李永川 祁青玲 艾小慶 劉玉嵚 馮海霞

(青海紅十字醫(yī)院婦三科，青海 西寧 810000)

子宮內(nèi)膜癌中缺氧誘導(dǎo)因子-1α和血管內(nèi)皮生長因子-D的表達及臨床意義

李永川 祁青玲 艾小慶 劉玉嵚 馮海霞

(青海紅十字醫(yī)院婦三科，青海 西寧 810000)

目的檢測子宮內(nèi)膜癌組織中缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)-D的表達，分析二者的關(guān)系及臨床意義。方法63例確診并行子宮內(nèi)膜癌根治術(shù)的患者為觀察組，19例子宮肌瘤行子宮全切的患者(留取子宮內(nèi)膜)為對照組，均留取術(shù)后蠟塊組織，應(yīng)用免疫組化法檢測HIF-1α和VEGF-D的表達。結(jié)果兩組HIF-1α和VEGF-D表達的陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。觀察組HIF-1α和VEGF-D表達與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，HIF-1α表達與腫瘤浸潤深度、腫瘤最大徑、增殖指數(shù)密切相關(guān)。二者表達均與年齡無相關(guān)性。相關(guān)分析顯示觀察組HIF-1α和VEGF-D表達無相關(guān)性。結(jié)論子宮內(nèi)膜癌中HIF-1α和VEGF-D表達升高可能與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，HIF-1α表達與腫瘤侵襲性生長密切相關(guān)。

子宮內(nèi)膜癌；缺氧誘導(dǎo)因子-1α；血管內(nèi)皮生長因子-D；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，激素、遺傳及基因表達失調(diào)均與腫瘤的形成有關(guān)〔1〕。腫瘤由于生長較快，常伴隨缺氧性環(huán)境〔2〕。缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α是在惡性腫瘤形成和進展時的低氧條件下產(chǎn)生的一種蛋白，對腫瘤有多種調(diào)控功能〔3〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)-D是VEGFs家族的成員，其具有促進腫瘤淋巴管生成的作用，與腫瘤的播散和進展有關(guān)〔4〕。本實驗檢測子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織中HIF-1α和VEGF-D的表達，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2014年1月至2016年6月63例青海紅十字醫(yī)院確診子宮內(nèi)膜癌并行根治性手術(shù)治療的患者為觀察組，留取術(shù)后蠟塊組織，年齡55～79(平均61.3)歲。均經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標準及分型。排除標準：①伴有其他器官惡性腫瘤或林奇綜合征；②生殖系統(tǒng)腫瘤手術(shù)史；③術(shù)前進行放、化療。19例因子宮肌瘤行子宮全切作為對照組，留取子宮內(nèi)膜組織，年齡55～76(平均56.6)歲。兩組常規(guī)資料無明顯差異。

1.2HIF-1α和VEGF-D表達的檢測 兩組術(shù)后組織均立即應(yīng)用中性甲醛溶液固定，常規(guī)進行取材、脫水、包埋后切片，并置于膠片上檢測。HIF-1α和VEGF-D蛋白表達的檢測應(yīng)用免疫化二步法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，做好實驗質(zhì)控。

1.3HIF-1α和VEGF-D結(jié)果的判讀 評定均由病理醫(yī)師閱片得出，應(yīng)用盲法評定。兩組均觀察腺上皮細胞中HIF-1α和VEGF-D的表達特征。HIF-1α和VEGF-D陽性細胞的表達部位是細胞質(zhì)，以出現(xiàn)淺黃色-棕褐色顆粒為陽性反應(yīng)細胞。對每張切片顯色上皮細胞數(shù)量占所有腫瘤細胞數(shù)量的比例(染色范圍)和染色強度進行評估。染色范圍評分：每張切片隨機選取3個高倍(400×)視野，按陽性細胞數(shù)占腫瘤細胞數(shù)的百分比進行評定，沒有顯色的為0分，<25%為1分，25%～50%為2分，>50%為3分。染色強度評分：無染色計0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分?？偟梅?染色范圍×染色強度。得分≤3分為陰性，>4分為陽性。

