狀也很難發(fā)現(xiàn)。因此，對(duì)普通野生稻材料先進(jìn)行遺傳純合后，再對(duì)其開發(fā)利用具有重要意義。本研究結(jié)果表明，經(jīng)過4代的套袋自交及目標(biāo)選擇后，可能獲得耐冷性更強(qiáng)，遺傳趨于穩(wěn)定的野生稻材料；利用花藥培養(yǎng)技術(shù)，可更快的獲得遺傳純合的野生稻材料；這更有利于客觀評(píng)價(jià)野生稻資源，并加快優(yōu)異資源在基礎(chǔ)研究和育種上的利用。而利用同樣的方法，在普通野生稻抗褐飛虱方面進(jìn)行了研究，并獲得了一批純合種質(zhì)資源[18]。另外，若先對(duì)野生稻進(jìn)行2～3代套袋自交及目標(biāo)選擇，再對(duì)優(yōu)良單株進(jìn)行花藥培養(yǎng)，則可能更快獲得耐冷性強(qiáng)的純合材料。

4 結(jié) 論

本研究鑒定篩選出廣西野生稻苗期1級(jí)耐冷材料共113份，宿根期3級(jí)耐冷材料共50份；耐冷性較強(qiáng)的近栽材料8份，這些材料可用于耐冷育種及抗逆機(jī)理研究。普通野生稻自身的雜合性，可通過多代套袋自交結(jié)合耐冷性選擇，獲得耐冷性更強(qiáng)性狀穩(wěn)定的株系材料；通過花藥培養(yǎng)技術(shù)，可快速獲得純合普通野生稻材料。

[1]劉建豐，陳立云.水稻耐冷性研究現(xiàn)狀與展望[J].作物研究,1996,10(2):41-43.

[2]詹慶才，曾曙珍，熊伏星，等. 水稻苗期耐冷性QTLs的分子定位[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2003,29(1):7-11.

[3]王慶國(guó)，黃增俊，黃歸蘭，等.南寧市近40年寒露風(fēng)演變趨勢(shì)及對(duì)晚稻的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2013,44(3):431-436.

[4]鐘代彬，羅利軍，應(yīng)存山.野生稻有利基因轉(zhuǎn)移研究進(jìn)展[J].中國(guó)水稻科學(xué),2000,14(2):103-106.

[5]游俊梅，阮仁超，陳惠查，等.稻種資源耐冷性鑒定與評(píng)價(jià)指標(biāo)分析[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2000,28(3):34-36.

[6]張建華，廖新華，戴陸園，等.稻種資源芽期和苗期的耐冷性評(píng)價(jià)[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),1996,12(5):10-13.

[7]戴陸園.云南稻種資源耐冷性研究[D].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文,2002:22-23.

[8]韓龍植，曹桂蘭，安永平，等.水稻種質(zhì)資源芽期耐冷性的鑒定與評(píng)價(jià)[J].植物遺傳資源學(xué)報(bào),2004,5(4):346-350.

[9]夏秀忠，張宗瓊，楊行海，等.廣西水稻地方品種耐冷性鑒定及相關(guān)分析[J]. 植物遺傳資源學(xué)報(bào),2016,17(6):969-975.

[10]林登豪. 廣西野生稻資源耐冷性鑒定[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),1992,(2):53-56.

[11]陳成斌，李道遠(yuǎn)，黃 勇，等.普通野生稻資源耐冷性研究[J]. 廣西農(nóng)學(xué)報(bào),1994(4):1-5.

[12]韓龍植，張三元. 水稻耐冷性鑒定評(píng)價(jià)方法[J]. 植物遺傳資源學(xué)報(bào),2004,5(1):75-80.

[13]李紳崇，曾亞文，申時(shí)全，等.云南地方稻核心種質(zhì)孕穗期耐冷性及其地理分布[J].中國(guó)水稻科學(xué),2004,18(5):27-32.

