楊海燕，殷莉麗，曾暉，李敏，夏琴，周進

·品種品質(zhì)·

海拔、坡向和年限與豬苓產(chǎn)量、質(zhì)量相關(guān)性研究

楊海燕1，殷莉麗1，曾暉1，李敏1，夏琴2，3，周進2，3

目的：探索豬苓適宜生長海拔范圍、坡向及最佳采收年限，為四川豬苓基地選址和規(guī)?；斯ぴ耘嗵峁┛茖W(xué)參考。方法：采用區(qū)組方法進行豬苓栽培試驗，單因素考察海拔高度、坡向和生長年限對豬苓產(chǎn)、質(zhì)量的影響。棋盤式取樣法取樣，烘干稱重計算產(chǎn)量，2015版中國藥典一部中豬苓項下含量測定方法測定麥角甾醇含量，硫酸-蒽酮法測定豬苓多糖含量。F檢驗對結(jié)果進行分析。結(jié)果：不同海拔條件下豬苓增產(chǎn)率在26.00%～59.52%之間，豬苓多糖含量在1.62%～2.30%之間，麥角甾醇含量在0.07%～0.13%之間；不同坡向條件下豬苓增產(chǎn)率在25.22%～64.50%之間，豬苓多糖含量在1.79%～1.88%之間，麥角甾醇含量在0.12%～0.15%之間；2～5.5年生豬苓增產(chǎn)率在18.33%～58.50%之間，豬苓多糖含量在1.30%～2.12%之間，麥角甾醇含量在0.07%～0.15%之間。結(jié)論：不同海拔段和不同坡向豬苓產(chǎn)量、質(zhì)量差異顯著。1200 m～1250 m海拔范圍內(nèi)，陰坡坡向更適合栽培豬苓，其中五年生豬苓質(zhì)量穩(wěn)定、產(chǎn)量高宜作商品。

豬苓；海拔；坡向；生長年限；麥角甾醇；豬苓多糖

豬苓為多孔菌科真菌Polyporus umbellatus(Pers.)Fries的干燥菌核[1]。現(xiàn)代研究表明，豬苓所含麥角甾醇、豬苓多糖等成分具有抗腫瘤、防治肝炎等作用[2-4]，且臨床療效明顯。近年來，因豬苓新作用的研究開發(fā)，其市場需求增大，導(dǎo)致野生豬苓被大量采挖，使其資源量驟降，現(xiàn)有野生豬苓已經(jīng)不能滿足市場基本需求。市場價格從2003年40元/Kg左右，持續(xù)上漲至今的280元/Kg左右。目前，全國多地實現(xiàn)了豬苓大面積人工栽培，暫時緩解了市場供不應(yīng)求的現(xiàn)狀，但現(xiàn)在人工栽培的豬苓產(chǎn)量、質(zhì)量均不穩(wěn)定，且栽培成本高、栽培技術(shù)尚待完善，導(dǎo)致豬苓栽培效益較低，王建中等[5]從仿野生豬苓進行了人工栽培技術(shù)研究，胡平等[6]對四川地區(qū)豬苓栽培技術(shù)進行了研究。他們對豬苓的生長環(huán)境均有相關(guān)描述，但未進行詳細(xì)分析。

筆者對四川南江豬苓栽培環(huán)境及生長年限進行相關(guān)研究，以期為生產(chǎn)高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)量的豬苓提供科學(xué)參考。

1 材料

1.1 儀器

UV-1100型TECHCOMP紫外可見分光光度計（上海天美科學(xué)儀器有限公司）；Agilent 1200 HPLC 高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；TPY-6A型土壤養(yǎng)分速測儀（浙江托普儀器有限公司）。

1.2 試藥與試劑

D(+)-無水葡萄糖對照品(批號：MUST-15041507，純度：98%，中國科學(xué)院成都生物研究所)；麥角甾醇對照品(批號：MUST-15051315，純度：99.99%，中國科學(xué)院成都生物研究所)。色譜甲醇（賽默飛世爾科技有限公司），其余試劑均為分析純。

種源由四川省中藥材有限責(zé)任公司提供，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)李敏教授鑒定為多孔菌科真菌豬苓Polyporus umbellatus(Pers.) Fries的菌核。

2 方法與結(jié)果

2.1 實驗設(shè)計

試驗地位于四川省巴中市南江縣砂壩鄉(xiāng)草壩村（東經(jīng)107°01'30″ ～107°01'59″，北緯32°33'45″～32°34'05″），山地，海拔在800 m ～2000 m之間，主要土質(zhì)有砂土、砂土含少量腐殖質(zhì)、砂土富含腐殖質(zhì)以及砂土混黃壤土。

