林麗飛，劉春國(guó)，王傳銘，羅巧育，劉艷紅，胡先奇*

云南省金平縣自然生境下森林土壤寄生線蟲的初步鑒定

林麗飛1，2，劉春國(guó)3，王傳銘1，羅巧育2，劉艷紅1，胡先奇2*

(1.云南省農(nóng)作物優(yōu)質(zhì)高效栽培與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室云南紅河學(xué)院，云南蒙自 661100;2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)省植物病理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明 650201;3.建水縣臨安鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，云南建水 654399)

【目的】以金平縣森林為代表，研究自然生境下線蟲群落的多樣性。植物寄生線蟲在植物病害中占有重要地位，它不但可以直接危害寄主植物，而且能夠傳播病毒、真菌和細(xì)菌參入復(fù)合病害，使林木生長(zhǎng)衰退，加劇植物病害。然而，國(guó)內(nèi)外缺乏自然生境下森林土壤線蟲系統(tǒng)的研究。鑒于此，本文章針對(duì)這一研究薄弱環(huán)節(jié)，運(yùn)用植物線蟲學(xué)的研究方法，對(duì)金平自然生境下森林土壤線蟲的種類和分布進(jìn)行了研究?！痉椒ā坑?013-2016年在金平縣未被破壞的森林植被中采集了35份土壤，帶回實(shí)驗(yàn)室，經(jīng)過分離、殺死、固定，應(yīng)用形態(tài)學(xué)鑒定的方法?！窘Y(jié)果】一共鑒定了3種矮化線蟲，分別是馬舒德矮化線蟲(Tylenchorhynchusmashhoodi siddiqi&Basir，1959)、甘藍(lán)矮化線蟲(Tylenchorhynchus brassicae，Siddiqi，1961)、尤因矮化線蟲(Tylenchorhynchus ewingi Hooper，1959);【結(jié)論】為森林病害的綜合治理和生態(tài)治理提供了理論依據(jù)。

森林;自然;線蟲;種類;鑒定

【研究意義】土壤線蟲按食性劃分為4種營(yíng)養(yǎng)類線蟲，分別是細(xì)菌類線蟲、食真菌類線蟲、植物寄生類線蟲和雜食/捕食類線蟲。植物寄生線蟲對(duì)植物正常的生長(zhǎng)產(chǎn)生阻礙，主要取食植物的根系，造成植物的根系畸形，養(yǎng)分吸收困難甚至腐爛，從而影響作物的產(chǎn)量?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】陸地生態(tài)系統(tǒng)中森林土壤線蟲最為豐富，線蟲在每平方米林地凋落物和土壤中的密度高達(dá)1000萬頭，其種類多于400種[1]，森林土壤線蟲群落功能結(jié)構(gòu)不僅與地上植物特性和植物生物多樣性組成有關(guān)[2]，還受森林植被演替不同階段、土壤質(zhì)地以及周邊生境影響[3-5]?！颈狙芯康那腥朦c(diǎn)】金平縣分水嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)有高等植物140科700多種。有不少第三紀(jì)植物的殘遺種和特有種存在，如原始蓮座蕨、樹蕨、馬尾樹等。植被類型主要為季風(fēng)常綠闊葉林、山地常綠闊葉林和山頂矮林，組成樹種為殼斗科、木蘭科、樟科、山茶科、槭科、冬青科、杜英科、安息香科、金縷梅科、五加科、樺木科的屬種?！緮M解決的關(guān)鍵問題】有關(guān)云南省金平縣分水嶺自然生境下的森林土壤線蟲的研究尚未見報(bào)道。為此，筆者對(duì)金平縣森林保護(hù)區(qū)生境下的土壤線蟲進(jìn)行研究，為探究土壤線蟲群落對(duì)森林凋落物分解的提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 樣本的采集

