陳瓊

摘要：銀屑病是一種常見并易復發(fā)的慢性炎癥性皮膚病。迄今為止，銀屑病真正的發(fā)病原因及其機制國內(nèi)外研究者均未能完全闡明。本文就多年來各種銀屑病模型的研究進行整理分析，為新模型的發(fā)展方向提供參考。發(fā)現(xiàn)雖然各種模型在一定程度上為銀屑病的藥物開發(fā)及機制研究提供了新思路新方法，但是均只能在短期內(nèi)局限性的模仿銀屑病的部分生理病理特點，并沒有真正意義上反映人類銀屑病的實際發(fā)病情況。因此，銀屑病模型的完善還需我們從分子水平到遺傳環(huán)境等各個因素出發(fā)，更深入更全面的研究。

關鍵詞：銀屑??；動物模型；細胞模型；發(fā)病機制

中圖分類號：R758.63 文獻標識碼：A 文章編號：1006-1959（2017）18-0038-03

銀屑病俗稱“牛皮癬”，是一種常見并易復發(fā)的慢性炎癥性皮膚病。紅斑、白色鱗屑、薄膜現(xiàn)象、點狀出血現(xiàn)象是本病主要臨床特征，部分患者伴有關節(jié)病變。組織病理學主要表現(xiàn)為角質(zhì)增厚，主要是角化不全、乳頭部的血管扭曲擴張、真皮上部有炎細胞浸潤[1]。銀屑病已成為皮膚科領域重點研究的疾病之一。迄今為止，銀屑病真正的發(fā)病原因及其機制國內(nèi)外研究者都未能完全闡明。本文就多年來各種銀屑病模型的研究進行整理分析，了解各種模型的作用特點及限制，為新模型的發(fā)展方向提供參考。

1 自發(fā)性動物模型

該種動物模型是指實驗動物在長期的進化過程中未經(jīng)任何外部的人工處置，在自然情況下發(fā)生的疾病模型，該種動物模型自發(fā)突變且產(chǎn)生銀屑病樣病變，其組織病理主要表現(xiàn)為表皮過度增生，主要是棘層肥厚、中性粒細胞巨噬細胞和肥大細胞浸潤、真皮血管擴張及新生等。

目前用于銀屑病研究的常見的動物模型主要包括缺皮脂突變鼠（asebia，ab）、魚鱗狀皮膚突變小鼠（ichthyosis，ic）、無毛突變鼠（hair-less，hr）和鱗片狀皮膚突變鼠（flaky skin，fsn）。該系小鼠的某些病變特征與人類銀屑病有一定的相似性，均能從某一角度闡明銀屑病的發(fā)病機制。因此，研究肥大細胞及神經(jīng)肽P物質(zhì)在銀屑病發(fā)病機制中所起的作用可選asebia突變鼠模型。鱗片狀皮膚突變鼠不僅皮膚外觀具有銀屑病樣皮損，組織病理學特點與人類銀屑病的發(fā)生、發(fā)展也非常相似，幫助人類從分子學角度研究銀屑病的發(fā)病機制，已成為自發(fā)性動物模型中最常用的研究對象之一[2]。但是，自發(fā)性突變鼠因其表皮缺乏T淋巴細胞，環(huán)孢菌素等免疫抑制劑對其治療不顯著，所以用于銀屑病發(fā)病機制和藥物的研究又有其自身的局限性。

2 誘發(fā)性動物模型

在動物皮膚上用人工刺激的方法，使其出現(xiàn)類似人類銀屑病的組織病理特征。通常采用的方法有紫外線照射、外涂化學刺激劑或藥物、角質(zhì)層剝脫及損傷愈合等。Gaylarde[3]等人將普萘洛爾涂在豚鼠耳、背側(cè)皮膚上造成了表皮角化不全和、棘層肥厚、角質(zhì)層內(nèi)細胞浸潤等類似銀病的病理改變。以上各種方法操作簡便，重復性好，在早期利用動物模型研究銀屑病中發(fā)揮過重要的作用，主要用于表皮增生動力學和藥物篩選等。但是，此類模型所表現(xiàn)的病理變化僅是對表皮損傷的遲發(fā)反應，與人類銀屑病的總體特征相差甚遠，目前已很少采用。

