于 敏 林哲洙 張 紅

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院普外科，遼寧 錦州 121001)

胃腺癌中Aurora激酶-A、-B表達及其與細胞增殖的相關(guān)性

于 敏 林哲洙 張 紅

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院普外科，遼寧 錦州 121001)

目的分析胃腺癌中Aurora激酶-A、-B的表達及與細胞增殖的相關(guān)性。方法79例經(jīng)病理醫(yī)師確診為胃腺癌并行手術(shù)根治的患者為研究組，術(shù)后常規(guī)留取組織；35例非腫瘤性胃黏膜組織為對照組。采用免疫組化SP法檢測兩組Aurora激酶-A、-B和Ki67的表達。結(jié)果研究組Aurora激酶-A、-B和Ki67陽性率明顯高于對照組(P<0.001)，研究組Aurora激酶-A、-B和Ki67陽性率均與腫瘤最大徑、浸潤深度密切相關(guān)；Aurora激酶-A、-B陽性率均與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管累犯密切相關(guān)。線性相關(guān)分析顯示研究組Aurora激酶-A、-B和Ki67表達呈正相關(guān)。結(jié)論胃腺癌中Aurora激酶-A、-B高表達是促進腫瘤形成和進展的重要蛋白因素，二者與細胞增殖明顯相關(guān)。

Aurora激酶-A；Aurora激酶-B；細胞增殖

胃腺癌發(fā)病與長期的潰瘍及幽門螺桿菌的刺激有關(guān)，病變形成中多種蛋白表達失調(diào)對病變進展有重要作用〔1,2〕。Aurora激酶-A、-B是Aurora激酶家族中的成員，屬于絲氨酸/蘇氨酸激酶，除了參與細胞有絲分裂之外，還參與多種生物學(xué)進程。目前認(rèn)為二者是新的癌基因，其可能對細胞增殖及細胞遷移有一定作用〔3,4〕。本研究針對胃腺癌患者術(shù)后組織中Aurora激酶-A、Aurora激酶-B和Ki67蛋白的表達進行檢測，分析其臨床意義及相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2014年3月至2016年7月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院診斷為胃腺癌同時行根治手術(shù)的患者79例為研究組，全部經(jīng)術(shù)后病理醫(yī)師明確診斷，并符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男40例，女39例，年齡41～89(平均63.2)歲。其中高分化10例，中分化20例，低分化49例?；颊呋蚣覍俸炇鹬橥鈺?。非腫瘤性胃黏膜組織35例為對照組，其中男18例，女17例，年齡42～79(平均59.3)歲，兩組常規(guī)資料無明顯差異。

1.2Aurora激酶-A、-B和Ki67檢測 術(shù)后組織常規(guī)送病理科，甲醛溶液固定，由病理醫(yī)師取材、脫水，包埋，切取4 μm切片于膠片上進行Aurora激酶-A、-B和Ki67表達的檢測，應(yīng)用免疫組化SP法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。嚴(yán)格說明書進行操作，做好質(zhì)量控制，減少人為誤差。

1.3Aurora激酶-A、-B和Ki67表達的判定 免疫組化的實驗結(jié)果均應(yīng)用Olympus光學(xué)顯微鏡進行觀察，由病理醫(yī)師應(yīng)用盲法觀察判讀。Aurora激酶-A、-B的陽性部位是細胞核和(或)細胞質(zhì)，Ki67的陽性部位是細胞核，以染成棕黃色定為陽性細胞，染色較為密集的區(qū)域進行觀察，共選擇3個視野(400倍)，取平均值。Aurora激酶-A、-B以<5%定為陰性，以≥5%定為陽性。Ki67以<25%定為陰性，以≥25%定為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組Aurora激酶-A、 -B陽性率和Ki67指數(shù)比較 兩組Aurora激酶-A、 -B陽性率和Ki67指數(shù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)，見表1。

