鄧婷　袁煒華

【摘要】 目的 探討乙型肝炎（乙肝）標(biāo)志物定量檢測(cè)指標(biāo)與乙肝病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）定量、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）的關(guān)系， 為臨床治療乙肝提供參考。方法 185例門診、住院及體檢者， 抽取靜脈血， 血液標(biāo)本采用PCR-熒光探針?lè)ㄟM(jìn)行HBV-DNA含量測(cè)定， 同時(shí)采用時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定法（TRFIA）及酶法進(jìn)行兩對(duì)半指標(biāo)及ALT檢測(cè)， 對(duì)比分析檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 185例乙肝患者的血液標(biāo)本中， 大三陽(yáng)45例；小三陽(yáng)111例；1， 5陽(yáng)性模式22例；1， 2， 3， 5陽(yáng)性模式2例；1， 2， 4， 5模式5例；HBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率為73.5%（136/185）。結(jié)論 在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）均為陽(yáng)性的情況下， 乙型肝炎e抗原（HBeAg）陽(yáng)性率與HBV-DNA定量及ALT有關(guān)， 為臨床制定合理的乙肝治療方素提供了依據(jù)， 有利于抑制乙肝病毒的傳染。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎標(biāo)志物；脫氧核糖核酸定量；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.19.004

Correlation between hepatitis B markers quantification detection index， hepatitis B virus DNA quantification and ALT DENG Ting， YUAN Wei-hua. Guangdong Yunfu City Peoples Hospital， Yunfu 527300， China

【Abstract】 Objective To investigate correlation between hepatitis B markers quantification detection index， hepatitis B virus desoxyribonucleic acid （HBV-DNA）quantification and alanine aminotransferase （ALT）， in order to provide reference for clinical hepatitis B treatment. Methods Venous blood of 185 outpatients， hospitalized patients and people in psychological examination were taken into HBV-DNA content determination by PCR-fluorescent probe method. Time resolved fluorescence immunoassay （TRFIA） and enzymic method were applied to detect hepatitis B five tests and ALT. Detection outcomes were compared and analyzed. Results In 185 blood samples of hepatitis B patients， there were 45 cases with big three positive， 111 case with small three positive， 22 cases with 1， 5 positive， 2 cases with 1， 2， 3， 5 positive， and 5 cases with 1， 2， 4， 5 positive. Positive rate of HBV-DNA detection was 73.5% （136/185）. Conclusion In the condition of positive hepatitis B surface antigen （HBsAg）， positive rate of hepatitis B e antigen （HBeAg） is positively correlated with HBV-DNA quantification and ALT. This method shows reference for clinical establishment of rational hepatitis B treatment， and it is helpful for hepatitis B inhibition.

【Key words】 Hepatitis B markers； Desoxyribonucleic acid quantification； Alanine aminotransferase

乙肝是目前我國(guó)主要傳染病之一， 可引起慢性、急性遷移性肝炎或肝癌。我國(guó)是乙肝高發(fā)區(qū)， 相關(guān)調(diào)查結(jié)果顯示， 我國(guó)乙肝病毒感染人群高達(dá)10%左右[1]。乙肝兩對(duì)半檢測(cè)是臨床診斷乙肝最常用的指標(biāo)， 可對(duì)人體乙肝病毒的免疫反應(yīng)狀態(tài)進(jìn)行反映。HBV-DNA是衡量乙肝傳染性最精確的手段， 是確定乙肝病毒感染不同復(fù)制狀態(tài)的重要方法， HBV-DNA陽(yáng)性顯示病毒具有傳染性[2]。ALT是反映肝損害的指標(biāo)。為探究乙肝兩對(duì)半模式與HBV-DNA定量、ALT的關(guān)系， 為制定合理治療方案提供科學(xué)依據(jù)， 本院對(duì)2016年4～12月185例HBV-DNA含量及乙肝兩對(duì)半定量、ALT指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)， 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 對(duì)2016年4～12月在云浮市人民醫(yī)院門診、住院及體檢者185例進(jìn)行乙肝兩對(duì)半定量、ALT檢測(cè)及HBV-DNA定量檢測(cè)， 其中男140例， 女45例， 年齡11～98歲。

1. 2 標(biāo)本采集及保存 采用真空干燥管3支， 各抽取受檢者靜脈血2 ml， 室溫放置≤4 h， 待樣本自行析出血清， 或直接室溫1600 rpm離心5 min分離出血清， 其中2支用于定量檢測(cè)乙肝兩對(duì)半及ALT檢測(cè)， 另一支分離血清后轉(zhuǎn)移到1.5 ml

滅菌離心管中備用。經(jīng)上述處理后的待測(cè)血清可立即用于檢測(cè)， 或（-20±5）℃保存（3個(gè)月）， 長(zhǎng)期保存置于-70℃以下， 避免反復(fù)凍融。