2013-2016年對(duì)云南省紅河州金平縣森林土樣進(jìn)行實(shí)際調(diào)查，采集森林里枯枝落葉下的土壤，用五點(diǎn)隨機(jī)抽樣法進(jìn)行采樣:選好5個(gè)固定點(diǎn)，在每個(gè)點(diǎn)的土層下方5～30 cm挖取土樣500 g，將所取土樣混勻，用“四分法”，取約1000 g土樣并將其放入自封袋中。對(duì)所采樣本進(jìn)行編號(hào)，并在記錄本上詳細(xì)記錄采樣地點(diǎn)、采樣時(shí)間、土壤類型、癥狀特點(diǎn)等。對(duì)樣本進(jìn)行及時(shí)處理，未來得及處理的樣本置于陰涼處保存，避免密閉和太陽(yáng)直射并盡快進(jìn)行線蟲分離。

1.2 線蟲的分離、殺死、固定及鑒定

具體方法參照文獻(xiàn)[6]的方法進(jìn)行操作。

1.3 線蟲的鑒定

將已固定的線蟲制成玻片在光學(xué)顯微鏡下觀察其形態(tài)特征，進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。分類鑒定主要依照謝輝的分類系統(tǒng)[7]，形態(tài)測(cè)計(jì)采用De M an公式。De M an公式常用的項(xiàng)目與參數(shù)(單位:μm):n:測(cè)量的樣本數(shù);L:體長(zhǎng);W:最大體寬;Ant.tip-junction:體前端至腸瓣交匯處距離;Ant.tip-gland:體前端至食道腺末端的距離;A-vulva:體前端至陰門的距離; Tail:尾長(zhǎng);Lip-h:頭部高;Lip-w:頭部寬;DGO:背食道腺開口至口針基部球之間的距離;Knob-h:口針基部球高;Knob-w:口針基部球?qū)?Cone:口針針錐部長(zhǎng);Ant.tip-bulb:體前端到中食道球中間的距離; Ex.p:排泄孔至頭端的距離;Oes:食道長(zhǎng);Glandwide:食道腺寬;a:體長(zhǎng)/最大體寬;b:體長(zhǎng)/體前端至食道與腸連接處的距離;b':體長(zhǎng)/體前端至食道腺末端的距離;c:體長(zhǎng)/尾長(zhǎng);c':尾長(zhǎng)/肛門處體寬; V:體前端至陰門的距離*100/體長(zhǎng);o:背食道腺開口距口針基部球的距離/口針長(zhǎng);m:口針針錐部長(zhǎng)/口針長(zhǎng);AW:肛門處體寬;Stylet:口針長(zhǎng);H:尾部透明區(qū)長(zhǎng)。

2 結(jié)果與分析

從調(diào)查的土壤樣本中，鑒定出3個(gè)種線蟲，屬于墊刃目(Tylenchida)，刺科(Belonolaimidae)、端墊刃亞科(Telotylenchinae)、矮化線蟲屬(Tylenchorhynchus)

2.1 馬舒德矮化線蟲(Tylenchorhynchusmashhoodi siddiqi&Basir,1959)

測(cè)量值及與文獻(xiàn)的對(duì)比見表1。

形態(tài)描述見圖1。

雌蟲65℃水浴熱殺死后，蟲體略向腹面彎曲，體環(huán)紋清晰，4條側(cè)線，頭圓，連續(xù)或稍突出，頭架骨化程度中等?？卺樆壳蚺虼?，中食道球發(fā)達(dá)，食道腺梨形、與腸交界清楚;排泄孔緊接半月體后;雙卵巢，對(duì)伸，陰門位于蟲體中后部;陰道較長(zhǎng)，陰門橫裂，受精囊近圓形，尾圓錐形，尾中部稍前可見側(cè)尾腺口。

表1 云南金平森林土壤馬舒德矮化線蟲測(cè)量值與文獻(xiàn)記述的比較Table 1 Comparison formeasurements of population from forest of Jinping，Yunnan and the description of literature of Tylenchorhynchusmashhoodi

