劉紅平，朱永恒,2，劉海泉,2，馬歐妹，趙 勇,2,*

基于SnO2納米花氣體傳感器快速檢測(cè)牛奶中的單增李斯特菌

劉紅平1，朱永恒1,2，劉海泉1,2，馬歐妹1，趙 勇1,2,*

（1.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海 201306；2.上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（上海），上海 201306）

以單增李斯特菌特征性代謝物3-羥基-2-丁酮為檢測(cè)靶點(diǎn)，水熱法合成與之匹配的敏感材料，制備出單增李斯特菌特異檢測(cè)半導(dǎo)體氣體傳感器。采用X射線衍射和透射電子顯微鏡手段對(duì)材料的結(jié)構(gòu)和形貌進(jìn)行表征。并分析傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮標(biāo)準(zhǔn)氣體的氣敏性能及其在牛奶中單增李斯特菌的檢測(cè)效果。結(jié)果表明，本研究合成的SnO2材料為納米花結(jié)構(gòu)。制備出的單增李斯特菌特異檢測(cè)半導(dǎo)體氣體傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮靈敏度高、響應(yīng)恢復(fù)時(shí)間短、選擇性和穩(wěn)定性好。用于檢測(cè)單增李斯特菌時(shí)，傳感器的靈敏度與細(xì)菌濃度呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，線性方程為lg（S-1）=0.198 3lgC-0.472 5（R2=0.990 1）。本方法快速靈敏、操作簡(jiǎn)便，可用于食品中單增李斯特菌的快速檢測(cè)。

單增李斯特菌；3-羥基-2-丁酮；水熱法；氣敏性能；納米花；靈敏度

單增李斯特菌（Listeria monocytogenes）是全世界普遍公認(rèn)的一種重要的人畜共患食源性致病菌[1-2]，人感染后可引起嘔吐、腦膜炎、敗血癥和自然流產(chǎn)等癥狀，免疫力較弱者如孕婦、新生兒和老人尤易被感染[3-5]。該菌廣泛存在于各種肉類(lèi)、蔬菜、乳制品等食品中[6-8]，在4 ℃環(huán)境中仍可生長(zhǎng)繁殖，是冷藏食品威脅人類(lèi)健康的主要致病菌之一[9]，日益引起食品安全工作者的重視。目前國(guó)際上對(duì)單增李斯特菌的檢測(cè)還沒(méi)有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，其檢測(cè)方法主要包括傳統(tǒng)的培養(yǎng)和生理生化方法、分子生物學(xué)方法以及免疫學(xué)等方法。這些方法可靠準(zhǔn)確，但操作繁雜、檢測(cè)周期長(zhǎng)，且對(duì)專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員和儀器設(shè)備依賴程度高，不適宜快速診斷[10-16]。因此對(duì)單增李斯特菌進(jìn)行實(shí)時(shí)、靈敏而無(wú)損檢測(cè)迫切需要操作簡(jiǎn)單、便攜、低成本的快速檢測(cè)技術(shù)。

自金屬氧化物半導(dǎo)體氣體傳感器問(wèn)世以來(lái)，因其具有制備簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉、體積小和使用壽命長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，在工業(yè)生產(chǎn)、環(huán)境監(jiān)測(cè)以及人類(lèi)生活等領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用，在檢測(cè)易燃易爆、有毒有害氣體等方面顯示了獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)[17-19]。其中，SnO2是一種寬禁帶（3.6 eV）n型半導(dǎo)體金屬氧化物，由于其優(yōu)越的光學(xué)、電學(xué)以及催化等性能，成為當(dāng)今研究最深入、應(yīng)用最廣泛的氣敏材料[20-22]。而將其制備成氣體傳感器運(yùn)用于微生物揮發(fā)性代謝物的特異性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究卻少見(jiàn)報(bào)道。

