宋小紅，李承旭，吳揚(yáng)，蔡源，董俊武

（華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬普愛(ài)醫(yī)院 腎內(nèi)科，湖北 武漢 430034）

百里醌預(yù)處理對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的影響

宋小紅，李承旭，吳揚(yáng)，蔡源，董俊武

（華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬普愛(ài)醫(yī)院 腎內(nèi)科，湖北 武漢 430034）

目的探討百里醌對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制。方法隨機(jī)將60只雄性SD大鼠分成假手術(shù)組（Sham組）、腎缺血再灌注損傷組（IRI組）和百里醌不同濃度預(yù)處理組（Thy組）。IRI組和Thy組用無(wú)創(chuàng)血管夾夾閉左側(cè)腎蒂?gòu)?fù)制IRI模型，Sham組操作同上，但不夾閉左側(cè)腎蒂。Thy組在缺血前45 min給予百里醌5、10、20和40 mg/kg腹腔注射。Sham組和IRI組在同一時(shí)間給予等體積生理鹽水腹腔注射。再灌注24 h后處死小鼠，收集血清和腎臟標(biāo)本。PAS染色檢測(cè)腎臟病理改變，ELISA檢測(cè)尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、丙二醛（MDA）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPx）、超氧化物歧化酶（SOD）的表達(dá)、白細(xì)胞介素8（IL-8）、干擾素（IFN-γ）和腫瘤壞死因子（TNF-α）的表達(dá),Western blot檢測(cè)JAK2、STAT3、P-JAK2、P-STAT3、P53和P21蛋白表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)IL-8、IFN-γ和TNF-α的信使RNA 水平（mRNA）。結(jié)果缺血再灌注損傷增加 BUN、Cr、P-JAK2、P-STAT3、P53、P21、MDA、IL-8、IFN-γ和TNF-α的表達(dá)以及腎組織病理改變，同時(shí)減少CAT、GPX與SOD表達(dá)。而百里醌治療，可減少BUN、Cr、P-JAK2、P-STAT3、P53、P21、MDA、IL-8、IFN-γ 和 TNF-α 表達(dá)以及腎組織病理改變，增加 CAT、GPX 與SOD表達(dá)，3組之間JAK2和STAT3表達(dá)無(wú)差異。結(jié)論百里醌預(yù)處理可減輕腎缺血再灌注損傷，其作用機(jī)制部分是通過(guò)抑制JAK2/STAT3/P53信號(hào)通路介導(dǎo)的炎癥和氧化應(yīng)激。

百里醌；腎缺血再灌注損傷；炎癥；氧化應(yīng)激；JAK2/STAT3/P53

急性腎損傷（acute kidney injury，AKI）是臨床上常見(jiàn)的危重癥，好發(fā)于腎移植、腎部分切除術(shù)、心臟手術(shù)和膿毒癥等危重情況。其發(fā)病率和死亡率奇高，據(jù)報(bào)道，全世界AKI每年發(fā)病率為1330萬(wàn)，與AKI相關(guān)的死亡率為200萬(wàn)[1-2]。腎臟缺血再灌注損傷（renal ischemia reperfusion injury，IRI）是導(dǎo)致 AKI的主要原因，并嚴(yán)重影響病情的轉(zhuǎn)歸[3]。百里醌（Thymoquinone，Thy）是從Nigella sativa植物提取的一種物質(zhì)，具有抗凋亡、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫以及抗氧化應(yīng)激的活性[4-5]。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，Thy對(duì)腦、肝臟、腸等器官缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用[6-9]。本實(shí)驗(yàn)擬在動(dòng)物水平探討Thy預(yù)處理對(duì)炎癥和氧化應(yīng)激的影響以及相關(guān)機(jī)制，為臨床防治IRI提供理論和實(shí)驗(yàn)支持。