3 評價藥效動物模型

該型動物模型主要有以下兩種傳統(tǒng)的動物模型[4]：①雌鼠陰道上皮模型，動情期小鼠因雌激素刺激其陰道上皮細胞增生活躍、轉(zhuǎn)換加快，與人類銀屑病角化增生、角化不全相類似。故藥物若能抑制小鼠陰道上皮細胞的增殖，則認為其具有抗銀屑病作用。②小鼠尾部鱗片模型，小鼠尾鱗片因表皮正常角化缺乏顆粒層，其角化不全與人類銀屑病表皮相似，故可模擬銀屑病角化不全的特點。此類模型用于篩選抗銀屑病藥物經(jīng)濟易行，國內(nèi)外研究者沿用至今。

4 異體移植動物模型

將銀屑病患者皮損組織移植到免疫缺陷小鼠身上，使其存活生長，并在一段時間內(nèi)維持原來的大部分特征[5]。裸鼠是先天性無胸腺的免疫缺陷小鼠，在一定情況下不排斥來自異種動物的移植組織，故裸鼠可作為人皮膚組織的受體。早在1975年Krueger [6]等就將人類銀屑病皮膚組織移植于裸鼠，經(jīng)11 w觀察后分析裸鼠能維持來自于人體的銀屑病病變皮損，可以在裸鼠活體上進行銀屑病研究。目前，應用較為廣泛的模型是嚴重聯(lián)合免疫缺陷?。╯evere combined immunodeficiency disease，SCID） 免疫缺陷鼠模型，由于淋巴細胞抗原受體基因重排受阻，鼠產(chǎn)生體液免疫和細胞免疫系統(tǒng)缺陷，可接受異種組織移植而不發(fā)生排斥反應，因此可將銀屑病患者的皮皮移植到SCID鼠。移植皮膚存活率高且存活時間達6 w，部分SCID 鼠保留了較高標準的NK 細胞量和功能，故時間可達數(shù)月并能保持皮損原有病變特征[7-8]。AGR129 鼠因缺乏活性重組酶基因而導致缺乏 T、B淋巴細胞和未分化的NK細胞，故可維持移自與人類銀屑病皮膚，建立異體移植動物模型[9]。

相比其他只能模擬銀屑病的部分病理改變的動物模型，上述幾種鼠模型能較完整地維持銀屑病的相對復雜的組織病理學及免疫變化，所以是銀屑病短期內(nèi)活體研究、細胞動力學研究合適的動物模型。但該類小鼠免疫功能嚴重缺陷易被各種微生物感染，故其飼養(yǎng)環(huán)境較為嚴格，成本較高；該模型移植皮片無法長期維持銀屑病特征，僅適于短期研究，其反映的銀屑病病理特征也只局限于皮損本身，不能完全模擬發(fā)病過程。上述原因均限制了異體移植動物模型的進一步推廣應用。

5 轉(zhuǎn)基因動物模型

研究者通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將外源性基因?qū)雱游锛毎騽h除內(nèi)源性基因建立轉(zhuǎn)基因動物模型[10]。自1990年起，該模型已被廣泛的用于不同疾病發(fā)病機制的研究。銀屑病是一種與多基因相關的遺傳傾向性疾病，故目前銀屑病轉(zhuǎn)基因鼠模型種類繁多。這些轉(zhuǎn)基因鼠雖然都能表現(xiàn)出不同程度的銀屑病樣特征，但每個模型都有自身特定增殖的細胞因子。根據(jù)銀屑病免疫學方面的發(fā)病機制可將該模型分為以下幾種[11]。endprint

5.1與血管異常生成有關的轉(zhuǎn)基因動物模型

研究者通過各自的啟動因子建立血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）轉(zhuǎn)基因小鼠模型和Tie轉(zhuǎn)基因小鼠模型。VEGF作為促血管生成因子，可增加微血管通透性，使內(nèi)皮細胞分裂、增殖加速，促進新生血管形成。其在銀屑病患者的血清及皮損中都高表達[12]。

5.2與SATA3途徑相關的轉(zhuǎn)基因動物模型

SATA3是信號轉(zhuǎn)導因子和轉(zhuǎn)錄激活因子家族的成員之一，在銀屑病發(fā)病機制中起信號轉(zhuǎn)導作用，需KRT5 或 KRT14等激活子將其轉(zhuǎn)入鼠細胞建立轉(zhuǎn)基因模型。研究表明，IL-20、IL-6、T細胞等都能激活SATA3途徑，而SATA3途徑的激活又能促進VEGF的分泌，促進血管形成。SATA3已成為臨床治療銀屑病的作用靶點。