續(xù)表1 Continued table 1

雄蟲未見。

2.2 甘藍(lán)矮化線蟲Tylenchorhynchus brassicae,Siddiqi,1961

測(cè)量值及與文獻(xiàn)記述的比較詳見表2。

形態(tài)描述見圖2。

雌蟲。蟲體兩端略變細(xì)，角質(zhì)層環(huán)明顯。唇區(qū)稍縊縮，唇環(huán)4條，口針發(fā)達(dá)，口針基部球前緣略向側(cè)傾斜。中食道球卵圓形，食道腺長(zhǎng)梨形，與腸交界清晰，排泄孔位于食道腺前端，卵巢2個(gè)，對(duì)生。尾圓錐形，末端光滑，尾腹環(huán)17～19個(gè)。

雄蟲未見。

2.3 尤因矮化線蟲(Tylenchorhynchus ewingi Hooper,1959)

測(cè)量值及與文獻(xiàn)記述的比較詳見表3。

圖1 馬舒德矮化線蟲雌蟲的光學(xué)顯微照片F(xiàn)ig.1 Lightmicroscope photographs of Tylenchorhynchusmashhoodi female

形態(tài)描述見圖3。

雌蟲。65℃水浴殺死后蟲體呈C字形，表皮紋清晰，頭部稍縊縮?？卺槹l(fā)達(dá)，口針基球表面向后傾斜或凹陷。排泄孔位于食道腺的前端，食道腺后部為長(zhǎng)梨形，食道腺后部為長(zhǎng)梨形，與腸稍有覆蓋，雙卵巢，直生，陰門位于蟲體的58.6%水平，受精囊圓形或卵圓形，尾為錐形，尾端平滑。

雄蟲未見。

該線蟲的形態(tài)特征描述和形態(tài)指標(biāo)測(cè)計(jì)值與尤因矮化線蟲的原始描述對(duì)該種線蟲的其他種群的描述基本一致，故將其鑒定為尤因矮化線蟲。

3 討 論

馬舒德矮化線蟲(T.mashhoodi)能夠寄生在茶樹、桑樹及黃瓜等寄主植物上，還能夠危害蔬菜[20]、花卉[21]等作物。本項(xiàng)目中的測(cè)量值a、b、b'、c、c'、v與參考文獻(xiàn)報(bào)道的數(shù)值較為接近，但體長(zhǎng)、體寬、尾部、背食道腺開口道口針基部球的距離及體前端到食道腺末端的距離等形態(tài)特征數(shù)值比周春娜、林麗飛報(bào)道的稍大，這可能跟本次采集土壤的分布有關(guān)系，土壤沒有被人類活動(dòng)干擾，森林中土壤營(yíng)養(yǎng)成分豐富，蟲體長(zhǎng)勢(shì)較好，且蟲體分布密度大。甘藍(lán)矮化線蟲(T.brassicae)主要危害花卉、蔬菜[22]，本文的形態(tài)測(cè)計(jì)數(shù)值處理體長(zhǎng)L較大，其他測(cè)量指標(biāo)與參考文獻(xiàn)相比較為接近。

矮化科線蟲的某些種類有時(shí)可危害植物的根系，造成植物矮化、腐爛等[14]?？巳R頓矮化線蟲危害煙草，造成根系發(fā)育不良，矮化。能夠危害甘蔗，造成蔗株矮小、葉色淡綠、蔗根短少等癥狀[15]，能夠危害石榴[16]，且矮化線蟲還能加重茄子黃萎病的發(fā)生[17]，能夠引起玉米的矮化病[18]，同時(shí)也能夠引起棉花的黃萎病[19]。