1 材料與方法

1.1 主要試劑、儀器和動(dòng)物

百里醌（上海哈森公司），無(wú)水乙醇（美國(guó)Sigma公司），水合氯醛（Google生物）。JAK2、P-JAK2、P-STAT3、STAT3（均美國(guó) CST 公司），P53和 P21（美國(guó) abgent公司），TRIzol reagent（美國(guó) Invitrogen公司），逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（美國(guó)GeneCopoeia公司），RT-PCR引物（擎科生物技術(shù)有限公司，訂單號(hào)SY14032221，序列見(jiàn)表1），PAS試劑由同濟(jì)醫(yī)學(xué)院病理實(shí)驗(yàn)室配制。紫外分光光度計(jì)（美國(guó)Thermo fisher）、逆轉(zhuǎn)錄儀（德國(guó) Eppendorf）、RT-PCR 儀（美國(guó) BIO-RAD IQ5）、顯微鏡（日本 Olympus BX51）及成像系統(tǒng)（日本HITMAS-30）均為同濟(jì)醫(yī)學(xué)院提供。SD大鼠，購(gòu)自武漢大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，SPF級(jí)，質(zhì)量合格證號(hào)430121021，飼養(yǎng)于同濟(jì)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，許可證號(hào)SYXK（鄂）2011-0027，設(shè)施使用證號(hào)00124722。

1.2 動(dòng)物模型的復(fù)制與分組

60只健康雄性SD大鼠，平均體重220～250克。隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham組），腎缺血再灌注損傷組（IRI組）和百里醌不同濃度組（Thy組）。Thy組在缺血前45 min給予 Thy 5、10、20和 40 mg/kg腹腔注射。Sham組和IRI組在同一時(shí)間給予等體積生理鹽水腹腔注射。IRI組和Thy組用無(wú)創(chuàng)血管夾夾閉左側(cè)腎蒂構(gòu)建IRI模型，Sham組操作同上，但不夾閉左側(cè)腎蒂。具體手術(shù)方式見(jiàn)參考文獻(xiàn)[9]。

1.3 標(biāo)本收集

再灌注24h后，行腹主動(dòng)脈取血，室溫下3000r/min離心10 min后取上清液送同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科檢測(cè)血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）和血清肌酐（Creatinine，Cr）。開(kāi)腹取左腎；1/3左腎置于多聚甲醛做石蠟切片，其余組織冷凍保存于-80°冰箱。

1.4 腎臟病理檢查

取腎臟石蠟包塊，4μm切片，脫蠟透明后由同濟(jì)醫(yī)院腎內(nèi)科實(shí)驗(yàn)室PAS試劑進(jìn)行染色，光鏡下觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)，半定量計(jì)數(shù)方法評(píng)估損傷程度，分別根據(jù)腎小管上皮細(xì)胞壞死、腎小管擴(kuò)張、刷狀緣脫落、管型等分級(jí)，5級(jí)評(píng)分如下：0分，正常；1分，＜25%；2分，25%～50%；3分，50%～75%；4分，＞75%。每只小鼠切片至少隨機(jī)選擇10個(gè)腎皮髓交界處視野（×400）[9]。見(jiàn)表 1。

1.5 Western blot測(cè)定 JAK2、STAT3、P-JAK2、P-STAT3、P53和P21的蛋白表達(dá)

取腎組織，加入裂解液，勻漿，收集上清液，蛋白定量后變性，SDS-PAGE電泳，轉(zhuǎn)膜，脫脂牛奶封閉1 h，4℃下一抗封閉過(guò)夜；37℃下二抗孵育1 h，ECL發(fā)光，X線片顯影、定影，凝膠圖像系統(tǒng)分析灰度值。

1.6 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)腎組織中白細(xì)胞介素8、腫瘤壞死因子和干擾素表達(dá)水平