5.3與轉(zhuǎn)化生長因子β家族有關的轉(zhuǎn)基因動物模型

轉(zhuǎn)化生長因子超家族（transforming growth factor，TGF）包括TGF-α與TGF-βs兩大類。TGF-β是一類具有多重生物學作用的調(diào)節(jié)蛋白，如細胞增殖、血管生成、細胞有絲分裂、傷口愈合及骨生成等。Li[13]等建立用角蛋白K5引導TGF-β1在KC基底層及毛囊的轉(zhuǎn)基因動物模型，新生小鼠出現(xiàn)類似銀屑病樣表現(xiàn)，組織病理伴隨有炎癥細胞浸潤及細胞因子的大量表達等。

銀屑病轉(zhuǎn)基因動物模型還可從各個角度進一步深入的總結(jié)研究，以上各類轉(zhuǎn)基因動物雖都可表現(xiàn)出銀屑病樣皮損，但仍不能全面的解釋疾病發(fā)病中各種復雜因素的關聯(lián)。

6 T淋巴細胞相關性動物模型

隨著免疫學研究的逐步深入，研究者發(fā)現(xiàn)T淋巴細胞功能的異常在銀屑病中起著非常重要的影響作用[14]。因此，為了更好的探討T細胞與銀屑病的相關性，我們把與T細胞相關的銀屑病動物模型歸為一類。其中最著名的是異體移植聯(lián)合T細胞注射動物模型。研究者將來源于銀屑病患者的未受累或受累皮膚移植至SCID鼠，同時注射供體血液來源或皮損來源的T細胞，多數(shù)SCID鼠移植皮膚發(fā)生鱗屑樣改變，皮膚組織病理提示角質(zhì)層增厚、顆粒層消失、T淋巴細胞浸潤等。Schon MP[15]等向免疫缺陷鼠體內(nèi)注射幼稚CD4+T細胞，經(jīng)1～2個月飼養(yǎng)后，小鼠皮膚出現(xiàn)銀屑病樣改變。此類模型打破了傳統(tǒng)的單因素的造模思維，把兩種致病條件結(jié)合在同一個模型中，證明了T細胞在銀屑病發(fā)病發(fā)展過程中至關重要的作用，但是人類T細胞的作用機理較為復雜，還需要我們從各個角度更深入的研究。

7體外細胞模型

體外細胞模型經(jīng)過了近一個世紀的發(fā)展，以它針對性強、操作簡便、重復性好等特點，現(xiàn)已經(jīng)成為研究者較為青睞的研究模型，對銀屑病的研究也發(fā)揮了巨大的作用。人永生化角質(zhì)形成細胞即HaCaT，其免疫學特征與表皮角質(zhì)形成細胞非常相似，被廣泛的用于抗銀屑病藥物活性的研究[16]，岑建萍等通過該模型研究表明銀屑病誘發(fā)藥物如碳酸鋰、鹽酸普萘洛爾和二磷酸氯喹可能影響某些細胞因子（如IL-8、IL-6mRNA）的產(chǎn)生和表達，而這些因子在銀屑病皮損的炎癥性免疫反應過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用[17]。經(jīng)曉杰[18]等成功的建立了來源于人正常皮膚的角朊細胞體外細胞模型，并通過銀屑病患者淋巴細胞刺激后出現(xiàn)增殖，從而證明銀屑病存在免疫功能異常。

體外細胞模型可以用于研究藥物對細胞形態(tài)、增殖、凋亡等方面的影響，進行藥物評價；通過細 胞因子測定 、基因片段測序等技術(shù)對銀屑病發(fā)病機制 進行推測[19]。

8總結(jié)

銀屑病是皮膚科常見的一種慢性炎癥性疾病，對銀屑病發(fā)病機制的研究已經(jīng)成為皮膚科領域的一項重要課題。以上各模型均基于不同的發(fā)病機制而建立，為人類銀屑病的研究提供了依據(jù)，在一定程度上為銀屑病的藥物開發(fā)及機制研究提供了新思路新方法，但是各類模型均只能在短期內(nèi)局限性的模仿銀屑病的部分生理病理特點，并沒有真正意義上反映人類銀屑病的實際發(fā)病情況。當然，由于種屬差異、遺傳因素和環(huán)境因素等都局限了以上模型的發(fā)展。因此，銀屑病模型的完善還需我們從分子水平到遺傳環(huán)境等各個因素出發(fā)，更深入更全面的研究。

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編輯/王朵梅endprint