[14]曾亞文，李紳崇，普曉英，等.云南稻核心種質(zhì)苗期耐冷性及其地理生態(tài)差異[J].生態(tài)環(huán)境,2006,15(2):345-349.

[15]夏秀忠，曾 宇，農(nóng)保選，等.廣西地方稻種資源核心種質(zhì)的耐冷性鑒定評(píng)價(jià)[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2014,27(5):1801-1805.

[16]阮仁超，陳惠查，游俊梅，等.貴州稻種遺傳資源耐冷性鑒定與利用評(píng)價(jià)[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,32(1):10-13.

[17]曾亞文，李紳崇，普曉英，等.云南稻核心種質(zhì)孕穗期耐冷性狀間的相關(guān)性與生態(tài)差異[J]. 中國(guó)水稻科學(xué),2006,20(3):265-271.

[18]馮 銳，郭 輝，劉百龍，等.普通野生稻褐飛虱抗性遺傳純合研究[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,43(2):146-150.

(責(zé)任編輯 王冠玉)

Study on Cold Tolerance Identification and Genetic Homozygosity of Wild Rice in Guangxi

GUO Hui, CHEN Can, ZHANG Xiao-li, QIN Xue-yi, FENG Rui*

(Rice Research Institute/Guangxi Key Laboratory of Rice Genetics and Breeding, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Guangxi Nanning 530007，China)

【Objective】Screening wild rice germplasm resources with strong cold tolerance, and studying their genetic stability would provide resistant sources for rice cold tolerance breeding and research.【Method】Identification of cold tolerance germplasm at seedling stage was carried out to wild rice resources collected from Guangxi in the artificial climate box, and cold tolerance at perennial root stage was evaluated under the circumstances of natural cold at highland cold area lying in the north of Guangxi. We will study genetic purity of cold tolerance germplasms through continuously bagging selfing and anther culture. 【Result】20 common wild rice,1 medicinal wild rice and 92 common wild rice by flower breeding were found, their cold tolerance reach 1 class at seedling stage;some germplasm resources showed cold tolerance to 3 class at perennial root stage, which included 43 common wild rice,2 medicinal wild rice 5 common wild rice by flower breeding; 8 erect type and slighting type germplasm resources showed stronger cold tolerance were found. The study announced at seedling stage and perennial period,the average cold tolerance levels of Guangxi common showed creeping type wild rice had the strongest cold tolerant, next was tilt type rice, and the weakest was Semi-erect type and erect type which had no difference between them. 【Conclusion】These resources of identified and screened would be used for cold resistant breeding and resistant mechanism research. These materials would be used to carry out in breeding utilization and cold tolerance to research. Moreover,this research found that through bagging selfing and anther culture can obtain stronger cold tolerance homozygous lines accelerately.

Oryzarufipogon; Oryzaofficinalis; Cold tolerance; Genetic homozygosis

1001-4829(2017)6-1245-06

10.16213/j.cnki.scjas.2017.6.001

2017-03-21

國(guó)家自然科學(xué)基金“藥用野生稻對(duì)褐飛虱免疫抗性的功能研究與抗性利用”(31560385)；廣西自然科學(xué)基金項(xiàng)目“普通野生稻抗褐飛虱新基因精細(xì)定位及比較轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析”(2015GXNSFAA139060)；廣西科技計(jì)劃項(xiàng)目“野生稻抗褐飛虱基因的挖掘和利用”(桂科AB16380138)；廣西科技計(jì)劃項(xiàng)目“越、老、柬秈型特種水稻種質(zhì)資源引進(jìn)與應(yīng)用”(桂科合15104001-27)；廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技發(fā)展基金項(xiàng)目“廣西野生稻優(yōu)異資源的繁殖更新及高抗體材料的遺傳純合”(桂農(nóng)科2017JM70)

郭 輝(1982-)，男，山西臨汾人，碩士，助理研究員，主要從事水稻抗逆資源評(píng)價(jià)與遺傳育種研究工作，E-mail：gh8207@163.com，*為通訊作者，E-mail：fengrui@gxaas.net。

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