表1 引物序列

采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR） 法檢測(cè)腎臟白細(xì)胞介素8（IL-8），腫瘤壞死因子（tumor necrosisfactor-α，TNF-α） 和干擾素（inteferon gamma，IFN-γ）的信使核糖核酸（mRNA）表達(dá)水平。稱(chēng)取適量腎臟組織，于液氮中研磨成粉末狀提取總RNA，紫外分光光度計(jì)測(cè)量濃度。引物序列見(jiàn)表1。采用兩步法PCR反應(yīng)，擴(kuò)增條件95℃預(yù)變性30 s；95℃變性 5 s，60℃退火延伸1 min。共 40個(gè)循環(huán)，得到每個(gè)樣本的CT值法，用得到的各樣本的Ct值按公式2-ΔΔCT計(jì)算相對(duì)表達(dá)量。

1.7 ELI SA檢測(cè)血清中I L-8、TN F-α、I FN-γ表達(dá)水平

按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)操作步驟檢測(cè)血清中IL-8、TNF-α、IFN-γ表達(dá)水平。

1.8 腎組織勻漿中丙二醛、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和超氧化物歧化酶含量檢測(cè)

按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定腎組織丙二醛（Malondialdehyde，MDA），過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的含量，具體步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)描述。計(jì)量資料組間比較采用方差分析，對(duì)等級(jí)資料使用非秩和檢驗(yàn)（Kruskal-WallisH檢驗(yàn)）進(jìn)行組間分析，兩兩比較則采用LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Thy預(yù)處理減輕腎缺血再灌注損傷

與Sham組比較，IRI組Cr和BUN表達(dá)增高（χ2=4.34和4.56，P=0.047和 0.045）。而 Thy組與IRI組比較，Cr和 BUN 均降低（χ2=4.17、4.88、5.25、5.56、6.16、6.54 和 5.72，P=0.048、0.041、0.036、0.029、0.013、0.025、0.011 和 0.021）。結(jié)果提示Thy預(yù)處理可以呈濃度依賴(lài)性減輕腎缺血再灌注損傷，在0～40 mg/kg范圍內(nèi)，Thy其最佳濃度為40 mg/kg。見(jiàn)表2。

2.2 Thy預(yù)處理可以減輕腎組織結(jié)構(gòu)的改變

與Sham組比較，IRI組腎小管明顯擴(kuò)張，大量腎小管細(xì)胞腫脹，空泡變性，壞死，刷狀緣脫落以及腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞大量浸潤(rùn)，其損傷評(píng)分為（4.5±1.0）分，而Sham組為（1.0±0.5）分，這提示腎臟損傷增加（χ2＝11.34，P=0.004）。而 Thy 40 mg/kg組與 IRI組比較，腎小管擴(kuò)張，細(xì)胞腫脹，空泡變性，壞死，刷狀緣脫落，以及腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)均明顯減少，其損傷評(píng)分為（1.5±0.5）分，這提示Thy組腎臟損傷明顯減輕（χ2=5.34，P=0.032）。結(jié)果顯示，Thy 40 mg/kg預(yù)處理能明顯減輕腎臟病理結(jié)構(gòu)改變。見(jiàn)圖1。

2.3 Thy預(yù)處理抑制JAK2/STAT3/P53信號(hào)通路激活

與 Sham 組比較，IRI組 P-JAK2，P-STAT3，P53和 P21表達(dá)增高（χ2=4.74、4.79、5.18和 7.83，P=0.045、0.047、0.038和 0.007），但 JAK2和 STAT3表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.76和3.12，P=0.063和0.085）。與 IRI組比較，Thy 40 mg/kg 組 P-JAK2，P-STAT3，P53和 P21 表達(dá)降低（χ2=4.66、4.96、5.11和 8.87，P=0.044、0.039、0.27 和 0.006），而 JAK2 和STAT3表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.55和3.86，P=0.076和0.057）。這提示Thy 40 mg/kg預(yù)處理可以抑制JAK2/STAT3/P53信號(hào)通路激活。見(jiàn)圖2、表3。