表1 兩組Aurora激酶A、 Aurora激酶B陽性率和Ki67指數(shù)的比較〔n(%)〕

2.2研究組Aurora激酶-A、 -B陽性率和Ki67指數(shù)在不同臨床特征中比較 Aurora激酶-A、-B和Ki67陽性率均與腫瘤最大徑、浸潤深度密切相關(guān)(P<0.05)；Aurora激酶-A、-B陽性率均與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管累犯密切相關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 研究組中Aurora激酶-A、-B陽性率和Ki67指數(shù)在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3研究組中Aurora激酶-A、 -B陽性率和Ki67指數(shù)的相關(guān)性 Aurora激酶-A和Ki67(r=0.51,P=0.035)、Aurora激酶-B和Ki67指數(shù)(r=0.48,P=0.035)呈正相關(guān)。

3 討 論

Aurora激酶家族是近年來研究較多的有絲分裂蛋白激酶，參與中心體的成熟、分離、紡錘體的組裝及染色體濃集等多種細胞學(xué)事件〔5〕。其家族包括3個成員，其中Aurora激酶-A、 -B的作用較為特異，且與腫瘤形成關(guān)系最密切〔6〕。Aurora激酶-A定位于20q13.2，Aurora激酶-B定位于17p13.1，都在易位、缺失或擴增活躍的染色體區(qū)域，因此其具有顯著的不穩(wěn)定性〔7,8〕。有觀點認(rèn)為Aurora激酶-B是染色體的過客蛋白，前期和中期附著在著絲粒上，后期附著于微管上，此時Aurora激酶-B能使組蛋白H3磷酸化，在分裂中期參與調(diào)節(jié)染色體的雙定位及其分離〔9,10〕。齊曉玲〔11〕觀察Aurora激酶-A、 -B在子宮內(nèi)膜樣癌中的表達，發(fā)現(xiàn)二者的表達升高，認(rèn)為二者高表達對腫瘤進展及細胞增殖均有明顯的促進作用。Ki67是經(jīng)典的細胞增殖標(biāo)志蛋白，存在于細胞周期的G1、S、G2和M期，其蛋白表達在細胞核中，其功能與細胞有絲分裂密切相關(guān)。

本實驗結(jié)果提示胃腺癌Aurora激酶-A、-B的表達升高在腫瘤形成中起到癌基因的作用。二者促進腫瘤的具體功能仍不清楚，相關(guān)研究認(rèn)為其可能與多種位點及蛋白磷酸化有一定關(guān)聯(lián)，通過磷酸化作用參與腫瘤發(fā)展〔12〕。有學(xué)者認(rèn)為Aurora激酶-A可能通過對P53等多個位點的絲氨酸磷酸化，從而對P53達到滅活效應(yīng)，提高腫瘤的生長和浸潤潛能〔13〕。本文結(jié)果提示Aurora激酶-A、Aurora激酶-B和Ki67三者高表達對腫瘤生長和浸潤起重要促進作用。Aurora激酶-A、-B二者對腫瘤的轉(zhuǎn)移可能有一定的促進作用，即二者參與腫瘤的淋巴道播散和血管侵襲，這可能涉及腫瘤的黏附功能及細胞外基質(zhì)的降解等作用，這也是二者作為癌基因啟動的促腫瘤增殖的重要功能之一。Aurora激酶-A、-B高表達是促進腫瘤細胞增殖的重要蛋白因素〔14,15〕。也有學(xué)者認(rèn)為Aurora激酶-A、-B可能通過其他細胞因子等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)發(fā)揮作用，促進腫瘤的增殖和進展〔4〕，但是這種介導(dǎo)細胞因子的作用是間接的增殖調(diào)節(jié)過程，涉及基因、蛋白等因素眾多，其具體機制需更多基礎(chǔ)實驗證實〔16,17〕。

1Chen L,Li X,Wang GL,etal.Clinicopathological significance of overexpression of TSPAN1,Ki67 and CD34 in gastric carcinoma〔J〕.Tumori,2008;94(4):531-8.