微生物揮發(fā)性代謝產(chǎn)物是微生物在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中利用周?chē)h(huán)境中的糖類(lèi)、蛋白質(zhì)和脂肪等營(yíng)養(yǎng)成分產(chǎn)生的一類(lèi)代謝產(chǎn)物。它與微生物生命活動(dòng)密切相關(guān)，是人類(lèi)了解微生物生命活動(dòng)本質(zhì)規(guī)律的重要窗口，已被廣泛應(yīng)用于臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測(cè)和微生物鑒定[23-25]。如李絢梅等[26]研究了肺部感染幾種常見(jiàn)致病菌，發(fā)現(xiàn)吲哚、十一烷醇、丁基羥基甲苯分別為大腸桿菌、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌的特征性揮發(fā)物，可用于肺部感染疾病的診斷。本實(shí)驗(yàn)室前期研究中發(fā)現(xiàn)，3-羥基-2-丁酮是單增李斯特菌產(chǎn)生的特征性揮發(fā)物，其含量隨細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間而變化，當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間為18 h時(shí)，相對(duì)含量高達(dá)48.93%[27-28]。因此，本實(shí)驗(yàn)以單增李斯特菌特征性代謝物3-羥基-2-丁酮為檢測(cè)靶點(diǎn)，利用比表面積大的SnO2納米花敏感材料對(duì)氣體快速響應(yīng)的氣敏性能，探索出一種基于SnO2氣體傳感器快速檢測(cè)單增李斯特菌的方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

牛奶 光明集團(tuán)；鹽酸、無(wú)水乙醇、氫氧化鈉、五水四氯化錫（SnCl4·5H2O） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；胰蛋白胨大豆肉湯（tryptic soy broth，TSB）、胰蛋白胨大豆瓊脂（tryptic soy agar，TSA） 北京陸橋技術(shù)股份有限公司；L. monocytogenes WaX12由本實(shí)驗(yàn)室從豬肉中分離得到；實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

DHG-9055A鼓風(fēng)干燥箱、GHP-9270隔水式恒溫培養(yǎng)箱、SX2箱式電阻爐 上海一恒科技儀器有限公司；Bioscreen C全自動(dòng)微生物生長(zhǎng)曲線分析儀 芬蘭Oy Growth Curves Ab公司；MYP11-2A恒溫磁力攪拌器上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司；SMS-60R半導(dǎo)體氣敏傳感器陣列測(cè)量平臺(tái) 河南圣瑪斯科技有限公司；實(shí)驗(yàn)用水為去離子水；實(shí)驗(yàn)所用玻璃器皿、去離子水及吸頭均經(jīng)高壓滅菌處理。

1.3 方法

1.3.1 材料的合成及表征

將0.5 mol SnCl4·5H2O溶于45 mL去離子水中，磁力攪拌均勻，用NaOH溶液調(diào)節(jié)體系pH值至10左右，緩慢加入25 mL無(wú)水乙醇，再攪拌30 min使其充分混合，得到均勻的反應(yīng)溶液。將混合均勻的反應(yīng)溶液引入100 mL的高壓釜中，螺釘旋緊密封，置于180 ℃烘箱中反應(yīng)24 h。關(guān)掉烘箱使高壓反應(yīng)釜自然冷卻至室溫，獲得一定量的沉淀產(chǎn)物。將沉淀產(chǎn)物用去離子水和無(wú)水乙醇交替洗滌多次，置于70 ℃烘箱中隔夜干燥，得到SnO2納米花前驅(qū)體。將前驅(qū)物置于馬弗爐中550 ℃煅燒2 h，所獲樣品即為SnO2納米花。采用X射線衍射和透射電子顯微鏡對(duì)所得樣品進(jìn)行表征，分析樣品的形貌、粒子大小以及分散狀況。