表2 百里醌對(duì)C r和BU N的影響 （n=10，μmol/L，±s）

表2 百里醌對(duì)C r和BU N的影響 （n=10，μmol/L，±s）

注：1）與 Sham 組比較，P ＜0.05；2）與 IRI組比較，P ＜0.05

組別BUN Sham組 14.22±2.76 7.21±1.42 IRI組 145.35±7.571） 91.45±4.641）Thy 5 mg/kg組 85.75±7.532） 60.32±3.512）Thy 10 mg/kg組 62.74±5.772） 45.22±3.472）Thy 20 mg/kg組 30.65±3.782） 22.35±2.382）Thy 40 mg/kg組 31.23±4.552） 21.35±3.382）Cr

圖1 Thy預(yù)處理對(duì)腎組織病理結(jié)構(gòu)的影響 （PAS染色×400）

圖2 Thy 預(yù)處理對(duì) P-JAK2、P-STAT3、JAK2、STATA3、P53和P21蛋白表達(dá)的影響

表3 Thy 對(duì) P-JAK2、P-STAT3、JAK2、STATA3、P53 和P21蛋白表達(dá)的影響 （n=10，±s）

表3 Thy 對(duì) P-JAK2、P-STAT3、JAK2、STATA3、P53 和P21蛋白表達(dá)的影響 （n=10，±s）

注：1）與 Sham組比較，P ＜0.05；2）與 IRI組比較，P ＜0.05

組別P-JAK2/JAK2P-STAT3/STAT3P53/β-actin P21/β-actin Sham 組 0.22±0.03 0.26±0.05 0.17±0.02 0.07±0.02 IRI組 1.41±0.121） 0.85±0.091） 0.76±0.041） 0.51±0.041）Thy組 0.55±0.072） 0.37±0.042） 0.44±0.032） 0.22±0.032）

2.4 Thy預(yù)處理可以減少促炎癥細(xì)胞因子TN F-α、I FN-γ和I L-8的表達(dá)

與Sham組比較，IRI組促炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ 和 IL-8 mRNA表達(dá)水平增高（χ2=4.58、4.76 和 4.91，P=0.045、0.043 和 0.041），而Thy 40 mg/kg組與IRI組比較，促炎癥細(xì)胞因子TNF-α，IFN-γ 和 IL-8 mRNA表達(dá)水平降低（χ2=4.66、4.74 和 5.03，P=0.044、0.042 和 P=0.038），見(jiàn)表4。

2.5 Thy預(yù)處理減少促炎癥細(xì)胞因子TN F-α、I FN-γ和I L-8的分泌

與Sham組比較，IRI組促炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ 和 IL-8分泌水平增高（χ2=5.73、4.82和5.04，P=0.028、0.043 和 0.039），而 Thy 40 mg/kg組與IRI組比較，促炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-8分泌水平降低（χ2=5.23、5.82和 5.94，P=0.036、0.028 和 0.024），見(jiàn)表 5。

2.6 Thy預(yù)處理減少M(fèi) D A表達(dá)

Sham 組 MDA 含量為（100±20）pg/ml，IRI組MDA 含量為（2 200±300）pg/ml，Thy組 MDA 含量為（600±150）pg/ml。與 Sham 組比較，IRI組 MDA 含量增高（χ2=15.82，P=0.001），而 Thy 40 mg/kg組與IRI組比較，MDA含量明顯降低（χ2=4.62，P=0.047）。

2.7 Thy預(yù)處理增加C AT、G Px和SO D的含量

與Sham組比較，IRI組CAT、GPx和SOD表達(dá)降低 （χ2=10.73、9.82 和 11.04，P=0.006、0.008 和0.004），而 Thy 40 mg/kg組與 IRI組比較，CAT、GPx和 SOD 的表達(dá)增高（χ2=4.99、5.82和 5.36，P=0.035、0.025 和 0.037），見(jiàn)表 6。