1.4統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS19.0軟件進行χ2檢驗、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組HIF-1α和VEGF-D表達的差別 兩組HIF-1α和VEGF-D的陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。見表1。

2.2HIF-1α和VEGF-D在觀察組不同臨床病理特征中表達的差別 HIF-1α和VEGF-D表達與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，HIF-1α表達與腫瘤的浸潤深度、腫瘤的最大徑、增殖指數(shù)密切相關(guān)。二者的表達均與年齡無相關(guān)性。見表2。

表1 兩組HIF-1α和VEGF陽性表達比較〔n(%)〕

表2 HIF-1α和VEGF-D陽性表達在觀察組不同臨床病理特征中表達的比較

2.3觀察組HIF-1α和VEGF-D表達相關(guān)性 HIF-1α和VEGF-D的表達無相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

缺氧是實體性腫瘤在生長過程中的重要特征之一，腫瘤細胞存在著對缺血缺氧的自身調(diào)節(jié)和適應(yīng)性反應(yīng)，其中一個機制是HIF-1α在微環(huán)境中可以使靶基因激活，進而提高葡萄糖轉(zhuǎn)運代謝，同時對腫瘤間質(zhì)的血管新生起重要的促進作用〔5，6〕。HIF-1α是缺氧環(huán)境下誘導(dǎo)的重要蛋白，是連接在紅細胞生成系基因上的核因子，其基因定位于14q21～q24〔7，8〕。在缺氧環(huán)境下，腫瘤細胞內(nèi)許多基因?qū)θ毖蹩梢猿霈F(xiàn)應(yīng)激性反應(yīng)。研究認為HIF-1α有明顯的促進腫瘤間質(zhì)血管生成的作用，可以使腫瘤細胞的營養(yǎng)供應(yīng)豐富〔9〕。VEGF-D是最重要的淋巴管生成因子之一，是唯一受轉(zhuǎn)錄因子c-fos誘導(dǎo)的生長因子，與很多腫瘤的形成和進展相關(guān)〔10〕。當VEGF-D由腫瘤細胞合成后，以前體方式分泌，經(jīng)蛋白水解過程去掉N-端和C-端前肽，由中間的VEGF同源區(qū)形成非共價的同源二聚體，通過旁分泌的方式作用于定位在淋巴管內(nèi)皮的受體VEGFR-3，促進間質(zhì)淋巴管生成〔11，12〕。當淋巴管生成并形成管腔后，腫瘤細胞可以進入新生淋巴管中，通過淋巴循環(huán)進而加速腫瘤細胞的播散。因此表達升高的VEGF-D可能是預(yù)示腫瘤轉(zhuǎn)移的蛋白指標〔13，14〕。

本研究提示HIF-1α和VEGF-D在腫瘤性病變的形成中有重要作用。HIF-1α和VEGF-D具有促癌形成的作用，使上皮細胞的惡性轉(zhuǎn)變能力提高。HIF-1α和VEGF-D高表達時腫瘤處于進展及轉(zhuǎn)移的狀態(tài)，腫瘤細胞易于播散，并定植于其他部位，形成轉(zhuǎn)移癌。HIF-1α表達升高使腫瘤具有較強的侵襲行為，同時促進腫瘤細胞繁殖，腫瘤體積增大，腫瘤生長加速，對周圍組織的破壞能力明顯增強，腫瘤不易切除干凈。本文提示HIF-1α和VEGF-D無明顯的協(xié)同作用，即HIF-1α在一定程度上可以促進血管的新生〔15，16〕，但是對淋巴管生成的促進因子VEGF-D的調(diào)節(jié)作用不明顯，因此HIF-1α可能不具有促進淋巴管生成的作用。HIF-1α在腫瘤中表達上調(diào)后啟動對腫瘤生長的促進作用，可能還涉及對染色質(zhì)改變的調(diào)控、對細胞增殖的影響及細胞凋亡抑制等作用〔17，18〕。HIF-1α的調(diào)節(jié)及作用方式明顯多于VEGF-D〔19〕。

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〔2017-05-15修回〕

(編輯 苑云杰)

李永川(1974-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事子宮腫瘤研究。

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A

1005-9202(2017)17-4284-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.055