1.3.2 傳感器的制作

圖1 氣敏元件的結(jié)構(gòu)Fig. 1 Schematic illustration of the gas-sensor structure

在瑪瑙研缽中加入少許樣品，研磨均勻后滴入少量去離子水，調(diào)成糊狀后用毛筆均勻涂于帶Pt引線的陶瓷管外面，將涂好氣敏材料的陶瓷管立于瓷方舟內(nèi)放在紅外燈下烘干（約10 min）后，置于500 ℃馬弗爐中煅燒2 h，以除去材料中所用的黏合劑，自然冷卻后備用。將涂有氣敏材料的陶瓷管的4 個(gè)電極絲焊接在底座上，然后將加熱絲從陶瓷管中穿過(guò)并將其兩端也焊接在底座上，制成氣敏元件，結(jié)構(gòu)如圖1所示。為了改善器件的性能，增加元件的穩(wěn)定性，將焊好的元件置于專(zhuān)用的老化臺(tái)上，通5 V直流電壓，老化1周[29]。

1.3.3 3-羥基-2-丁酮標(biāo)準(zhǔn)氣體的氣敏性能測(cè)試

采用靜態(tài)配氣法，在SMS-60R氣敏元件測(cè)試系統(tǒng)上進(jìn)行傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮?dú)饷粜阅軠y(cè)試，測(cè)試內(nèi)容包括最佳工作電壓的判斷、響應(yīng)恢復(fù)情況、選擇性和長(zhǎng)期穩(wěn)定性分析?；緶y(cè)試電路如圖2所示。Vh為加熱電壓，Vc為測(cè)試回路電壓，Vout為負(fù)載電阻RL上的電壓。加熱電壓Vh，0～6 V連續(xù)可調(diào)；回路電壓Vc，2～10 V連續(xù)可調(diào)；負(fù)載電阻RL，可換插卡式。通過(guò)測(cè)試與氣敏元件串聯(lián)的負(fù)載電阻RL上的電壓Vout來(lái)反映傳感器的特性。在本實(shí)驗(yàn)中，定義元件的靈敏度S=Ra/Rg，Ra和Rg分別為元件在空氣中和被測(cè)氣體中的電阻值。定義響應(yīng)時(shí)間tres為元件接觸被測(cè)氣體后，負(fù)載電阻RL上的電壓U0變化到U0+90%（UX-U0）所需的時(shí)間，恢復(fù)時(shí)間trev為元件脫離被測(cè)氣體后，負(fù)載電阻RL的電壓由UX恢復(fù)到U0+ 10%（UX-U0）所用的時(shí)間[30]。測(cè)試氣體包括3-羥基-2-丁酮和幾種常見(jiàn)的干擾氣體如氨氣、二甲苯、甲醛、乙醇、異丙醇、丙酮、一氧化碳、二氧化硫、氫氣、乙烯等。

1.3.4 TSB培養(yǎng)基中單增李斯特菌的檢測(cè)

挑取一環(huán)單增李斯特菌單菌落接種到裝有10 mL TSB培養(yǎng)基的試管中，于37 ℃、以180 r/min搖床過(guò)夜培養(yǎng)，使菌液濃度達(dá)到109CFU/mL左右，將菌液按梯度稀釋。然后從稀釋液中吸取100 μL一定濃度的菌液接種到裝有15 mL TSB培養(yǎng)基的頂空收集瓶中，使菌液濃度約為104CFU/mL，37 ℃、180 r/min搖床培養(yǎng)。每隔2 h取出一個(gè)頂空收集瓶，在37 ℃水浴、18 r/min磁力攪拌15 min進(jìn)行頂空氣體收集，再用注射器抽取瓶中頂空氣體，快速注入氣體測(cè)試箱中，進(jìn)行單增李斯特菌氣味檢測(cè)，每次實(shí)驗(yàn)做3 個(gè)平行。另外，將初始接種量約為104CFU/mL的菌液用全自動(dòng)微生物生長(zhǎng)曲線分析儀進(jìn)行單增李斯特菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定，將所得結(jié)果與傳感器檢測(cè)結(jié)果對(duì)比。同時(shí)為考察單增李斯特菌氣味檢測(cè)傳感器的特異性及培養(yǎng)基背景氣味對(duì)傳感器的影響，本實(shí)驗(yàn)還對(duì)大腸桿菌、副溶血性弧菌、沙門(mén)氏菌和TSB進(jìn)行了檢測(cè)。