表4 Thy對(duì)TN F-α、I FN-γ和I L-8 mR N A表達(dá)水平的影響（n=10，±s）

表4 Thy對(duì)TN F-α、I FN-γ和I L-8 mR N A表達(dá)水平的影響（n=10，±s）

注：1）與 Sham 組比較，P ＜0.05；2）與 IRI組比較，P ＜0.05

組別IL-8 Sham組 0.95±0.10 IRI組 7.50±0.751）Thy 40 mg/kg 組 2.50±0.402）IFN-γ 1.00±0.10 1.00±0.05 12.00±1.501） 5.00±0.401）5.00±0.502） 1.50±0.502）TNF-α

表5 Thy對(duì)TN F-α，I FN-γ和I L-8分泌水平的影響（n=10，pg/ml，±s）

表5 Thy對(duì)TN F-α，I FN-γ和I L-8分泌水平的影響（n=10，pg/ml，±s）

注：1）與 Sham組比較，P ＜0.05；2）與 IRI組比較，P ＜0.05

組別IL-8 Sham組 100±20 IRI組 750±501）Thy 40 mg/kg 組 350±402）IFN-γ 100±10 120±20 1200±2001） 550±501）400±1502） 200±302）TNF-α

表6 Thy對(duì)C AT，G Px和SO D的表達(dá)影響（n=10，pg/ml，±s）

表6 Thy對(duì)C AT，G Px和SO D的表達(dá)影響（n=10，pg/ml，±s）

注：1）與 Sham組比較，P ＜0.05；2）與 IRI組比較，P ＜0.05

組別SO Sham組 117 IRI組 28±GPx 98±7 110±15 30±51） 32±41）2） 2）CAT D±9 51）Thy 40 mg/kg組 65±72）61±570±5

3 討論

目前，急性腎損傷乃至急性腎功能衰竭在臨床上的發(fā)生率很高，其預(yù)后也差。作為急性腎損傷常見(jiàn)原因的腎缺血再灌注損傷的治療，目前也越來(lái)越成為關(guān)注的熱點(diǎn)。既往研究表明，缺血再灌注損傷的發(fā)病機(jī)制包括鈣離子超載，炎癥反應(yīng)，細(xì)胞凋亡和氧自由基增加[1-2]。腎臟缺血再灌注損傷可通過(guò)多條信號(hào)途徑如JAK2/STAT3，PI3K/AKT等對(duì)腎臟損傷進(jìn)行調(diào)節(jié)[3-4]。近來(lái)，P65信號(hào)蛋白也成為腎臟缺血再灌注損傷致病機(jī)制的研究熱點(diǎn)[10]。

既往研究發(fā)現(xiàn)，Thy對(duì)腦，肝臟，腸道等器官缺血再灌注損傷具有明顯的保護(hù)作用，還可增加GPx，MDA以及IL-6等細(xì)胞因子水平，在一定程度上是通過(guò)抑制氧化應(yīng)激以及炎癥反應(yīng)誘發(fā)的損傷而下調(diào)器官損害用[6-9]。多種研究提示，Thy可與多種信號(hào)傳導(dǎo)分子相互影響，對(duì)MAPK、Ras、PI3K/AKT等多條胞內(nèi)信號(hào)途徑產(chǎn)生作用，調(diào)控機(jī)體功能[4-5]。