從2011年起，每年4月進行春播，10月進行秋播[7]。根據(jù)種植基地地形地勢，均采用環(huán)山梯式[8]的方法栽培，每次栽培前對土地進行區(qū)域劃分、整理。每七根木材為一窖，每窖用種苓0.35Kg[9]。海拔依據(jù)地形選取1200～1480 m的范圍；土質(zhì)選取砂土、砂土含少量腐殖質(zhì)、砂土富含腐殖質(zhì)和砂土黃壤土的混合土壤等四種土質(zhì)；坡向選取陽坡、半陰半陽坡（五陰五陽坡）、陰坡（七陰三陽坡）等三個坡向進行栽培。

取樣方法，從栽種第三年開始采用棋盤式樣方法，每半年進行一次樣品采挖（每年4月上旬和10月中旬進行采挖）。采集樣品后去除泥沙，稱重，在50℃條件下烘干，再稱重，計算增產(chǎn)率。

增產(chǎn)率（%）=（G-M）*100%/M

式中：G為每窖樣品去除泥沙的重量（Kg），M為每窖的用種量（Kg）。

本次實驗考察豬苓產(chǎn)量以增產(chǎn)率計，質(zhì)量以藥典規(guī)定的麥角甾醇含量以及豬苓多糖含量進行評定。

2.2 麥角甾醇含量測定

參照《中國藥典》（2015年版）豬苓項下含量測定方法進行測定。

2.3 多糖含量測定

參照夏琴等[10]采用的硫酸-蒽醌法測定豬苓多糖含量。

2.4 結(jié)果與分析

2.4.1 不同海拔高度的影響 實驗表明，不同海拔條件下豬苓的產(chǎn)量差異顯著（P=0.05），海拔從1200～1480 m，豬苓的增產(chǎn)率在26.00%～59.52%之間，其中以海拔1250 m產(chǎn)量最高，增產(chǎn)率為59.52%，以此海拔高度為中心兩側(cè)海拔豬苓的增產(chǎn)率呈現(xiàn)出下降趨勢，到1480m海拔處增產(chǎn)率最低僅有26.00%。如圖1所示。

麥角甾醇含量均能達到國家藥典規(guī)定的不低于0.07%標(biāo)準(zhǔn)，且含量存在顯著差異（P=0.01)。在1250 m、1480 m海拔處最低為0.07%，1365 m處最高達0.13%，1250 m～1365 m海拔處含量定在0.11%～0.13%之間波動。多糖含量則在1250 m海拔處最低為1.62%，在1486 m海拔處含量最高為2.30%。在1250 m～1480 m海拔范圍，豬苓多糖的含量在1.62%～2.30%之間隨著海拔的升高而增加，但經(jīng)分析其含量不存在顯著差異。

圖1 不同海拔高度豬苓增產(chǎn)率、麥角甾醇含量及豬苓多糖含量柱形圖

2.4.2 坡向研究 如表1所示，在不同坡向豬苓的增產(chǎn)率在25.22%～64.50%之間，其中以陰坡坡向產(chǎn)量最高，增產(chǎn)率為64.50%，以陽坡坡向產(chǎn)量最低，增產(chǎn)率僅有25.22%。

麥角甾醇含量陰坡最高為0.15%，陽坡和半陰半陽坡差距不大分別是0.08%、0.06%。但豬苓多糖陽坡含量最高達1.94%，半陰半陽坡含量最低含1.68%。

表1 不同坡向豬苓增產(chǎn)率、麥角甾醇含量及多糖含量測定

2.4.3不同栽培年限研究 試驗表明，2～5.5年生豬苓的增產(chǎn)率在18.33%～58.50%之間，其中以五年半產(chǎn)量最高，增產(chǎn)率為58.50%，四年生產(chǎn)量最低，增產(chǎn)率僅有18.33%。如圖2所示。

麥角甾醇含量存在顯著差異（P=0.01)，四年生含量最高為0.15%，兩年生最低僅有0.07%，2～4年生含量在0.07%～0.15%之間逐年增加，4～5.5年生其含量在0.15%～0.09%之間逐年遞減。多糖含量也存在顯著差異（P=0.05)，則在四年生最低為1.30%，三年生含量最高為2.12%，此外，2、4.5、5、5.5年生豬苓多糖在1.82%～1.98%范圍內(nèi)，含量較穩(wěn)定。

3 結(jié)論與討論

試驗從海拔、坡向等環(huán)境條件以及栽培年限方面進行綜合分析。豬苓最佳栽培海拔段是1250m（±30m）左右，且陰坡更適合豬苓生長，五年生豬苓更適合作商品。