1.3.5 牛奶樣品中單增李斯特菌的檢測(cè)

為評(píng)價(jià)本方法在實(shí)際樣品中的可行性，將濃度約為10、102、103、104、105、106CFU/mL的單增李斯特菌接種到市售無(wú)菌牛奶樣品中，37 ℃、180 r/min搖床培養(yǎng)，培養(yǎng)12 h后取出樣品，進(jìn)行氣味檢測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 材料的表征

圖3 a為溶劑熱條件下180 ℃水熱24 h后得到的樣品X射線衍射圖譜。經(jīng)過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)卡片比較分析可知，圖3a中標(biāo)出的所有衍射峰與標(biāo)準(zhǔn)圖譜（JCPDS 41-1445）相吻合，屬于四方金紅石結(jié)構(gòu)。無(wú)其他雜質(zhì)的衍射峰，說(shuō)明樣品是單一的SnO2相，結(jié)晶度和純度均很高。如圖3b1、b2所示，所得樣品為形貌規(guī)則、分布均勻的多級(jí)花狀結(jié)構(gòu)，它是由若干根納米棒組成，每根納米棒的直徑大約為200～300 nm，長(zhǎng)約1～1.5 μm。

2.2 3-羥基-2-丁酮標(biāo)準(zhǔn)氣體的氣敏性能測(cè)試結(jié)果

圖4 傳感器對(duì)50 mL/m33-羥基-2-丁酮的靈敏度與加熱電壓的關(guān)系（a）、靈敏度和3-羥基-2-丁酮含量關(guān)系（b）及含量對(duì)數(shù)的線性關(guān)系（c）Fig. 4 Heating voltage dependence of response to 50 mL/m33-hydroxy-2-butanone of the sensor (a), relationship between the response of sensor and concentrations of 3-hydroxy-2-butanone (b) and linear relationshipbetween the logarithm of response and concentrations (c)

由圖4a可知，傳感器的靈敏度與加熱電壓的關(guān)系呈火山形曲線，當(dāng)加熱電壓為5 V時(shí)傳感器的靈敏度最大。因此，5 V選為本實(shí)驗(yàn)的工作電壓。由圖4b可知，基于SnO2納米花制作的傳感器的靈敏度隨3-羥基-2-丁酮含量增加而增大，即傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮的響應(yīng)隨著氣體含量的增加而升高，幾乎呈線性關(guān)系，符合經(jīng)驗(yàn)公式：S=a[C]b+1（其中a、b為常數(shù)，S、C分別為靈敏度和氣體含量）[31-32]。如圖4c所示，靈敏度和氣體含量在對(duì)數(shù)坐標(biāo)軸上線性關(guān)系為：lg（S-1）=0.478 2lgC+0.844 3，線性系數(shù)R2為0.995 2。傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮響應(yīng)的重復(fù)性好，響應(yīng)-恢復(fù)時(shí)間短，其響應(yīng)和恢復(fù)時(shí)間分別在11、16 s以內(nèi)，檢測(cè)限達(dá)10-9級(jí)。

圖5 傳感器對(duì)不同氣體響應(yīng)（a）及長(zhǎng)期穩(wěn)定性（b）Fig. 5 Response of the sensor to different gases (a) and its long-term stability to 3-hydroxy-2-butanone (b)

傳感器對(duì)氨氣、二甲苯、甲醛、乙醇、異丙醇、丙酮、一氧化碳、二氧化硫、氫氣、乙烯等11 種氣體（含量皆為50 mL/m3）的測(cè)試結(jié)果如圖5a所示。傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮的靈敏度最高，可達(dá)46.26。而對(duì)其他氣體，丙酮最高靈敏度為16.09。由此可知，傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮具有很好的選擇性。長(zhǎng)期穩(wěn)定性是傳感器實(shí)際應(yīng)用中的一個(gè)重要指標(biāo)。將制備好的傳感器每隔7 d對(duì)50 mL/m3的3-羥基-2-丁酮?dú)怏w進(jìn)行測(cè)試，從圖5b可以看出，傳感器在35 d后的靈敏度變化很小，說(shuō)明該傳感器有著很好的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。