有研究顯示，JAK2/STAT3信號(hào)途徑的激活對(duì)細(xì)胞增殖、炎癥、凋亡、氧化應(yīng)激乃至存活起著重要作用[11]。本實(shí)驗(yàn)主要在活體大鼠研究Thy預(yù)處理對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷的作用，并研究Thy對(duì)JAK2/STAT3-P65在腎臟再灌注損傷過(guò)程中的作用，結(jié)果顯示，Thy在一定程度上對(duì)JAK2及STAT3的激活具有抑制作用，以及可減小JAK2/STATA3的靶向分子P21的表達(dá)，表明Thy對(duì)JAK2/STAT3信號(hào)通路的激活具有抑制效應(yīng)。此外，P65蛋白是JAK2/STATA3信號(hào)通路的下游分子[11]，其對(duì)氧化應(yīng)激以及炎癥反應(yīng)都具有調(diào)控作用，可調(diào)節(jié)如MDA、SOD、IL-6、TNF-α以及趨化因子的表達(dá)[12]。但對(duì)腎臟P65信號(hào)蛋白的表達(dá)是否具有調(diào)節(jié)作用，目前尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Thy預(yù)處理可明顯減少促炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-8和IFN-γ以及促氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA表達(dá)，但可加抗氧化應(yīng)激產(chǎn)物CAT、GPx和SOD的表達(dá)，其調(diào)節(jié)機(jī)制可能與抑制缺血誘發(fā)的JAK2/STAT3信號(hào)通路激活，從而抑制P65信號(hào)蛋白的活化，進(jìn)而抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，從而起到了腎臟保護(hù)作用，但其具體作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，Thy能減少氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生，其作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制JAK2/STAT3-P65信號(hào)通路，從而對(duì)腎臟缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。但是，在動(dòng)物體內(nèi)，Thy調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路的具體機(jī)制極其復(fù)雜，對(duì)于腎臟損傷后JAK2/STAT3-P65信號(hào)通路的變化以及腎臟缺血再灌注損傷確切的作用機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究。

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（張蕾 編輯）

Influence of Thymoquinone pretreatment on renal ischemiareperfusion injury in rats

Xiao-hong Song,Cheng-xu Li,Yang Wu,Yuan Cai,Jun-wu Dong
(Department of Nephrology,Puai Hospital of Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan,Hubei 430034,China)

ObjectiveTo explore the influence of Thymoquinone(Thy)on kidney ischemia-reperfusion injury(IRI)and the mechanism.MethodsSixty male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation(sham)group,IRI group and IR plus different concentration of Thy preconditioning groups.Thy groups were preconditioned with Thy(5,10,20 and 40 mg/kg)by intraperitoneal injection at 45 min prior to operation,and the other 2 groups were pretreated by equal volume of saline.The rats in the IRI and Thy groups were kept in 37℃infant incubators for 45 min after their left renal pedicles were clamped with noninvasive endoclips,and then their right kidneys were removed.The rats in the sham group underwent the same process,except for clamping the left renal pedicles.After 24-h reperfusion,blood samples and renal tissues were collected.The pathological changes of kidney tissues were observed using PAS staining.The expression levels of serum creatinine(Cr),urea nitrogen(BUN),IL-8,IFN-γ,TNF-α,MDA,CAT,GPX and SOD were measured by ELISA.The expression of JAK2,STAT3,p-JAK2,p-STAT3,p53 and p21 were measured by Western blot.Moreover,the mRNA levels of IL-8,IFN-γ and TNF-αwere examined by RT-PCR.ResultsIRI markedly enhanced renal pathological changes and the expressions of BUN,Cr,p-JAK2,p-STAT3,p53,p21,MDA,IL-8,IFN-γ and TNF-α,meanwhile reduced the expressions of CAT,GPX and SOD.Thymoquinone pretreatment significantly decreased renal pathological changes and the expressions ofBUN,Cr,p-JAK2,p-STAT3,p53,p21,MDA,IL-8,IFN-γ and TNF-α,at the same time up-regulated the expressions of CAT,GPX and SOD.There was no significant difference in the expression of JAK2 or STAT3 among the three groups.ConclusionsThymoquinone pretreatment can alleviate kidney ischemia-reperfusion injury in rats partly by inhibiting inflammation and oxidative stress mediated by JAK2/STAT3/p53 signaling pathway.

Thymoquinone;renal ischemia-reperfusion injury;inflammation;oxidative stress;JAK2/STAT3/p53

R-332

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.13.004

1005-8982（2017）13-0019-05

2016-12-05