1. 3 方法與試劑 采用TRFIA及蘇州新波試劑檢測(cè)乙肝兩對(duì)半， 儀器為Anytest；采用上?？迫A試劑檢測(cè)ALT， 儀器為日立7600全自動(dòng)生化分析儀。采用PCR-熒光探針?lè)耙倚透窝撞《竞怂岫繙y(cè)定試劑盒定量檢測(cè)HBV-DNA， 試劑來(lái)自湖南圣湘生物科技有限公司， 本試劑盒的最低檢出量為 1.0×102 IU/ml， 定量線性范圍為 5.0×102～5.0×109 IU/ml。儀器為CFX96型熒光定量PCR儀（Bio-rad公司）， 本次所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒及儀器說(shuō)明書(shū)操作。

2 結(jié)果

本研究185例乙肝患者的血液標(biāo)本中， 血乙肝兩對(duì)半模式定量檢測(cè)有以下5種模式：大三陽(yáng)（1， 3， 5陽(yáng)性）45例， HBV-DNA平均含量 3.91×106 IU/ml， ALT值122.6 IU/L；小三陽(yáng)（1， 4， 5陽(yáng)性）111例， HBV-DNA平均含量 3.74×104 IU/ml，

ALT值94.8 IU/L；1， 5陽(yáng)性模式22例， HBV-DNA平均含量5.19E×105 IU/ml， ALT平均值43.6 IU/L；1， 2， 3， 5陽(yáng)性模式2例， 1， 2， 4， 5模式5例；HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果以HBV-DNA表達(dá)水平高于1×102 IU /ml為陽(yáng)性結(jié)果， 本研究185例血清樣本中， HBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率為73.5%（136/185）。見(jiàn)表1。

3 討論

HBV感染呈世界性流行， 但不同地區(qū)HBV感染的流行強(qiáng)度差異很大， 傳播途徑不確定[3-6]。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道， 全球約20億人曾感染過(guò)HBV， 其中3.5億人為慢性HBV感染者， 每年約有100萬(wàn)人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細(xì)胞癌[7-10]。HBV感染者部分發(fā)展成肝炎， 部分為正常攜帶者， 也有部分發(fā)展成肝硬化和肝癌[11-13]。HBV感染率高， 不僅危害社會(huì)公共健康， 也是醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露時(shí)容易感染的病毒[14， 15]， HBV感染一部分人群為正常人群， 無(wú)傳染性， 也有部分人群具有傳染性， 判斷HBV感染者是否具有傳染性， 對(duì)做好HBV感染控制和預(yù)防工作， 具有重要意義[16-19]。時(shí)間分辨免疫熒光法是一種繼放射免疫、酶免疫和發(fā)光免疫后的一種非放射性標(biāo)記免疫分析技術(shù)。鑭系元素的螯合物為TRFIA所使用標(biāo)記物， 具有發(fā)出的熒光時(shí)間長(zhǎng)、強(qiáng)度高等特點(diǎn)， 因?yàn)榇蟛糠直尘胺翘禺悷晒舛际嵌虝捍嬖诘亩虝r(shí)間熒光， 鑭系金屬螯合物發(fā)出的熒光時(shí)間長(zhǎng)， 可有效地避免本底非特異熒光的干擾， 故稱TRFIA[20]。TRFIA是一種定量檢測(cè) HBV 標(biāo)志物的新方法， 具有靈敏度高、特異性好等特點(diǎn)。乙肝病毒 DNA 是判斷乙肝病毒有無(wú)復(fù)制的黃金指標(biāo)， 其主要用來(lái)判斷體內(nèi)乙肝病毒含量的多少及傳染程度， HBV-DAN 含量越高則表示病毒復(fù)制能力越強(qiáng)， 傳染性越強(qiáng)[21]。從本次實(shí)驗(yàn)可見(jiàn)， 1， 3， 5大三陽(yáng)和1， 2， 3， 5模式的HBV-DNA的陽(yáng)性率及其平均含量均較其他模式的高， 且反映肝功能損害的ALT也較高， 說(shuō)明在HBsAg陽(yáng)性的情況下， 反映乙肝病毒復(fù)制的標(biāo)志物HBeAg陽(yáng)性與HBV-DNA的陽(yáng)性率及其平均含量、ALT存在著一定的正相關(guān)性。當(dāng)然本次的1， 2， 3， 5模式的標(biāo)本量較少會(huì)有一定的影響。但應(yīng)該準(zhǔn)確測(cè)出乙肝標(biāo)志物HBsAg和HBeAg發(fā)現(xiàn)其陽(yáng)性后應(yīng)高度重視并做好后續(xù)HBV-DNA含量及ALT的檢測(cè)， 盡快采取醫(yī)學(xué)干預(yù)。

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[收稿日期：2017-04-11]