2.3 TSB培養(yǎng)基中單增李斯特菌的檢測(cè)結(jié)果

圖6 單增李斯特菌的生長(zhǎng)曲線（a）和靈敏度與細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間的關(guān)系（b）Fig. 6 Growth curve of Listeria monocytogenes (a) and relationship between the response of sensor and bacterial culture time (b)

由圖6a可知，隨著細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，傳感器的靈敏度由變化緩慢到變化顯著最后趨于穩(wěn)定。這與用全自動(dòng)微生物生長(zhǎng)曲線分析儀測(cè)得單增李斯特菌的生長(zhǎng)曲線的結(jié)果相一致。微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)經(jīng)歷延滯期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期和衰亡期4 個(gè)生命階段。當(dāng)細(xì)菌處于延滯期時(shí)，細(xì)菌生長(zhǎng)緩慢，產(chǎn)生的揮發(fā)性代謝物3-羥基-2-丁酮少，傳感器的靈敏度小。當(dāng)細(xì)菌處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)，細(xì)菌以對(duì)數(shù)形式生長(zhǎng)，產(chǎn)生的3-羥基-2-丁酮?dú)怏w急劇增加，傳感器靈敏度增大，這段時(shí)期靈敏度變化顯著。當(dāng)細(xì)菌進(jìn)入穩(wěn)定期后，細(xì)菌生長(zhǎng)速率不再增加，此時(shí)細(xì)菌產(chǎn)生的3-羥基-2-丁酮的量不再急劇增加，靈敏度變化緩慢，最后將趨于穩(wěn)定。從圖6b中還可以看到，傳感器對(duì)副溶血性弧菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和TSB培養(yǎng)基的檢測(cè)效果。由圖6b可知，傳感器檢測(cè)副溶血性弧菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和TSB培養(yǎng)基時(shí)，靈敏度隨細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間變化緩慢，對(duì)TSB培養(yǎng)基幾乎無(wú)變化。表明本實(shí)驗(yàn)所制備的傳感器具有良好的特異性，對(duì)單增李斯特菌具有很好的檢測(cè)效果。

2.4 牛奶樣品中單增李斯特菌的檢測(cè)結(jié)果

圖7 傳感器檢測(cè)不同濃度單增李斯特菌的靈敏度（a）和靈敏度與細(xì)菌濃度的線性關(guān)系曲線（b）Fig. 7 Response of the sensor to different concentrations of Listeria monocytogenes (a) and linear relationship curve between response and concentrations of L. monocytogenes (b)

將初始接種量約為0、10、102、103、104、105、106CFU/mL的單增李斯特菌接種到無(wú)菌牛奶中培養(yǎng)12h后，由圖7可知，菌液濃度越大，傳感器的靈敏度越大，細(xì)菌被傳感器檢出所需的增菌時(shí)間越短。靈敏度與菌液濃度呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，線性方程為lg（S-1）= 0.198 3lgC-0.472 5（R2=0.990 1）。初始接種量約為10 CFU/mL的單增李斯特菌在牛奶中培養(yǎng)12 h后也能被檢測(cè)出。說(shuō)明本研究所制備的單增李斯特菌特異檢測(cè)傳感器可以應(yīng)用于實(shí)際樣品中單增李斯特菌的檢測(cè)。