4 結(jié) 論

本文章通過森林土樣調(diào)查、采集、線蟲分離、殺死、固定，從35份土樣中鑒定出3種矮化線蟲，分別是馬舒德矮化線蟲(Tylenchorhynchusmashhoodi siddiqi&Basir，1959)、甘藍(lán)矮化線蟲(Tylenchorhynchus brassicae，Siddiqi，1961)、尤因矮化線蟲(Tylenchorhynchus ewingi Hooper，1959)。

表2 云南金平森林土壤甘藍(lán)矮化線蟲的測(cè)量值與文獻(xiàn)記述的比較Table 2 Comparison formeasurements of population from forest of Jinping，Yunnan and the description of literature of Tylenchorhynchus brassicae

圖2 甘藍(lán)矮化線蟲雌蟲的光學(xué)顯微照片F(xiàn)ig.2 Lightmicroscope photographs of Tylenchorhynchus brassicae female

表3 云南金平森林土壤尤因矮化線蟲的測(cè)量值與文獻(xiàn)記述的比較Table 3 Comparison formeasurements of population from forest of Jinping，Yunnan and the Description of literature of Tylenchorhynchusewingi

圖3 尤因矮化線蟲雌蟲的光學(xué)顯微照片F(xiàn)ig.3 Lightmicroscope photographs of Tylenchorhynchus ewingi female

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(責(zé)任編輯 王家銀)

Prelim inary Identification of Parasitic Nematodes in Forest Soils in Jinping County，Yunnan Province

LIN Li-fei1，2，LIU Chun-guo3，WANG Chuan-ming1，LUO Qiao-yu2，LIU Yan-hong1，HU Xian-qi2*
(1.Key Laboratory for Crop High Quality Cultivation and Security Control of Yunnan Province，Yunnan Honghe University，Yunnan Mengzi 661100，China;2.Key Laboratory of Plant Pathology of Yunnan Province，Yunnan Agricultural University，Yunnan Kunming650201，China;3.Extension Centre of Agro-Technique of Li-nan，Yunnan Jianshui654399，China)

【Objective】Taking the forest of Jinping County as the representative，the diversity of nematode community in natural habitatwas studied.Plant parasitic nematodes played an important role in plant diseases，not only could directly harm the host plants，but also spread the virus，fungi and bacteria into the complex disease，decline the growth of trees，exacerbate plant diseases.However，the study of forest soil nematode system in naturalhabitatathome and abroad was lacking.In view of this，this paper studied the species and distribution of forest soil nematodes in Jinping natural habitatby using themethod of plantnematode research.【Method】In this paper，35 soilswere collected from the unspoiled forest vegetation in Jinping County from 2013 to2016，and returned to the laboratory after separation，killing，fixation and morphological identification.【Result】3 dwarf nematodes，Tylenchorhynchusmashhoodi siddiqi&Basir(1959)，Tylenchorhynchus brassicae (Siddiqi，1961)，Ewing dwarf nematodes Tylenchorhynchusewingi Hooper(1959)were identified.【Conclusion】The present paper provided a theoretical basis for comprehensivemanagement and ecologicalmanagement of forest diseases.

Forest;Natural habitat;Parasitic nematodes;Identification

S436.631

A

1001-4829(2017)8-1808-06

10.16213/j.cnki.scjas.2017.8.019

2016-10-02

教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(201353 02110003);云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(2009ZC131M);第一批校中青年學(xué)術(shù)帶頭人后備人才(2010PY0104);校級(jí)項(xiàng)目(XJ1Y0801);紅河學(xué)院碩士點(diǎn)植物保護(hù)一級(jí)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目;云南省紅河州人民政府生物創(chuàng)新辦委托項(xiàng)目(草果良種選育和豐產(chǎn)示范基地建設(shè)項(xiàng)目)

林麗飛(1978-)，女，云南建水人，碩士，主要研究方向:從事植物病蟲害的研究，E-mail:llf-biology2@126.com，*為通訊作者:胡先奇，E-mai:xqhoo@126.com。