整體而言，豬苓在1200m～1250m之間增產(chǎn)率較高，推測跟該海拔段的植被關(guān)系較密切，該海拔段大多是落葉闊葉林，落葉使得土壤有機質(zhì)增多，增加了土壤的肥力，也提高了土壤的保水、保溫的能力。同時，該海拔段的其他生物或微生物因素對豬苓的生長可能也有一定的影響。人工栽培時，在可在其他海拔段進行相應(yīng)的施肥、灌溉、覆蓋遮陰或進行保溫等處理，仿該段野生環(huán)境，爭取更好的效益。

本次試驗顯示豬苓適合陰坡坡向，陰坡相對陽坡而言具有潮濕、陰冷、光照弱等特點，與傳統(tǒng)觀念上豬苓具喜冷涼、陰郁、濕潤，怕干旱的特性相吻合，曾李時珍在《本草綱目》[11]集解中寫道“[別錄曰]豬苓生衡山山谷”。

現(xiàn)市場豬苓種質(zhì)來源混雜，質(zhì)量不穩(wěn)定，有的地區(qū)長時間不更換種苓，直接導(dǎo)致豬苓產(chǎn)量、質(zhì)量不穩(wěn)定。因此，摸索好豬苓適宜生長環(huán)境，開展豬苓人工育種，實現(xiàn)豬苓農(nóng)業(yè)化發(fā)展，進行規(guī)范化種植、管理，是解決不同地區(qū)產(chǎn)率差異大、質(zhì)量相差遠(yuǎn)、藥效不穩(wěn)定等問題的首要任務(wù)，也是當(dāng)前解決當(dāng)前豬苓質(zhì)量和產(chǎn)量問題的關(guān)鍵之一。

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（責(zé)任編輯： 胡慧玲）

Research on the relationship of elevation, slope and years with production and quality of Zhuling/

YANG Hai-yan1, YINLi-li1, ZENG Hui1, LI Min1, XIA Qin2,3, ZHOU Jin2,3//(1.College of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine;The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan; 2.Sichuan Co. Ltd of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, Sichuan; 3.Nanjiang Shuhua Co. Ltd of Traditional Chinese Medicine, Bazhong 636600, Sichuan)

Objective: To explore the effect of elevation range, slope, and the harvest period on Zhuling growth, to provide scienti fi c reference for the selection of the location for Sichuan Zhuling base and large-scale arti fi cial cultivation. Method: Block design was used to design Zhuling cultivation test, and the in fl uence of elevation, slope and growth time on the quantity and quality of Zhuling was investigated by single factor test. Samples were collected using chessboard sampling method and the production was calculated after samples were dried and weighted. According to Chinese Pharmacopoeia 2015 edition, ergosterol was detected as record under the Zhuling content determination method. Zhuling polysaccharide content was detected by sulfuric acid-anthrone method. The results were analyzed by F test. Result: The rate of growth of Zhuling was between 26.00% ～ 59.52% in different elevation conditions with Zhuling polysaccharide content between 1.62% ～ 2.30%, and ergosterol content between 0.07% ～ 0.13%.The rate of growth of Zhuling was between 25.22% ～ 64.50% in different slope conditions, with Zhuling polysaccharide content between 1.79% ～ 1.88%, and ergosterol content between 0.12% ～ 0.15%. The rate of growth of Zhuling was between 18.33% ～58.50% in different harvest periods (2～5.5 year), with Zhuling polysaccharide content between 1.30% ～ 2.12%, and ergosterol content between 0.07% ～ 0.15%. Conclusion: The yield and quality of Zhuling is signi fi cantly different when it is cultivated in different elevations and slope. Between the range of altitude 1200 m ～ 1250 m , shady slope is more suitable for the cultivation of Zhuling, and Zhuling of fi ve years old is more suitable for commodity with stable quality and high yield .

Zhuling; elevation; slope ; harvest period; ergosterol; Zhuling polysaccharide

R 282.2

A

] 1674-926X(2017)02-003-03

《四川省科技計劃項目——川射干、石斛等川產(chǎn)特色中藥材的資源保護與規(guī)范化種植關(guān)鍵技術(shù)研究（2014SZ0073）》：《豬苓GAP種植基地建設(shè)與示范》

1．成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點實驗室 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點實驗室培育基地，四川 成都 611137；2．四川省中藥材有限責(zé)任公司， 四川 成都 611137；3．南江蜀華中藥材種植有限公司， 四川 巴中 636600

楊海燕（1990-），女，碩士在讀，研究方向：中藥品種、質(zhì)量與資源研究Tel:15184455421 Email:1935077941@qq.com

李敏，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中藥品種、質(zhì)量及資源研究 Email:028limin@163.com

2016-09-23