3 結(jié) 論

采用水熱法成功合成了形貌規(guī)則的SnO2納米花材料?；赟nO2納米花制備的單增李斯特菌特異檢測(cè)半導(dǎo)體氣體傳感器對(duì)3-羥基-2-丁酮靈敏度高、選擇性強(qiáng)和穩(wěn)定性好，響應(yīng)和恢復(fù)時(shí)間分別在11、16 s以內(nèi)。用于檢測(cè)單增李斯特菌時(shí)，傳感器的靈敏度與細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間之間的關(guān)系符合單增李斯特菌的生長(zhǎng)規(guī)律。并且靈敏度與菌液濃度呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，線性方程為lg（S-1）= 0.198 3lgC-0.472 5（R2=0.990 1），初始接種量約為10 CFU/mL的單增李斯特菌在牛奶中培養(yǎng)12 h后也能被檢測(cè)出。說(shuō)明通過(guò)該傳感器對(duì)單增李斯特菌產(chǎn)生的特征性氣味3-羥基-2-丁酮的檢測(cè)以達(dá)到快速檢測(cè)單增李斯特菌的目的是可行的。不同微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的特征揮發(fā)性代謝物不盡相同，可以根據(jù)特征性代謝物制備出與其匹配的敏感材料。因此，這種方法還可被借鑒到其他食源性致病菌的快速檢測(cè)。

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Rapid Detection of Listeria monocytogenes in Milk Base on SnO2Nanoflower Gas Sensor

LIU Hongping1, ZHU Yongheng1,2, LIU Haiquan1,2, MA Oumei1, ZHAO Yong1,2,*
(1. College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China; 2. Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment for Aquatic Product on Storage and Preservation (Shanghai), Ministry of Agriculture, Shanghai Aquatic and Storage Engineering Technology Research Center, Shanghai 201306, China)

The aim of this study was to develop a semiconductor gas sensor for the rapid and sensitive detection of L. monocytogenes by targeting 3-hydroxy-2-butanone, the characteristic metabolite of L. monocytogenes. The sensitive material that matches 3-hydroxy-2-butanone was synthesized by a hydrothermal method and used to fabricate the sensor. The structure and morphology of the material were characterized by X-ray diffraction (XRD) and transmission electron microscopy (TEM). The response of the as-prepared sensor to 3-hydroxy-2-butanone calibration gases and its performance for the detection of L. monocytogenes in milk were analyzed. The results indicated that the sensor exhibited high response, quick response-recovery kinetics, and good repeatability to 3-hydroxy-2-butanone. Furthermore, the response showed a good linear relationship with the concentration of L. monocytogenes, and the linear regression equation was lg(S-1)=0.198 3lgC -0.472 5 (R2= 0.990 1). This method could be completed within a short time without extensive sample preparation. Accordingly, it has a great potential as a rapid method for the detection of L. monocytogenes in food samples.

Listeria monocytogenes; 3-hydroxy-2-butanone; hydrothermal method; gas-sensing performance; nanoflower; response

10.7506/spkx1002-6630-201716036

TS201.3

A

1002-6630（2017）16-0228-06

劉紅平, 朱永恒, 劉海泉, 等. 基于SnO2納米花氣體傳感器快速檢測(cè)牛奶中的單增李斯特菌[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(16): 228-233. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201716036. http://www.spkx.net.cn

LIU Hongping, ZHU Yongheng, LIU Haiquan, et al. Rapid detection of Listeria monocytogenes in milk base on SnO2nanoflower gas sensor[J]. Food Science, 2017, 38(16): 228-233. (in Chinese with English abstract)

10.7506/spkx1002-6630-201716036. http://www.spkx.net.cn

2016-10-20

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（31571917；31671779）；上海市科技興農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目（滬農(nóng)科攻字2014第3-5號(hào)；滬農(nóng)科攻字2015第4-8號(hào)；滬農(nóng)科攻字2016第1-1號(hào)）作者簡(jiǎn)介：劉紅平（1989—），男，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称钒踩珯z測(cè)。E-mail：liuhp3358189@126.com

*通信作者：趙勇（1975—），男，教授，博士，研究方向?yàn)槭称钒踩c生物技術(shù)。E-mail：yzhao@shou.edu.cn