2Rew JS,Koo C,Kim HS,etal.The expression of topoisomerase Ⅱα and Ki67 in the gastric carcinoma〔J〕.Gastroenterology,1998;114(4):A666-7.

3Reiter R,Gais P,Jütting U,etal.Aurora kinase A messenger RNA overexpression is correlated with tumor progression and shortened survival in head and neck squamous cell carcinoma〔J〕.Clin Cancer Res,2006;12(17):5136-41.

4Tanaka S,Arii S,Yasen M,etal.Aurora kinase B is a predictive factor for the aggressive recurrence of hepatocellular carcinoma after curative hepatectomy〔J〕.Brit J Surg,2008;95(5):611-9.

5高志波,萬經(jīng)海,程宏偉,等.Aurora激酶與人類腫瘤的研究進展〔J〕.中華腫瘤防治雜志,2007;14(24):1907-10.

6Mendiola M,Barriuso J,Marino-Enriquez A,etal.Aurora kinases as prognostic biomarkers in ovarian carcinoma〔J〕.Hum Pathol,2009;40(5):631-8.

7田富國,羅 飛,趙浩亮.Aurora激酶A在三陰性乳腺癌中的表達及與臨床病理特征的相關(guān)性〔J〕.中國藥物與臨床,2011;11(s1):5-7.

8李國權(quán),宮琳琳,鄒麗娟,等.Aurora-A激酶與惡性腫瘤研究進展〔J〕.國際腫瘤學(xué)雜志,2004;31(2):103-6.

9Hegyi K,Egervári K,Sándor Z,etal.Aurora kinase B expression in breast carcinoma:cell kinetic and genetic aspects〔J〕.Pathobiology,2012;79(6):314-22.

10Kwon YJ,Lee SJ,Koh JS,etal.Expression patterns of aurora kinase B,heat shock protein 47,and periostin in esophageal squamous cell carcinoma〔J〕.Oncol Res,2009;18(4):141-51.

11齊曉玲.老年子宮內(nèi)膜樣腺癌患者癌組織Aurora-A、-B和TPX2表達及相關(guān)性〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2014；34(14):3869-71.

12Mao JH,Wu D,Perez-Losada J,etal.Crosstalk between Aurora-A and p53:frequent deletion or downregulation of Aurora-A in tumors from p53 null mice〔J〕.Cancer Cell,2007;11(2):161-73.

13Scarpini S,Rouprêt M,Renard-Penna R,etal.Impact of the expression of Aurora-A,p53,and MIB-1 on the prognosis of urothelial carcinomas of the upper urinary tract〔J〕.Urol Oncol,2012;30(2):182-7.

14Ali HR,Dawson SJ,Blows FM,etal.Aurora kinase A outperforms Ki67 as a prognostic marker in ER-positive breast cancer〔J〕.Brit J Cancer,2012;106(11):1798-806.

15Ramani P,Nash R,Rogers CA.Aurora kinase A is superior to Ki67 as a prognostic indicator of survival in neuroblastoma〔J〕.Histopathology,2014;66(3):370-9.

16Garcia-Fernandez E,De Diego JI,Collantes-Bellido E,etal.Aurora B kinase expression in laryngeal squamous cell carcinoma and its prognostic implications〔J〕.Histopathology,2011;58(3):368-76.

17Yasen M,Mizushima H,Mogushi K,etal.Expression of Aurora B and alternative variant forms in hepatocellular carcinoma and adjacent tissue〔J〕.Cancer Sci,2009;100(3):472-80.

〔2017-04-15修回〕

(編輯 苑云杰)

R735.2

A

1005-9202(2017)18-4586-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.18.072

張 紅(1969-)，男，博士，教授，主要從事普外科研究。

于 敏(1978-)，女，主治醫(yī)師，主要從事普外科臨床研究。