汪瑋

550000貴陽市婦幼保健院

靜脈滴注丙種球蛋白聯(lián)合淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的可行性分析

汪瑋

550000貴陽市婦幼保健院

目的：探討靜脈滴注丙種球蛋白(IVIG)聯(lián)合淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫(LIT)治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的效果。方法：收治復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者86例，分為觀察組和對(duì)照組。觀察組采用IVIG聯(lián)合LIT治療，對(duì)照組采用IVIG治療，比較兩組治療效果。結(jié)果：治療后，兩組IL-10、CD3+、CD8+表達(dá)水平明顯升高，NK細(xì)胞含量、IL-2、CD4+、CD4+/CD8+表達(dá)水平均降低(P＜0.05)；觀察組IL-10、CD3+和CD8+表達(dá)水平高于對(duì)照組，NK細(xì)胞含量、IL-2、CD4+和CD4+/CD8+表達(dá)水平低于對(duì)照組(P＜0.05)；觀察組妊娠成功率顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。結(jié)論：IVIG聯(lián)合LIT治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的效果顯著。

丙種球蛋白；復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫

孕婦在妊娠28周前出現(xiàn)多次流產(chǎn)征兆在臨床上被稱為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，其病因比較復(fù)雜，在檢查中也難以發(fā)現(xiàn)流產(chǎn)原因[1]。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)中排除內(nèi)分泌異常、生殖道畸形、染色體異常及感染的患者，臨床稱為原因不明性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(URSA)，其占復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的45%～60%。有研究表明[2]，產(chǎn)生URSA的主要原因是孕婦體內(nèi)缺乏封閉抗體(BA)和T淋巴細(xì)胞亞群失衡，臨床上治療URSA的主要療法為免疫療法。本研究分組比較、觀察靜脈滴注丙種球蛋白(IVIG)聯(lián)合淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫(LIT)治療URSA的效果，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

2013年3月-2015年6月收治復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者86例，所有患者反復(fù)自然流產(chǎn)＞2次，自身抗體陰性，內(nèi)分泌檢查正常。按照平均分配法分為兩組，觀察組和對(duì)照組，每組43例。觀察組中，年齡22～35歲，平均(27.46±4.65)歲；流產(chǎn)次數(shù)3～6次，平均(4.32±1.43)次。對(duì)照組中，年齡22～37歲，平均(28.47±5.42)歲；流產(chǎn)次數(shù)3～5次，平均(4.47±1.73)次。兩組患者在一般資料方面，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本院倫理委員會(huì)已通過本次研究的審批。

方法：①對(duì)照組患者采用常規(guī)IVIG治療。靜脈滴注丙種球蛋白，孕前靜脈滴注1次/4周，孕后靜脈滴注1次/3周，共需要靜脈滴注10次，使用藥量標(biāo)準(zhǔn)400 mg/kg。②觀察組患者采用IVIG聯(lián)合LIT治療。具體方法：對(duì)患者的丈夫抽取20 mL靜脈血，獲取外周血單核細(xì)胞，調(diào)整濃度為1×109/L，在無菌環(huán)境條件下使用淋巴細(xì)胞分離液分離。1次/2周，1 mL/次，于患者臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射，治療8周為1個(gè)療程。檢測封閉抗體，若為陰性，則繼續(xù)治療1個(gè)療程。若為陽性，則患者可以考慮懷孕。孕后需LIT治療3次，1次/4周。

觀察指標(biāo)：分別提取治療前及治療后1個(gè)療程孕婦的血清和靜脈血5 mL進(jìn)行封閉抗體、淋巴細(xì)胞亞型及細(xì)胞因子檢測。①妊娠成功：成功分娩或妊娠3個(gè)月后B超檢查未見異常。②封閉抗體檢測：使用上海恒斐生物科技有限公司生產(chǎn)的ELISA標(biāo)準(zhǔn)檢測試劑盒，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作，檢測封閉抗體采用酶聯(lián)免疫吸附法。③檢測細(xì)胞因子及淋巴細(xì)胞亞型：對(duì)采集的靜脈血加肝素抗凝，用流式細(xì)胞儀檢測IL-2、IL-10、T細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+和CD8+)的表達(dá)水平及NK細(xì)胞含量。每次檢測獲取10 000個(gè)細(xì)胞。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)采用軟件SPSS 21.0進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用(±s)表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

比較治療前后NK細(xì)胞含量、IL-2、IL-10、T細(xì)胞亞群表達(dá)水平：NK細(xì)胞含量、IL-2、IL-10、CD3+、CD4+和CD8+表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療后兩組患者IL-10、CD3+、CD8+表達(dá)水平比治療前明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；NK細(xì)胞含量、IL-2、CD4+、CD4+/CD8+表達(dá)水平比治療前降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組IL-10、CD3+和CD8+表達(dá)水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；而NK細(xì)胞含量、IL-2、CD4+和CD4+/CD8+表達(dá)水平觀察組均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

比較兩組患者妊娠成功率：治療后封閉抗體轉(zhuǎn)陽率觀察組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組妊娠成功率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表1 兩組治療前后NK細(xì)胞含量、IL-2、IL-10、T細(xì)胞亞群表達(dá)水平比較(±s)

表1 兩組治療前后NK細(xì)胞含量、IL-2、IL-10、T細(xì)胞亞群表達(dá)水平比較(±s)

項(xiàng)目 觀察組 對(duì)照組治療前 治療后 治療前 治療后CD3+(%) 66.23±1.67 69.36±2.36?# 66.68±1.84 68.12±2.03?CD4+(%) 48.35±2.43 39.47±2.35?# 49.62±2.53 41.48±1.25?CD8+(%) 41.76±2.43 55.75±2.63?# 40.62±2.73. 50.71±2.48?CD4+/CD8+ 1.35±0.25 0.97±0.08?# 1.43±0.43 1.21±0.14?IL-2(ng/L) 23.53±2.46 17.38±3.71?# 24.63±2.63 21.72±2.37?IL-10(ng/L) 0.67±0.06 1.75±0.47?# 0.64±0.53 1.55±0.64?NK(%) 25.24±4.42 11.78±2.63?# 26.56±3.68 17.79±3.54?注：與治療前比較，?P＜0.05；與對(duì)照組比較，#P＜0.05。

表2 兩組患者妊娠成功率比較[n(%)]

討 論

母體中的胎兒相當(dāng)于自身異物，并且胎兒還含有來自父方的基因，會(huì)受到母體強(qiáng)烈的排斥。健康的母體會(huì)產(chǎn)生封閉抗體，防止胚胎受到免疫系統(tǒng)傷害，保護(hù)胚胎能夠在母體內(nèi)存活。當(dāng)母體缺乏封閉抗體時(shí)，胚胎細(xì)胞會(huì)受到免疫系統(tǒng)攻擊，容易使孕婦流產(chǎn)[3]。研究證明，URSA產(chǎn)生的主要原因就是封閉抗體的缺乏。LIT治療的方法是以男性的淋巴細(xì)胞刺激患者的免疫系統(tǒng)，給患者增加封閉抗體，保護(hù)胚胎正常發(fā)育。有研究證實(shí)[4]，封閉抗體陽性者妊娠成功率明顯高于陰性者，而封閉抗體陽性率在使用LIT治療后可明顯提高。本研究結(jié)果顯示，治療后封閉抗體轉(zhuǎn)陽率，觀察組高于對(duì)照組，觀察組臨床妊娠成功率顯著高于對(duì)照組。陸元慶等研究[5，6]認(rèn)為使用IVIG治療URSA主要是降低NK細(xì)胞的水平和調(diào)節(jié) Thl(如 IL-2、IFN-r及 TNF-a)、Th2(如IL4、IL-10)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，從而為減少毒性發(fā)揮重要的作用。妊娠后母體分泌的細(xì)胞因子中，Th1型細(xì)胞因子對(duì)胚胎有傷害作用，誘發(fā)孕婦發(fā)生流產(chǎn)；Th2型細(xì)胞因子起到保護(hù)胚胎作用，是抑制Thl型細(xì)胞因子的產(chǎn)物，孕婦流產(chǎn)率減少。IVIG可增加Th2型細(xì)胞因子，降低Th1型細(xì)胞因子的分泌。另外，IVIG是IgG抗體，部分阻斷了自身抗體的Fc段與NK細(xì)胞的結(jié)合，從而降低NK細(xì)胞的毒性，抑制了自身抗體介導(dǎo)的NK細(xì)胞ADCC效應(yīng)。

綜上所述，原因不明性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者采用IVIG聯(lián)合LIT治療效果顯著，妊娠成功率更高，值得臨床推廣使用。

[1]沈伶,盧煥霞,胡瑞霞.兩種免疫治療方法治療封閉抗體陰性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的療效觀察[J].新醫(yī)學(xué),2011,3(6)：402-405.

[2]蘇迎春,肖素梅,甘建寧,等.3種不同免疫治療方法治療不明原因復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的效果比較[J].中國婦幼保健,2016,2(6)：1228-1230.

[3]呂春紅,王連珠.丙種球蛋白聯(lián)合淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的療效[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2016,6(7)：96-98.

[4]周穎嫻.免疫治療對(duì)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的臨床觀察分析[J].黑龍江醫(yī)藥,2016,2(1)：123-125.

[5]陸元慶,宋學(xué)靜,付子毅.丙種球蛋白聯(lián)合淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的療效[J].江蘇醫(yī)藥,2016,11(14)：1570-1572.

[6]崔蓉,苗竹林,趙文忠,等.淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫聯(lián)合小劑量IVIG治療URSA的初步探討[J].中國計(jì)劃生育學(xué)雜志,2013,3(5)：331-333.

Feasibility analysis of IVIG combined with LIT in the treatment of recurrent spontaneous abortion

Wang Wei
The Maternal and Child Health Hospital of Guiyang City 550000

Objective：To investigate the efficacy of IVIG combined with LIT in the treatment of recurrent spontaneous abortion.Methods：86 patients with recurrent spontaneous abortion were selected.They were divided into the observation group and the control group.The observation group was treated with IVIG combined with LIT,and the control group was treated with IVIG.We compared the therapeutic effects of two groups.Results：After treatment,the expression levels of IL-10,CD3+and CD8+were significantly increased in the two groups,and the levels of NK cells,IL-2,CD4+and CD4+/CD8+were decreased(P＜0.05).In the observation group,the expression levels of IL-10,CD3+and CD8+were higher than those of the control group,and the content of NK cells,IL-2,CD4+and CD4+/CD8+expression were lower than those of the control group(P＜0.05).The pregnancy success rate of the observation group was significantly higher than that of the control group(P＜0.05).Conclusion：The efficacy of IVIG combined with LIT in the treatment of recurrent spontaneous abortion was significant.

Gamma globulin;Recurrent spontaneous abortion;Lymphocyte active immunity

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.24.35